CC BY
10Идентификация нового аллеля HLA-B*44:02:17 у трех членов афро-американской семьи
Юрий А. Серов 1,2
1 Институт детской гематологии, онкологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачевой, Санкт-Петербургский государственный медицинский Университет им. акад. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Российская Федерация
2 Лаборатория ИЬА, Медицинский факультет, Университет Индианы, Индианаполис, Индиана, США
Была описана идентификация нового аллеля HLA-B* 44:02:17, который был обнаружен в семье афроамери-канских индивидуумов во время типирования HLA пациента и доноров для трансплантации костного мозга. Новый аллель HLA-B*44:02:17 отличается от HLA-B* 44: 02:01:01 одним синонимным нуклеотидным изменением в положении 606 bp, кодоном 178, экзон 3 (ACG> ACC, Thr - Silent change). Кроме того, расширенные последовательности HLA-B*44:02:17, за пределами экзонов 2 и 3, были описаны путем клонирования и полноразмер-
ного 8БТ 3,5 кЬ фрагмента, простирающегося от 5'-не-транслируемой области до З'-нетранслируемой области. Название В*44:02:17 было официально присвоено Комитетом номенклатуры ВОЗ. Нуклеотидная последовательность доступна в базе данных ШОТ/ИЪА с номером присоединения ИШ8100122239.
Ключевые слова
ИЬА-В*44:02, ИЬА-В*44:02:17, полногеномное секвени-рование, ген ИЬА-В.
Hematopoietic stem cell transplantation with alpha/beta T lymphocyte and CD19 cell depletion in adolescents and young adults with paroxysmal nocturnal hemoglobinuria using the immune-ablative conditioning and "peritransplant" therapy with eculizumab
Daria A. Shasheleva, Alexei A. Maschan, Larisa N. Shelikhova, Ulyana N. Petrova, Maria A. Ilyushina, Zhanna B. Shekhovtsova, Sergey L. Blagov, Andrei B. Abrosimov, Elena I. Gutovskaya, Elena E. Kurnikova, Olga I. Illarionova, Elena V. Boyakova, Galina A. Novichkova, Michael A. Maschan
Dmitriy Rogachev National Medical Research Center for Pediatric Hematology, Oncology and Immunology, Moscow, Russian Federation
Contact: Dr. Daria A. Shasheleva E-mail: [email protected]
Introduction
The main goal was to optimize hematopoietic stem cell transplantation (HSCT) approach among adolescents and young adults with paroxysmal nocturnal hemoglobinuria (PNH) by means of Graft-versus-host disease (GVHD) and posttrans-plant complications risk lowering.
Materials and methods
We report our experience of HSCT from HLA-matched unrelated donors using TCR alfa/beta and CD19 depletion in 5 pts (1M/4F) with PNH, developed after successful immunosuppressive therapy (1ST) of acquired aplastic anemia (AA). Median age of pts at the moment of transplantation was 17.8 years (range 14.5-22.7), median interval from 1ST to PNH was 4 years (5mo - 6.5 y). In all patients non-severe pancytopenia was present: granulocytes 0.8x109/l (0.8-1.8x109/l) platelets 106x109/l (27-143x109/l) and Hb -78 g/l, median PNH clone size in granulocytes was 94 (range 75-99)%. One pts previously developed sinus thrombosis. Conditioning consisted of thoraco-abdominal irradiation 4-6 Gy, cyclo-
phosphamide 100 mg/kg, fludarabine 150 mg/m2 and anti-thymocyte globulin (ATG) or alemtuzumab. Eculizumab was given from day (-7) till day (+14) (every 7 days, only 4 times). GVHD prophylaxis was tacrolimus +/- methotrexate. Infusedgraft characteristics were: CD34+ - 8.1x106/kg, CD3TCRab+ - 150x103/kg, CD3gd+ - 7.3x106/kg, CD19+ -221x103/kg, NK - 6.4x108/kg.
Results
Engraftment was achieved in all 5 pts with a median of 15 (12-18) m 13 (10-18) days for granulocytes and platelets, respectively. Skin acute GVHD grade I developed in only 1 pt, and subsided with short course of glucocorticoids. CMV reactivation occurred in 1 pt; there were no episodes of Ep-stein-Barr Virus (EBV) or Adenovirus (AdV) reactivation. Full donor myeloid chimerism was established in all cases by day +30. Immune reconstitution was delayed until 6 months after transplant but no severe infections occurred. All pts are alive for 1.7-5.5 years (med 4 years) after HSCT with normal hematopoiesis and immune function, full donor chimerism and no late sequelae.
Conclusions
Transplantation of TCRalfa/beta and CD 19 depleted hematopoietic cells from matched unrelated donor after immunoablative conditioning and supported with short course of eculizumab is perfectly safe and efficient technology leading to cure in young patients with PNH.
Keywords
Paroxysmal nocturnal hemoglobinuria, TCR alfa/beta and CD19 depletion, transplantation, adolescents, young adults.
Трансплантация гемопоэтических стволовых клеток с деплецией альфа/бета Т-лимфоцитов и CD19-клеток у подростков и молодых взрослых с пароксизмальной ночной гемоглобинурией с использованием иммуноаблативного кондиционирования и «пери-трансплантационной» терапией экулизумабом
Дарья А. Шашелева, Алексей А. Масчан, Лариса Н. Шелихова, Ульяна Н. Петрова, Мария А. Илюшина, Жанна Б. Шеховцова, Сергей Л. Благов, Андрей Б. Абросимов, Елена И. Гутовская, Елена Е. Курникова, Ольга И. Илларионова, Елена В. Боякова, Галина А. Новичкова, Михаил А. Масчан
ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр детской гематологии, онкологии и иммунологии имени Дмитрия Рогачева» Минздрава России, отдел оптимизации лечения и профилактики осложнений трансплантации гемопоэтических стволовых клеток, Москва, Россия
Цель работы
Оптимизировать подходы к трансплантации гемопоэтических стволовых клеток (ТГСК) у подростков и молодых взрослых с пароксизмальной ночной гемогло-бинурией (ПНГ) путем снижения риска реакции «трансплантат против хозяина» (РТПХ) и посттрансплантационных осложнений.
Материалы и методы
Мы описываем опыт ТГСК от ИЬА-совместимых неродственных доноров с использованием деплеции альфа/бета Т-лимфоцитов и СБ19-клеток у 5 пациентов (1 мужчина, 4 женщины) с ПНГ, развившейся в результате эволюции приобретенной апластической анемии (АА) после успешной иммуносупрессивной терапии (ИСТ) -см. Табл. 1. Медиана возраста пациентов на момент трансплантации составила 17,8 года (14,5-22,7 года), медиана интервала до диагностики ПНГ - 4 года (5 мес.-6,5 лет) от проведения ИСТ. У всех пациентов присутствовали признаки нетяжелой костномозговой недостаточности: гранулоциты 0,8-109/л (0,8-1,8-109/л), тромбоциты 106-109/л (27-143-109/л), гемоглобин - 78 г/л, медиана размера ПНГ-клона во фракции гранулоцитов составила 94% (75-99%). У одной пациентки в анамнезе был тромбоз мозговых венозных синусов. Кондиционирование состояло из торакоабдоминального облучения (ТАО) 4-6 Гр, циклофосфамида 100 мг/кг, флударабина 150 мг/м2 и лошадиного антитимоцитарного глобулина/ал емтузумаба (Табл. 2). Экулизумаб вводили со дня (-7) до дня (+14) 1 раз в 7 дней, всего 4 введения, профилактика РТПХ/отторжения состояла из такролимуса ± метотрексат. Клеточные характеристики трансплантата были следующими: СБ34+/кг 8,1-106/кг, альфа/бета Т-лимфоциты/кг 150-103/кг, гамма/дельта Т-лимфоциты/кг 7,3-106/кг, СБ19+/кг 221-103/кг, Ж/кг 6,4-108/кг
(Табл. 3). Медиана продолжительности приема такроли-муса после ТГСК составила117 (27-365) сут.
Результаты
Первичное приживление лейкоцитарного и тромбо-цитарного ростков было достигнуто у всех пятерых пациентов с медианой 15 (12-18) и 13 (10-18) дней соответственно, ни одного отторжения не зафиксировано. Острую РТПХ наблюдали у одного пациента - I стадия (поражение кожи 2-й степени), которая потребовала системного назначения глюкокортикостероидов с быстрым ответом и быстрой отменой терапии. Хроническая РТПХ не развилась ни у одного пациента. Реактивация ЦМВ оказалась у 1 пациента, на (-1) сутки, проводилась упреждающая терапия фоскавиром в течение 2 нед., реактивации вируса Эпштейна-Барр (ЭБВ) и аденовируса не наблюдалось. Ни в одном случае не зарегистрировано проявлений эндотелиальной токсичности. У всех пациентов ко дню +30 достигнут полный донорский химеризм в миелоидном ростке. При этом во фракции Т-лимфоцитов памяти (фракция С045К.0+) у 1 пациента длительно сохранялся собственный химе-ризм, в то время как во фракции наивных Т-лимфоци-тов (С045КА+) химеризм был стабильно донорским с момента их появления в периферической крови. Ни у одного пациента не развилось гемолитического криза и исчезновение ПНГ-клона документировано у всех пациентов к +60 дню (см. рис. 1). Иммунореконститу-ция (СБ 3+/4+ > 200/мкл, СБ19 + > 50/мкл) оказалась замедленной и наступала с медианой 6 мес после ТГСК (от 4 до 10 мес после ТГСК), однако клинически значимых инфекций, связанных с Т-клеточным дефицитом, не отмечено. В настоящее время все пять пациентов живы с нормальным гемопоэзом, полным количественным восстановлением показателей иммунитета, не имеют посттрансплантационных осложнений, клинически
здоровы и хорошо социально адаптированы. Медиана посттрансплантационного наблюдения составляет 4 года (1,7-5,5 лет).
Заключение
Таким образом, выполнение ТГСК с деплецией альфа/ бета Т-лимфоцитов и СБ19-клеток от полностью совместимого неродственного донора после мощного имму-носупрессивного кондиционирования с минимальной
Таблица 1. Характеристика пациентов
органной токсичностью показало более чем обнадеживающие результаты в группе подростков и молодых взрослых с ПНГ.
Ключевые слова
Пароксизмальная ночная гемоглобинурия, трансплантация, деплеция альфа/бета Т-лимфоциты и СБ19-клеток, неродственные доноры, подростки, молодые взрослые.
Пациент/ пол, возраст, лет Тяжесть ПАА/ возраст диагноза ПАА, лет Лечение ПАА/результат Интервал до развития ПНГ/лет Размер ПНГ-клона (гран.), % Лабораторные показатели на момент начала ТГСК
Больной Ш.М., муж/22 Сверхтяжелая ПАА/13,5 АТГ+CsA ^ ПО рецидив через 9 лет 6,5 95 НЬ 74 г/л Гран. 0,8-109/л Тромб. 27'109/л Ретик. 0,9% ЛДГ 729 Ед/л
Больная С.Е., жен/15 Сверхтяжелая ПАА/8,2 АТГ+CsA ^ ЧО после 2 курсов (рецидив через 3 года) 3,5 94 НЬ 78 г/л Гран. 1,68 109/л Тромб. 34'109/л Ретик. 0,4% ЛДГ 184 Ед/л
Больная С.О., жен/22 Сверхтяжелая ПАА/14,9 АТГ+CsA ^ ПО/рецидив через 1 год/АТГ ^ ЧО/ рецидив через 3 года/ ^ CsA 5,5 99 НЬ 78 г/л Гран. 0,8'109/л Тромб. 143 109/л Ретик. 0,7% ЛДГ 590 Ед/л
Больная Ф.Ю., жен/14 Тяжелая ПАА/13 АТ^А ^ ЧО 0,4 94 НЬ 77 г/л Гран. 0,75'109/л Тромб. 106 109/л Ретик. 0,8% ЛДГ 242 Ед/л
Больная К.Е., жен/17 Сверхтяжелая ПАА/12,4 АТГ+CsA ^ ПО рецидив через 4,5 года АТГ ^ ЧО 4,5 75% НЬ 92 г/л Гран. 0,9'109/л Тромб. 125 109/л Ретик. 0,2% ЛДГ 743 Ед/л
Примечания. СзА - циклоспорин А, ПО - полный ответ, ЧО - частичный ответ, гран. - гранулоциты, тромб. - тромбоциты, ретик. - ретикулоциты
Таблица 2. Режим кондиционирования и лечение экулизумабом (дни)
Режим Пациент 1 Пациент 2 Пациент 3 Пациент 4 Пациент 5
кондиционирования
ТАО доза, Гр 6 6 6 4 4
(-6) - (-4 ) (-9) - (-7) (-6)- (-4) (-7) - (-6) (-6) - (-5)
Флударабин, мг/м2 150 150 150 150 150
(-6) - (-2) (-6) - (-2) (-6) - (-2) (-6) - (-2) (-6) - (-2)
Циклофосфамид, мг/кг 100 100 100 100 100
(-5) - (-2) (-5) - (-2) (-5) - (-2) (-5) - (-2) (-5) - (-2)
Тиотепа, мг/кг 5 (-5) 5(-5)
Серотерапия Алемтузумаб, АТГАМ, АТГАМ, Тимоглобулин, Тимоглобулин,
1 мг/кг 100 мг/кг 100 мг/кг 7,5 мг/кг 5 мг/кг
(-14 сут) (-5) - (-2) (-5) - (-2) (-5) - (-4) (-5) - (-4)
Ритуксимаб, мг/м2 200 (-1) 200 (-1) 100 (-1)
Экулизумаб 600 мг/1 раз 600 мг/1 раз в 7 600 мг/1 раз 600 мг/1 раз 600 мг/1 раз
в 7 дней дней в 7 дней в 7 дней в 7 дней
(-7, 0, +7, +14) (-7, 0, +7, +14) (-7, 0, +7, +14) (-7, 0, +7, +14) (-7, 0, +7, +14)
Таблица 3. Характеристики трансплантата и режимов профилактики отторжения/РТПХ
Пациент 1 Пациент 2 Пациент 3 Пациент 4 Пациент 5
CD34(+)/Kr 6,6106/кг 13,5106/кг 13106/кг 8,1106/кг 8,0'106/кг
А/б Т/кг 150 103/кг 316103/кг 98'107кг 44103/кг 181103/кг
Г/д T/кг 7,7'106/кг 14,1106/кг 7,3106/кг 2,3'106/кг 1,4106/кг
CD19/Kr 62'103/кг 343'103/кг 221 103/кг 232 103/кг 1986 103/кг
NK/кг 6,4108/кг 13,8108/кг 7,6108/кг 2,4108/кг 3,2108/кг
Профилактика отторжения/РТПХ
Такролимус 0,015 мг/кг/сут 0,015 мг/кг/сут 0,015 мг/кг/сут 0,015 мг/кг/сут 0,015 мг/кг/сут
Метотрексат 10 мг/м2 (+1, +4, +7, +11) 5 мг/м2 (+1,+3,+6) - - -
Примечание. А/б Т/кг - альфа/бета Т-лифоциты/кг, Г/д T/кг - гамма/дельта Т-лимфоциты/кг.
ПНГ-клон в эритроцитах
Type III PNH Typell
клон ПНГ 20,31%
"lll"""»L ......
с lûJ
CD59 РЕ-А
Туре III PNH Type II PNH
минорный клон ПНГ 0,70%_
"if": III PNH Type II PNH
минорный клон ПНГ 0,11%
ПНГ-клон в гранулоцитах
минорный клон ПНГ 0,07%
минорный клон ПНГ 0,03%
ПНГ-клон в моноцитах
WBC 2-Моп
"г- ПНГ моноциты
85,33% Ж
vÉÊ '•m ,f
.....Ъ ......>
F LAER FITC-A
WBC 6-Mon
V минорный клон ПНГ 0,02%
V PNH
F LAER FITC-A
WBC
ПНГ моноциты 0%
103 10' 10s LAER FITC-A
Нормальные клетки
ПНГ+ клетки, эритроциты III типа
Эритроциты II типа
Рисунок 1. Эволюция ПНГ-клона после ТГСК
Retrospective analysis of using ixazomib in patients with relapsed/refractory multiple myeloma
Daniil I. Shmidt, Olga V. Pirogova, Valentina V. Porunova, Olga V. Kudyasheva, Elena I. Darskaya, Sergey N. Bondarenko, Boris V. Afanasyev
R. M. Gorbacheva Memorial Institute of Oncology, Hematology and Transplantation; Chair of Hematology, Transfusiology and Transplantology, Pavlov First Saint Petersburg State Medical University, Saint Petersburg, Russian Federation
Contacts: Daniil I. Shmidt E-mail: [email protected]
Introduction
Multiple myeloma (MM) remains incurable relapsing disease and novel agents are under investigation in order to prolong progression-free and overall survival of MM patients (pts). Ixazomib is the first oral proteasome inhibitor that showed effectiveness in relapsed/refractory MM. Patients (pts) re-
fractory to prior bortezomib therapy are often responsive to ixazomib treatment. As newly introduced agent, ixazomib requires further investigation.
Patients and methods
Retrospective analysis of a single-center experience was performed in 12 pts with MM. Efficacy and tolerability of
