CC BY
12
ГИСТОМОРФОМЕТРИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА ВЛИЯНИЯ КАЛЬЦИЯ-Б3 НИКОМЕД И КАРБОНАТА КАЛЬЦИЯ
НА СОСТОЯНИЕ КОСТНОЙ ТКАНИ ПРИ БЕРЕМЕННОСТИ И ЛАКТАЦИИ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
ЭА ЩЕРБАВСКАЯ, ЕА КОЦЮРБИЙ
Владивостокский государственный медицинский унтер*
В сравнительном аспекте изучено влияние препаратов Кальция-Б3 Никомед и карбоната кальция на гис-томорфометрические параметры костной ткани в периоды беременности и лактации у экспериментальных животных. Обнаруженные в эксперименте качественные и количественные изменения продемонстрировали, что комбинированное применение солей Са и витамина Б в периоды беременности и лактации оказывает положительное воздействие на костную ткань, обеспечивая стабилизацию костной массы и сохранность костной микроархитектоники. Эффективность комбинированной терапии обусловлена ее способностью сохранять оптимальную скорость костеобразования и в то .же время подавлять ускоренную костную резорбцию. Лечение только карбонатом Са не способно полностью предотвратить костные потери.
ВЦ Гистоморфометрия кости являемся незаменимым «инструментом» для исследований влияния различных методов лечения остеопоро-за, предоставляя информацию не только о механизме действия препаратов, но и, способности их восстанавливать костную микроархитектонику [4]. В настоящее время утвердилось понимание простого факта, что микроархитектоника кости играет критическую роль в определении ее механических качеств [9]. Увеличение костной массы, достигнутое в результате приема каких-либо препаратов, не обязательно сопровождается восстановлением нормальной костной структуры или прочности кости [12]. В связи с этим определение морфометричес-ких параметров имеет важное значение для контроля эффективности лечения [1, 15].
Исследованиями последних лет установлено, что беременность и лактация оказывают отрицательное влияние на состояние костной системы, обусловливая ускоренную потерю костной массы [2, 11, 14]. Учитывая, что в развитии остеопенического синдрома у беременных и кормящих женщин первостепенное значение имеют нарушения минерального обмена [5, 7], патогенетически обоснованным является применение для его терапии солей кальция (Са) и витамина D [13]. Предварительными исследованиями продемонстрирована эффективность назначения подобной комбинации для приостановления потери массы кости [6,10]. Гистоморфометрическая оценка антиостеопоротических свойств препаратов Са и витамина D позволит, с нашей точки зрения, определить оптимальную тактику лечения, основанную на понимании основных механизмов развития остеопе-нических осложнений, и в значительной степени снизить частоту данной патологии. По очевидным эти-
ческим соображениям метод гистоморфометрии не мог использоваться у беременных и кормящих женщин, поэтому нами были проведены экспериментальные исследования на животных.
ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ
Сравнительная оценка влияния Кальция^, и карбоната Са на гистоморфометрические показатели костной ткани при беременности и лактации у крыс в эксперименте.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
В качестве экспериментального материала использовались белые нелинейные половозрелые крысы-самки с исходной массой 180-220 г. Животные были распределены на 4 группы (по 20 в каждой): 1-я - животные, получающие во время беременности Кальций^3 Никомед (содержит карбонат кальция и витамин D3 - холекальциферол), 2-я - карбонат Са; 3-я - лактирующие животные, получающие Кальций-Б3 4-я - карбонат Са. Препараты вводили внутри-желудочно: Кальций^3 в дозе 8,33 мг/сут. карбоната Са и 1 ,33 МЕ/сут. холекальциферола, карбонат Са в дозе 8,33 мг/сут. 1 раз в сутки в течение всего периода беременности и лактации (из расчета 4,167 мг/ сут. карбоната Са и 0,667 МЕ/сут. холекальциферо-ла на 100 г массы тела животного). Группу сравнения составили 40 интактных животных.
Эвтаназия животных проводилась путем декапи-тации в первые часы послеродового периода и в конце лактационного периода. Кости (позвонки поясничного отдела позвоночного столба, бедренная и плечевая кости) извлекались и фиксировались в 10% нейтральном формалине, обезвоживались в спиртах восходящей крепости и заливались в формалине по
№ 1/2004 ОСТЕОПОРОЗ И ОСТЕОПАТИИ
стандартной методике. Декальцинация костных структур проводилась раствором Рихмана, Гельфан-да и Хилла. При гистоморфометрии использовались окулярный микрометр MOB -1 -15 и окулярная квадратно-сетчатая вставка для цитологических исследований с 289 точками по Автандилову. Количественную оценку морфофункциональных показателей костных структур проводили на обзорных препаратах, окрашенных гематоксилином и эозином по Шмор-лю при постоянном десятикратном увеличении. Изучение материала проводилось под микроскопом NIKON MICKOFLEX AFX - DX, БИМАМ Р 11.
В соответствии с требованиями Американского остеологического общества [3] для полной оценки состояния кости исследовали следующие показатели: объем губчатой кости (в %), ширину кортикального слоя (в мкм), диаметр гаверсова канала (в мкм), толщину трабекул (в мкм), толщину остеоида (в мкм), поверхность остеоида (в %), число остеобластов (ОБ) (на мм2 среза кости), эрозированную поверхность (в %), число остеокластов (ОК) (на мм2 среза кости). Статистическую обработку полученных результатов проводили с вычислением средней арифметической (М), ее ошибки (м), критерия Стьюдента (t).
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
При сравнительном морфометрическом исследовании влияния Кальция-D, Никомед и карбоната Са на состояние костной ткани при беременности у экспериментальных животных установлено, что у крыс, получавших во время беременности Кальций-D, Ни-комед, эрозированная поверхность как в телах позвонков (6,1 ±1,2%, р<0,01), так и в трубчатых костях (4,9± 1,1%, р<0,05) была достоверно меньше, чем в контрольной группе (10,6± 1,2% и 9,5±2,0% соответственно). Заметное уменьшение количества ОК (в телах позвонков - 0,8+0,1 на мм2, р<0,01, в трубчатых костях - 2,0±0,2 на мм2, р<0,05), расположенных в просвете гаушиповых лакун, по сравнению с интак-тными животными (2,0±0,6 на мм2 и 3,1 ±0,5 на мм2 соответственно) также свидетельствует об ослаблении резорбтивной активности (табл. 1). В дополнение к этому микроскопически выявлялось уменьшение глубины полостей резорбции.
На фоне приема карбоната Са подавление кост-но-резорбтивных процессов было не столь выражено, как в предыдущей группе: в телах позвонков эро-зированная поверхность изменилась значительно (7,5+0,9%, р<0,05), а в трубчатых костях наблюдалась только тенденция к уменьшению показателя (6,3±1,8%, р>0,05). Количество ОК и их одноядерных остатков, находящихся в резорбированных лакунах, достоверно не изменилось (в телах позвонков -1,4±0,5 на мм2, р>0,05, в трубчатых костях - 2,5+0,7
на мм2, р>0,05), хотя тенденция к снижению их числа была отчетливой.
Итак, основным эффектом препаратов оказалось снижение интенсивности костной резорбции. В свою очередь, Кальций^] по сравнению с карбонатом Са не только ослабляет патологическую костную резорбцию, но и способствует активации клеток остеоб-ластического ряда. То есть отмечено еще одно важное следствие комбинированной терапии, а именно увеличение толщины остеоида (в телах позвонков -4,4±0,8 мкм, р<0,05, в трубчатых костях - 9,5±0,9%, р<0,05) по сравнению с контролем (2,7+0,3 мкм и 6,6+ 1,1 мкм соответственно). Достоверного изменения числа ОБ обнаружено не было (р>0,05), поэтому нарастание толщины остеоида можно отнести на счет стимуляции функциональных способностей остеоб-ластных клеток. При рассмотрении гистологических препаратов обращает на себя внимание активное протекание процессов остеогенеза. При окраске по Мал-лори определяется синтез коллагена остеоцитами с последующей его кальцинацией.
В отличие от Кальция^, карбонат Са не вызывал увеличения толщины остеоида (в телах позвонков - 2,9±0,5 мкм, в трубчатых костях - 6,3± 1,4 мкм), при этом величины данного параметра приближались к соответствующим значениям в контрольной группе животных (р>0,05). Количество ОБ достоверно не изменилось (р>0,05).
Можно предположить, что обусловленное комбинированной терапией уменьшение количества резор-бированной костной ткани, сопровождающееся адекватным костеобразованием, в целом приводит к смещению костного баланса со слабоотрицательного до слабоположительного. С момента наступления равновесия между процессами костного метаболизма костная масса либо остается неизменной, либо начинает увеличиваться, и ее прирост будет сохраняться до тех пор, пока интенсивность резорбции остается низкой [8].
На фоне приема Кальция^, морфометрические показатели основных костных структур существенно отличались от соответствующих значений в контрольной группе животных. Выявлены достоверное увеличение толщины трабекул (в телах позвонков -58,7+1,9 мкм, р<0,05, в трубчатых костях - 52,6+1,7 мкм, р<0,05) и уменьшение диаметра гаверсовых каналов (в телах позвонков - 41,2+4,7 мкм, р<0,05, в трубчатых костях - 32,4+3,8 мкм, р<0,05) по сравнению с контролем. Эти изменения сопровождались нарастанием объема губчатой кости. Так, данный количественный параметр в телах позвонков составил 68,9 + 2,7% (р<0,05), в трубчатых костях -56,5+2,4% (р<0,05), что достоверно превышало соответствующие показатели в группе интактных жи-
вотных (59,7+3,8% и 49,8+2,2%). Следует подчеркнуть, что статистически значимые различия в объеме губчатой кости с контролем достигнуты не за счет прироста костной массы, а благодаря предотвращению ее потери, поскольку этот показатель у небеременных половозрелых крыс-самок (в телах позвонков -72,3+4,1%, р>0,05, в трубчатых костях -58,7+3,6%, р>0,05) не отличался от такового у родивших животных, получавших Кальций-Б,. Это расценивалось как положительный эффект препарата. Между тем существуют теоретические предпосылки и для первого варианта. При анализе индивидуальных результатов терапии установлено, что в случаях некоторого увеличения (р>0,05) объема губчатой кости (4 наблюдения) это происходило в результате нарастания толщины остеоида и последующего утолщения трабекулярных пластин.
Обнаруженные в эксперименте качественные и количественные изменения позволяют считать, что на фоне лечения Кальцием-Б, происходит стабилизация объема губчатой кости и структуры трабекул.
В группе крыс, получавших карбонат Са, отмечалась тенденция к увеличению толщины трабекул (в телах позвонков - 55,7+2,6 мкм, р>0,05, в трубчатых костях - 50,4+2,2 мкм, р>0,05) и уменьшению диаметра гаверсовых каналов (в телах позвонков -49,6+5,4 мкм, р>0,05, в трубчатых костях - 38,2+5,6 мкм, р>0,05) по сравнению с контролем (табл. 1), вероятно, обусловленная снижением интенсивности костной резорбции. Однако объем губчатой кости в телах позвонков (64,3+3,1%) и в трубчатых костях (53,1 +2,8%) от контроля не отличался (р>0,05), то есть карбонат Са не обеспечивает полного сохранения костной массы. У 3 (15%) животных из 20 обнаружено достоверное снижение объема губчатой кости, у 12 (60%) - некоторая тенденция к снижению показателя, а у 5 (25%) - изменений не найдено (прекратилась потеря кости), в то время как в контрольной группе во всех случаях найдена отрицательная динамика, причем в 22 (55%) наблюдениях снижение объема губчатой кости было достоверным, в 18 (45%) - не достоверным. Лечение Кальцием-Б, и карбонатом Са не повлияло на толщину кортикального слоя, возможно, потому, что при беременности данный показатель не изменяется. По нашим данным, у небеременных крыс толщина кортикального слоя составляет в телах позвонков 138,5+3,2 мкм, в трубчатых костях - 146,2+2,2 мкм, у родивших животных - соответственно 135,4+2,3 мкм и 144,1+3,1 мкм, р>0,05.
В ходе эксперимента установлено, что комбинированная терапия при беременности оказывает нормализующее влияние на процессы костного ремоде-лирования, активизируя костное формирование и
подавляя резорбцию кости, что в целом предотвращает костные потери.
Результаты исследования показателей костеобра-зования и резорбции у лактирующих животных показали, что в сравниваемых группах сохранилась высокая скорость ремоделирования кости. При оценке ре-моделирующих поверхностей в группе крыс, получавших Кальций-Б , поверхность остеоида по протяженности превышала протяженность эрозированной поверхности (р<0,05). На фоне приема карбоната Са за прошедший период времени заметных изменений протяженности зрозированных и занятых остеоидом поверхностей относительно друг друга не произошло (р>0,05). Однонаправленные, но более значительные нарушения костного ремоделирования обнаружены в группе животных, не получавших антирезорбтивнои терапии, где увеличение костеобразующей поверхности сопровождалось параллельным увеличением эро-зированной поверхности, причем в 62,5% случаев преобладала последняя (р<0,05). Более того, при лечении Кальцием-Б, существенно уменьшилась как средняя, так и максимальная глубина полостей резорбции. На фоне терапии карбонатом Са также наблюдалось снижение глубины полостей резорбции.
Измерение параметров резорбции позволило установить, что у животных, получавших Кальций-Б,, отмечено уменьшение эрозированной поверхности (в телах позвонков - 9,5+0,7%, р<0,01, в трубчатых костях - 8,4+1,2%, р<0,05) и числа ОК (в телах позвонков - 1,1 +0,2 на мм:, р<0,05, в трубчатых костях -2,3+0,7 на мм2, р<0,05) по сравнению с контролем (табл. 2). При лечении карбонатом Са доля эрозиро-ванной поверхности в телах позвонков снизилась достоверно (10,8+1,2%, р<0,05), а в трубчатых костях имела место тенденция к уменьшению показателя (10,2+2,3%, р>0,05) по отношению к контрольным величинам (16,3+2,5%и 15,1 +3,2%) соответственно). Выявлено заметное снижение количества ОК (в телах позвонков - 2,4+0,6 на мм:, в трубчатых костях -3,8+1,4 на мм2, р>0,05), хотя разница с контролем (3,7+1,3 на мм2 и 5,2+1,2 на мм: соответственно) не была статистически значимой.
Наиболее примечательным изменением, обнаруженным у экспериментальных* животных на фоне приема Кальция-Б,, оказалось достоверное нарастание толщины остеоида (в телах позвонков - 4,2+0,5 мкм, р<0,05, в трубчатых костях - 9,4+1,1 мкм, р<0,05) по сравнению с контрольной группой (2,1 +0,7 мкм и 5,9+1,4 мкм соответственно). По всей вероятности, это обусловлено увеличением периода ремо-делирования, в результате существенно увеличиваются период костеобразования и время минерализации [8]. Морфологическая картина костной ткани в группе животных, леченных Кальцием-Б,, характе-
№ 1/2004 ОСТЕОПОРОЗ И ОСТЕОПАТИИ
Таблица 1
Динамика гнетом орфо метрических параметров тел позвонков и трубчатых костей при беременности у экспериментальных жшиниш на фоне приема Кальция-и карбоната Си
Показатсль Контрольная труипа п=40 Рилившие живо шые, получавшие
Калыдин-О, н=20 Карбонат Са п-2{\
Объем 1убчатой кости.' 49,8+2,2 68.9+2.7* 56,5+2.4+ 64.3+3.
Ширина кортикального слоя, мкм 135.4±2.3 144, 137.612.8""' ! 45.512.4"'" 136.412.5^' 144,8+2,9"'-'
Диаметр гаверсова каната, мкм шш 47,516,4 41.2+4,7* 32.413,8* 49,6+5.4"-38,2+5 .б"1'1
Толщина трабекул, мкм да 4К,3+1,2 58.7+1,9* 52.6+1.7* 55.7±2.6";-' 50.412,2'"
Толщина остеоида, мкм ИШ 6,6+1.1 4.4Ю.К* 9.5Ю.9* 6,311,4"
Количество ОБ на мм- И1±1Л 7,4±0,8 9,2+1,5'" 8.4+1.3'1'1 7.9±1.2Н/Т
Эршированиия поверхность,"-и 10.6+1.2 У,5+2,0 (У+1.2** 4.9+1.1* 7,510.9* 6.3+1.8'"-1
Количество ОК на мм 10+0,6 3.1 ±0,5 0,810.1 ** 2.0Й.2* Г^+О^11-2,5±0.7"'л
Примечание: * - достоверность различий по сравнению с контролем, * - р<0,05, ** - р<0,01, н/д - не достоверно; в числителе - показатели в телах позвонков, в знаменателе - в трубчатых
костях.
Таблица 2
Динамика гистоморфометрических параметров тел позвонков и трубчатых костей в период лактации у экспериментальных животных на фоне приема Кальция^3 и Карбоната Са
Показатель Контрольная группа, п=40 Лактирующие животные, получавшие
Кальций-D, п=20 Карбонат Са п=20
Объем губчатой кости,% 52,6±4.5 44,3±2,8 62,5±2.1* 51,6±2,4* 55.7±3.4н/д 47,5±2,6н/д
Ширина кортикального слоя, мкм 128,2±2.8 137,8±2,6 135.5±2,2* 145,4±2,4* 131.2±2,5н/д 140,6±2,1н/д
Диаметр гаверсова канала, мкм 78,4±12.4 60,6±10,2 53,8±8.4Л 46,2±7,3"/л 53,4±8,7н/д
Толщина трабекул, мкм 44.9±3.8 46.2±1,9 54.2±2.5* 50,9+1,4* 49.6±2.1н/д 48,6±2,3н/д
Толщина остеоида, мкм 2,1±0,7 5,9±1,4 4,2±0,5* 9,4+1,1* 2.3±0,9н/д 5,5±1,6н/д
Количество ОБ на мм2 15,4±2.6 14,2±2,3 11,9±2.1н/д 10,8±1,8н/д 13,6±2,4н/д 12,5±2,2н/д
Эрозированная 0 А поверхность, /) 16.3±2.5 15,1±3,2 9.5±0,7** 8,4±1,2* 10.8±1.2* 10,2±2,3н/д
Количество ОК на мм2 3,7±1,3 5,2±1,2 1.1±0,2* 2,3±0,7* 2А±0,6н/д 3,8±1,4н/д
Примечание: * - достоверность различий по сравнению с контролем, * - р<0,05, ** - р<0,01, н/д - не достоверно; в числителе -показатели в телах позвонков, в знаменателе - в трубчатых костях.
ризовалась наличием очагов костеобразования, на что указывали цепочки ОБ (от 3,5 до 11 в поле зрения) на поверхности эндостальной части костных балок. Увеличение толщины остеоида сопровождается возникновением очагов его минерализации, хотя по сравнению с контрольной группой зарегистрирована тенденция к снижению числа ОБ (в телах позвонков - 11,9±2,1 на мм2, в трубчатых костях -10,8±1,8 на мм2, р>0,05), что, по нашему мнению, является закономерной реакцией на угнетение костной резорбции, достигнутое в результате терапии, поскольку процессы резорбции и костеобразования сопряжены между собой.
Однако карбонат Са оказался не в состоянии поддерживать достаточный уровень костеобразования. Толщина остеоида в группе крыс, принимавших данный препарат (в телах позвонков - 2,3±0,9 мкм, в трубчатых костях - 5,5±1,6 мкм), не отличалась от контрольных значений (р>0,05).
Анализ полученных результатов дает основание полагать, что при использовании Кальция-Б3 у лак-тирующих животных достигается положительный баланс в каждом цикле ремоделирования. Последнее в сочетании с высокой частотой активации ремоде-лирования способно обеспечить стабилизацию и даже некоторый прирост костной массы. Однако для того, чтобы препарат мог заметно увеличиватькос-тную массу, он должен снижать как глубину резорбции, так и частоту активации [3]. Ни Кальций Б3, ни карбонат Са не обладают последним эффектом. Тем не менее уменьшение глубины полости резорбции наряду с полноценным костеобразованием является важным доводом в отношении потенциального использования Кальция-Б3 для профилактики остеопе-нического синдрома. Кроме того, снижается вероятность перфорации трабекул и соответственно наблюдается устойчивая тенденция к усилению трабекуляр-ной сцепленности по сравнению с животными, которые не подвергались лечению.
Действительно, на фоне приема Кальция-Б3 у лак-тирующих животных толщина трабекул составила в телах позвонков 54,2±2,5 мкм (р<0,05), в трубчатых костях - 50,9+1,4 мкм (р<0,05), что достоверно превышало контрольные величины (44,9±3,8 мкм и 46,2± 1,9 мкм соответственно). Возможным механизмом увеличения толщины трабекул является снижение глубины резорбции и увеличение времени костеобразования. Благодаря этим же изменениям диаметр гаверсовых каналов был заметно меньше (в телах позвонков - 53,8±8,4 мкм, в трубчатых костях -46,2±7,3 мкм), чем в группе интактных животных (в телах позвонков - 78,4±12,4 мкм, в трубчатых костях - 60,6± 10,2 мкм), хотя различия оказались не достоверными (р>0,05).
При применении Кальция-Б, наряду с изменением параметров, отражающих микроархитектонику кости, зафиксирована положительная динамика количественных показателей (табл. 2). Объем губчатой кости в телах позвонков (62,5+2,1%, р<0,05) и в трубчатых костях (51,6+2,4%, р<0,05) превышал соответствующие значения в контроле (52,6±4,5% и 44,3±2,8%). Увеличение объема губчатой кости было в основном результатом нарастания толщины тра-бекул. Вследствие подавления избыточной резорбции на эндостальной поверхности толщина кортикальной пластинки в телах позвонков (135,5±2,2 мкм) и в трубчатых костях (145,4±2,4 мкм) сохранилась на уровне, отмеченном до беременности, и статистически значимо отличалась от контрольной группы (128,2±2,8 мкм и 137,8±2,6 мкм соответственно, р<0,05), где принципиальным изменением в течение лактации явилось истончение кортикального слоя по сравнению с небеременными животными (в телах позвонков — 138,5+3,2 мкм, р<0,05, в трубчатых костях -146,2±2,2мкм,р<0,05).
В группе животных, получавших в течение лактации карбонат Са, наблюдалась незначительная тенденция к увеличению толщины трабекул (в телах позвонков - 49,6+2,1 мкм, в трубчатых костях - 48,6+2,3 мкм) по сравнению с контролем (р>0,05). Изменений диаметра гаверсовых каналов (в телах позвонков -66,1 ±9,3 мкм, в трубчатых костях - 53,4±8,7 мкм) обнаружено не было (р>0,05). На фоне терапии карбонатом Са количественные гистоморфометрические параметры (объем губчатой кости и ширина кортикального слоя) от соответствующих в контроле не отличались. У 3 (15%) животных объем губчатой кости уменьшился достоверно по сравнению с исходным уровнем, процесс сопровождался потерей тра-бекулярной сцепленности, что выявлялось при рассмотрении гистологических препаратов. Эти данные свидетельствуют о том, что лечение добавками Са и в период лактации не способно полностью предотвратить костные потери.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Проведенное нами экспериментальное исследование продемонстрировало, что комбинированное применение солей Са и витамина Б в периоды беременности и лактации оказывает позитивное воздействие на костную ткань, подтверждаемое данными гистоморфометрии. Отмечаются стабилизация костной массы и сохранность трабекулярной микроархитектоники. Эффективность комбинированной схемы лечения обусловлена ее способностью поддерживать оптимальную скорость костеобразо-вания в условиях подавления ускоренной костной резорбции.
SUMMARY
The influence ofcalcium-D? N у corned and calcium carbonate matters on histomorphometric parameters of bone tissue during pregnancy and lactation of testing animals was analyzed in comparative aspect. The quantitative and qualitative changes showed that combine usage of calcium carbonate and vitamin Dt during pregnancy and lactation had positive effect on bone mass expressed in bone mass stabilization and trabecular bone microarchitecture safety. The effectiveness of combined therapy was determined by it's ability to keep an optimal boneformation speed and to suppress bone resorbition simultaneously. Treatment with only calcium supplement did notfully prevent the bone loss.
ЛИТЕРА ТУРА
1. Войтович А.В.. АнисимоваЛ.О.. Кормильченко В. В. Взгляд на остеопороз с позиции костной морфометрии // Остеопороз и остеопатии. 2001. № 1. С. 8-11.
2. МорэЛ. Изменение плотности костной ткани во время беременности // XIV Европ. конгресс гинекологов и акушеров (Испания, Гранада). 1999. С. 43.
3. Риггз Б.Л., Мелтон 111 Л.Д. Остеопороз. Этиология, диагностика, лечение. М.: БИНОМ. 2000. 558 с.
4. Родионова С. С. Швец В.Н. Гистоморфометрическая оценка влияния различных форм препаратов на течение остеопоро-за // Остеопороз и остеопатии. 1998. № 1. С. 33-35.
5. Таников А.И., Айламазян ЭК. Обмен кальция во время беременности // Вестн. Рос. ассоциации акуш.-гинекологов. 1996. № 4. С. 32-37.
d.ChanG.M., McMurry M., Westover К. et al. Effects of increased dietary calcium intake upon the calcium and bone mineral status of lactating adolescent and adult women // Am. J. Clin. Nutr. 1987. V. 46. P. 319-323.
7. ChesneyR. W., SpeckerB.L.. MimouniK, McKayC.P. Mineral metabolism during pregnancy and lactation // In: Сое F.L., Favus M.J.. eds. Disorders of bone and mineral metabolism. New York: Raven Press, 1992. P. 383-393.
8. Compston J.E., CroucherP.I. Histomorphometric assessment of trabecular bone remodelling in osteoporosis // Bone Miner. 1991. V. 14. P. 91-102.
9. Hordon L.D.. Raisi M., Aaron J'.E. et al. Trabecular architecture in women and men of similar bone mass with and without vertebral fractures: Two-dimensional histology // Bone. 2000. V. 27, № 2. P. 271-276.
10. Kent G.N.. Price R.I., Gutterbridge D.N. Acute effects of an oral calcium load in pregnancy and lactation: findings on renal calcium conservation and biochemical indices of bone turnover // Miner. Electrolyte Metab. 1991. V. 17. P. 1-7.
11. Kent G.N., Price R.I.. Gutterbridge D.N. el al. Effect of pregnancy and lactation on maternal bone mass and calcium metabolism. Osteoporosis Int. 1993. V. 3. S.I. P. 44-47.
12. Legrand E, Chappard D., Pascaretti C. et al. Trabecular bone microarchitecture and male osteoporosis // Morphologic. 1999. V. 83, №261. P. 35-40.
13. Marie P.J.. CancelaL., LeBoulch N.. MiravetL. Bone changes due to pregnancy and lactation: influence of vitamin D status // Am. J. Physiol. 1986. V. 251. P. 400^06.
14. Sowers M.F., Corton G., Shapiro B.L. Changes in bone density with lactation // JAMA. 1993. V. 269. P. 3130-3135.
15. Purfitt A.M. The physiologic and pathogenetic significance of bone histomorphometric data. In: Сое F.L.. Favus M.G. eds. Disorders of bone and mineral metabolism. New York: Raven Press. 1992. P. 475л189.
