CC BY
18
DOI: 10.17650/1726-9784-2022-23-1 -30-36
с«)]
Хемилюминесцентный анализ свободнорадикальных процессов в семенной плазме мужчин с патоспермией, перенесших инфекцию COVID-19
BY 4.0
Н.А. Курашова, Б.Г. Дашиев, Л.А. Гребенкина, С.И. Колесников, Л.И. Колесникова
ФГБНУ«Научный центр проблем здоровья семьи и репродукции человека»; Россия, 664003 Иркутск, ул. Тимирязева, 16
Контакты: Надежда Александровна Курашова [email protected]
Введение. В условиях пандемии COVID-19 актуальным представляется исследование клинических особенностей и влияния вируса SARS-CoV-2 на репродуктивную систему и фертильность мужчин. Цель - оценить интенсивность окислительных процессов в семенной плазме мужчин с патозооспермией после перенесенной инфекции COVID-19.
Материалы и методы. Параметры спермограммы оценены в соответствии с критериями руководства Всемирной организации здравоохранения 2010 г. (5-е издание) по исследованию и обработке эякулята человека через 2-3 мес после получения пациентом отрицательного результата полимеразной цепной реакции назо-фарингеального мазка на ДНК вируса SARS-CoV-2. Методом хемилюминесценции, индуцированной ионами двухвалентного железа, исследована интенсивность свободнорадикальных процессов в семенной плазме. Результаты. Установлено снижение подвижности сперматозоидов и повышение количества лейкоцитов у мужчин с патозооспермией, перенесших инфекцию COVID-19. Наблюдаются более низкие уровни таких показателей, как объем эякулята, общая концентрация сперматозоидов и количество морфологически нормальных форм сперматозоидов. Выявлена повышенная способность к генерации активных форм кислорода в семенной плазме при патозооспермии и COVID-19.
Выводы. Полученные результаты свидетельствуют о том, что SARS-CoV-2 влияет на мужскую половую систему прямым или косвенным образом и оказывает негативное воздействие на мужское репродуктивное здоровье, вызывая активацию процессов липопероксидации и сперматогенную недостаточность.
Ключевые слова: COVID-19, патозооспермия, мужчины, окислительный стресс, хемилюминесценция, семенная плазма
Для цитирования: Курашова Н.А., Дашиев Б.Г., Гребенкина Л.А. и др. Хемилюминесцентный анализ свободнорадикальных процессов в семенной плазме мужчин с патоспермией, перенесших инфекцию COVID-19. Анд-рология и генитальная хирургия 2022;23(1):30-6. DOI: 10.17650/1726-9784-2022-23-1-30-36.
Chemiluminescence analysis of free radical processes in seminal plasma of men w with pathospermia who have undergone COVID-19 infection
E
u N.A. Kurashova, B.G. Dashiev, L.A. Grebenkina, S.I. Kolesnikov, L.I. Kolesnikova
g. Scientific Centre for Family Health and Human Reproduction Problems; 16 Timiryazeva St., Irkutsk 664003, Russia
CO
s Contacts: Nadezhda Aleksandrovna Kurashova [email protected]
^ Introduction. In the context of the COVID-19 pandemic, it seems relevant to study the clinical features and the effect
w of the SARS-CoV-2 virus on the reproductive system and male fertility.
s The study objective was to assess the intensity of oxidative processes in the seminal plasma of men with pathozo-
s ospermia after suffering a COVID-19 infection.
<- Materials and methods. Spermogram parameters were assessed in accordance with the criteria of the 2010 WHO
= Guidelines, 5th edition, for the study and processing of human ejaculate two to three months after the patient received
a a negative polymerase chain reaction result of a nasopharyngeal swab for SARS-CoV-2 DNA. The intensity
of free radical processes in seminal plasma was investigated by the method of chemiluminescence induced by ions of bivalent iron.
АНДРОЛОГИЯ ANDROLOGY
И ГЕНИТАЛЬНАЯ ХИРУРГИЯ AND GENITAL SURGERY
Results. A decrease in sperm motility and an increase in the number of leukocytes were found in men with pathozoo-spermia who had undergone COVID-19 infection. There are lower levels of indicators such as ejaculate volume, total sperm concentration and the number of morphologically normal sperm forms. An increased ability to generate reactive oxygen species in seminal plasma was revealed in pathozoospermia and COVID-19.
Conclusions. The results obtained indicate that SARS-CoV-2 affects the male reproductive system directly or indirectly and has a negative effect on male reproductive health, causing the activation of lipid peroxidation processes and spermatogenic insufficiency.
Key words: COVID-19, infertility, men, oxidative stress, chemiluminescence, seminal plasma
For citation: Kurashova N.A., Dashiev B.G., Grebenkina L.A. Chemiluminescence analysis of free radical processes in seminal plasma of men with pathospermia who have undergone COVID-19 infection. Andrologiya i ge-nital'naya khirurgiya = Andrology and Genital Surgery 2022;23(1):30-6. (In Russ.). DOI: 10.17650/1726-97842022-23-1-30-36.
1ТОМ 23 / VOL. 23 2 0 2 2
Введение
Мужское бесплодие имеет мультифакториальный генез [1, 2], в его развитии играют роль социальные, демографические, а также экологические факторы [3, 4]. В условиях пандемии СОУТО-19 актуальным представляется исследование клинических особенностей и влияния вируса SARS-CoV-2 на репродуктивную систему и фертильность мужчин. Экспрессия АСЕ2 и TMPRSS2 на уровне РНК или белка, о чем сообщалось в различных исследованиях, указывает на то, что мужская репродуктивная система потенциально уязвима к инфекции SARS-CoV-2 [5]. Присутствие SARS-CoV-2 в образцах спермы, вторичная воспалительная реакция, вызывающая орхит или дискомфорт в яичках, а также количество вирусной нагрузки, приводящей к повреждению яичек и активации иммунного ответа, являются одними из вероятных основных механизмов повреждения процесса сперматогенеза [6—8]. Согласно эпидемиологическим исследованиям, во многих случаях мужского бесплодия пациенты страдают от острого или хронического воспаления мочеполового тракта [9]. Воспалительные реакции в мужской половой системе неразрывно связаны с окислительным стрессом [10], который наносит ущерб параметрам мужской фертильности, поскольку вызывает окислительное повреждение репродуктивных клеток и внутриклеточных компонентов. Разнообразные причинные факторы мужского бесплодия ведут к нарушению мужских репродуктивных функций через общие механизмы окислительного стресса и воспаления, оба из которых являются взаимосвязанными патофизиологическими процессами, и возникновение любого из них вызывает возникновение другого [11]. Это предопределяет сложность патогенеза, создает объективные трудности в диагностике. Хемилюминес-центный анализ обладает высокой избирательностью исследуемого объекта (возможность тестирования тонких механизмов развития конкретной патологии) и позволяет проводить интегральную оценку сложных патологических процессов. С его помощью можно обнаружить наличие свободнорадикальной патологии,
проанализировать интенсивность процессов перекис-ного окисления липидов, а также оценить эффективность проведенной терапии [12—14]. В связи с вышеизложенным целью исследования послужила оценка интенсивности окислительных процессов в семенной плазме мужчин с патозооспермией после перенесенной инфекции COVID-19.
Материалы и методы
Ретроспективно проведен анализ результатов обследования 30 мужчин с патозооспермией после перенесенной коронавирусной инфекции (средний возраст — 29,9 ± 5,3 года) из семейных пар с бесплодием. Сформирована контрольная группа из 38 мужчин с патозооспермией, не болевших инфекцией COVID-19 (средний возраст — 30,2 ± 3,6 года). Параметры спер-мограммы оценены через 2—3 мес после получения пациентом отрицательного результата полимеразной цепной реакции назофарингеального мазка на ДНК вируса SARS-CoV-2. Оценка проведена в соответствии с критериями руководства Всемирной организации здравоохранения 2010 г. (5-е издание) по исследованию и обработке эякулята человека. В работе с пациентами соблюдали этические принципы Хельсинкской декларации Всемирной медицинской ассоциации (World Médical Association Déclaration of Helsinki; последний j пересмотр: Форталеза, Бразилия, октябрь 2013 г.). Под- g писание информированного добровольного письмен- я ного согласия являлось обязательной процедурой £ для включения пациентов в одну из групп. "
Образец спермы, оставшийся после проведения я анализа спермограммы, центрифугировали в течение « 10 мин при 1000 g. Отделяли осадок и хранили семен- Œ ную плазму (без сперматозоидов) при температуре ^ —40 °С до проведения анализа. Замораживание прово- <и дили однократно. Размораживание семенной плазмы = проводили в течение 1 ч при температуре 22—25 °С, непосредственно перед анализом, затем образцы ак- = куратно перемешивали. е.
Хемилюминесценцию регистрировали в семенной в плазме мужчин. Измерения проводили на хемилюми-
АНДРОЛОГИЯ
И ГЕНИТАЛЬНАЯ ХИРУРГИЯ
ANDROLOGY
AND GENITAL SURGERY
1
нометре SmartLum-5773 — аппаратно-программном комплексе, предназначенном для регистрации сверхслабых световых потоков, сопровождающих биохимические реакции, физические и биологические процессы. Управление прибором, регистрацию, обработку и анализ данных осуществляли посредством стандартного IBM-совместимого персонального компьютера с операционной системой Windows 98/2000/XP с использованием программного обеспечения Power Graph, предназначенного для записи, визуализации, обработки и хранения аналоговых сигналов. Для проведения реакции в фосфатный буферный раствор (20 мМ КН2РО4, pH 7,4) вносили семенную плазму, раствор двухвалентного железа и перекись водорода. Регистрировали светосумму (Sm) и амплитуду вспышки хеми-люминесценции (Max). Значения Max и Sm рассчитывали в условных единицах. Светосумма — площадь под кривой хемилюминесценции от начала нарастания амплитуды медленной вспышки до достижения ею максимума. Она характеризует число цепей разветвления или количество образовавшихся перекисных радикалов и отражает способность компонентов системы подвергаться цепным процессам окисления при инициации их ионами двухвалентного железа. Амплитуда быстрой вспышки отражает концентрацию гидроперекисей и пропорциональна исходному содержанию гидроперекисей в пробе. Статистическая обработка
данных проведена с использованием программы Sta-tistica 6.1 (Stat-Soft Inc., США). Данные представлены в виде среднего арифметического (М), дисперсии (с), медианы (Ме), L—H, где L — 25-й (нижний) квартиль, Н — 75-й (верхний) квартиль. Статистически значимыми считали результаты при уровне ошибки р <0,05.
Результаты
Анализ параметров спермы показал статистически значимое снижение подвижности сперматозоидов на 30 % (p = 0,048) и повышение количества лейкоцитов на 10 % (p = 0,05) у мужчин с патозооспермией, перенесших инфекцию COVID-19 (табл. 1). Также в данной группе мужчин наблюдали более низкие уровни таких показателей, как объем эякулята, общая концентрация сперматозоидов и количество морфологически нормальных форм сперматозоидов, по сравнению с контрольной группой. В среднем полный цикл становления сперматозоида из сперматогония длится 64 ± 4 дня. Для окончательной дифференцировки они перемещаются в семенные придатки, где через 12—14 дней становятся состоятельными мужскими половыми клетками. Таким образом, суммарное время формирования и созревания сперматозоида — минимум 72 дня и максимум 82 дня. Учитывая данный факт, можно предположить, что вирус влияет на состояние процесса сперматогенеза.
Таблица 1. Показатели концентрации, подвижности и морфологии сперматозоидов в исследуемых группах, М ± a, Me, L—H Table 1. Indicators of concentration, motility and sperm morphology in the studied groups, M ± a, Me, L—H
Группа
Показатель Group
Parameter Патозооспермия (n = 30) Патозооспермия + COVID-19 (n = 30)
Объем эякулята, мл Ejaculate volume, ml 3,00 ± 1,17 2,83 2,20-3,98 2,83 ± 1,18 2,6 1,90-3,77
к •a E Концентрация сперматозоидов, млн/мл Sperm concentration, million/ml 36,43 ± 23,88 34,66 14,92-61,57 35,92 ± 27,29 25,45 14,48-49,18
И E u Подвижность сперматозоидов, % Sperm motility, % 35,43 ± 19,78 35,68 17,70-44,41 24,73 ± 16,91* 25,73 10,20-38,65
к га м Морфологически нормальные сперматозоиды, % Morphologically normal sperm, % 13,78 ± 6,97 14,00 8,5-18,5 13,41 ± 6,30 12,0 9,0-18,5
Ч га Лейкоциты, млн/мл Leukocytes, million/ml 0,53 ± 0,13 0,50 0,45-0,61 0,59 ± 0,13* 0,60 0,45-0,65
*Различия статистически значимы, p <0,05. *The differences are significant, p <0,05.
Примечание. Здесь и в табл. 2: M — среднее арифметическое, a — дисперсия; Ме — медиана, L — 25-й (нижний) квартиль, Н — 75-й (верхний) квартиль.
Note. Here and in table 2: M — arithmetic mean, a — variance; Me — median, L — 25th (lower) quartile, H — 75th (upper) quartile.
Таблица 2. Интенсивность свободнорадикальных процессов в семенной плазме у мужчин с бесплодием, М ± a, Me, L—H Table 2. Intensity offree radical processes in seminal plasma in men with infertility, M ± a, Me, L—H
Группа
Показатель Group
Indicato Патозооспермия (n = 30) Патозооспермия + COVID-19 (n = 30)
Max, усл. ед. Max, c.u. 3,37 ± 0,44 3,43 3,05-3,73 3,94 ± 1,21* 3,55 3,12-4,59
Sm, усл. ед. Sm, c.u. 315,7 ± 50,9 290,5 273,6-368,7 196,7 ± 34,82* 184,2 173,3-209,5
*Различия статистически значимы, p <0,05. *The differences are significant, p <0,05.
Примечание. Max — амплитуда вспышки хемилюминесценции; Sm — светосумма хемилюминесценции. Note. Max — the amplitude of the chemiluminescence flash; Sm — chemiluminescence light sum.
У мужчин с патозооспермией, перенесших инфекцию COVID-19, установлено повышение интенсивности свободнорадикальных процессов, о чем свидетельствует статистически значимое повышение показателя амплитуды! вспышки хемилюминесценции (Max) на 14 % (p = 0,017), характеризующего резистентность тканей к пе-рекисному окислению (табл. 2). При этом в семенной плазме мужчин с патозооспермией, перенесших инфекцию COVID-19, установлено статистически значимое снижение светосуммы хемилюминесценции (Sm) на 37 % (р = 0,000), отражающей скорость расходования свободных радикалов липидной природы вследствие их взаимодействия с антиоксидантами и обусловленной, в первую очередь, уровнем прооксидантов в системе (см. табл. 2).
Обсуждение
Основным симптомом инфекции COVID-19 была определена лихорадка, выявленная более чем в 80 % случаев [15]. Лихорадка сама по себе оказывает отрицательное влияние на сперматогенез и, таким образом, изменяет параметры спермы, такие как концентрация сперматозоидов. Также известно, что лихорадка негативно влияет на подвижность сперматозоидов и изменяет целостность ДНК сперматозоидов. Полученные результаты согласуются с данными зарубежных исследований, в которых сообщают о значительном уменьшении объема спермы, концентрации сперматозоидов, прогрессирующей подвижности и морфологии сперматозоидов. Авторы резюмируют, что данный факт может быть связан с повышенной активностью фермента ACE2 в семенной плазме, усилением семенного воспаления (интерлейкины 1р, 6, 8, 10, трансформирующий фактор роста в, фактор некроза опухоли а, интерфероны а, у), повышенной активностью семенных апоптотических маркеров (каспаза-8, 9 и 3), а также высоким содержанием активных форм кислорода
(АФК) и низкой активностью супероксиддисмутазы [16, 17]. Причины задержки восстановления параметров спермы после лихорадки COVID-19 пока неясны. Необходимо отметить, что даже через 2 мес после выздоровления в сперме остаются признаки воспаления (лейкоциты).
Показатель Max, по всей вероятности, обусловлен реакцией организма на вирус и является следствием изменения концентрации биологически активных веществ, влияющих на скорость и интенсивность реакций перекисного окисления липидов. Усиление хемилюми-несценции связывают с активацией свободнорадикаль-ного окисления, снижением уровня антиоксидантов, накоплением кислородных радикалов и гидроперекисей липидов. Поэтому по уровню хемилюминесценции, индуцированной гидроксильными радикалами, которые образуются в реакции Фентона, можно оценить способность субстрата к окислению в данных условиях [14, 18]. Снижение показателя Sm хемилюминесценции свидетельствует о нарушении проницаемости клеточных мембран и выходе в кровь низкомолекулярных пептидов, являющихся тушителями хемилюминесценции. Уровень светосуммы хемилюминесценции, инициированной гидроксильными радикалами, определяется константами скорости реакций инициирования, продолжения и обрыва цепи [18—20]. В качестве запускающих агентов окислительного стресса в мужских гаметах рассматривают лейкоциты и клетки сперматогенеза. Взаимосвязь между присутствием лейкоцитов в сперме и окислительным стрессом у мужчин с бесплодием до сих пор обсуждается. Некоторые исследователи сообщают о положительной корреляции между количеством лейкоцитов в сперме и продукцией АФК [21]. С эволюционной точки зрения АФК являются универсальными ограничителями количества и регуляторами качества спермы, но в избыточном количестве инициируют на-
Е га Е
рушения в сперматозоидах путем индукции оксидатив-ного повреждения клеточных липидов, протеинов и ДНК, что является одним из механизмов патогенеза мужского бесплодия [22]. Подавляющее большинство образцов спермы содержат лейкоциты, причем ней-трофилы являются лейкоцитарным типом. Так как продукция АФК является одним из основных механизмов, посредством которого нейтрофилы осуществляют разрушение патогенов, не удивительно, что лейкоциты спермы обладают потенциалом вызова окислительного стресса [21]. Сперматозоиды особо чувствительны к окислительному повреждению из-за большого количества полиненасыщенных жирных кислот в их клеточной мембране. Семенная плазма фертильных мужчин в норме богата антиоксидантами, которые поддерживают, защищают и питают сперматозоиды, контролируя повреждающее действие АФК [3]. Избыточная выработка АФК клетками сперматогенеза и лейкоцитами в условиях окислительного стресса усиливает перекис-ное окисление липидов, потерю подвижности сперматозоидов и их повреждение. Окислительный стресс различной этиологии является основной причиной тестикулярной дисфункции и оказывает непосредственное влияние на процессы пролиферации и диф-ференцировки клеток сперматогенеза, индуцирует их апоптоз, нарушает стероидогенез в клетках Лейдига [22]. АФК способны оказывать негативное влияние даже в пределах физиологических концентраций, по-
скольку могут стимулировать преждевременную капа-цитацию и такой необратимый процесс, как акросом-ная реакция [23, 24].
Заключение
Полученные результаты свидетельствуют о том, что вирус SARS-CoV-2 влияет на мужскую половую систему прямым или косвенным образом и оказывает негативное воздействие на мужское репродуктивное здоровье, вызывая сперматогенную недостаточность. Выявление и понимание механизма влияния вируса SARS-CoV-2 на репродуктивную систему мужчин актуально на сегодняшний день и будет способствовать созданию методов профилактики бесплодия и репродуктивных потерь в условиях пандемии СО\ТО-19. Подтверждена эффективность применения хемилюминес-центных методов исследования как дополнительного критерия оценки мужской фертильности. Представленные данные свидетельствуют о перспективности широкого клинического применения хемилюминесцентного анализа для оценки состояния свободнорадикальных процессов в семенной плазме мужчин. Учитывая, что пандемия затянулась, естественное зачатие или применение вспомогательных репродуктивных технологий требуют дополнительных мер предосторожности. Необходимы дальнейшие исследования, чтобы понять долгосрочные последствия SARS-CoV-2 для репродуктивного здоровья мужчин.
ЛИТЕРАТУРА/REFERENCES
Е га Е
1. Курашова Н.А. Оценка репродуктивного потенциала мужского населения. Бюллетень Восточно-Сибирского научного центра Сибирского отделения Российской академии медицинских наук 2014;2(96):104-9. [Kurashova N.A. Assessment of reproduotive potential
of men. Bjulleten' Vostochno-Sibirskogo nauchnogo centra Sibirskogo otdelenija Rossijskoj akademii medicinskih nauk = Bulletin of the East Siberian Scientific Center of the Siberian Branch of the Russian Academy of Medical Sciences 2014;2(96);104-9. (In Russ.)].
2. Velez D., Ohlander S., Niederberger C. Pyospermia: background and controversies. F S Rep 2021;2(1):2-6.
DOI: 10.1016/j.xfre.2021.01.001.
3. Kolesnikova L.I., Kurashova N.A., Dolgikh M.I. et al. Parameters of pro-and antioxidant status in ejaculate
of men of fertile age. Bull Exp Biol Med 2015;159(6):726—8. DOI: 10.1007/s10517-015-3059-6.
4. Kolesnikova L.I., Kurashova N.A., Bairova T.A. et al. Features
of lipoperoxidation, antioxidant defense, and thiol/disulfide system in the pathogenesis of infertility in males, carriers of nonfunctional variants of GSTT1 and GSTM1 gene polymorphisms. Bull Exp Biol Med 2017;163(3):378-80. DOI: 10.1007/s10517-017-3808-9.
5. Seymen C.M. The other side
of COVID-19 pandemic: Effects on male fertility. J Med Virol 2021;93(3):1396-1402. DOI: 10.1002/jmv.26667.
6. Брагина Е.Е. Вирусное инфицирование сперматозоидов. Часть 2. Герпесвирусы человека, вирус иммунодефицита человека, вирус гепатита С, вирус Зика (обзор литературы). Андрология и генитальная хирургия 2020;21(4):20-30. [Bragina E.E.Viral infection of sperm. Part 2. Human herpes viruses, human immunodeficiency virus, hepatitis C virus, Zika virus (review). Andrologiya i genital'naja khirurgija = Andrology and Genital Surgery 2020;21(4):20-30. (In Russ.)].
DOI: 10.17650/2070-9781-2020-21-420-30.
7. Sheikhzadeh Hesari F., Hosseinzadeh S.S., Asl Monadi Sardroud M.A. Review
of COVID-19 and male genital tract. Andrologia 2021;53(1):e13914. DOI: 10.1111/and.13914.
8. Сорокина Т.М., Брагина Е.Е., Сорокина Е.А. и др. Влияние перенесенной инфекции COVID-19 на спер-миологические показатели мужчин с нарушением фертильности. Андрология и генитальная хирургия 2021;22(3): 25-33. [Sorokina T.M., Bragina E.E., Sorokina E.A. et al. Effect of COVID-19 infection on characteristics of sperm
in men with impaired fertility. Andrologiya i genital'naja khirurgija = Andrology and Genital Surgery 2021;22(3):25-33. (In Russ.)]. DOI 10.17650/1726-9784-2021-22-3-25-33.
9. Darbandi M., Darbandi S., Agarwal A. et al. Reactive oxygen species-induced alterations in H19-Igf2 methylation patterns, seminal plasma metabolites, and semen quality. J Assist Reprod Genet 2019;36(2):241-53.
DOI: 10.1007/s10815-018-1350-y.
10. Darenskaya M., Kolesnikova L., Kolesnikov S. The association
of respiratory viruses with oxidative stress and antioxidants. Implications for the COVID-19 pandemic. Curr Pharm Des 2021;27(13):1618-27. DOI: 10.2174/1381612827666210222113351.
11. Agarwal A., Durairajanayagam D., Halabi J. et al. Proteomics, oxidative stress and male infertility. Reprod Biomed Online 2014;29(1):32-58. DOI: 10.1016/j.rbmo.2014.02.013.
12. Владимиров ЮА., Проскурнина Е.В., Измайлов Д.Ю. Кинетическая хеми-люминесценция как метод изучения реакций свободных радикалов. Биофизика 2011;56(6):1081-90. [Vladimirov Yu.A., Proskurnina E.V., Izmaylov D.Yu. Kinetic chemilumi-nescence as a method for studying
the reactions of free radicals. Biofizika = Biophysics 2011;56(6):1081-90. (In Russ.)].
13. Кривохижина Л.В., Ермолаева Е.Н., Сурина-Марышева Е.Ф. и др. Хеми-люминесценция сыворотки при физических нагрузках различной интенсивности. Здоровье и образование
в XXI веке 2016;18(2):542-7. [Krivohizhina L.V., Ermolaeva E.N., Surina-Marysheva E.F. et al. Serum chemiluminescence during physical activity of varying intensity. Zdorov'e i obrazovanie v XXI veke = Health
and education in the XXI century. 2016;18(2):542-7. (In Russ.)].
14. Piskarev I.M., Ivanova I.P. Assessment of oxidative and antioxidant capacity of biological substrates by chemilumi-nescence induced by fenton reaction. Sovremennye tehnologii v medicine 2016;8(3):16-26.
DOI: 10.17691/stm2016.8.3.02.
15. Hamdi S., Bendayan M., Huyghe E. et al. COVID-19 and andrology: Recommendations of the French-speaking society of andrology (Société d'Andrologie de langue Française SALF). Basic Clin Androl 2020;30:10.
DOI: 10.1186/s12610-020-00106-4.
16. Liu X., Chen Y., Tang W. et al. Single-cell transcriptome analysis
of the novel coronavirus (SARS-CoV-2) associated gene ACE2 expression in normal and non-obstructive azoospermia (NOA) human male testes. Sci China Life Sci 2020;63:1006-15. DOI: 10.1007/s11427-020-1705-0.
17. Sengupta P., Leisegang K., Agarwal A. The impact of COVID-19 on the male reproductive tract and fertility:
A systematic review. Arab J Urol 2021;19(3):423-36.
DOI: 10.1080/2090598X.2021.1955554.
18. Vessey W., Perez-Miranda A., Macfarquhar R. et al. Reactive oxygen species in human semen: validation
and qualification of a chemiluminescence
assay. Fertil Steril 2014;102(6):1576-83.e4. DOI: 10.1016/j.fertnstert.2014.09.009.
19. Azadi L., Tavalaee M., Deemeh M.R. et al. Effects of Tempol and Quercetin on Human Sperm Function
after Cryopreservation. Cryo Letters 2017;38(1):29-36.
20. Agarwal A., Ahmad G., Sharma R. Reference values of reactive oxygen species in seminal ejaculates using chemiluminescence assay. J Assist Reprod Genet 2015;32(12):1721-9. DOI: 10.1007/s10815-015-0584-1.
21. Kulchenko N., Pashina N. Association of leukocyte activity and DNA fragmentation in men with non-obstructive azoospermia. Georgian Med News 2020;(299):26-9.
22. Sánchez V., Redmann K., Wistuba J. et al. Oxidative DNA damage in human sperm can be detected by Raman microspectroscopy. Fertil Steril 2012;98(5):1124-9.e1-3.
DOI: 10.1016/j.fertnstert.2012.07.1059.
23. Massarotti C., Garolla A., Maccarini E. et al. SARS-CoV-2 in the semen: Where does it come from? Andrology 2021;9(1):39-41.
DOI: 10.1111/andr.12839.
24. Li H., Xiao X., Zhang J. et al. Impaired spermatogenesis
in COVID-19 patients. EClinicalMedicine 2020;28:100604. DOI: 10.1016/j.eclinm.2020.100604.
Вклад авторов
Н.А. Курашова: разработка концепции и дизайна исследования, написание текста статьи; Б.Г. Дашиев: сбор, анализ и интерпретация данных; Л.А. Гребенкина: анализ и интерпретация данных;
С.И. Колесников: разработка концепции исследования и внесение принципиальных изменений; Л.И. Колесникова: внесение принципиальных изменений и окончательное утверждение версии статьи. Authors' contributions
N.A. Kurashova: development of the concept and design of the study, writing the text of the article; B.G. Dashiev: data collection, analysis and interpretation; L.A. Grebenkina: data analysis and interpretation;
S.I. Kolesnikov: development of the research concept and introduction of fundamental changes; L.I. Kolesnikova: making fundamental changes and final approval of the article version.
E
ORCID авторов / ORCID of authors я
Н.А. Курашова / N.A. Kurashova: https://orcid.org/0000-0001-8591-8619 E
Б.Г. Дашиев / B.G. Dashiev: https://orcid.org/0000-0003-2698-0687 « Л.И. Гребенкина / L.A. Grebenkina: https://orcid.org/0000-0002-1263-5527
С.И. Колесников / S.I. Kolesnikov: https://orcid.org/0000-0003-2124-6328 я
Л.И. Колесникова / L.I. Kolesnikova: https://orcid.org/0000-0003-3354-2992 я
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Conflict of interest. The authors declare no conflicts of interest. 4
W
Финансирование. Работа выполнена без спонсорской поддержки. Financing. The work was performed without external funding.
Соблюдение прав пациентов и правил биоэтики. В работе с пациентами соблюдали этические принципы Хельсинкской декларации Всемирной медицинской ассоциации (последний пересмотр: Форталеза, Бразилия, октябрь 2013 г.). Все пациенты подписали добровольное информированное согласие на участие в исследовании. Протокол исследования одобрен комитетом по биомедицинской этике при ФГБНУ «Научный центр проблем здоровья семьи и репродукции человека».
АНДРОЛОГИЯ ANDROLOGY
И ГЕНИТАЛЬНАЯ ХИРУРГИЯ AND GENITAL SURGERY
Compliance with patients rights and bioethics rules. The ethical principles World Medical Association Declaration of Helsinki (last revision of Fortaleza, Brazil, October 2013) were observed. All patients signed a voluntary informed consent to participate in the study. The protocol of the study was approved by the Committee on Biomedical Ethics at Scientific Center for Family Health and Human Reproduction Problems.
E ra E
Статья поступила: 29.10.2021. Принята к публикации: 23.12.2021. Article submitted: 29.10.2021. Accepted for publication: 23.12.2021.
