CC BY-ND
22
ОШШ №10 (247) ЗНиСО
31
г-Ь
по квартилям. В результате все административные территории Ставропольского края были разделены на четыре группы по степени риска распространения холеры.
Группа 1 (низкая степень риска): г. Ессентуки, районы Александровский, Благодарненский, Георгиевский, Кировский, Предгорный, Труновский, Шпаковский, Туркменский, Ипатовский, Апанасен-ковский, Красногвардейский.
Группа 2 (средняя степень риска): г. Ставрополь, районы Буденновский, Новоселицкий, Советский, Невинномысск, Курский, Минерало-водский, Петровский.
Группа 3 (высокая степень риска): г.г. Желез-новодск, Пятигорск, районы Андроповский, Арз-гирский, Грачевский, Нефтекумский, Степновский, Новоалександровский.
Группа 4 (очень высокая степень риска): г. Кисловодск, районы Изобильненский, Кочу-беевский, Левокумский.
При разработке плана санитарно-эпидемиологических мероприятий с целью совершенствования эпидемического надзора за холерой следует учитывать степень риска каждой административной единицы края. Для территорий с высокой степенью риска заноса холеры должны быть усилены профилактические меры по выявлению, локализации и ликвидации единичных случаев завоза в первую очередь среди граждан, прибывших из неблагополучных по холере стран. В районах с повышенным риском распространения заболевания целесообразно активизировать работу по мониторингу объектов окружающей среды на предмет выявления холерных вибрионов, а также усилить надзор за санитарно-гигиеническим состоянием населенных пунктов, объектов водоснабжения, мест массового отдыха населения. При этом необходимо обеспечить готовность медицинских
учреждений, а также других заинтересованных служб к работе в условиях массового распространения инфекции в соответствии с действующими нормативными документами [6].
Таким образом, на территории Ставропольского края, относящейся к первому типу по эпидемическим проявлениям холеры, выделены административные территории с различной степенью риска заноса и распространения холеры (низкой, средней, высокой и очень высокой). В зависимости от преобладания рисков заноса или распространения холеры, определен комплекс первоочередных противохолерных мероприятий на конкретных территориях.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Дубянский В.М. Методика оценки биологической опасности внутренних и внешних угроз в субъекте Российской Федерации / В.М. Дубянский, О.В. Малецкая //Проблемы особо опасных инфекций. 2012. Вып. 1(11). С. 39—42.
2. Об эпидемиологической ситуации по холере в мире и прогнозе заболеваемости холерой на 2012 г.: Письмо Главного государственного санитарного врача Г.Г. Онищенко от 06.04.2012 № 01/3540-12-32.
3. Разработка методических подходов к определению эпидемического потенциала административной территории по холере / Ю.М. Ломов, Э.А. Москвитина, В.И. Прометной [и др.] //Матер. науч.-практ. конф., посв. 100-летию образования противочумной службы России. Саратов, 1997. Т. 1. С. 95—96.
4. Разработка методических подходов к определению степени потенциальной эпидемической опасности миграции в завозе холеры / Э.А. Москвитина, В.В. Баташев, Л.А. Калошина [и др] //Матер. науч.-практ. конф., посв. 100-летию образования противочумной службы России. Саратов, 1997. Т. 1. С. 109—110.
5. Холера в начале XXI века. Прогноз / Г.Г. Онищенко, Ю.М Ломов, Э.В. Москвитина, Ю.М. Федоров, Л.С. Подосинникова, А.В. Горобец //Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2005. Вып. 3. С. 44—48.
6. Профилактика холеры. Общие требования к эпидемиологическому надзору за холерой на территории Российской Федерации: СП 3.1.1. 2521—09. М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2009. 35 с.
Контактная информация: Contact Information:
Васильева Оксана Васильевна, Vasilieva Oksana, тел.: 8 (865) 241-87-30, phone: 8(865) 241-87-30,
е-mail: snipchi@ mail.stv.ru е-mail: snipchi@ mail.stv.ru
-V-
ХАРАКТЕРИСТИКА ВИРУЛЕНТНОСТИ И ТОКСИГЕННОСТИ ШТАММА PSEUDOMONAS FLUORESCENS ЕК-5-93-ДЕСТРУКТОРА ТОКСИЧНЫХ ФОСФОРОРГАНИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ
И.В. Дармов1, И.П. Погорельский1, А.А. Лещенко1, В.В. Тетерин1, А.Г. Лазыкин1, В.Н. Бредихнин3, Н.В. Шеенков2, И.В. Поздняков3
CHARACTERISTIC OF VIRULENCE AND TOXIGENIC PROPERTIES OF PSEUDOMONAS FLUORENSCENS ЕК-5-93 AS A ORGANO-PHOSPHORUS TOXIC COMPAUNDS' BIODESTRUCTOR
I.V. Darmov, I.P Pogorel'sky, A.A. Leshchenko, V.V. Teterin, A.G. Lazykin., V.N. Bredikhin, N.V. Sheenkov, I.V. Pozdnjakov
1Научно-исследовательский центр ФБУ «33 Центральный научно-исследовательский испытательный институт Министерства обороны Российской Федерации», г. Киров; 2Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, г. Москва; 3ФКУЗ «Противочумный центр» Роспотребнадзора, г. Москва Представлены результаты изучения вирулентности и токсигенности штамма Pseudomonas fluorescens ЕК-5-93 - деструктора токсичных фосфорорганических соединений, существенные для оценки его безвредности и экологической безопасности.
Ключевые слова: окружающая среда, штамм-биодеструктор, токсичные фосфорорганические соединения, биотехнология, утилизация отходов.
There are shown the results of study of virulence and toxigenic properties ofPseudomonas fluorescens ЕК-5-93 as a organo-phosphorus toxic compaunds' destructor as them being assessment of its harmful effect and environmental safety. Keywords: environment, biodestructoringstrain, toxic organo-phosphorus compounds, biotechnology, waste disposal.
Принятие Российской Федерацией в марте 1996 г. федеральной целевой программы «Уничтожение запасов химического оружия в Российской Федерации» явилось важным этапом выполнения международных обязательств в рамках реализации «Конвенции о запрещении разра-
ботки, производства, накопления и применения химического оружия и о его уничтожении», вступившей в силу 29 апреля 1997 г. [1]. Программой было предусмотрено создание в стране промышленной базы для уничтожения химического оружия с учетом необходимости охраны окружающей
32
ЗНиСО ОШШ №10 (247)
среды в местах строительства объектов по уничтожению химического оружия, сохранения здоровья и улучшения социально-бытовых условий населения, проживающего в районах размещения данных объектов. В октябре 2006 г. в поселке Марадыковский Оричевского района Кировской области начал действовать первый пусковой комплекс третьего российского объекта по уничтожению химического оружия, на территории которого хранилось 17,4 % запасов химического оружия. Объект в поселке Марадыковский — особый, на нем впервые в России развернуты работы по уничтожению фосфорорганических отравляющих веществ (ФОВ) [1].
Функционирование объекта по уничтожению химического оружия сопряжено с образованием продуктов, при сжигании которых может происходить эмиссия в окружающую среду аэрозолей, содержащих токсичные фосфорорганические соединения (ФОС).
Альтернативой существующих физических и химических методов очистки окружающей среды от токсичных труднолазлагаемых соединений являются биотехнологические методы, основанные на биологической активности микроорганизмов. Одним из условий реализации биотехнологии утилизации ФОС является выделение и всесторонняя характеристика биологических свойств микроорганизмов-биодеструкторов, способных использовать энергию химических связей этих соединений в своей жизнедеятельности [2].
Всеобъемлющая характеристика биологических свойств микроорганизма-деструктора, перспективного для использования в биотехнологии утилизации ФОС, крайне важна при конструировании соответствующего биопрепарата и выдаче разрешительных документов на его производство, применение (использование) и реализацию, в том числе санитарно-эпидемиологического заключения от регионального управления Роспотребнадзора. Среди сведений, необходимых для получения указанного заключения, фигурируют данные экспериментальных исследований по оценке безвредности и экологической безопасности микроорганизма-деструктора и биопрепарата, приготовленного на его основе. Исходя из вышеизложенного, целью работы было экспериментальное изучение вирулентности и токси-генности штамма-деструктора ФОС, имеющих важное значение для оценки его биологической и химической безопасности.
Материалы и методы. В работе использован штамм-биодеструктор ФОС Pseudomonas fluorescens ЕК-5-93, хранящийся в коллекции технофильных микроорганизмов НИЦ ФБУ «33 ЦНИИИ Минобороны России» (авторы описавшие вид: Лазыкин А. Г., Дармов И. В., Лещенко А.А.,Погорельский И.П.,Тетерин В.В.). Штамм выделен из мест естественной адаптации к ФОС [4], имеет высокую биодеградирующую активность, способность к накоплению биомассы в процессе культивирования и другие свойства, необходимые для его использования в технологической схеме деструкции данных соединений.
Культуру бактерий Р. Аыо^евт ЕК-5-93 выра- ^ щивали на агаре Хоттингера (рН 7,2) при темпе- '— ратуре 28 °С в течение 48 ч. Для проведения экс- ^ периментов выросшую культуру бактерий смы- ° вали с поверхности плотной питательной среды ^ физиологическим раствором хлорида натрия. Ч|
Концентрацию живых микробов в суспензиях оценивали методом высева серийных десятикратных разведений на плотную питательную среду в чашках Петри с последующим подсчетом выросших колоний. Общую концентрацию бактерий в культурах и суспензиях определяли по стандарту мутности ГИСК им. Л.А. Тарасевича (ОСО 42-28-29-86П). Безопасность бактерий штамма Р. Аыо^евт ЕК-5-93 выявляли в остром и хроническом экспериментах с использованием лабораторных животных. Нелинейных белых мышей массой 18—20 г, морских свинок массой 180—200 г и кроликов массой 1 500—2 000 г получали из питомника НИЦ ФБУ «33 ЦНИИИ Минобороны России». Экспериментальных животных содержали в однотипных условиях с одинаковым пищевым рационом [5]. Общетоксическое действие штамма Р. Аыо^евт ЕК-5-93 оценивали на основании определения вирулентности, токсигенности и токсичности в опытах на белых мышах [6, 7].
Оценку раздражающего действия бактерий штамма Р. ПиогеБсеш ЕК-5-93 на слизистые оболочки глаза проводили на кроликах и морских свинках [7].
Результаты и обсуждение. Определение вирулентности проводили на белых мышах обоего пола, каждая группа состояла из 12 животных (6 самцов и 6 самок в группе). Суспензию бактерий в физиологическом растворе вводили в концентрациях 105—1010 микробных клеток в 0,2 см3 внутрибрюшинно и перорально. Контрольным группам экспериментальных животных вводили физиологический раствор хлорида натрия в аналогичных объемах. Продолжительность наблюдения за животными после введения составляла 21 сутки.
Установлено, что в течение всего периода наблюдения животные опытной и контрольной групп оставались живыми и признаков интоксикации у них не выявлено. В отношении остальных контролируемых показателей животные подопытной группы не отличались от контрольной. Ввиду того, что максимально вводимая доза бактерий при внутрибрюшинном и пероральном путях заражения (1010 КОЕ см-3) не вызывает гибели животных, штамм следует отнести к невирулентным.
При определении токсигенности белым мышам вводили внутрибрюшинно стерильный фильтрат двухсуточной бульонной культуры штамма Р. Аыо^евт ЕК-5-93 в объеме 0,5 см3. Контрольной группе животных вводили физиологический раствор хлорида натрия в том же объеме. Срок наблюдения за животными составлял 21 сутки.
В течение всего срока наблюдения гибели животных не наблюдалось. Полученные результаты свидетельствуют о том, что изучаемый штамм не выделяет в культуральную жидкость экзотоксины
№№l №10 (247) ЗНиСО
33
в количествах, вызывающих токсический эффект '— или гибель животных, что характеризует его как нетоксигенный.
Следующим этапом исследований было -чт определение токсичности штамма P. fluorescens ЕК-5-93 для белых мышей при внутри брюшинном и пероральном способах введения. Термоинактивированную суспензию бактерий, Эразведенную физиологическим раствором хлорида натрия до концентрации 2 х 109 микробных клеток в 1,0 см3, вводили животным в объеме 0,5 см3. Животным контрольной группы вводили физиологический раствор хлорида натрия в аналогичном объеме. Продолжительность наблюдения за животными составила 21 сутки.
В результате изучения токсичности культуры штамма P. fluorescens ЕК-5-93 установлено, что животные всех групп оставались живыми и признаков интоксикации у них не выявлено. Согласно полученным данным, можно отметить, что бактерии исследуемого штамма не содержат значимых количеств эндотоксинов и при внутри-брюшинном и пероральном введении экспериментальным животным в соответствующих дозах токсического действия не оказывают.
Исследование раздражающего действия бактерий P. fluorescens ЕК-5-93 на слизистую оболочку глаз морских свинок и кроликов проводили согласно методике [7]. Опытным животным под верхнее веко вводили взвесь изучаемого штамма микроорганизма в объеме 0,05 см3, содержащем 109 м.кл.-см-3. Контрольным животным закапывали физиологический раствор хлорида натрия в том же объеме.
Оценка степени повреждения слизистой оболочки включала: регистрацию состояния конъюнктивы и роговицы, отека век, инъекцию кровеносных сосудов и степень выделений из глаза. Реакцию учитывали через 15 мин (быстрая реакция) и через 24 ч (гиперчувствительность замедленного типа).
Установлено, что изучаемый штамм в регистрируемые сроки наблюдения не вызывает воспалительных реакций и раздражающего действия на слизистую оболочку глаз лабораторных животных.
Экспериментальную оценку хронического общетоксического действия штамма P. fluorescens ЕК-5-93 проводили на белых мышах и морских свинках. Животным вводили суспензию бактерий в физиологическом растворе хлорида натрия ин-траназально и внутрижелудочно. Концентрация микробных клеток при интраназальном способе введения белым мышам составила 104 и морским свинкам 105 в пересчете на объем вдыхаемого воздуха (м3). При внутрижелудочном способе введения доза бактерий составила 104 и 105 соответственно для белых мышей и морских свинок. Животным контрольной группы вводили физиологический раствор хлорида натрия в том же объеме. Введение бактерий при соответствующих способах осуществляли один раз в день в течение 30 суток. В процессе наблюдения за животными ежедневно фиксировали: двигательную активность, потребление корма и воды, изменение
массы тела, а также регистрировали гибель животных.
В период наблюдения при проведении хронического опыта гибель животных не наблюдалась, признаков интоксикации не выявлено. По показателям двигательной активности, потреблению корма и воды, изменению массы тела животные опытной группы не отличались от животных контрольной группы. Исследуемый штамм P. fluorescens ЕК-5-93 при интраназальном и пе-роральном введении в исследуемых дозах экспериментальным животным хронического токсического действия не оказывает.
В настоящее время проблеме биологической безопасности уделяется пристальное внимание. Наряду с математическим моделированием биологических процессов, учитывающих особенности свойств микро- и макроорганизмов, влияние условий окружающей среды и другие параметры, актуальной является оценка риска интродукции технофильного микроорганизма с использованием классических микробиологических подходов [8]. Это тем более важно в случае использования микроорганизма в биотехнологии утилизации ФОС. И хотя конкретный исследуемый штамм микроорганизма-деструктора P. fluorescens ЕК-5-93 является природным изолятом, нельзя не учитывать того, что в биотехнологии переработки ФОС с указанным штаммом могут возникнуть определенные риски для здоровья человека, в первую очередь при аэрогенном поступлении бактерий в организм.
Выполненный цикл исследований, связанный с изучением в опытах in vivo вирулентности, ток-сигенности, токсичности, хронического общетоксического действия на организм экспериментальных животных, а также раздражающего действия на слизистую оболочку глаз бактерий штамма P. luorescens ЕК-5-93, дает основания говорить об отсутствии у микробных клеток признаков пато-генности.
Выводы. В результате исследований бактерий штамма-деструктора P. fluorescens ЕК-5-93 по оценке вирулентности, токсигенности, токсичности, хронического общетоксического действия на организм лабораторных животных и раздражающего действия на слизистую оболочку глаз экспериментально доказано отсутствие признаков патогенности у микробных клеток, что открывает перспективу дальнейшего изучения биологических свойств штамма в составе биопрепарата.
Работа была выполнена при поддержке Государственного контракта № ЦР/07/2085/УЗ0/К.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Холстов В.И. Выполнение Россией обязательств по Конвенции о запрещении химического оружия: состояние и ближайшие задачи //Теоретическая и прикладная экология. 2007. № 2. С. 4—7.
2. Чупис В.Н., Растегаев О.Ю., Малишевский А.О. Перспективные подходы к перепрофилированию объектов по уничтожению химического оружия //Теоретическая и прикладная экология. 2010. № 1. С. 87—95.
3. Воробьева Л.И. Промышленная микробиология. М.: Изд-во «Знание», 1985. 64 с.
4. Пат. 2154103 Российская Федерация. Штамм Pseudomonas species 78Г, предназначенный для деградации фосфороргани-ческих отравляющих веществ / А.Т. Харечко [и др.]; заявитель и патентообладатель Центр военно-технических проблем
34
ЗНиСО ОКТЯбРЬ №10 (247)
биологической защиты НИИМ МО РФ. № 99100570: заявл. 10.01.1999; опубл. 10.08.2000.
Правила проведения работ с использованием экспериментальных животных: утв. М-вом здравоохранения РСФСР. М.: МЗ РСФСР, 1977. 54 с.
Методы распределения токсичности и опасности химических веществ / Под ред. И.С. Саноцкого. М.: Медицина, 1970. 340 с. Методические рекомендации по изучению общетоксического действия фармакологических средств / Ведомости Фармакологического Комитета. Приложение к журналу «Фарматика». 1998. № 1. С. 36—40.
Поклонский Д.Л. Нормирование рисков при работе с возбудителями опасных и особо опасных заболеваний //Матер.
Всерос. научн. конф., посвящ. 80-летию со дня основания ФГУ «48 ЦНИИ Минобороны России» «Диагностика, лечение и профилактика опасных и особо опасных инфекционных заболеваний. Биотехнология». Киров, 2008. С. 411—414.
Контактная информация:
Бредихин Владимир Николаевич, тел.: 8 (905) 711-41-07, e-mail: bredikhin59@mail.ru
Contact information:
Bredikhin Vladimir, рhone: 8 (905) 711-41-07, e-mail: bredikhin59@mail.ru
-
ВЛИЯНИЕ ЗАГРЯЗНЕНИЯ АТМОСФЕРНОГО ВОЗДУХА НА ЗАБОЛЕВАЕМОСТЬ НАСЕЛЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ САХА (ЯКУТИЯ)
О.А.Ушкарева1, Н.П. Семенова2
INFLUENCE OF POLLUTION OF ATMOSPHERIC AIR ON INCIDENCE OF THE POPULATION OF THE REPUBLIC OF SAKHA (YAKUTIA)
O.A. Ushkareva, N.P. Semenova 'ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Республике Саха (Якутия)», г. Якутск; 2Сибирская академия права, экономики и управления, г. Иркутск
Представлены результаты исследования показателей здоровья населения Республики Саха (Якутия) в зависимости от природно-климатических и техногенных факторов. Выявлены приоритетные загрязнители атмосферного воздуха, оказывающие влияние на здоровье детского и взрослого населения Республики Саха (Якутия).
Ключевые слова: экология, здоровье, население, загрязнение атмосферы.
Results of research of indicators of health of the population of the Republic of Sakha (Yakutia) depending on climatic and technogenic factors are presented. The priority pollutants of atmospheric air having impact on health of children's and adult population of the Republic of Sakha (Yakutia) are revealed. Keywords: ecology, health, population, atmosphere pollution.
Одним из важных показателей социально-экономического благополучия страны является здоровье населения. Среди многочисленных факторов внешней среды, формирующих уровень здоровья населения, воздуху принадлежит одно из ведущих мест. Антропогенное загрязнение окружающей среды оказывает прямое влияние на рост заболеваемости, смертности, в первую очередь социально незащищенных слоев населения, репродуктивную функцию молодых людей и естественное воспроизводство. Анализ соответствия атмосферного воздуха санитарному законодательству за последние годы показывает устойчивую тенденцию к снижению количества проб с превышением гигиенических нормативов.
В настоящее время проблема формирования, сохранения и укрепления здоровья населения особенного детского и подросткового, рассматривается как фактор национальной безопасности и стратегической цели отечественного здравоохранения в связи с прогрессирующим снижением доли здорового населения в целом [1, 6].
Несмотря на обширный научный материал по данной области остается дефицит научных исследований по проблемам развития, роста и управления здоровьем населения, недостаточная эффективность проводимых профилактических мероприятий, потребительское отношение к своему здоровью большинства членов общества.
Для жителей республики характерна специфическая форма хронического полярного напряжения, вызванная снижением резистентности организма в суровых климатических условиях. При этом истощаются приспособительные резервы организма и, уже в молодом возрасте, возникают многочисленные заболевания, происходит преждевременное старение. И поэтому воздействие
комплекса экстремальных климатогеографиче-ских, социальных, экологических факторов отражается в неблагоприятных динамических сдвигах общественного здоровья [2, 3, 4]. В этой связи охрана здоровья населения, проживающего в условиях урбанизированного Севера, приобретает особое приоритетное значение в системе здравоохранения [5].
Развитие цивилизации способствует переустройству среды обитания, что неблагоприятно сказывается на трансформировании важнейших ее составляющих: атмосферного воздуха, воды и почвы.
В связи с этим нами был проведен анализ многолетних данных по заболеваемости населения Республики Саха (Якутия) и выявлено влияние загрязнения атмосферного воздуха на здоровье населения в современных условиях.
Материалы и методы. Для изучения загрязнения атмосферного воздуха Республики Саха (Якутия) были использованы данные территориального органа Федеральной службы государственной статистики за 1995—2011 гг. Состояние здоровья населения республики оценивали на основании общей и впервые выявленной заболеваемости детей и взрослого населения. Оценка состояния здоровья проводилась по формам текущей отчетности лечебно-профилактических учреждений форма № 12у «Сведения о числе заболеваний, зарегистрированных у пациентов, проживающих в районе обслуживания медицинской организации». Анализ взаимосвязи между среднереспубликанскими показателями проводился с использованием коэффициента ранговой корреляции Спирмена (г). Достоверными считались различия статистически значимыми при р < 0,05.
