Морфология. Патология
УДК 616-018
© 2013 Ю.В .Григорьева, В. А. Ваньков, О.Ю. Качаев
ГИСТОСТРУКТУРНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ СТЕНКИ НИЖНЕГО СЕГМЕНТА
МАТКИ КРОЛИКА
Методами световой микроскопии уточнено гистологическое строение нижнего сегмента матки. Установлено, что стенки правого и левого маточных рогов срастаются, формируя тело и шейку, их полости остаются отделенными друг от друга тонкой перегородкой и открываются во влагалище двумя отдельными отверстиями. Участок слияния медиальных стенок характеризуется объединением периметрия и надсосудистого слоя мио-метрия. Полученные данные могут быть использованы для освещения соответствующих разделов справочной и учебной литературы при написании разделов эволюционной, функциональной, сравнительно - видовой морфологии и биологии размножения. На основании проведенного гистологического исследования установлено, что у мелких и крупных грызунов, несмотря на общий тип строения матки, имеются значительные отличия, преимущественно затрагивающие их нижний сегмент на границе внутреннего и наружного зева.
Ключевые слова: матка, нижний сегмент матки, шейки матки, крысы, миометрий, поперечно-полосатые мышцы, актин
Введение. Изучение закономерностей индивидуального развития животных и путей управления процессами размножения и развития млекопитающих - одна из актуальных проблем эмбриологии, морфологии и зоологии [1,2,6]. Полнота знаний основ строения лабораторных животных позволяет изучить механизмы цитодифференцировки, аномальных гисто-и органогенезов, а также способствует более глубокому и объективному пониманию морфологических основ взаимоотношений тканей в развивающихся, обновляющихся и восстанавливающихся многотканевых системах. Кролик является одной из наиболее удобных моделей для экспериментальных исследований наравне с крысой, в силу короткой продолжительности эмбриогенеза, быстроты наступления периода половозрелости и непродолжительного периода послеродовой инволюции. Поэтому кролика часто используют в качестве объекта изучения половой системы [8].
Матка кролика является достаточно изученным органом половой системы [3,7,12,13]. Она представляет собой полый перепончатый орган, в котором развиваются плоды. Во время родов плоды выталкиваются маткой через родовые пути наружу. В ней различают рога, тело и шейку. Два рога сверху начинаются от маточных труб, а ниже срастаются в тело, причем они открываются в полость матки самостоятельными отверстиями [4,10]. Существуют данные, что иногда эмбрионы от первого спаривания развиваются в одном роге, а от второго - в другом [4]. Тело матки небольшое, полость ее переходит в узкий канал шейки, открывающийся во влагалище.
Но, как показывает анализ литературы, остается много нерешенных вопросов, касающихся строения ее каудального отдела, особенно на микроскопическом уровне. Малоизученной остается гладкая мышечная ткань миометрия шейки матки, характеризующаяся, как известно, спецификой выполняемых функций и эндокринной зависимостью [9,12,14]. Прак-
тическое значение этих сведений, несомненно, необходимо для биологов, ветеринаров и может быть полезно для врачей-гинекологов [9].
Целью исследования стало изучение гистоструктурной организации стенки нижнего сегмента матки кролика репродуктивного возраста с применением современных гистологических методов.
Материал и методы. В работе использованы нерожавшие крольчихи в возрасте 6-8 месяцев, в фазе эструса, в количестве - 3 особей. Исследование выполнено в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных». Материал фиксировали в 10 % забуференном формалине, проводку материала осуществляли в гистологическом процессоре замкнутого типа с вакуумом Leica ASP 300. Заливали материал в парафин «Histomix» фирмы Bio Optica. Срезы готовили на роторном микротоме толщиной 6 мкм. В работе использованы методы световой микроскопии с окраской срезов гематоксилином и эозином. Также проведено иммуногистохимическое исследование тканей шейки матки с применением набора моноклональных антител к гладкомышечному актину. Типирование проводили с использованием антител фирмы DACO. Постановку иммуногистохимической реакции проводили с одношаговой системой визуализации BioGenex (QD 630-XAK) Super Sensitive one-step Polymer - HRP Kit/DAB. Также в работе использованы методы кольпоско-пии с видео- и фотосъемкой.
Результаты исследований и их обсуждение. Матка крольчих в своем строении имеет парные рога, двойные тело и шейку. Маточные рога срастаются в каудальном направлении, формируя тело и шейку, но их полости остаются отделенными друг от друга перегородкой и открываются во влагалище двумя самостоятельными отверстиями (рис. 1, 2). Согласно общепринятой классификации маток, ее расценивают как двойную.
При гистологическом исследовании установлено, что стенка рогов и тела матки имеет сходное строение с другими млекопитающими и состоит из трех оболочек: слизистой (эндометрия), мышечной (миометрия) и серозной (периметрия) (рис. 3).
Рис. 1. Нижний сегмент матки. Видны рога, сливаю- Рис. 2. Нижний сегмент матки. Видна одна шейка
щиеся в каудальной части с образованием двойного матки, открывающаяся во влагалище.
тела и двойной шейки, открывающейся во влагалище Метод кольпоскопии
Рис. 3. Стенка рогов матки, образованная эндометрием, миометрием и периметрием.
Окраска гематоксилин и эозин. Увел. 40Х
Слизистая оболочка образована эпителиальной пластинкой из однослойного столбчатого реснитчатого эпителия по длине матки. Клеточный состав эпителия представлен морфологически отличающимися клетками реснитчатыми (с гиперхромными ядрами), секреторными, также встречаются клетки в состоянии митоза. В цитоплазме секреторных клеток во все периоды эстрального цикла выявляются вакуоли, количество которых увеличивается на стадии эструса. В количественном составе они являются преобладающими в цервикальном канале. В литературе имеются данные, что в шейке матки определяются вакуолизированные и гранулированные PAS- положительныеклетки, которые являются эстрагензависимыми [11]. Эпителий матки участвует в образовании желез (рис. 4), которые имеют морфологические отличия в теле и шейке: в теле матки устья желез широкие и глубокие, в шейке матки - более короткие, концевые отделы разветвленные (рис. 5).
Рис. 4. Стенка матки на уровне рогов. В эпителии определяются реснитчатые и секреторные клетки.
Окраска: гематоксилин и эозин. Увел. 400Х.
Рис. 5. Матки на уровне цервикального канала и наружного зева. Отмечается разница в глубине, ширине и разветвленности желез шейки матки. Окраска: гематоксилин и эозин. Увел. 40Х.
Слизистая оболочка образует рельеф в виде складок, которые становятся еще более заметными со стороны наружного зева матки. Следует отметить, что эпителий со стороны цервикального канала и наружного зева у кроликов остается однослойным реснитчатым, несмотря на то, что количество их уменьшается. Таким образом, в нижнем сегменте матки кролика со стороны наружного зева отсутствует смена эпителия по сравнению со строением нижнего сегмента матки крысы, у которой матка также является двойной [5], но есть участок стыка двух морфологически и гистогенетически разных эпителиев, аналогичный человеку.
Собственная пластинка слизистой представлена рыхлой волокнистой соединительной тканью. Среди волокнистых структур соединительной ткани преобладают коллагеновые волокна. Эластические волокна немногочисленны, имеют вид ветвящихся пучков.
Соединительная ткань также присутствует и в миометрии, и в периметрии. Периметрий снаружи покрыт мезотелием.
Миометрий матки крольчих, так же как и у других млекопитающих, образован пучками гладкой мышечной ткани, отделенными друг от друга прослойками рыхлой волокнистой ткани. С помощью иммуногистохимического исследования матки в различных ее отделах, установлено, что в рогах и теле миометрий состоит из трех слоев - внутреннего (подслизи-стого), образованного циркулярно ориентированными миоцитами; среднего (сосудистого) с небольшим количеством гладких миоцитов, косопоперечного направления; наружного (над-сосудистого) с клетками косопродольного направления.
Участок слияния медиальных стенок правого и левого рогов матки происходит на уровне тела и характеризуется объединением наружной оболочки - периметрия и части миометрия, а именно, его надсосудистого и сосудистого слоев (рис. 6). Таким образом, в нижнем сегменте формируется срединная перегородка, разделяющая две полости нечетко выраженного тела и шейки матки. Срединная перегородка в своем строении образована эндометрием и мио-метрием. При этом миометрий в своем строении имеет подслизистые слои и единый сосудистый слой. Сосудистый слой более выражен в теле матки (рис. 6).
Миометрий латеральных стенок нижнего сегмента сохраняет в своем строении три слоя. На уровне шейки матки максимальное развитие получает внутренний (подслизистый) слой, образованный циркулярно и косо ориентированными миоцитами (рис.7). На уровне наружного зева шейки матки мышечные волокна формируют мощный сфинктер (рис. 3). Такое строение миометрия сходно по строению с нижним сегментом матки грызунов (например, крыс). Функциональное значение, вероятно, можно объяснить многоплодной беременностью и удержанием плодов от одного изгнания до другого.
Рис. 6. Участок слияния рогов матки в тело. Стенка рогов матки, образованная эндометрием, миометрием и периметрием. Окраска гематоксилин и эозин. Увел. 40Х.
Рис. 7. Мышечная оболочка матки со стороны латеральной стенки на уровне сфинктера. Иммуногистохимическое исследование гладкомышечного актина. Увел. 40Х.
Выводы. На основании проведенного гистологического исследования установлено, что у мелких и крупных грызунов, несмотря на общий тип строения матки, имеются значительные отличия, преимущественно затрагивающие их нижний сегмент.
В качестве экспериментальной модели для изучения нижнего сегмента матки, предпочтение следует отдавать крысам, в виду приближенного строения шейки матки к человеку. Проведенное гистологическое исследование носит фундаментальный характер, его результаты могут быть использованы для подготовки соответствующей справочной и учебной литературы при написании соответствующих разделов по эволюционной, функциональной, сравнительно-видовой морфологии и биологии размножения.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Дорош М.В. Болезни кроликов и нутрий. Дорош М.В. Издательство: Вече, 2007. - С. 11-12.
2. Вагин Е. А., Цветкова Р. П. Кролиководство в личных хозяйствах. 3-е изд., перераб. и доп. М.: Московский рабочий, 1991. 205 с.
3. Вахид Абд Эль Азим Абдель Рахим. Особенности строения и васкуляризации яичников и матки крольчихи в постнатальном онтогенезе. Автореферат на соик. уч. степ. канд ветерин. наук. - Санкт- Петербург, 1992, С. 19.
4. Глаголев П. А., Ипполитова В. И.. Анатомия сельскохозяйственных животных с основами гистологии и эмбриологии, 1977, 450 с.
5. Григорьева Ю.В., Ямщиков Н.В., Бормотов А.В, Гарифуллина К.Ф. Особенности строения миометрия нижнего сегмента матки лабораторных крыс. Фундаментальные исследования. № 12 (часть 1), 2012. С. 48-51.
6. Кладовщиков В. Ф., Александров В. Н. Стимулировать развитие нутриеводства и кролиководства // Кролиководство и нутриеводство. 2002. № 3. С. 19-20.
7. Малакшинова, Л. М. Гистологическая и гистохимическая характеристика матки крольчих [Text] / Л.М. Ма-лакшинова // Состояние и перспективы развития агропромышленного комплекса Забайкалья: Материалы научно-практической конференции (4-6 февраля 2003 г.) / Бурятская ГСХА им. В. Р. Филиппова. - Улан-Удэ, 2003. -С. 82-86.
8. Савинов П.А., Ниаури Д.А., Ковшова Н.В. Разработка экспериментальной модели эндометриоза, адаптированной к современным хирургическим технологиям. / Вестник Санкт-Петербургского университета, 2006. -сер.11. - Вып. 3. С. 114 - 119.
9. Томитова, Е. А. Гистоструктура, гистохимические и морфологические показатели слизистой матки, шейки матки и влагалища крольчих в норме и под воздействием экзогенных половых гормонов [Text] / Е. А. Томитова // Актуальные аспекты экологической, сравнительно-видовой, возрастной и экспериментальной морфологии: Материалы международной научно-практической конференции, посвященной 100-летию профессора Вениамина Яковлевича Суетина (24-27 июня 2004 г.) / ФГОУ ВПО «Бурятская ГСХА им. В.Р. Филиппова», Фак. вет. медицины. - Улан-Удэ, 2004. - С. 186-191.
10. Хрусталева И.В., Михайлов Н.В., Шнейберг Я.И. и др./под ред. Хрусталевой И. В./ Анатомия домашних животных. М.: Колос, 1994. 704 с.
11. Beverly s. Chilton, Santo V. Nicosia, Janice M. Sowinski, and Don P. Wolf/ Isolation and characterization of rabbit endocervical cells the journal of cell biology «Volume 86». July 1980. - P. 172-180
12. Bulat R, Kannan MS, Garfield RE. Studies of the innervation of rabbit myometrium and cervix. Can J Physiol Pharmacol. 1989 Aug; 67(8):837-44. PubMed PMID: 2598120.
13. Odor D.L., Blandau R.J. Light and electron microscopic observation on the cervical epithelium of the rabbit //Amer. J. Anat. 1988.- V.181.- №3. - P. 289-319.
14. Okawa T, Suzuki Y, Endo C, Hoshi K, Sato A, Nakanishi H. The influence of prostaglandins on the contractile response to electrical field stimulation in rabbit myometrial and cervical smooth muscles. Eur J Pharmacol. 1993. Jan. 19; 230(3):341-8. PubMed PMID: 8440311.
REFERENCES
1. Dorosh M.V. Disease of rabbits and nutria. Dorosh M.V. Publisher: Veche, 2007. - S. 11-12.
2. Vagin E.A., Tsvetkov R.P. Rabbit in private households. 3rd ed., Rev. and add. Moscow: Moscow Worker, 1991. 205.
3. Wahid Abd El Azim Abdel Rahim. Structure and vascularization of the ovaries and uterus rabbit in postnatal ontogenesis. Abstract for Soik. uch. step. candidate vet. Sciences. - St. Petersburg, 1992, pp. 19.4.
4. Glagolev P.A., Ippolitova V.I. Anatomy of farm animals with the basics of Histology and Embryology, 1977, 450c.
5. Grigorievа Y.V., Yamshchikov N.V., Bormotov A.V., Garifullina K.F. structural features of the lower uterine segment myometrium lab rats "Fundamental research" № 12 (Part 1), 2012, pp. 48-51.
6. Storekeepers V.F., Alexandrov V.N. Nutrievodstva stimulate the development and Rabbits / / Rabbit and nutrievod-stvo. 2002. Number 3. Pp. 19-20.
7. Malakshinova L.M. Histological and histochemical characteristics of the uterus of rabbits [Text] / LM Malakshinova / / Condition and prospects of development of the agroindustrial complex Transbaikalia: Proceedings of the conference (4-6 February 2003) / Buryat State Agricultural them. VR Filippov. - Ulan-Ude, 2003. - S. 82-86
8. Savinov P.A. Niauri D.A., Kovshova N.V. Development of an experimental model of endometriosis, adapted to modern surgical technologies. / Bulletin of the St. Petersburg University Press, 2006. - Seryu 11. - MY. 3. Pp. 114 - 119.
9. Tomitova E.A. Histostructure, histochemical and morphological parameters of the endometrium, cervix and vagina of rabbits under normal conditions and under the influence of exogenous hormones [Text] / E.A. Tomitova / / Actual environmental aspects, comparative species, age and experimental morphology: Proceedings of the international scientific-practical conference dedicated to the 100th anniversary of Professor Benjamin Jakovljevic Suetina (24-27 June 2004) / FSEIHPE "Buryat State Agricultural them. V.R. Filippov, «Fuck. vet. Medicine». - Ulan-Ude, 2004. - S. 186-191
10. Khrustalyova I.V., Mikhailov N.V., Shneiberg J.I. et al. / Ed. Khrustalyova I.V. / Anatomy pets. Moscow: Kolos, 1994. 704.
11. Beverly s. Chilton, Santo V. Nicosia, Janice M. Sowinski, and Don P. Wolf/ Isolation and characterization of rabbit endocervical cells the journal of cell biology " Volume 86 July 1980. - P. 172-180.
12. Bulat R, Kannan MS, Garfield RE. Studies of the innervation of rabbit myometrium and cervix. Can J Physiol Pharmacol. 1989 Aug;67(8):837-44. PubMed PMID: 2598120.
13. Odor D.L., Blandau R.J. Light and electron microscopic observation on the cervical epithelium of the rabbit //Amer. J. Anat. 1988. - V.181.- №3. - P.289-319.
14. Okawa T, Suzuki Y, Endo C, Hoshi K, Sato A, Nakanishi H. The influence of prostaglandins on the contractile response to electrical field stimulation in rabbit myometrial and cervical smooth muscles. Eur J Pharmacol. 1993 Jan 19; 230(3):341-8. PubMed PMID: 8440311.
Статья принята в печать 8 октября 2013 г.
Рецензент Гелашвили П.А., доктор медицинских наук, заведующий кафедрой морфологии и патологии НОУ ВПО «Медицинский институт «РЕАВИЗ».