CC BY
44
I
Орипнальы досл1дження
Original Researches
Травма
УДК 616.71-089.843/.844-003.93-092.4:66/67
ЛУЗИН В.И., ПЕТРОСЯНЦ С.В., ГРЕК О.А., БЕРЕЖНОЙ Е.П., АСТРАХАНЦЕВ Д.А. ГУ «Луганский государственный медицинский университет»
ХАРАКТЕРИСТИКА БИОЛОГИЧЕСКОЙ ДЕГРАДАЦИИ КЕРАМИЧЕСКОГО ГИДРОКСИАПАТИТА, ИМПЛАНТИРОВАННОГО В КОСТНЫЙ ДЕФЕКТ, ПО ДАННЫМ РЕНТГЕНОСТРУКТУРНОГО АНАЛИЗА
Резюме. В эксперименте на 72 белых крысах с исходной массой 130-150 г методом рентгеноструктурного анализа исследовали кристаллическую структуру регенерата при имплантации в костный дефект в зоне проксимального метафиза большеберцовой кости керамического гидроксиапатита с размером частиц менее 63 мкм.
Установили, что в керамическом гидроксиапатите размеры кристаллитов были меньше, чем в интактной кости, на 11,19-12,78 %, а коэффициентмикротекстурирования, наоборот, был больше на 18,11-21,13 % при неизменных параметрах элементарных ячеек гидроксиапатита.
В группе животных, которым заполнение дефекта не проводилось, в период с 15-го по 30-й день размеры элементарных ячеек вдоль оси с и соотношение с/а превосходили таковые показатели группы интактных животных на 60-й и 90-й день. Размеры кристаллитов в группе незаполненного дефекта в течение всего периода исследования были меньше, чем аналогичные показатели в группе интактных крыс, на 2,08-9,14 %. При имплантации керамического гидроксиапатита в зону дефекта было выявлено увеличение параметров с, а и с/а, что свидетельствует о дестабилизации элементарных ячеек гидроксиапатита костного регенерата и является следствием его биологического преобразования.
В результате биодеградации кристаллиты керамического гидроксиапатита становятся более рыхлыми, увеличиваются в размерах и, вероятно, создают препятствие для формирования однородной кристаллической решетки костного минерала, который образуется.
Ключевые слова: кость, репаративная регенерация, гидроксиапатит, рентгеноструктурный анализ.
Введение
С целью замещения костных дефектов, которые образуются в результате оперативного лечения доброкачественных опухолей, опухолеподобных и диспла-стических заболеваний, в настоящее время широко используется гидроксиапатитная (ГАП) керамика [5, 6]. Между поверхностью керамического имплантата и окружающими тканями происходит активное взаимодействие, в результате которого имплантат подвергается биологической резорбции с формированием костной ткани [2—4]. Однако несмотря на то, что ГАП материалы близки по химическому составу минеральному веществу костной ткани, они обладают только остеокондуктивными свойствами [17].
В литературе имеется множество сведений, характеризующих биологическую деградацию ГАП керамики методами рентгенологического, гистологического, гистоморфометрического исследований как в эксперименте, так и в целом ряде клинических наблюдений [13]. Однако сведения о динамических изменениях ультраструктуры комбинированного костно-керами-
ческого регенерата, а также о его кристаллографических характеристиках в литературе практически отсутствуют.
Поэтому целью нашего исследования было экспериментальное изучение особенностей процессов репа-ративной регенерации костной ткани при имплантации в область дефекта ГАП керамики в виде порошка с размером частиц менее 63 мкм методом рентгено-структурного анализа.
Материал и методы исследования
Экспериментальные исследования проведены на 72 белых крысах-самцах с исходной массой тела 130—150 г.
Все животные были разделены на три группы: первая (К-1) — интактные животные, вторая (К-2) — животные, которым были сформированы костные дефек-
© Лузин В.И., Петросянц С.В., Грек О.А., Бережной Е.П.,
Астраханцев Д.А. , 2014 © «Травма», 2014 © Заславский А.Ю., 2014
ты в проксимальном метафизе обеих большеберцовых костей (диаметр дефекта равен 2,2 мм, а глубина — 3,0 мм), в третьей группе (А) дефект заполняли порошкообразной ГАП керамикой с размером частиц менее 63 мкм (производства НПП «Кергап», Украина).
Оперативные вмешательства выполнялись под эфирным наркозом. После заполнения сформированного костного дефекта пластическими материалами соответственно группам исследования раны ушивали послойно лавсановыми нитями.
По истечении сроков эксперимента животных де-капитировали под эфирным наркозом и забирали для исследования большеберцовые кости. Рентгенострук-турное исследование костного порошка, полученного в агатовой ступке из сегмента кости в области нанесенного дефекта, проводили на аппарате ДРОН-2,0 с гониометрической приставкой ГУР-5. Использовали Ка-излучение кобальта с длиной волны 0,179 нМ; напряжение и сила анодного тока составляли соответственно 30 кВ и 20 А. Дифрагированные рентгеновские лучи регистрировали в угловом диапазоне от 2° до 37° со скоростью записи 1° в 1 мин. На полученных дифрактограммах исследовали наиболее выраженные дифракционные пики, по угловому положению которых рассчитывали межплоскостные расстояния и параметры элементарной ячейки костного гидрок-сиапатита [10, 12]. Кроме этого, определяли размеры блоков когерентного рассеивания по уравнению Селякова — Шеррера и рассчитывали коэффициент микротекстурирования по методу соотношения рефлексов [1, 10].
Полученные цифровые данные обрабатывались методами вариационной статистики с использованием пакета программ Statistica 5.11 для Windows.
Результаты и их обсуждение
Для того чтобы иметь возможность объективно оценивать изменения имплантата, на начальных этапах представленного сложной комбинацией синтетического и биологического минералов, рентгенострук-турному анализу в первую очередь были подвергнуты образцы керамического ГАП, не имплантированные в зону дефекта (табл. 1).
По данным рентгеноструктурного анализа, размеры элементарной ячейки синтетического гидрок-сиапатита (производства НПП «Кергап», Украина) вдоль осей с и а составили 6,883 ± 0,002 (х 10-10 М) и 9,414 ± 0,002 (х 10-10 М) соответственно, а коэффициент с/а — 73,097 ± 0,280 усл.ед.
Размер блоков когерентного рассеивания был равен 44,68 ± 1,13 нМ, а коэффициент микротекстурирова-ния, рассчитанный по методу соотношения рефлексов [12], составил при этом 0,497 ± 0,009 усл.ед. (табл. 2).
У интактных животных (группа К-1) размер элементарной ячейки костного ГАП вдоль оси с в динамике с 15-го по 90-й день наблюдения варьировал в пределах от 6,886 ± 0,007 (х 10-10 М) до 6,900 ± 0,003 (х 10-10 М). Размеры элементарной ячейки вдоль оси а за весь исследуемый период также колебались в пределах от 9,418 ± 0,004 (х 10-10 М) до 9,424 ± 0,001 (х 10-10 М) (табл. 1).
Коэффициент с/а, характеризующий степень симметрии элементарной ячейки костного ГАП, также достоверно не изменялся и составлял в ходе наблюдения 73,120-73,208 усл.ед.
Размеры кристаллитов и коэффициент микротек-стурирования костного ГАП в данной группе также колебались в пределах от 50,39 ± 0,64 нМ до 51,0 ± 0,59 нМ и от 0,392 ± 0,009 усл.ед. до 0,407 ± 0,019 усл.ед. соответственно (табл. 2), что является свидетельством стабильно-
Группа животных Срок, дни Размер элементарной ячейки вдоль оси с, 10-10 М Размер элементарной ячейки вдоль оси а, 10-10 М Коэффициент с/а, 102
ГАП керамика 6,883 ± 0,002 9,414 ± 0,002 73,097 ± 0,280
К-1 15 6,886 ± 0,007 9,418 ± 0,004 73,120 ± 0,055
30 6,893 ± 0,006 9,421 ± 0,003 73,153 ± 0,047
60 6,895 ± 0,007 9,422 ± 0,004 73,175 ± 0,052
90 6,900 ± 0,003 9,424 ± 0,001 73,208 ± 0,034
К-2 15 6,891 ± 0,006 9,418 ± 0,003 73,168 ± 0,048
30 6,898 ± 0,004 9,423 ± 0,002 73,207 ± 0,040
60 6,888 ± 0,003 9,423 ± 0,002 73,100 ± 0,016
90 6,891 ± 0,001* 9,422 ± 0,002 73,147 ± 0,019
А 15 6,900 ± 0,003 9,423 ± 0,002 73,223 ± 0,041
30 6,894 ± 0,005 9,425 ± 0,004 73,210 ± 0,028
60 6,901 ± 0,006 9,429 ± 0,004 73,213 ± 0,026**
90 6,920 ± 0,002* ** 9,451 ± 0,008* ** 73,223 ± 0,042
Примечания: * — достоверное различие с группой К-1, р < 0,05; ** —достоверное различие с группой К-2, р < 0,05.
Таблица 1. Показатели размеров элементарной ячейки вдоль осей с и а гидроксиапатита костного регенерата, M ± m
сти процессов костеобразования и формирования костного минерала у белых крыс репродуктивного возраста [9].
Следует отметить, что при сравнении с исходным материалом для замещения (керамический ГАП) в физиологически нормальной кости размеры блоков когерентного рассеивания были значительно больше — на 11,19—12,78 %, а коэффициент микротекстурирования, напротив, был меньше на 18,11—21,13 %. При этом параметры элементарной ячейки как керамического, так и костного ГАП достоверно друг от друга не отличались.
Это свидетельствует о том, что вследствие постоянно и одновременно происходящих процессов резорбции и минерализации костный минерал находится в более аморфном состоянии, нежели керамический [15].
В группе К-2, в которой пластику сформированного дырчатого дефекта не производили, к 15-му и 30-му дням наблюдения размеры элементарной ячейки ГАП вдоль оси с и соотношение с/а незначительно (на 0,07—0,08 %) превосходили аналогичные показатели в образцах группы К-1, что является признаком нарушения симметрии и дестабилизации кристаллической решетки [1, 10]. К 60-м и 90-м сут. эти же показатели были малодостоверно ниже контрольных на 0,09—0,13 %, что свидетельствует об интенсивных процессах нуклеации и роста элементарных ячеек вновь образованного ГАП [14]. Размеры элементарной ячейки вдоль оси а в ходе наблюдения не изменялись.
Необходимо отметить, что, хотя параметры элементарной ячейки ГАП весьма часто статистически достоверно отличались от контрольных, амплитуда отклонений составляла, как правило, не более 0,3—0,4 %. Это объясняется тем, что параметры элементарной ячейки из всех кристаллографических показателей являются наиболее стабильными и их величина определяет тип минерала [11]. Статистическая достоверность различий проявлялась за счет достаточно высокой точности измерений и значительного количества наблюдений.
Рисунок 1. Динамика изменения размеров кристаллитов и коэффициента микротекстурирования минерального компонента регенерата в группе К-2 в зависимости от длительности эксперимента (в % по отношению к интактным животным)
Размеры кристаллитов в группе К-2 в течение всего исследуемого периода были меньше, чем аналогичные показатели в группе К-1, на 9,14; 7,13 и 5,20 % в период с 15-го по 60-й день эксперимента (рис. 1). Это свидетельствует об интенсивных процессах роста кристаллов вновь образованного костного минерала и о его большой обменной поверхности [9, 15].
Коэффициент микротекстурирования минерального компонента формирующегося регенерата кости в группе К-2 во все сроки наблюдения достоверно (р < 0,05) превышал аналогичный показатель в группе интактных крыс на 3,19—19,94 % (рис. 1). В период с 15-го по 30-й день наблюдения это связано с интенсивно текущими процессами формирования грубоволокнистой костной ткани с высокой степенью упорядоченности кристаллической решетки костного минерала [15].
Таким образом, в течение первого месяца после нанесения дефекта динамика изменений кристаллографических
Таблица 2. Показатели размера блоков когерентного рассеивания и коэффициента микротекстурирования гидроксиапатита костного регенерата, M ± m
Группа животных Срок, дни Размер блоков когерентного рассеивания,нМ Коэффициент микротекстурирования, усл.ед.
ГАП керамика 44,68 ± 1,13 0,497 ± 0,009
К-1 15 51,00 ± 0,59 0,407 ± 0,019
30 50,78 ± 0,61 0,396 ± 0,017
60 50,39 ± 0,64 0,406 ± 0,015
90 50,52 ± 0,69 0,392 ± 0,009
К-2 15 46,34 ± 0,98* 0,420 ± 0,023
30 47,16 ± 0,87* 0,475 ± 0,003*
60 47,77 ± 0,85* 0,467 ± 0,006*
90 49,47 ± 0,79 0,466 ± 0,002*
А 15 57,11 ± 1,06*, ** 0,393 ± 0,014
30 53,68 ± 0,74*, ** 0,374 ± 0,009**
60 53,88 ± 0,53* ** 0,366 ± 0,018**
90 55,02 ± 0,60* *** 0,393 ± 0,003**
Примечания: * — достоверное различие с группой К-1, р < 0,05; ** — достоверное различие с группой К-2, р < 0,05.
показателей свидетельствует о дестабилизации костного ГАП. В дальнейшем увеличивается объемная поверхность вновь образованного ГАП, возрастает степень упорядоченности его кристаллической решетки, что является проявлением интенсивно протекающих процессов минерализации костного регенерата и роста кристаллов [15].
При сравнении размеров элементарных ячеек вдоль осей с и а и отношения с/а в образцах группы А с данными контрольной группы К-2 выявлено, что к 15-му дню они превышали показатели контрольной группы на 0,05-0,13 %, что, вероятно, связано с интенсивно развивающейся в этот период биодеградацией ГАП [8].
К 30-му дню показатели с, а и с/а уже не отличались от контрольных, что, вероятно, свидетельствует о завершении биодеградации ГАП на ультраструктурном уровне (в эти же сроки при визуальной оценке при исследовании методом светооптической микроскопии гранулы ГАП выражены еще очень хорошо) [7].
В дальнейшем тенденция к увеличению параметров элементарной ячейки ГАП появляется вновь: к 60-му дню показатели с, а и с/а малодостоверно превосходили контрольные значения. В дальнейшем параметры с, а и с/а продолжали увеличиваться и к 90-му дню превышали контрольные значения уже на 0,42 % (р < 0,05), 0,31 % (р < 0,05) и 0,10 % соответственно.
Увеличение данных показателей свидетельствует о дестабилизации элементарных ячеек ГАП и является следствием интенсивно текущих процессов перестройки вновь сформированного костно-керамического регенерата [14].
Необходимо подчеркнуть, что КЕРГАП-М, не внедренный в зону дефекта, имеет несколько меньшие значения параметров с, а и с/а. Увеличение параметров с, а и с/а при внедрении КЕРГАП-М в зону дефекта свидетельствует о дестабилизации его элементарных ячеек и является следствием его биологического преобразования [15].
Исследование размеров блоков когерентного рассеивания (то есть конгломератов элементарных ячеек или кристаллитов) показало, что при внедрении в зону дефекта керамического ГАП (группа А) они были больше контрольных (К-2) во все установленные сроки эксперимента соответственно на 23,24; 13,83; 12,79 и 11,22 % (р < 0,05 во всех случаях). Это свидетельствует об увеличении степени общей аморфности костно-керами-ческого регенерата и уменьшении общей обменной поверхности формирующейся минеральной фазы [8].
Оценка однородности расположения кристаллов ГАП в кристаллической решетке по коэффициенту микротекстурирования в группе А показала, что во все установленные сроки он был меньше контрольного на 6,43; 21,26; 21,63 и 15,67 % соответственно.
Вероятно, вследствие того, что при биодеградации кристаллиты КЕРГАП-М становятся более аморфными и увеличиваются в размерах [16], они создают препятствия для формирования однородной кристаллической решетки образующегося костного минерала.
Выводы
1. У интактных животных все исследуемые кристаллографические показатели в ходе наблюдения не из-
меняются, что является свидетельством стабильности процессов костеобразования и формирования костного минерала у белых крыс репродуктивного возраста.
2. При сравнении с керамическим гидроксиапа-титом в физиологически нормальной кости размеры кристаллитов были значительно больше, а коэффициент микротекстурирования, напротив, понижался. Это свидетельствует о том, что вследствие одновременно происходящих процессов резорбции и кристаллизации костный минерал находится в более аморфном состоянии, нежели керамический.
3. Динамика кристаллографических показателей в течение первого месяца после нанесения дырчатого дефекта свидетельствует о дестабилизации костного гидроксиапатита, что является следствием резорбции разрушенной костной ткани. В дальнейшем объемная поверхность вновь образованного ГАП и степень упорядоченности его кристаллической решетки возрастают, что является проявлением интенсивно протекающих процессов минерализации костного регенерата и роста кристаллов.
4. Внедрение керамического порошкообразного ги-дроксиапатита в зону костного дефекта сопровождается увеличением размеров его элементарных ячеек, блоков когерентного рассеивания и снижением коэффициента микротекстурирования. Это свидетельствует о возрастании степени аморфности керамического гидроксиапа-тита вследствие его биологической резорбции.
5. Увеличение в размерах кристаллитов керамического гидроксиапатита создает препятствия для формирования однородной кристаллической решетки образующегося костного минерала.
Список литературы
1. Азаров Л.В. Метод порошка в рентгенографии / Азаров Л.В., Бургер М.Й. — М.: Изд-во иностранной литературы, 1961. — 363 с.
2. Пдроксиапатит та його використання в медициш / Н.В. Ульянчич, В.В. Поворознюк, О.О. Евтушенко [и др.]// Проблеми остеолог«. — 1999. — Т. 2, №4. — С. 71-74.
3. Грунтовский Т.Х. Гидроксилапатитная керамика. Особенности взаимодействия с костной тканью / Г.Х. Грунтовский, С. В. Малышкина // Труды Крымского государственного медицинского университета им. С.И. Георгиевского. — Симферополь: Сонат, 1999. — Т. 135, ч. 2. — С. 127-129.
4. Експериментально-морфологiчне обгрунтування за-стосування пористоi керамши при реконструктивно-вiдновних операщях на етметаф1зах / В.1. Бондарчук, В.А. Попов, А. Т. Бруско [и др.] // Проблеми остеологП. — 2000. — Т. 3, № 2-3. — С. 17-22.
5. Керамiчний гiдроксиапатит — новий iмплантат для замщення дефектiв шсток у дтей / А.П. Крись-Пугач, В.А. Дубок, Р. В. Лучко [и др.] // Труды Крымского государственного медицинского университета им. С.И. Георгиевского. — Симферополь: Сонат, 1999. — Т. 135, ч. 2. — С. 133-134.
6. Крись-Пугач А.П. Шсткова пластика керамiчним гiд-роксиапатитом в дитячш та тдлтковш ортопеда/
А.П. Крись-Пугач, Р.В. Лучко // Лтопис травматологи та ортопеда. — 1999. — Т. 2. — С. 60-63.
7. Лузин В.И. Гистоморфометрическое исследование регенерации костной ткани при имплантации порошкообразной гидроксилапатитной керамики в сочетании с деминерализованным костным матриксом/В.И. Лузин, В.В. Головченко, Е.П. Бережной // Украшський медичний альманах. — 2001. — № 5. — С. 81-84.
8. Лузин В.И. Рентгеноструктурное исследование процессов репаративной регенерации большеберцовой кости крыс в условиях облучения электромагнитными волнами крайне высокой частоты / В.И. Лузин // Ортопедия, травматология и протезирование. — 2000. — № 2. — С. 120-122.
9. Лузин В.И. Ультраструктура минерального компонента кости у белых крыс различного возраста при низкоинтенсивном микроволновом облучении / В.И. Лузин // Украшський медичний альманах. — 1999. — Т. 2, № 4. — С. 95-97.
10. Миркин Л.И. Рентгеноструктурный анализ. Индици-рование рентгенограмм (Справочное руководство). — М.: Наука, 1981. — 496с.
11. Михеев В.И. Рентгенометрический определитель минералов / В.И. Михеев. — М.: Госгеолтехиздат, 1957. — 868 с.
Лузн В.1., Петросянц С.В., Грек О.О., Бережний £.П., Астраханцев Д.А.
ДЗ «Луганський державний медичний ун'терситет»
ХАРАКТЕРИСТИКА БЮЛОПЧНО1' ДЕГРАДАЦП KEPAMi4HOrO ПДРОКаАПАТИТУ, iМПЛАНТОВАНОГО В КЮТКОВИЙ ДЕФЕКТ, ЗА ДАНИМИ РЕНТГЕНОСТРУКТУРНОГО АНАЛiЗУ
Резюме. В експеримени на 72 бших щурах i3 початковою масою 130—150 г методом рентгеноструктурного ан^зу досль джували кристдачну структуру регенерату при шплантацН до исткового дефекту в зон проксимального метафiзу великого-мшково'! истки керамiчного гщрокаапатиту з розмiром часток менше за 63 мкм.
Встановили, що в керамiчному пдроксмлатии розмiри крис-талтв були менш, шж в штактнш юстщ, на 11,19—12,78 %, а коефщент мжротекстурування, навпаки, був бшьше на 18,11— 21,13 % при незмшних параметрах елементарних комiрок гзд-роксiапатиту.
У грут тварин, яким заповнення дефекту не проводилося, в перiод з 15-го по 30-й день розмiри елементарних комiрок уздовж осi с i спiввiIдношення с/а перевершували такi показни-ки групи iнтактних тварин на 60-й i 90-й день. Розмiри криста-лiтiв у групi з незаповненим дефектом протягом усього перюду дослщження були меншими, нiж аналопчт показники в групi iнтактних тварин, на 2,08—9,14 %.
При шплантацН керамiчного гщрокаапатигу в зону дефекту було виявлено збiльшення параметрiв с, а i с/а, що свщчить про дестабшзащю елементарних комiрок пдрокаапатиту юстково-го регенерату i е наслщком його бiологiчного перетворення.
Внаслщок бiодеградацïï кристалити керамiчного ддрокиапа-титу стають бшьш пухкими, збшьшуються в розмiрах i, ймовiр-но, створюють перешкоду для формування однорiдноï криста-лiчноï решiтки кiсткового мшералу, що утворюеться.
Ключовi слова: кiстка, репаративна регенерацы, гщроксь апатит, рентгеноструктурний анатз.
12. Пономарев В.В. Рентгеноструктурные методы исследования в инженерной геологии/Пономарев В.В. — М.: Недра, 1981. — 194 с.
13. Biodégradation behavior of various calcium phosphate materials in bone tissue / C.P. Klein, A.A. Driessen, K. de Groot [et al.] // J. Biomed. Mater. Res. — 1983. — Vol. 17, № 5. — P. 769-784.
14. Boskey A.L. Amorphous calcium phosphate: the contention of bone / A.L. Boskey // J. Dent. Res. — 1997. — Vol. 76(8). — P. 1433-1436.
15. Diffuse X-ray scattering from apatite crystals and its relation to amorphous bone mineral / T. Aoba, Y. Moriwaki, Y. Doi [et al.] // J. Osaka Univ. Dent. Sch. — 1980. — Vol. 20. — P. 81-90.
16. Ducheyne P. The effect of calcium-phosphate ceramic composition and structure on in vitro behavior. I. Dissolution / P. Ducheyne, S. Radin, L. King// J. Biomed. Mater. Res. — 1993. — Vol. 27, № 1. — P. 25-34.
17. Properties of calcium phosphate ceramics in relation to their in vivo behavior / Blokhuis T.J., Termaat M.F., den Boer F.C. [et al.] // The Journal of Trauma. — 2000. — Vol. 48, № 1. — P. 179-186.
Получено 22.04.14 ■
Luzin V.I., PetrosyantsS.V., GrekO.A., Berezhnoy Ye.P., Astrakhantsev D.A.
State Institution «Lugansk State Medical University», Lugansk, Ukraine
FEATURES OF BIOLOGICAL DEGRADATION OF CERAMIC HYDROXYAPATITE IMPLANTED INTO THE BONE DEFECT, ACCORDING TO X-RAY DIFFRACTION ANALYSIS
Summary. In experiment involved 72 white rats with initial weight of 130—150 g, using X-ray diffraction analysis, we examined crystal structure of the regenerate after implantation of ceramic hydroxy-apatite with a particle size less than 63 microns into the bone defect in the area of proximal tibial metaphysis.
It is found that in the ceramic hydroxyapatite crystallite sizes were smaller than in the intact bone by 11.19—12.78 %, and the micro-texturing coefficient, in contrast, was higher by 18.11—21.13 % at constant parameters of the unit cells of hydroxyapatite.
In the group of animals in which we didn't fill the defect, in the period from the 15 th to the 30 th day sizes of unit cells along the c axis and c/a ratio were higher than those in group of intact animals on the 60th and 90th day. The crystallite sizes in the group of unfilled defect within the whole study period were less than those in the group of intact rats by 2.08-9.14 %.
When implanting ceramic hydroxyapatite in the defect area we detected the increase of c, a and c/a parameters, which indicates the destabilization of the unit cells of hydroxyapatite of the bone regenerate and is a consequence of its biological conversion.
As a result of biodegradation, ceramic hydroxyapatite crystallites became more friable, are increased in size and would probably constitute an obstacle for the formation of uniform crystal lattice ofbone mineral which is formed.
Key words: bone, reparative regeneration, hydroxyapatite, X-ray diffraction analysis.
