CC BY
22we implied peritonitis classification scheme by Simonyan. Such phase classification turned out to be applicable in our case. Though for fur-bearing animals the peritonitis process had specific features. Animals of the first group represented signs of the first phase only. For the second group peritonitis appeared as a complication of acute enteritis and developed along with hypovolemia. This fact limited the inflammatory process spreading and peritonitis proceeded subacutevly. Animals of the third group represented classical peritonitis scheme including all three phases. In reactive phase of peritonitis vascular complications realise, the toxic phase inflammatory and complications dystrophic realise. With the super acutely a course of peritonitis the most severe complication is hypovolemic shock. But with acute and subacute course the most severe complication is that of precipitation respiratory function of diaphragm with the development of a stagnant hyperemia and pulmonary oedema. If peritonitis designed as a second trial and complicates the acute enteritis exudative, pathological picture determines hypovolemia of first point with enteritis type. The vascular reaction with peritonitis of the family Mustalidae was very acute. A case of animals during the superacute peritonitis can because the development of hypovolemic shock. Conclusion: The most likely cause of death is acute ischemia of the vital organs: brain, heart, lungs. The course of disease and pathological anatomy of exudative peritonitis and hypovolemic shock of fur-bearing animals like the pathological anatomy of purulent peritonitis and hypovolemic shock, described in peoples.
KEYWORDS: peritonitis, hypovolemic shock.
Referenses
1. Zharov, A.V. Vskrytiye i patomorfologicheskaya diagnostika bolexney zhivotnyh: uchebnik dlya vuzov [Autopsy and pathomorphologycal diagnosis of animal diseases: a textbook for High Schools] / A.V. Zharov, I.V. Ivanov, A.P. Strelnikov. -Moscow: Kolos, 2003. - 400p.
2. Boyko, V.V. Rasprostranenniy gnoyniy peritonot: monografiya [Widespread purulent peritonitis: a manuscript] / V.V.Boyko, I.A.Krivoruchko, S.N.Teslenko - Kharkov: Prapor, 2008. - 280p.
3. Lvov, D.K. Virusy grippa: sobytiya i prognozy [Influenza viruses: events and predictions] / D.K.Lvov, A.D.Zaberezhny, T.I.Aliper // J. Nature. - 2006.Vol.6. - P.3-13.
4. Prakticheskoye posobiye po monitoringu brutsellyoza, tuberkulyoza, paratuberkulyoza, i leykoza krupnogo rogatogo skota: organizatsionno-hozyaystvenniye, veterinarno-sanitarniye, i zoogigiyenicheskiye aspekty profilaktiki i likvidatsii etih infektsiy [Practical guide of monitoring of brucellosis, tuberculosis, paratuberculosis and bovine leukemia: organizational-economic and veterinarian sanitary and zoohygienic aspects of the prevention and elimination of these infections] / Edited by M.I. Gulukin. - Moskow.: LTD "Agentstvo kreativnyh tehnologiy", 2014. - 76 p.
5. Stafford, V.V. gistologicheskaya diagnostika [Histological method of diagnosis]/ V.V.Stafford // "Innovative development of young scientist - the development of agriculture": Proceedings from the IV int. conf. - All Russ. Res. Institute of sheep and goat breeding. - Stavripol. - 2015. - Vol. 1, - Issue8. - P.523-526.
6. Strukov, A.I. patologicheskaya anatomiya: uchebnik [Pathological anatomy: a textbook] / A.I.Strukov, V.V.Serov. - Moscow: GAEOTAR - Media, 2014. - 880 p.
7. Simonyan, K.S. Peritonit: monografiya [Peritonitis: a manuscript] / K.S.Simonyan. - Moscow: Meditsina, 1991. - 296 p.
8. Kuzin, M.I. Hirurgicheskiye bolezni: uchebnik [Surgical diseases: a textbook]/M.I.Kuzin, O.S.Shkrob, N.M.Kuzin . -Moscow: Meditsina, 2005 - 784 p.
9. Dva sluchaya gidrofobii v Respublike Tatrstan: prizhiznennaya i postmortalnaya laboratornaya diagnostika [two cases of hydrophobia in Tatarstan: living and postmortal laboratory diagnosis] / N.A.Khismatullina [et al.] // J. Virology issues. - 2015. - Vol. 2. - P. 18-25
10. Schmidt, R. Human Physiology: in three volumes. Volume 2 / edited by R.F Schmidt and G. Thews. - second, completely revised edition; translated from English into Russian by N.N.Alipova [et al.]; edited by academician Kostyuk P.G. - third revised and added edition. - Moscow: Mir, 2007. - 314 p.
УДК636.4:612.35-092
ХАРАКТЕРИСТИКА МИКРОПАТОЛОГИИ ПЕЧЕНИ СВИНЕЙ И ЗАКОНОМЕРНОСТИ ЕЕ РЕГЕНЕРАЦИИ ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ ПРЕПАРАТА «ГЕПРИМ ДЛЯ СВИНЕЙ»
П.В.Бурков - кандидат ветеринарных наук, руководитель научно-исследовательского центра
биотехнологии и репродукции животных.
ФГБОУ ВПО «Южно-Уральский государственный аграрный университет», Россия, г.Троицк (457100, Челябинская область, г.Троицк, Гагарина, 13, e-mail: burcovpavel@mail.ru).
Незаразные заболевания свиней, в том числе патологии печени - гепатозы - способны нанести серьезный экономический ущерб промышленному свиноводству. Для повышения регенеративных свойств печени при ге-
56
НАУЧНО-ПРОИЗВОДСТВЕННЫЙ ЖУРНАЛ
№ 2/2016
патозах нами предложен препарат «Геприм для свиней», изготовленный на основе модифицированных цитоток-сических сывороток. Целью работы послужило изучение особенностей микроструктурного поражения печени у свиней при гепатозах и определение закономерностей её регенерации при применении «Геприм для свиней». Материалы и методы. Исследования проводили на базе ООО «Луговской свинокомплекс» на поросятах крупной белой породы в возрасте 2 мес. Из животных сформировали две группы (опытная и контрольная) по 25 голов в каждой. Особям опытной группы для профилактики гепатоза однократно подкожно вводили препарат «Геприм для свиней» в дозе 0,2 мл на 1 кг живой массы. Поросятам контрольной группы инъецировали аналогичное количество физиологического раствора. За всеми животными вели наблюдения в течение 4 мес. У животных, павших с диагнозом гепатоз, проводили гистологическое исследование печени с использованием различных методов окраски. При контрольном ежемесячном забое здоровых животных из опытной и контрольной групп, в печени при гистологическом исследовании проводили подсчет двуядерных гепатоцитов, а также измеряли площадь ядра, цитоплазмы и ядерно-плазменное отношение. Результаты исследований. В результате исследований установлено, что патология печени при гепатозах связана с явлениями дистрофии, некроза, хронического продуктивного воспаления и нарушения кровообращения. Механизм регенерации печени при использовании «Геприм для свиней» заключается в эффекте образования двуядерных гепатоцитов - их количество возрастало соответственно на 175%, 96,5%, 197% и 146% по сравнению с контролем в первый, второй, третий и четвертый месяцы наблюдения. В органе при регенерации также происходит гипертрофия клеток за счет увеличения площади ядра на 31%, 2%, 59% и 71% в сравнении с контролем и площади цитоплазмы на 219%, 162%, 338% и 402% к контролю. Ядерно-плазменное отношение, напротив, в опытной группе было ниже, чем в контрольной на 59%, 61%, 64% и 66%, соответственно. Заключение. Таким образом, микропатология печени свиней при гепатозах сопровождается дистрофически-воспалительными процессами с нарушениями кровообращения и последующим некрозом тканей. Механизм регенерации печени при использовании «Геприм для свиней» заключается в стимуляции полиплоидизации гепатоцитов и гипертрофии клеток.
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: печень, гепатоз, гепатопротекторы, регенерация печени, «Геприм для свиней».
В сложившихся экономических условиях решение вопросов продовольственной безопасности является первоочередной задачей, которую государство ставит перед агропромышленным комплексом. Важнейшим вызовом является увеличение объемов производства сельскохозяйственной продукции и, в первую очередь, мяса и мясопродуктов. Наиболее экономически выгодно в настоящее время производство свинины. Однако, незаразные заболевания, в том числе патологии печени - гепатозы, - способны нанести серьезный экономический ущерб, поскольку на данные заболевания приходится от 10-20% до трети всех незаразных патологий печени [1, 2, 3].
По данным многих исследователей, основными причинами поражения печени являются: скармливание недоброкачественных, прогорклых кормов, содержащих недоокисленные жиры, продукты гниения белка, токсины грибов; нарушение соотношения между белками и липидами; дефицит витаминов и аминокислот [4]. Исходя из объемов потребляемых кормов, очевидным становится тот факт, что избежать негативного воздействия тех или иных факторов на печень не представляется возможным, и остается лишь изыскание средств, смягчающих или препятствующих поражению органа. А поскольку патогенез поражения печени многообразен, необходимо использовать препараты, действующие на различные его звенья. К данным средствам относятся гепатопротекторы [5]. В связи с этим, изучение механизма их действия является актуальной задачей.
Гепатопротекторы являются современными эффективными средствами защиты печени. Однако,
механизм их действия зачастую заключается в воздействии на отдельные звенья патогенеза гепатозов, не затрагивая возможностей восстановления функций печени и регенерации органа [6].
Для повышения регенеративных свойств печени нами предложен препарат «Геприм для свиней», изготовленный на основе модифицированных цитотокси-ческих сывороток [7].
Целью работы послужило изучение особенностей микроструктурного поражения печени у свиней при гепатозах и определение закономерностей её регенерации при применении «Геприм для свиней».
Материалы и методы. Исследования проводили в ООО «Луговской свинокомплекс» Увельского района Челябинской области на поросятах крупной белой породы в возрасте 2 мес. Из животных сформировали две группы (опытная и контрольная) по 25 гол. в каждой. Особям опытной группы для профилактики гепатоза однократно подкожно вводили препарат «Геприм для свиней» в дозе 0,2 мл на 1 кг живой массы.
Поросятам контрольной группы инъецировали аналогичное количество физиологического раствора. За всеми животными вели наблюдения в течение 4 мес.
Трупы павших животных подвергали патологоана-томическому исследованию с обязательным гистологическим исследованием печени. Для этого кусочки размером 1 см3 фиксировали 10%-ным раствором формалина на протяжении 72 ч, затем заливали в парафин, изготавливали гистологические срезы и окрашивали их гематоксилином и эозином, Суданом III для обнаружения нейтральных жиров, Конго красным для обнаружения амилоида, а также по Ван Гизону для
изучения соединительной ткани. Срезы микроскопи-ровали, фотографировали с помощью микроскопа LeicaDMRXA и камеры LeicaDFC 290 при различных увеличениях. Для изучения микроструктурных механизмов регенерации печени, ежемесячно проводили убой 2 голов свиней из каждой группы для изучения особенностей регенерации печени путем гистологического и морфометрического исследования кусочков органа, окрашенных гематоксилином и эозином. Срезы микроскопировали при 400-х кратном увеличении, фотографировали с помощью микроскопа LeicaDMRXA и камеры LeicaDFC 290, проводили подсчет количества двуядерных гепатоцитов с помощью программы ImageScopeM, а также измерения гепатоцитов: площади ядра, цитоплазмы и ядерно-плазменного соотношения (ЯПО). Измерения и подсчеты проводили в 20 полях зрения. Статистическую достоверность определяли с помощью критерия Стьюдента (t), а долю влияния цитотоксинов «Геприм для свиней», как изучаемого фактора, с помощью однофакторного дисперсионного анализа MSExel.
Результаты исследований. За период наблюдений в контрольной группе пало 3 поросенка с диагнозом гепатоз, в опытной - 1 поросенок с диагнозом гастроэнтерит.
При гистологическом исследовании печени поросят контрольной группы установлено наличие в органе паретического венозного и капиллярного полнокровия с картиной эритростазов и сладжирования эритроцитов в центрах долек, дискомплексация балок из-за расширения перикапиллярных пространств. Во всех полях зрения - центролобулярные некрозы гепатоци-тов, по периферии долек - тяжелая белковая, крупно-и мелкокапельная жировая дистрофия гепатоцитов, протекающая по типу инфильтрации с последующим некрозом клеток и слиянием капель жира в общий бесформенный конгломерат. Стенки портальных трактов утолщены, несколько разрыхлены из-за умеренного отека. По ходу портальных трактов определяется густая нейтрофильно-лимфоцитарная инфильтрация с распространением нейтрофилов по перикапиллярным пространствам (рисунки 1, 2, 3).
Рис. 2. Эритростаз и сладжирование эритроцитов в центре печеночной дольки. Окраска гематоксилином и эозином 400 .
Рис. 3. Жировая дистрофия печени. Окраска Суданом 3х100.
В органе отмечается отложение патологического белка амилоида в строме печеночных долек по ходу синусоидных капилляров, в строме портальных трактов и стенок вен (рис. 4).
Рис. 1. Белковая и жировая дистрофия печени. Некроз в центре печеночной дольки. Окраска гематоксилином и эозином 200 .
Рис. 4. Отложение амилоида стенках кровеносных сосудов и печеночных балках. Окраска Конго красным х100.
При гистологическом исследовании в препаратах отмечается разрост коллагеновой соединительной ткани вокруг крупных кровеносных сосудов, в меж-дольковом пространстве. Отмечается тенденция к об-
НАУЧНО-ПРОИЗВОДСТВЕННЫИ ЖУРНАЛ
№ 2/2016
58
разованию ложных печеночных долек без кровеносных сосудов и желчных ходов (рис. 5).
Оценка эффективности препарата «Геприм для свиней» при регенерации гепатоцитов проведена посредством морфометрических исследований клеток печени.
Подсчет количества двуядерных клеток в гистологических срезах печени свиней отражено в таблице 1.
Рис. 5. Разроет соединительной ткани в печени. Окраска по Ван-Гизону х100.
Таблица 1
Количество двуядерных клеток в гистологических срезах печени (Х ±тх , п=20)
Опытная группа Контрольная группа
Первый месяц эксперимента
26,40±0,81*** 9,60+0,92
Второй месяц эксперимента
22,40+1,21*** 11,40+0,81
Третий месяц эксперимента
26,80+0,91*** 9,0+0,83
Четвертый месяц эксперимента
28,60+1,0*** 11,60+0,75
- р<0,001
Согласно данных таблицы 1 установлено, что количество двуядерных клеток в печени свиней опытной группы было достоверно выше (р<0,001), чем в контроле. Так, в первый месяц наблюдения разница составила 175%, во второй - 96,5%, третий - 197% и четвертый - 146%.
В результате дисперсионного анализа установлено, что препарат «Геприм для свиней» обладает достоверно высокой долей влияния на образование дву-ядерных гепатоцитов. В первый месяц эксперимента доля влияния составила 95%, второй - 87%, третий -96% и четвертый - 95%.
Таблица 2
Цитометрические исследования клеточных структур гепатоцитов (Х ±тх , п=20)
Ядра Цитоплазма ЯПО
опыт контроль опыт контроль опыт контроль
Первый месяц эксперимента
33,82+0,73*** 25,81+1,03 179,60+4,67*** 56,18+1,86 18,91+0,44*** 45,90+1,04
Второй месяц эксперимента
28,43+0,70 27,86+1,10 161,20+3,21*** 61,46+2,28 17,68+0,40*** 45,32+0,58
Третий месяц эксперимента
32,69+0,70*** 20,57+0,88 191,20+2,35*** 43,64+2,77 17,07+0,19*** 47,91+1,85
Четвертый месяц эксперимента
37,24+0,50*** 21,80+1,16 236,0+4,70*** 47,0+1,76 15,81+0,25*** 46,59+2,03
р<0,001.
ET ЕР ПИАРНЫЙ
Врач
Из данных таблицы 2 следует, что площадь ядра клеток печени у животных опытной группы была выше на протяжении всех месяцев наблюдения на 31%, 2%, 59% и 71%, соответственно. Причем в первый, третий и четвертые месяцы эта разница носила достоверный характер (р<0,001). Площадь цитоплазмы клеток на протяжении четырех месяцев исследований была достоверно (р<0,001) выше в опытной группе, чем в контрольной на 219%, 162%, 338% и 402%, соответственно. Ядерно-плазменное отношение, напротив, в опытной группе было ниже, чем в контрольной на 59%, 61%, 64% и 66%, соответственно.
Заключение. Гепатоз у свиней характеризуется тяжелыми дистрофическими изменениями тканей печени с сочетанием белковых и жировой дистро-
Литература
фий, явлениями воспаления и некроза паренхимы печени. В органе отмечается венозное полнокровие. Отдельные участки печени находятся в состоянии цирроза. Однако, ведущую роль в развитии гепато-за, по-нашему мнению, играет поражение гепато-цита. В связи с этим, для стимуляции регенерации клеток печени оправдано применение препарата «Геприм для свиней». Механизм действия препарата на основании наших исследований заключается как в стимуляции полиплоидизации гепатоцитов с образованием двуядерных клеток, так и в результате гипертрофии клеток печени. Оба эти процесса взаимосвязаны и отражают полную картину компенсаторных процессов в печени при использовании гепа-топротектора «Геприм для свиней».
1. Баумгэртнер, У. Обратите внимание на печень / У.Баумгэртнер // Свиноводство. - 2013. - № 5. - С. 51-53.
2. Данилевский, В.М. Профилактика болезней печени при откорме животных / В.М.Данилевский // Ветеринария. -1989. - № 11. - С. 21-24.
3. Гепатодистрофия поросят и ее профилактика / С.М.Сулейманов [и др.] // Ветеринарная патология. - 2005. -№ 3. - С. 118-124.
4. Харламов, В.К. Полифепан при гепатопатологии у норок / В.К.Харламов, Б.В.Уша // Ветеринария. - 2013. -№ 12. - С. 48-50.
5. Каркищеко, Н.Н. Клиническая и экологическая фармакология в терминах и понятиях / Н.Н.Каркищеко. -М.: IMP-медицина, 1995. - 304 с.
6. Гепатопротекторное действие биопрепаратов из обезжиренных лецитинов сои и подсолнечника / А.Л.Дроздов [и др.] // BIOTECHNOLOGIA ACTA. - 2014. - Vol. 7, № 1. - С. 123-130.
7. Пат. 2416430 Рос. Федерация, МПК А61 К39/395, А61 Р1/16. Средство для профилактики гепатоза у свиней / П.В.Бурков, П.Н.Щербаков, Т.Б.Щербакова; патентообладатель ФГОУ «Уральская государственная академия ветеринарной медицины». - № 2009145566/15; заявл. 08.12.2009; опубл. 20.04.2011, Бюл. № 11. - 10 с.
REGENERATION OF PIG LIVER MICROPATHOLOGY USING "GEPRIM FOR PIGS" DRUG
Burkov P.V. - Candidate of Veterinary Sciences.
South Ural State Agrarian University, Russia, Troitsk (e-mail: burcovpavel@mail.ru).
Pig non-contagious diseases including liver diseases such as hepatoses can cause serious economic damage to swine breeding industry. We propose "Geprim for pigs" drug based on modified cytotoxic sera to promote liver regeneration at heptoses. The aim of research was to study liver cell structure in pigs with hepatoses and define its regeneration laws at using "Geprim for pigs". Methods and materials: the research was carried out in "Lugovskoy pig farm" using Large White pigs at the age of 2 months. The animals were divided into two groups (the experimental and control) with 25 animal in each group. /4s prevention means the experimental animals were once introduced "Geprim for pigs" subcutaneously in a dose of 0.2 ml per 1kg of live weight. The piglets from the control group were injected with a similar amount of physiological saline solution. All of the animals were observed during 4 months. The animals which died from liver hepatoses were subjected to histological studies using different staining techniques. At control monthly slaughter of healthy animals both from the experimental and control groups the liver was sampled for histological studies counting binucleate hepatocytes and measuring the area of nucleus, cytoplasm and nucleus-plasma ratio. The results: the carried out studies showed that liver disease at heptoses is accompanied by degeneration, necrosis, chronic productive inflammation, and circulatory disorders. The mechanism of liver regeneration at using "Geprim for pigs" is the formation of binucleate hepatocytes - their number increased for 175%, 96.5%, 197% and 146% compared with the control during the first, second, third and fourth months of observation accordingly. During liver regeneration, cellular
60
НАУЧНО-ПРОИЗВОДСТВЕННЫЙ ЖУРНАЛ
№ 2/2016
hypertrophy at the account of increased nuclear area for 31%, 2%, 59%, and 71% compared to that of the controls and cytoplasm area larger for 219%, 162%, 338% and 402% than in the controls was registered. The nuclear plasma ratio, in contrast, was lower in the experimental group than in the control by 59%, 61%, 64% and 66% accordingly. Conclusion: the refore, liver cellular pathology in swine affected with hepatoses is accompanied by degenerative and inflammatory processes with circulation disorders and subsequent tissue necrosis. "Geprim for pigs" regenerates liver cellular structure by promoting polyploidization of hepatocytes and cell hypertrophy.
KEYWORDS: liver, hepatosis, hepatoprotectors, liver regeneration, "Geprim for pigs".
References
1. Baumgertner, U. Obratite vnimanie na pechen [Pay attention to the liver]// Svinovodstvo. - 2013. - Vol. 5. - P. 51.
2. Danilevskiy, V.M. Profilaktika bolezney pecheni pri otkorme zhivotnyh [Prevention of liver disease at animal fattening]/ Veterinariya. - 1989. - Vol. 11. - P. 21-24.
3. Gepatodistrofiya porosyat i yeyo profilaktika [Liver dystrophy in pigs and its prevention]/ S.M. Suleymanov [et al.] // Veterinarnaya patologiya. - 2005. - Vol. 3. - P. 118-124.
4. Harlamov, V.K., Usha B.V. Polifepan pri gepatopatologii u norok [Using Polyfepan drug at liver pathology in minks] / V.K. Harlamov, B.V. Usha // Veterinariya. - 2013. - Vol. 12. - P. 48-50.
5. Karkishcheko, N.N. Klinicheskaya i ekologicheskaya farmakologiya v terminah i ponyatiyah [Clinical and environmental pharmacology terms and notions] / N.N. Karkishcheko. - Moscow: IMP-meditsina, 1995. - 304 p.
6. Gepatoprotektornoe deistvie biopreparatov iz obezzhirennyh letsitinov soi i podsolnechnika [Hepatoprotective effect of biological drugs from defatted soy lecithin and sunflower]/ A.L. drozdov [et al.] // BIOTECHNOLOGIA ACTA. - 2014. - Vol. 7 (1). - P. 123-130.
7. Patent 2416430 the Russian Federation, IPC A61 K39/395, A61 P1/16. Sredstvo dlya profilaktiki gepatoza u sviney [prevention means against swine hepatoses] / P.V. Burkov, P.N. Scherbakov, T.B. Scherbakova; patent owner: "Ural state academy of veterinary medicine". - № 2009145566/15; applied on 08.12.2009; published on 20.04.201 1, Bulletin № 11. - 10 p.
