CC BY
44
ОБЗОРЫ ЛИТЕРАТУРЫ Х-ХРОМОСОМНЫЕ РАКОВО-ТЕСТИКУЛЯРНЫЕ ГЕНЫ... 1 3
ОБЗОРЫ ЛИТЕРАТУРЫ
УДК 577.21.08+615.37+576.316
В.А. Мисюрин
Х-ХРОМОСОМНЫЕ РАКОВО-ТЕСТИКУЛЯРНЫЕ ГЕНЫ
ФГБУ «РОНЦим. H.H. Блохина», Москва
Контактная информация
Мисюрин Всеволод Андреевич, младший научный сотрудник лаборатории экспериментальной химиотерапии НИИ ЭДиТО
адрес: 115478, Москва, Каширское ш., 24; тел. +7(985)436-30-19 e-mail: vsevolod.misvurin@gmail.com
Статья поступила 02.04.2014, принята к печати 16.04.2014.
Резюме
В отличие от генов "домашнего хозяйства", активность раково-тестикулярных генов наблюдается только в клетках герминогенных тканей. В норме их экспрессия не характерна для соматических клеток здорового человека. При этом в ряде онкологических заболеваний наблюдается спонтанная активация экспрессии раково-тестикулярных генов. Существование таких маркеров делает возможным развитие специфической терапии, в частности, иммунотерапии. Кроме того, данные маркеры можно использовать и для диагностики минимальной остаточной болезни или для подтверждения достигнутой ремиссии. Кодируемые этими генами белковые продукты, так называемые раково-тестикулярные антигены, очень иммуногенны. Функции этих белков остаются в целом неизвестными. Предполагается, что особенности, которыми отличаются раково-тестикулярные гены, кодируемые Х-хромосомой, позволят в будущем разработать уникальные методы специфической терапии онкологических заболеваний. Задел для этого уже существует. Известно, что у онкологических больных в крови могут циркулировать антитела, распознающие эпитопы белков, кодируемых Х-хромосомными раково-тестикулярными генами. Аллогенная трансплантация костного мозга может сопровождаться иммунной реакцией типа "трансплантат-против-опухоли". Считается, что экспрессия опухолевой клеткой Х-хромосомных раково-тестикулярных генов в значительной степени усиливает эту реакцию. Апробированы и другие способы терапии, основанной на белковых продуктах, кодируемых данными генами. Это могут быть дендритноклеточные вакцины, а также применение пептидных вакцин. Возможна и иммуномодуляция, при которой происходит активация экспрессии Х-хромосомных раково-тестикулярных генов в антиген-презентирующей клетке. Таким образом, особенности Х-хромосомных раково-тестикулярных генов позволяют применять их в целях создания новых противоопухолевых препаратов.
Ключевые слова: раково-тестикулярные гены, иммунотерапия, экспрессия генов, Х-хромосома.
V.A. Misyurin
X-CHROMOSOMAL CANCER-TESTIS GENES
FSBI «N.N. Blokhin RCRC», Moscow
Abstract
In contrast to housekeeping "gene family", cancer-testis genes activity is observed only in the germ cells. Their expression is not typical for normal somatic cells of a healthy person. However, a spontaneous activation of cancer-testis genes expression is observed in some cancers. The existence of such markers makes possible to develop specific therapy, including immunotherapy. Furthermore, these markers can be used for diagnostics of minimal residual disease or for confirmation achieving complete remission. Proteins, which are encoded by these genes, so called cancer-testis antigens, have a very immunogenic properties. Functions of these proteins remain to be largely unknown. It is assumed that the features that distinguish cancer-testis genes encoded by the X-chromosome, will allow to develop unique methods of specific anticancer therapy in the nearest future. Groundwork for this already exists now. It is known that in peripheral blood of patients with cancer may circulate antibodies that which recognize epitopes of the proteins encoded by X-chromosomal cancer-testis genes. Allogeneic bone marrow transplantation may be accompanied by a specific immune response such as "graft-versus-tumor". It is believed that the expression by tumor cell X-chromosomal cancer-testis genes greatly enhances this reaction. A lot of new methods of therapy based on the protein, encoded by these genes, have been approbated. For example, it can be peptid-based and dendritic cell-based vaccine. Expression of X-chromosomal cancer-testis genes can be activated in antigen-presenting cells. Thus, the features of X-chromosomal cancer-testis genes allow us to apply them in order to create new anticancer drugs.
Key words: cancer-testis genes, immunotherapy, gene expression, X-chromosome.
Введение
Онкологические заболевания широко распространены во всём мире. Так, в США и странах Западной и Центральной Европы главной причиной
смерти являются именно эти заболевания [27]. В РФ основной причиной смертности среди взрослого населения (около половины от всех случаев) является патология сердечно-сосудистой системы. Онкологические заболевания приводят приблизительно к
№ 2/том 13/2014
РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ
ОБЗОРЫ ЛИТЕРАТУРЫ
Х-ХРОМОСОМНЫЕ РАКОВО-ТЕСТИКУЛЯРНЫЕ ГЕНЫ...
45% летальных исходов, и этот показатель со временем увеличивается [5]. В связи с этим растёт актуальность проблемы терапии заболеваний, в основе которых лежит неопластическая трансформация.
Значительную роль в развитии подходов противоопухолевой терапии играет определение новых молекулярных маркеров, характерных для опухолевой клетки. Существование таких маркеров делает возможным развитие специфической терапии, в частности, иммунотерапии [3]. Имея знания о биологии неопластической клетки и маркерах, экспресси-руемых ею, можно выявлять закономерности, которые позволят определить возможные клинические особенности заболевания. Кроме того, данные маркеры можно использовать и для экспериментальной диагностики [2].
РТА, кодируемые РТГ - это группа белков, которые не экспрессируются в здоровых тканях взрослого человека, за исключением семенников. В то же время, при рассмотрении различных типов онкологических заболеваний часто наблюдается экспрессия некоторых РТА [58].
Целью данного обзора является освещение известных свойств РТГ, которые делают их перспективными мишенями для приложения иммуно-терапевтических методов при терапии онкогемато-логических заболеваний.
Основные характеристики РТГ
Исследования, начатые не так давно, показали, что при своём развитии герминогенные клетки экспрессируют большое количество генов. Для многих из этих генов описаны свойства, характерные для онко-, или протоонкогенов, которые не активны, или же экспрессируются на очень низком уровне в немалигнизированных клетках [18; 20].
Здоровые семенные железы, как известно, не являются раковым образованием. К тому же, герминогенные клетки, проходящие конкретные стадии своего развития при сперматогенезе, экспрессируют эти гены в течение короткого времени, меняя общий профиль экспрессии от стадии к стадии. Таким образом, экспрессия раково-тестикулярных генов в герминогенных клетках является нормальным процессом, и этот процесс подчинён жёсткому контролю. Более того, некоторые временно экс-прессирующиеся белки имеют очень важные функции в сперматогенезе. Кроме того, они отвечают за слияние гамет [17].
Важной чертой, отличающей герминогенные ткани от соматических, является их расположение внутри иммунопривилегированной зоны, изолированной от взаимодействия с клетками иммунной системы [43]. Семенные канальцы ограничены клетками Сертоли. За счёт образования между ними комплекса плотных и щелевых контактов и десмосом формируется очень плотный гемато-тестикулярный барьер, внутри которого осуществляются процессы сперматогенеза [75]. Клетки Сертоли несут на своей поверхности Ра8-лиганд для запуска процессов апоптоза у лимфоцитов, случайно оказавшихся рядом. Кроме того, клетки Сертоли выделяют интерлейкины и ин-терфероны, затрудняющие развитие иммунных реакций в микроокружении семенных канальцев [36; 37; 49]. Предполагается, что биологический смысл данной изоляции заключается в предотвращении развития аутоиммунных реакций, направленных непосредственно против половых клеток, и его отсутствие быстро приводило бы к бесплодию.
В чём же заключаются свойства раково-тестикулярных генов? Для ответа на этот вопрос
исследователи указывают на функции сперматого-нальных клеток. Их роль заключается в осуществлении сперматогенеза. Для сперматогенеза характерно мейотическое деление и последующее созревание половых клеток [25]. Для осуществления подобных функций требуется работа целого ряда транскрипционных факторов и структурных белков, которые кодируются раково-тестикулярными генами [51].
При описании РТГ их делят на две группы. В первой группе оказываются РТГ, расположенные на Х-хромосоме. Гены из другой группы, так называемые не-Х-хромосомные РТГ, располагаются на соматических хромосомах [59]. Не-Х-хромосомные РТГ кодируют в основном структурные белки, отличающиеся большим разнообразием. В этом обзоре будут рассмотрены только представители X-хромосомных РТГ, так как они имеют существенно больше общих черт между собой, чем РТГ из другой группы.
Гены из первой группы составляют более половины от общего числа известных РТГ. X-хромосомные гены чаще всего организованы в кластеры, содержащие мультигенные семейства [77]. Всего известно 44 мультигенных семейства. Название семейства генов дают по названию первого открытого гена. Например, гены высокогомологичного семейства MAGE названы так в соответствии с названием данному открытому представителю -гену MAGEA1 (melanoma antigen A1).
Подсчитано, что 10% генов на Х-хромосоме является типичными РТГ. В целом, Х-хромосомные РТГ экспрессируются в герминогенных клетках, ещё не прошедших стадии мейотического деления [60]. До сегодняшнего дня известно очень немного о биологических функциях белков, кодируемых X-хромосомными РТГ. Но для большинства белков уже сейчас показана способность с высокой аффинностью взаимодействовать с двухцепочечной молекулой ДНК [46]. Кроме того, для некоторых представителей этой группы генов методом выравнивания показана гомология с хорошо описанными антиапоптотическими и транскрипционными факторами [31].
Для белка, кодируемого геном PASD1 (PAS domain containing 1), например, предполагают функцию активатора экспрессии генов, регулирующих циркадные ритмы [57]. Ген SSX1 (synovial sarcoma, X breakpoint 1) кодирует одноимённый белок, связывающийся с промоторными областями других Х-хромосомных РТГ, и блокирует их экспрессию. Интересно, что транскрипция этого гена запускается перед мейозом, и кодируемый белок существует во время всего мейотического деления. Возможно, белок SSX1 предназначен для инактивации экспрессии других Х-хромосомных РТГ, так как их участие в процессах постмейотического созревания, вероятнее всего, нежелательно [21]. Белок SPANXA1 (sperm protein associated with the nucleus, X-linked, family member A1), присутствующий в цитоплазме герминогенных клеток, только что закончивших редукционное деление, связан с активацией экспрессии других РТГ, однако механизм взаимодействия не раскрыт [74]. Функции других генов, таких как GAGEI (G antigen 1), NY-ESO-1 (New York, esophageal squamous 1), MAGEA1 и многих других остаются неизвестными, но их структуры так же предполагают наличие ре-гуляторных свойств [23].
Таким образом, для группы Х-хромосомных РТГ предполагают наличие регуляторных функций, значимых для подготовки половой клетки к мейозу.
№ 2/том 13/2014
РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ
ОБЗОРЫ ЛИТЕРАТУРЫ
Х-ХРОМОСОМНЫЕ РАКОВО-ТЕСТИКУЛЯРНЫЕ ГЕНЫ...
Причины спонтанной активации экспрессии Х-хромосомных РТГ при онкологических заболеваниях
Как было отражено в названии, РТГ отличаются экспрессией в семенниках, а также при ряде соматических опухолей и онкологических заболеваний системы крови [24]. Эпитопы белков, кодируемые РТГ, и синтезированные мРНК обнаруживаются практических при любых онкологических заболеваниях [1; 14; 34; 38; 39; 44-48; 53; 54; 65; 66; 70; 72;73; 78].
Экспрессия генов находятся под контролем целого комплекса факторов, таких как последовательность ДНК, модификации специфических транскрипционных стимуляторов или супрессоров. На экспрессию генов оказывают влияние метилирование ДНК и посттрансляционные модификации, затрагивающие аминокислотную последовательность гистонов. Эти процессы изменяют структуру хроматина, и приводят его к такому состоянию, при котором транскрипция подавляется [38]. Кроме этого, к активации генов может приводить метилирование и ацетилирование специфических аминокислотных остатков в молекулах гистонов.
О регуляции экспрессии Х-хромосомных РТГ известно только то, что каждый ген из этой группы активен только во время одной или нескольких стадий гаметогенеза, что было подтверждено методами иммуногистохимии и исследования статуса метилирования промоторных областей этих генов [15; 22].
В качестве основной причины активации экспрессии генов данной группы предполагают статус метилирования регуляторных областей, которым подчинены РТГ. В здоровых клетках большинство нуклеотидных пар СрО молекулы ДНК находятся в деметилированном состоянии. В то же время ДНК таких клеток содержит в себе длинные последовательности, на всём протяжении которых динуклеотиды СрО метилированы. Метилирование таких последовательностей приводит к запрету транскрипции гена. Например, в соматических клетках СрО пары в последовательностях большинства Х-хромосомных генов метилированы [42; 55]. Этим объясняют отсутствие экспрессии РТГ в соматических тканях.
В метилировании молекулы ДНК задействовано три специальных метилтрансферазных фермента (БКМТ8). В качестве донора метильных радикалов эти ферменты используют молекулу 8-аденозин-метионина [35]. Все три метилтрансферазных фермента блокируются работой ДНК деме-тилирующих агентов, таких как 5-азацитидин. Эти компоненты внедряются в ДНК делящихся клеток, и необратимо ингибируют активность БКМТ8, тем самым предотвращая метилирование пар СрО.
В целом, прогрессирование опухолей связано со снижением общего уровня метилирования геномной ДНК [32]. Снижение общего уровня метилирования в геноме трансформированных клеток начинается задолго до клинических проявлений рака [12; 26; 56]. Гипометилирование приводит к экспрессии многих опухоль-ассоциированных антигенов, среди них встречаются и РТА. При про-грессировании рака уровень метилирования только понижается, что приводит к активации всё новых опухоль-ассоциированных антигенов.
Экспериментальные работы демонстрируют прямую зависимость между деметилированием промоторов РТГ и последующей экспрессией этих генов. Было замечено, что при терапии опухолей
ДНК деметилирующим агентом, 5-азацитидином, уровень метилирования ДНК падает, и это запускает экспрессию РТА [71; 79]. Было показано, что гипометилирование играет ключевую роль в регуляции экспрессии генов семейства MAGE [28]. Отмечено, что гиперметилирование наоборот, останавливает транскрипцию генов, кодирующих РТА.
Несмотря на тесную связь между гипомети-лированием ДНК и экспрессией генов, есть данные, указывающие на существование и других факторов, регулирующих экспрессию РТГ. Например, опухолевые клетки, выделенные при раке толстого кишечника, не экспрессируют РТГ и не имеют эпито-пов РТА, хотя последовательность геномной ДНК в целом гипометилирована. Это наблюдение позволило предположить, что экспрессия РТГ контролируется так же и другими, вторичными факторами.
Интересно, что при онкогематологических заболеваниях экспрессия РТГ наблюдается в целом реже, чем при онкологических. В литературе пока нет объяснений причин, по которым это происходит.
Сейчас стало известно о том, что запуск экспрессии генов группы SPANX в клетках миеломы может контролироваться IL-7 и GM-CSF [72]. Если промотор генов SPANX метилирован, то клетки миеломы при обработке IL-7 и/или GM-CSF остаются SPAAX-негативными. При обработке клеток миеломы 5-азацитидином промотор гена SPANX деметилируется, и после этого IL-7 и/или GM-CSF успешно запускают экспрессию гена SPANX, что приводит к появлению эпитопов данных РТА. Подобным образом обработка 5-азацитидином клеток линий, моделирующих хронический лимфоидный лейкоз деметилирует общегеномную ДНК, в том числе и промотор гена SEMG1. Экспрессия этого гена в последующем активируется IL-4 и IL-6 [80].
Указывается на возможное влияние и некоторых других факторов, приводящих к активации экспрессии РТГ. Так, движущей силой некоторых неопластических заболеваний может быть активность мутантного регуляторного белка [19]. К примеру, хронический миелоидный лейкоз вызван хромосомной перестройкой, формирующей ген BCR-ABL, кодирующий одноимённую высокоактивную тирозин-киназу [29; 63]. При данном заболевании так же обнаружена экспрессия большого количества РТГ, в том числе гены семейств SEMG, SPANX и ген PASD1 [33; 76] При JAK2-V617F-пoлoжитeльныx миело-пролиферативных заболеваниях так же существуют условия для экспрессии РТГ [8].
Очень трудно в точности предсказать последствия начала экспрессии РТГ, но ряд их свойств указывает, что экспрессия этих генов является неблагоприятным признаком. Поскольку Х-хромосомные РТГ могут работать как транскрипционные факторы, то они могут приводить к дальнейшей дестабилизации механизма внутриклеточной регуляции, к эволюции опухолевого клона и прогрессии заболевания. На текущий момент опубликовано множество результатов экспериментальных исследований, в которых продемонстрирована прямая связь между экспрессией РТГ и плохим прогнозом заболевания у больных с солидными опухолями, такими как рак головы и шеи, гепатоцеллюлярная карцинома, и особенно при онкогематологических заболеваниях, в частности, при множественной миеломе [16].
Иммунотерапия, основанная на РТГ
РТА соответствуют многим критериям «идеальной мишени» для проведения специфической терапии, в частности, иммунотерапии. Они опухольспеци-
№ 2/том 13/2014
РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ
ОБЗОРЫ ЛИТЕРАТУРЫ
Х-ХРОМОСОМНЫЕ РАКОВО-ТЕСТИКУЛЯРНЫЕ ГЕНЫ...
фичны, часто нарабатываются в больших количествах, не обнаруживаются в здоровых стволовых клетках и распознаются иммунной системой [41]. Х-хромосомные РТГ кодируют более иммуногенные белки, чем не-Х-хромосомные гены [59]. Это подтверждается тем, что в крови онкологических больных часто обнаруживают антитела, специфичные против эпитопов Х-хромосом-ных РТА [39]. Во всех описанных случаях специфический иммунный ответ вырабатывался спонтанно [33]. Вероятно, что редкие случаи спонтанной регрессии опухолей связаны именно с высокой иммуногенностью трансформированных клеток, экспрессирующих РТГ. Но в большинстве случаев собственный иммунный ответ оказывается недостаточным, и без медицинского вмешательства больной погибает.
Показано, что одним из компонентов иммунного ответа «трансплантат против опухоли» становится выработка антител и появление популяции аллогенных Т-клеток, способных распознавать РТА. Таким образом, костный мозг, пересаженный от неродственного донора, подавляет опухоль в организме реципиента, что и наблюдалось во множестве клинических исследований [6; 7; 61]. Таким образом, одним из эффективных, хотя и неспецифических, способов терапии является аллогенная трансплантация костного мозга.
На сегодняшний день в мире проходят испытания многие вакцины, лекарственной формой которых стали гуманизированные антитела, направленные против РТА. Наибольшее количество публикаций посвящено испытаниям антител, выработанных против эпитопов белка NY-ESO-1 [69].
Испытан ещё один способ проведения терапии - это создание дендритноклеточных вакцин. В данном случае проводится совместная культивация дендритных клеток, нагруженных антигеном, с аутоло-гичными Т-лимфоцитами. После культивации незрелые Т-клетки приобретают специфичность и возвращаются в кровоток больного [50; 52]. Некоторые исследователи взяли курс на введение в Т-клетку готового TCR (Т-клеточного рецептора), с высокой аффиностью связывающегося с эпитопами РТА NY-ESO-1 [81].
Интересен ещё один подход, при котором антиген-презентирующую клетку обрабатывают деметилилующими агентами, из-за чего в её геноме начинается экспрессия множества генов, в том числе и РТГ. После этого проводится культивация этих клеток с наивными Т-лимофоцитами.
В другом исследовании было описано применение пептидной вакцины. Иммунизация здорового донора пептидом MAGE, полученным после расщепления нативного белка, привела к развитию специфического иммунного ответа. Клетки донора приобрели способность распознавать MAGE-экспрессирующие культуры клеток множественной миеломы. Донорские иммунные клетки были введены в кровь его близнеца, больного множественной миеломой. У реципиента наблюдалось развитие специфического иммунного ответа, ремиссия заболевания сохранялась более двух лет после проведения трансплантации [62].
Несмотря на многообещающие перспективы, иммунотерапия должна пройти множество этапов в своём развитии, прежде чем она станет основным методом лечения онкологических больных.
Литература
Одним из серьёзных ограничений массового применения методов иммунотерапии является крайне разнообразный профиль экспрессии РТГ. Даже для одной и той же нозологии характерно наличие активных РТГ только у некоторых больных из общей группы. Иммуногистохимия показывает неоднородность опухоли, экспрессирующей РТА. В некоторых клетках экспрессия обнаружена, а в некоторых не происходит. Вероятная причина -неспецифическая активация экспрессии РТГ. В большой массе опухолевых клеток с деметелиро-ванным геномом эти гены активны, но экспрессия РТГ в одной клетке мало зависит от профиля экспрессии РТГ в соседней клетке.
Длительность времени прогрессирования заболевания увеличивает только вероятность спонтанной экспрессии РТГ. Кроме того, как показано для хронического миелоидного лейкоза, при общности клинических проявлений одной болезни в её основе лежат сходные, но неодинаковые причины. Так, хронический миелоидный лейкоз вызван появлением химерного гена BCR-ABL, но у каждого больного может наблюдаться свой вариант слияния генов BCR и ABL [4; 9]. В связи с этим ещё ни про один РТГ не было сказано, что его экспрессия характерна для всей группы исследованных больных с каким-либо диагнозом. Единственное исключение, возможно, составляет острый промиелоцитар-ный лейкоз, при котором абсолютно у всех первичных больных экспрессируется не-Х-хромосомный РТГ PRAME [11].
Выводы
Количество опубликованных результатов экспериментальных работ в области исследования Х-хромосомных РТГ растёт из года в год, что говорит о большой актуальности проблемы спонтанной экспрессии этих генов при различных онкологических и онкогематологических заболеваниях. Данные гены кодируют очень иммуногенные белки, и это позволяет разрабатывать очень эффективные методы специфической иммунотерапии.
Уникальное свойство этих генов, заключающееся в экспрессии их исключительно в опухолевых тканях и клетках, защищённых в иммуно-привилегированных зонах, даёт ряд преимуществ при разработке специфических средств для противоопухолевой терапии.
Сопоставление клинических проявлений онкозаболеваний с паттерном экспрессии Х-хромосомных РТГ позволит проводить определение экспрессируемых генов для рутинной диагностики, подобно тому, как другие маркеры применяются уже сегодня [9; 13; 30; 40; 64; 67; 68].
Следует продолжать исследования пространственной структуры кодируемых белков и определять, в каких регуляторных путях они задействованы, и на какие клеточные системы воздействуют экспрессируемые РТГ. Не исключено, что в будущем появятся новые способы таргетной терапии, основанные на взаимодействии низкомолекулярных молекул с реакционными центрами белков, кодируемых РТГ.
1. Абраменко И.В., Белоус Н.И., Крячок И.А. и др. Экспрессия гена ргате при множественной миеломе // Терапевтический архив. - 2004. - Т. 76, № 7. - С. 77-81.
2. Барышников А.Ю. Принципы и практика вакцинотерапии рака // Бюллетень Сибирского отделения Российской академии медицинских наук. - 2004. - № 2. - С. 59-63.
№ 2/том 13/2014
РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ
ОБЗОРЫ ЛИТЕРАТУРЫ
Х-ХРОМОСОМНЫЕ РАКОВО-ТЕСТИКУЛЯРНЫЕ ГЕНЫ...
3.
Барышников А.Ю., Демидов Л.В., Кадагидзе З.Г и др. Современные проблемы биотерапии злокачественных опухолей // Вестник Московского онкологического общества. - 2008. - № 1. - С. 6-10. Герасимова Л.П., Манакова Т.Е., Ахлынина Т.В. и др. Экспрессия онкогена bcr/abl и р53-индуцированный апоптоз в суспензионных культурах гемопоэтических ph+ клеток хронического мие-лолейкоза // Российский биотерапевтический журнал. - 2002. - Т. 1, № 4. - С. 29-38. Давыдов М.И., Аксель Е.М. Статистика злокачественных новообразований в России и странах СНГ в 2012 г. - Издательская группа РОНЦ, 2014. - 226 с.
Демидова И.А., Савченко В.Г., Ольшанская Ю.В. и др. Аллогенная трансплантация костного мозга после режимов кондиционирования пониженной интенсивности в терапии больных гемобластозами // Терапевтический архив. - 2003. - Т. 75, № 7. - С. 15-21.
Любимова Л.С., Савченко В.Г., Менделеева Л.П. и др. Трансплантация аллогенного костного мозга при хроническом миелолейкозе // Терапевтический архив. - 2004. - Т. 76, 7. - С. 18-24. Мисюрин А.В. Молекулярный патогенез миелопролиферативных заболеваний // Клиническая онкогема-тология. Фундаментальные исследования и клиническая практика. - 2009. - Т. 2, № 3. - С. 211-9. Мисюрин А.В., Аксенова Е.В., Крутое А.А. и др. Молекулярная диагностика хронического миелолейкоза // Гематология и трансфузиология. - 2007. - Т. 52, № 2. - С. 35-40.
Мисюрин А.В., Сурин В.Л., Тагиев А.Ф. Новые точки разрыва транслокации t(9;22) при хроническом миелолейкозе // Биоорганическая химия. - 1999. - Т. 25, №3. - С. 234-6.
Мисюрин В.А., Лукина А.Е., Мисюрин А.В. и др. Особенности соотношения уровней экспрессии генов PRAME и PML/RARa в дебюте острого промиелоцитарного лейкоза // Российский биотерапевтический журнал. - 2014. - Т. 13, №1. - С. 9-16.
Новиков В.В., Евсегнеева И.В., Караулов А.В., Барышников А.Ю. Растворимые формы мембранных антигенов клеток иммунной системы при социально значимых инфекциях // Российский биотерапевтический журнал. - 2005. - Т. 4, № 2. - С. 100-5.
Челышева Е.Ю., Туркина А.Г., Мисюрин А.В., Захарова А.В. Раннее выявление цитогенетического рецидива при динамическом исследовании уровня BCR-ABL транскрипта у больного хроническим миело-лейкозом // Гематология и трансфузиология. - 2007. - Т. 52, № 2. - С. 50-1.
Adams S.P., Sahota S.S., Mijovic A. et al. Frequent expression of HAGE in presentation chronic myeloid leukaemias // Leuk. - 2002. - 16. - P. 2238-42.
Akers S.N., Odunsi K., Karpf A.R. Regulation of cancer germline antigen gene expression: implications for cancer immunotherapy // Future Oncol. - 2010. - 6. - P. 717-32.
Atanackovic D., Luetkens T., Hildebrandt Y. Longitudinal analysis and prognostic effect of cancer-testis antigen expression in multiple myeloma // Clin Cancer Res. - 2009. - 15(4). - P. 1343-52.
AtanassovaN.N., Walker M., McKinnell C. et al. Evidence that androgens and oestrogens, as well as follicle-stimulating hormone, can alter Sertoli cell number in the neonatal rat // J Endocr. - 2005. - 184. - P. 107-17. Auharek S.A., Franca L.R., McKinnell C. et al. Prenatal plus postnatal exposure to Di(n-Buttyl) phthalate and/or flutamide markedly reduces final Sertoli cell number in the rat // Endocrinology. - 2010. - 151. - P. 2868-75.
Baryshnikov A.Yu., Polosukhina E.R., Tupitsin N.N. et al. CD95 (FAS/APO-1) antigen is a new prognostic marker of blast cells of acute lymphoblastic leukaemia patients // Advances in Experimental Medicine and Biology. - 1999. - 457. - P. 251-8.
Berndtson W.E., Thompson T.L. Changing relationships between testis size, Sertoli cell number and spermatogenesis in Sprague-Dawley rats // J Androl. - 1990. - 11. - P. 429-35. 21. Bodey B. Cancer-testis antigens: promising targets for antigen directed antineoplastic immunotherapy // Expert Opin Biol Ther. - 2002. - 2. - P. 577-784.
Caballero O.L., Chen Y.T. Cancer/testis (CT) antigens: Potential targets for immunotherapy // Cancer Sci. -
2009. - 100. - P. 2014-21.
Caballero O.L., Zhao Q., Rimoldi D. et al. Frequent MAGE mutations in human melanoma // PLoS One. -
2010. - 5. - P. 127-33.
Chen Y.T., Scanlan M.J., Sahin U. et al. A testicular antigen aberrantly expressed in human cancers detected by autologous antibody screening // Proc Natl Acad Sci USA. - 1997. - 94. - P. 1914-8. Cheng C.Y., Mruk D.D. The biology of spermatogenesis: the past, present and future // Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. - 2010. - 365. - P. 1459-63.
Christman J.K., Sheikhnejad G., DizikM. et al. Reversibility of changes in nucleic acid methylation and gene expression induced in rat liver by severe dietary methyl deficiency // Carcinogenesis. - 1993. - 14. - P. 551-7. Danaei G., Vander Hoorn S., Lopez A.D. et al. Causes of cancer in the world: comparative risk assessment of nine behavioural and environmental risk factors // Lancet. - 2005. - 366(9499). - P. 1784-93. de Smet C.C., Lurquin B., Lethe et al. DNA methylation in the primary silencing mechanism for a set of germ lineand tumor-specific genes with a CpG-rich promoter // Mol Cell Biol. - 1999. - 19. - P. 7327-35. Deininger M.W., Goldman J.M., Melo J.V. The molecular biology of chronic myeloid leukemia // Blood. -2000. - 96(10). - P. 3343-56.
Dementieva E.I., Rubina A.Yu., Darii E.L. et al. Protein microchips in quantitative assays for tumor markers // Doklady Biochemistry and Biophysics. - 2004. - 395(6). - P. 88-92. 31. Eng Y, Gao J., Yang M. When MAGE meets RING: insights into biological functions of MAGE proteins // Protein Cell. - 2011. - 2. - P. 7-12.
Gama-Sosa, M.A. V.A. Slagel, R.W. Trewyn et al. The 5-methylcytosine content of DNA from human tumors // Nucleic Acids Res. - 1983. - 11. - P.6883-94.
Gnjatic S., Nishikawa H., Jungbluth A.A. et al. NY-ESO-1: review of an immunogenic tumor antigen // Adv Cancer Res. - 2006. - 95. - P. 1-30.
Guinn B., Bland E.A., Lodi U. et al. Humoral detection of leukaemia-associated antigens in presentation acute myeloid leukaemia // Biochem Biophy Res Comm. - 2005. - 225. - P. 1293-304.
4.
5.
6.
7.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
32.
33.
34.
№ 2/tom 13/2014
РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ
ОБЗОРЫ ЛИТЕРАТУРЫ
Х-ХРОМОСОМНЫЕ РАКОВО-ТЕСТИКУЛЯРНЫЕ ГЕНЫ...
35. Herman H., Lu M., Anggraini M. et al. Trans allele methylation and paramutation-like effects in mice // Nat Genet. - 2003. - 34. - P. 199-202.
36. Jegou B., Pineau C. Current aspects of autocrine and paracrine regulation of spermatogenesis // Adv Exp Med Biol. - 1995. - 377. - P. 67-86.
37. Jegou B., Cudicini C., Gomez E., Stephan J. Interleukin-1, interleukin-6 and the germ cell-Sertoli cell crosstalk // Reprod Fertil Dev. - 1995. - 7. - P. 723-30.
38. Jones P.A., Baylin S.B. The fundamental role of epigenetic events in cancer // Nat Rev Genet. - 2002. - 3. - P. 415-28.
39. Jungbluth A.A., Ely S., DiLiberto M. The cancer-testis antigens CT7 (MAGE-C1) and MAGE-A3/6 are commonly expressed in multiple myeloma and correlate with plasma-cell proliferation // Blood. - 2005. - 106. - P. 167-74.
40. Lebedev M.Ju., Sholkina M.N., Vilkov S.A. et al. Serum levels of different forms of soluble cd38 antigen in burned patients // Burns. - 2004. - 30(6). - P. 552-6.
41. Lethe B., Lucas S., Michaux L. et al. LAGE-1, a new gene with tumor specificity // Int J Cancer. - 1998. - 76.
- P. 903-8.
42. Li E., Beard C., Jaenisch R. Role for DNA methylation in genomic imprinting // Nature. - 1993. - 366. - P. 362-5.
43. Lie P.P.Y, Cheng C.Y., MrukD.D. The biology of the desmosome-like junction: A versatile anchoring junction and signal transducer in the seminiferous epithelium // Int Rev Cell Mol Biol. - 2011. - 286. - P. 223-69.
44. Liggins A.P., Lim S.H., Soilleux E.J. A panel of cancer-testis genes exhibiting broad-spectrum expression in haematological malignancies // Cancer Immun. - 2010. - 10. - P. 8.
45. Lim S.H., Austin S., Owen-Jones E., Robinson L. Expression of testicular genes in haematological malignancies // Br J Cancer. - 1999. - 81. - P. 1162-4.
46. Svobodova M., Pinto A., Nadal P., O'Sullivan C.K. Comparison of different methods for generation of single-stranded DNA for SELEX processes // Anal Bioanal Chem. - 2012. - 404. - P. 835-42.
47. Meklat F., Zhang Y., Shahriar M. Identification of protamine 1 as a novel cancer-testis antigen in early chronic lymphocytic leukaemia // Br J Haematol. - 2009. - 144. - P. 660-6.
48. Mikhaylova I.N., Morozova L.F., Golubeva V.A. et al. Cancer/testis genes expression in human melanoma cell lines // Melanoma Research. - 2008. - 18(5). - P. 303-13.
49. Mruk D.D., Cheng C.Y. Sertoli-Sertoli and Sertoligerm cell interactions and their significance in germ cell movement in the seminiferous epithelium during spermatogenesis // Endocr Rev. - 2004. - 25. - P. 747-806.
50. Nagel H., Laskawi R., Eiffert H., Schlott T. Analysis of the tumour suppressor genes, FHIT and WT-1, and the tumour rejection genes, BAGE, GAGE-1/2, HAGE, MAGE-1, and MAGE-3, in benign and malignant neoplasms of the salivary glands // Mol Pathol. - 2003. - 56(4). - P. 226-31.
51. O'Donnell L., Nicholls P.K., O'Bryan M.K. et al. Spermiation: the process of sperm release // Spermatogenesis
- 2011. - 1. - P. 14-35.
52. Okuno K., Sugiura F., Itoh K. et al. Recent advances in active specific cancer vaccine treatment for colorectal cancer // Curr Pharm Biotechnol. - 2012. - 13(8). - P. 1439-45.
53. Paydas S., Tanriverdi K., Yavuz S. PRAME mRNA levels in cases with chronic leukemia: clinical importance and review of the literature // Leuk Res. - 2007. - 31. - P. 365-9.
54. Paydas S., Tanriverdi K., Yavuz S. et al. PRAME mRNA levels in cases with acute leukemia: clinical importance and future prospects // Am J Hematol. - 2005. - 79. - P. 257-61.
55. Pfeifer G.P., Tanguay R.L., Steigerwald S.D. et al. In vivo footprint and methylation analysis by PCR-aided genomic sequencing: comparison of active and inactive X chromosomal DNA at the CpG island and promoter of human PGK-1 // Genes Dev. - 1990. - 4. - P. 1277-87.
56. Pogribny I.P., Miller B.J., James S.J. P53 gene methylation pattern during tumor progression with folate/methyl deficiency in the rat //Alterations Cancer Lett. - 1997. - 115. - P. 31-8.
57. Sahota S.S., Goonewardena C.M., Cooper C.D. et al. PASD1, a DLBCL-associated cancer testis antigen and candidate for lymphoma immunotherapy // Blood. - 2006. - 108(12). - P. 3953-5.
58. Scanlan M.J., Simpson A.J., Old L.J. The cancer/testis genes: review, standardization, and commentary // Cancer Immun. - 2004. - 4. - P. 1.
59. Simpson A.J. Cancer/testis antigens and cancer // Nat Rev Cancer. - 2004. - 4(5). - P. 18-22.
60. Simpson A.J.G., Caballero O.L., Jungbluth A. et al. Cancer/testis antigens, gametogenesis and cancer // Nat Rev Cancer. - 2005. - 5. - P. 615-25.
61. Szmania S., Gnjatic S., Tricot G. et al. Immunization with a recombinant MAGE-A3 protein after high-dose therapy for myeloma // J Immunother. - 2007. - 30(8). - P. 847-54.
62. Szmania S., Gnjatic S., Tricot G. et al. Immunization with a recombinant MAGE-A3 protein after high-dose therapy for myeloma // J Immunother. - 2007. - 30. - P. 847-54.
63. Turkina A.G., Zabotina T.N., Kuznetzov S.V. et al. Studies of some mechanisms of drug resistance in chronic myeloid leukemia (CML) // Advances in Experimental Medicine and Biology. - 1999. - 457. - P. 477-88.
64. Tutaeva V., Misurin A.V., RoZenberg J.M. et al. Application of PRV-1 mRNA expression level and JAK2V617F mutation for the differentiating between polycytemia vera and secondary erythrocytosis and assessment of treatment by interferon or hydroxyurea // Hematology. - 2007. - 12(6). - P. 473-9.
65. van Baren N., Brasseur F., Godelaine D. Genes encoding tumor-specific antigens are expressed in human myeloma cells // Blood. - 1999. - 94. - P. 1156-64.
66. Van Rhee F., Szmania S.M., Zhan F. et al. NY-ESO-1 is highly expressed in poor-prognosis multiple myeloma and induces spontaneous humoral and cellular immune responses // Blood. - 2005. - 105. - P. 3939-44.
67. Vartanian A., Stepanova E., Grigorieva I. et al. VEGFR1 and PKCa signaling control melanoma vasculogenic mimicry in a vegfr2 kinase-independent manner // Melanoma Research. - 2011. - 21(2). - P. 91-8.
68. Vartanian A.A., Stepanova E.V., Gutorov S.L. et al. Prognostic significance of periodic acid-schiff-positive patterns in clear cell renal cell carcinoma // The Canadian journal of urology. - 2009. - 16(4). - P. 4726-32.
№ 2/tom 13/2014
РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ
ОБЗОРЫ ЛИТЕРАТУРЫ
Х-ХРОМОСОМНЫЕ РАКОВО-ТЕСТИКУЛЯРНЫЕ ГЕНЫ...
69. WangY., Wu X.J., Zhao A.L. et al. Cancer/testis antigen expression and autologous humoral immunity to NY-ESO-1 in gastric cancer // Cancer Immunol. - 2004. - 4. - P. 11.
70. Wang Z., Zhang Y., Mandal A. The spermatozoa protein, SLLP1, is a novel cancer-testis antigen in hematologic malignancies // Clin Cancer Res. - 2004. - 19. - P. 6544-50.
71. Wang Z., Zhang Y., Ramsahoye B. et al. Sp17 gene expression in myeloma cells is regulated by promoter me-thylation // Br J Cancer. - 2004. - 91. - P. 1597-603.
72. Wang Z., Zhang Y., Liu H. et al. Gene expression and immunologic consequence of SPAN-Xb in myeloma and other hematologic malignancies // Blood. - 2003. - 101. - P. 955-60.
73. Wang Z., Zhang Y., Liu H., Salati E. Gene expression and consequence of SPAN-Xb in myeloma and other hematologic malignancies // Blood. - 2003. - 99. - P. 821-5.
74. Westbrook V.A., Schoppee P.D., Diekman A.B. et al. Genomic organization, incidence, and localization of the SPAN-X family of cancer-testis antigens in melanoma tumors and cell lines // Clin Cancer Res. - 2004. - 10. -
75. Wong E. W.P., Mruk D.D., Cheng C. Y. Biology and regulation of ectoplasmic specialization, an atypical adherens junction type, in the testis // Biochem Biophys Acta. - 2008. - 1778. - P. 692-708.
76. Wang Z., Liu H., Giles F.J., Lim S.H. Pattern of gene expression and immune responses to Semenogelin 1 in chronic hematologic malignancies // J Immunother. - 2003. - 26. - P. 461-7.
77. Zendman A.J., Ruiter D.J., van Muijen G.N. Cancer/testisassociated genes: identification, experssion profile and putative function // J Cell Physiol. - 2003. - 194. - P. 272-88.
78. Zhang Y., Wang Z., Liu H. et al. Pattern of gene expression and immune responses to Semenogelin 1 in chronic hematologic malignancies // J Immunother. - 2003. - 26. - P. 461-7.
79. Zhang Y., Wang Z., Zhang J. et al. Semenogelin I expression in myeloma cells can be upregulated pharmacologically // Leuk Res. - 2008. - 32(12). - P. 1889-94.
80. Zhang Y., Wang Z., Zhang J., Lim S.H. Core promoter sequence of SEMG 1 spans between the two putative GATA-1 binding domains and is responsive to IL-4 and IL-6 in myeloma cells // Leuk Res. - 2008. - 33. - P. 186-9.
81. Zoete V., Irving M., Ferber M. et al. Structure-Based, Rational Design of T Cell Receptors // Front Immunol. -2013. - 4. - P. 268.
P. 101-12.
#
НАУЧНЫЕ ЖУРНАЛЫ РОНЦ ИМ. Н.Н. БЛОХИНА РАМН
#
№ 2/том 13/2014
РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ
Материалы Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Противоопухолевая терапия: от эксперимента к клинике» Москва, 20-21 марта 2014
Е.В. Бочаров1, В.Г. Кучеряну1, Р.В. Карпова2, O.A. Бочарова2
КОМПЛЕКСНЫЙ ФИТОАДАПТОГЕН ПРИ ЛЕЧЕБНОМ РЕЖИМЕ ВВЕДЕНИЯ УЛУЧШАЕТ СОМАТИЧЕСКОЕ СОСТОЯНИЕ ВЫСОКОРАКОВЫХ МЫШЕЙ СВА
1ФГБУ НИИ общей патологии и патофизиологии РАМН, Москва 2ФГБУ «РОНЦим. H.H. Блохина» РАМН, Москва
Задачи исследования. Оценить лечебное воздействие комплексного фитоадаптогена фитомикса-40 на соматическое состояние мышей самцов высокораковой линии СВА, предрасположенных к возникновению спонтанных гепатокарцином.
Материалы и методы. Комплексный фитоадаптоген фитомикс-40 - стандартизованный препарат, включающий компоненты 40 растительных экстрактов; обладает иммуномодулирующим, адгезиогенным, интерфероно-генным, антимутагенным, антиоксидантным, радиопротекторным действием. В работе использовали 140 мышей: 1 группа (n=70) - контрольная; 2 группа (n=70) - опытная, мыши получали фитомикс-40 с питьевой водой курсами в лечебном режиме с 6-месячного возраста (периода возникновения первых гепатокарцином) до естественной гибели животных. В возрасте 22 месяцев оценивали наличие алопеции, вес животных, их двигательную активность. Двигательную активность определяли в тесте «открытого поля» в автоматическом режиме с помощью системы Opto-Varimex-3. Анализ результатов проводили с использованием программы STATISTICA 6.0.
Результаты. В возрасте 22 месяцев вес мышей в опытной группе был выше, чем в контрольной (34,6 ± 0,5г и 24,4 ± 0,2г соответственно, р<0,01). Это сопровождалось снижением у мышей опытных групп уровня интерлей-кинов-6 и -10 в сыворотке крови, участвующих в патогенезе кахексии. Вместе с тем мыши опытной группы имели полноценный шёрстный покров, что сочеталось со снижением сывороточного уровня интерлейкина-6. Последнее может препятствовать потере шерсти в результате стимуляции функциональной активности волосяных фолликулов при подавлении воспалительного процесса в кожном покрове. У контрольных мышей в 16,6 % случаев наблюдали алопецию. Кроме того, показатели двигательной активности (пройденный путь, время без движения, число «стоек», число мелких движений) у мышей опытной группы были лучше, чем у мышей контрольной группы. При этом у опытных мышей выявлено снижение частоты образования опухолей и повышение выживаемости.
Выводы. Длительное применение комплексного фитоадаптогена, начиная с 6-месячного возраста, способствовало повышению качества жизни высокораковых мышей СВА.
Р.В. Карпова , Е.В. Бочаров , В.А. Ильенко , A.A. Вершинская , H.H. Касаткина , O.A. Бочарова ПОВЫШЕНИЕ ВЫЖИВАЕМОСТИ МЫШЕЙ ВЫСОКОРАКОВОЙ ЛИНИИ СВА ПРИ ЛЕЧЕБНОМ ВОЗДЕЙСТВИИ КОМПЛЕКСНОГО ФИТОАДАПТОГЕНА
'ФГБУ «РОНЦим. H.H. Блохина» РАМН, Москва 2 ФГБУ НИИ о бщей патологии и патофизиологии РАМН, Москва
Задачи исследования. Оценить лечебное воздействие комплексного фитоадаптогена на продолжительность жизни мышей высокораковой линии СВА.
Материалы и методы. Комплексный фитоадаптоген фитомикс-40 включает компоненты 40 растительных экстрактов; обладает иммуномодулирующим, адгезиогенным, интерфероногенным, антимутагенным, антиоксидантным, радиопротекторным эффектами. В работе использовали 140 мышей линии СВА, предрасположенных к возникновению спонтанных опухолей печени: 1 группа (n=70) - контрольная; 2 группа (n=70) - мыши получали фитомикс-40 с питьевой водой курсами в лечебном режиме с 6-месячного возраста (периода возникновения первых гепатокарцином) до естественной гибели животных. Среднюю продолжительность жизни (СПЖ) и медиану выживаемости определяли по методу Каплан-Мейера.
Результаты. СПЖ мышей контрольной группы в среднем не достигала 22 месяцев. Медиана выживаемости составила 21,1 месяц. Воздействие фитомикса-40 в лечебном режиме способствовало удлинению жизни опытных мышей на 28,2 % (р=0,001). Медиана выживаемости при этом повысилась на 33,6 % и составила 28,2 месяцев (р<0,001). Ни одно животное контрольной группы не пережило 1000 дней (около 33 месяцев). В опытной группе указанный срок пережило 8 мышей (р<0,001): их выживаемость в среднем составила 1051±24 дня (около 34,5 месяцев). Рекорд по долгожительству из них побил самец, проживший 1099 дней (36 месяцев, или 3 года). Повышение выживаемости мышей опытной группы сопровождалось увеличением экспрессии лейкоцитарных интегринов LFA-1 и Mac-1, снижением сывороточного уровня интерлейкинов-6 и -10, уменьшением частоты возникновения гепакарцином, улучшением соматического состояния животных.
Выводы. Применение комплексного фитоадаптогена с адгезиогенным действием в лечебном режиме долговременно, начиная с периода возникновения первых гепатокарцином, увеличивает выживаемость высокораковых мышей; полученные результаты могут быть перспективны для разработки способа лечения опухолей, возникающих при соответствующей генетической предрасположенности.
