CC BY
39
.ПРЕПАРАТЫ
ем антител 1дА класса, индуцированный парентеральным введением «Шигеллвак», оказался эффективным и достаточным для создания иммунных контингентов.
Конструирование вакцины против дизентерии Флекснера по аналогии с разработанной ранее вакциной «Шигеллвак» проводилось на основе О-специфи-ческого иммуногена, вводимого парентерально. Однако наличие различных серотипов шигелл Флекснера обуславливает необходимость выбора О-антигена мажорного серотипа или комбинации серотипов, ответственных за формирование протективного ответа при введении препарата.
Нами получен О-антиген высокой степени очистки, структура которого подтверждена методами С13 ЯМР-спектрос-копии и масс-спектрометрии. Данные исследования привели к более глубокому представлению о тонкой химической структуре повторяющего звена О-специфического полисахарида S. Аехпеп 2а. Согласно опубликованным материалам международным коллективом авторов доказано наличие ОАс групп в составе повторяющего тетрасахаридного звена О-специфического полисахарида.
О-специфический антиген вызывает индукцию иммунологической памяти и высокий вторичный иммунный !дО-ответ у лабораторных животных. Серии кандидата вакцины обладают протективными свойствами при моделировании инфекции шигеллеза Флекснера на морских свинках ^егепитест).
Проведена ! фаза клинических испытаний полисахаридной вакцины против дизентерии Флекснера на ограниченном контингенте взрослых добровольцев (28 человек). Подкожное введение препарата в дозах 25 - 125 мкг не приводило к возникновению существенных побочных реакций, зарегистрированные подъемы температуры у привитых не превышали 37,1°С.
Препарат продемонстрировал иммуногенность после первичной иммунизации с увеличением конечного титра антител в 16 раз. Специфические антитела были представлены наиболее важными для анти-шигеллез-ного иммунитета антителами !дА и !дО класса. Нарастание уровня !дМ антител у привитых было незначительно, что сопоставимо с данными по вакцине против шигелл Зонне - «Шигеллвак».
ГЛУБИННОЕ КУЛЬТИВИРОВАНИЕ БАКТЕРИЙ BORDETELLA PERTUSSIS ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ КОКЛЮШНОГО КОМПОНЕНТА ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ
Удотов Ю.М., Увицкий А.Ю.
ОАО «Биомед», г. Москва
В настоящее время для получения коклюшного компонента комбинированных вакцин и производства диагностических препаратов применяют метод поверхностного культивирования Bordetella pertussis на питательной среде КУА. Несмотря на очевидные положительные свойства метода, он обладает рядом существенных недостатков, затрудняющих стандартизацию процесса и снижающих выход микробной массы. За последние годы был предложен ряд вариантов культивирования B. pertussis на жидких питательных средах, однако ни один из них до сих пор не получил промышленного внедрения в России.
Нами было проведено исследование глубинного культивирования B. pertussis с целью получения промышленного объема биомассы. Среду для культивирования готовили ex tempore, выполняя стерилизующую фильтрацию без предварительного автоклавирования. Культивирование проводили при температуре (36 ± 1) оС при непрерывном перемешивании под ватно-марлевыми пробками. В качестве посевного материала использовали культуру III пассажа B. pertussis, проверенную по показателям микробиологической чистоты и морфологии. Посевная доза для одной бутыли составляла 20 мл культуры с содержанием микробных клеток 80 - 100 млрд/мл. Таким образом, исходное содержание микробных клеток в жидкой питательной среде составляло не более 1 МОЕ/мл.
В процессе культивирования с периодичностью 24 ч. проводили контроль микробиологической чистоты, морфологии, содержания микробных клеток, а также специфических агглютиногенов 1, 2 и 3. Установлено, что наиболее интенсивный рост культуры происходил в первые 24 ч, при этом максимальное содержание микробных клеток по окончании роста составляло 35 - 40 МОЕ/мл. Рост культуры существенно замедлялся при повышении показателя рН до 7.5 и прекращался при рН 8,0. Критичными параметрами в отношении скорости роста и содержания микробных клеток были кратность воздухообмена и содержание дрожжевого экстракта в составе питательной среды. Наличие сорбента (активированный уголь) не влияло на скорость роста и содержание микробных клеток, но в его отсутствие агглютинация со специфическими сыворотками отсутствовала, в том числе и с фактором I (видовой фактор B.pertussis). Сорбент вводили в состав среды в фиксированном виде, дополнительной его элиминации из готового продукта не требовалось.
В настоящее время отделением сорбированных препаратов ОАО «Биомед» проводится работа по внедрению технологии культивирования B. pertussis на жидкой питательной среде для получения коклюшного диагнос-тикума. В качестве перспективной разработки рассматривается также получение на жидкой среде коклюшного компонента вакцины АКДС.
О7
