CC BY
27
medical news of north caucasus
2020. Vоl. 15. Iss. 1
Сведения об авторах:
Брин Вадим Борисович, доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой нормальной физиологии; тел.: (8672)537661, 89188261559; e-mail: vbbrin@yandex.ru
Ислаев Алтынбек Азраткулович, аспирант; тел.: 89194274627; e-mail: altin_islaev91@mail.ru
© Коллектив авторов, 2020 УДК 616.717.3:021.2
DOI - https://doi.org/10.14300/mnnc.2020.15025 ISSN - 2073-8137
ГИСТОЛОГИЧЕСКИЕ И ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ РЕПАРАТИВНОГО ОСТЕОГЕНЕЗА В СТАНДАРТНЫХ КОСТНЫХ ДЕФЕКТАХ НИЖНЕЙ ЧЕЛЮСТИ, ЗАМЕЩАЕМЫХ СИНТЕТИЧЕСКИМ БИОМАТЕРИАЛОМ ПО БЕЗМЕМБРАННОЙ ТЕХНОЛОГИИ
С. В. Сирак \ А. А. Андреев \ С. П. Рубникович 2, А. А. Слетов \ З. М. Кочкарова \ Н. Д. Вафиади \ В. Н. Ленев \ Е. В. Щетинин 1
1 Ставропольский государственный медицинский университет, Российская Федерация
2 Белорусская медицинская академия последипломного образования, Минск, Беларусь
HISTOLOGICAL AND IMMUNOHISTOCHEMICAL FEATURES OF REPARATIVE OSTEOGENESIS IN STANDARD BONE DEFECTS OF THE MANDIBLE, REPLACED BY SYNTHETIC BIOMATERIAL USING A MEMBRANE-FREE TECHNOLOGY
Sirak S. V. 1, Andreev A. A. 1, Rubnikovich S. P. 2, Sletov A. A. 1, Kochkarova Z. M. 1, Vafiadi N. D. 1, Lenev V. N. 1, Shchetinin E. V. 1
1 Stavropol State Medical University, Russian Federation
2 Belorusian Medical Academy of Postgraduate Education, Minsk, Belarus
Представлены результаты экспериментальной оценки эффективности остеопластической композиции, состоящей из смеси гидроксиапатита кальция, p-трикальцийфосфата, активатора склейки гранул и гиалуроновой кислоты для пластики стандартных дефектов челюстных костей. На 30 годовалых кроликах установлено, что синтетические биоматериалы не вызывают патологических реакций в окружающей костной ткани, рассасываются синхронно с построением костного репарата, быстро замещаются формирующимися костными структурами, чем обусловливается полное замещение костного дефекта мозолью, которая перестраивается в зрелую кость. Добавление в резорбируемую двухфазную смесь 60 % гидроксиапатита кальция и 40 % p-трикальцийфосфата с активатором склейки гранул Bio Linker гиалуроновой кислоты потенцирует остеостимулирующий эффект всей композиции и ускоряет репаративный осте-огенез, а значительная пористость создает оптимальные условия для формирования костной ткани в промежутках между гранулами
Ключевые слова: костный дефект, синтетические биоматериалы, остеогенез, репарация, гиалуроновая кислота
The article presents the results of an experimental evaluation of the effectiveness of an osteoplastic composition consisting of a mixture of calcium hydroxyapatite, p-tricalcium phosphate, a granule bonding activator and hyaluronic acid for the plasticization of standard jaw bone defects. In 30 year-old rabbits, it was found that synthetic biomaterials do not cause pathological reactions in the surrounding bone tissue, are absorbed synchronously with the construction of bone repair, are quickly replaced by the emerging bone structures, which causes the complete replacement of the bone defect with a corn, which is rebuilt into Mature bone. The addition of 60 % calcium hydroxyapatite and 40 % p-tricalcium phosphate to the resorbed two-phase mixture with the bio Linker granule bonding activator of hyaluronic acid potentiates the osteostimulating effect of the entire composition and accelerates the reparative osteogenesis, and the significant porosity creates optimal conditions for the germination of cellular bone tissue in the gaps between the granules.
Keywords: bone defect, synthetic biomaterials, osteogenesis, repair, hyaluronic acid
Для цитирования: Сирак С. В., Андреев А. А., Рубникович С. П., Слетов А. А., Кочкарова З. М., Вафиади Н. Д., Ленев В. Н., Щетинин Е. В. ГИСТОЛОГИЧЕСКИЕ И ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ РЕПАРАТИВНОГО ОСТЕОГЕНЕЗА В СТАНДАРТНЫХ КОСТНЫХ ДЕФЕКТАХ НИЖНЕЙ ЧЕЛЮСТИ, ЗАМЕЩАЕМЫХ СИНТЕТИЧЕСКИМ БИОМАТЕРИАЛОМ ПО БЕЗМЕМБРАННОЙ ТЕХНОЛОГИИ. Медицинский вестник Северного Кавказа. 2020;15(1):107-112. DOI - https://doi.org/10.14300/mnnc.2020.15025
oRiGiNAL RESEARCH
i Experimental medicine
For citation: Sirak S. V., Andreev A. A., Rubnikovich S. P., Sletov A. A., Kochkarova Z. M., Vafiadi N. D., Lenev V. N., Shcheti-nin E. V. HISTOLOGICAL AND IMMUNOHISTOCHEMICAL FEATURES OF REPARATIVE OSTEOGENESIS IN STANDARD BONE DEFECTS OF THE MANDIBLE, REPLACED BY SYNTHETIC BIOMATERIAL USING A MEMBRANE-FREE TECHNOLOGY. Medical News of North Caucasus. 2020;15(1):107-112. DOI - https://doi.org/10.14300/mnnc.2020.15025 (In Russ.)
ГАП -гидроксиапатит кальция
ГК - гиалуроновая кислота
ИГХ - иммуногистохимическая реакция
КПА - кроличьи поликлональные антитела
Восстановление постоперационных и травматических костных дефектов челюстных костей проводят с использованием различных видов костных ауто-, алло- и ксеногенных остеопласти-ческих средств, не лишенных недостатков. К таковым следует отнести возможность возникновения реакций отторжения вследствие их иммунной несовместимости с организмом реципиента, медленное резорбирование остеогенных материалов и соответственно торможение процесса их замещения костными структурами реципиента [1, 2, 3].
Важна техника применения синтетических биоматериалов в полости рта, связанная с необходимостью обязательного разделения двух источников регенерации - тканей десны и собственно костной ткани замещаемого дефекта из-за длительного периода резор-бирования гранул биоматериалов [4, 5].
Перспективным способом преодоления ограничений является использование синтетического биоматериала, который при соприкосновении с кровью способен быстро затвердеть и создать устойчивый, прочный, пористый наполнитель правильной формы, который позднее заменяется костной тканью и не нуждается в мембранной защите от эпителия десны, но при этом имеет все достоинства исходного материала: низкую иммуногенность, наличие биостимуляторов процессов репарации, высокую остеогенную ла-тентность [6, 7, 8].
Перспективной представляется резорбируемая двухфазная смесь из гидроксиапатита кальция (ГАП) и ß-трикальцийфосфата (ТКФ) с активатором склейки гранул Bio Linker, превращающим их в пластичную, легко поддающуюся формовке, удобную для работы хирурга массу. В состав остеопластической композиции на этапе приготовления можно ввести вещества, повышающие биостимулирующую активность, а также сообщающие ей новые свойства. В качестве таких добавок все чаще используют гиалуроновую кислоту, способную стимулировать остео- и ангиогенез [9].
Цель исследования - экспериментальная оценка эффективности остеопластической композиции гидроксиапатита кальция, ß-трикальцийфосфата, активатора склейки гранул и гиалуроновой кислоты при замещении стандартных дефектов челюстных костей.
Материал и методы. Экспериментальные исследования проведены на кроликах породы Серый Великан, которым фиссурной фрезой воспроизводили стандартный сквозной дефект нижней челюсти в области ее угла диаметром 1 см. Всего использовали 30 животных, которых в зависимости от условий эксперимента разделили на 3 группы по 10 кроликов в каждой: 1-я и 2-я группы - опытные, 3-я группа - контрольная. В 1-й группе в качестве имплантата использовали ре-зорбируемую двухфазную смесь из 60 % гидроксиапатита кальция (ГАП) и 40 % ß-трикальцийфосфата (ТКФ) с активатором склейки гранул Bio Linker, во 2-й - тот же состав, но с добавлением гиалуроновой кислоты, в 3-й группе дефект вели под кровяным сгустком.
Животных выводили из эксперимента через 1, 3, 7, 10, 15, 20 и 30 суток и 2, 3 и 6 месяцев после операции.
ММА - моноклональные мышиные антитела
ТКФ - трикальцийфосфат
ЕМА - эпителиальный мембранный антиген
Участки кости с имплантатом выпиливали, фиксировали в 10 % растворе нейтрального формалина с последующей декальцинацией в трилоне Б. После заливки костных блоков в парафин готовили срезы, которые окрашивали гематоксилин-эозином по Акимченко и Маллори.
Для выявления антигенов в клетках регенерата кости проводили серию иммуногистохимических реакций с использованием антител: моноклональ-ных мышиных антител (ММА) к виментину (V9) (CELL MARQUE, США, 1:100 - 1:500); ММА к эпителиальному мембранному антигену, E29 (EMA) (CELL MARQUE, США, 1:100 - 1:500); кроличьи поликлональные антитела (КПА) к нейрон-специфической энолазе (NSE) (SpringBioScience, США 1:300); КПА к пролифериру-ющим клеткам стадии интерфазы (Ki-67) (БиоВитрум, Россия, 1:50).
Иммуногистохимические исследования проводили на парафиновых срезах с применением высокочувствительной системы визуализации Reveal biotin-free polyvalent DAB (SpringBioScience, США). Интенсивность иммуногистохимической реакции (ИГХ) в каждом препарате контролировали под микроскопом. Интенсивность экспрессии иммунореактивного материала в клетках оценивали полуколичественным методом по интенсивности окрашивания.
Работа проведена в рамках Государственного задания Министерства здравоохранения Российской федерации на научные исследования и разработки по теме «Изучение механизмов регенерации при использовании новых биоинженерных конструкций на основе аутологичных мезенхимальных стволовых клеток и ма-териалов-матриксов различного происхождения».
Результаты исследования. При гистологическом изучении препаратов в первые сутки наблюдений в опытных группах обнаруживаются костные дефекты с имплантированным синтетическим биоматериалом, представленные оксифильными нежноволокнисты-ми тяжами, микрофрагментами костных и хрящевых структур, погруженных на периферии дефекта в эри-троцитные массы. Среди костных и мягкотканных микрофрагментов имплантата и в краевых зонах дефекта определяются ярко-оксифильные тонковолокнистые сетки массы фибрина. К 3-м суткам формирование кровяного сгустка в дефекте завершается, эритроциты в нем почти полностью гемолизируются, их рисунок оказывается стертым. Со стороны краев дефекта в массы фибрина энергично мигрируют полибласти-ческие элементы, лейкоциты, гистиоциты и фибро-бласты. В рыхлой соединительной ткани и жировой клетчатке межбалочных пространств костной ткани, окружающей дефект, помимо обширных геморрагий, отмечаются признаки экссудативно-гиперемической реакции с выходом за пределы сосудистых стенок полинуклеарных элементов. Лейкоцитарный инфильтрат, располагающийся вблизи дефекта, может достигать значительной плотности, а в отдалении от дефекта его плотность уменьшается.
Остеоциты в костных краях дефекта подвергаются дистрофическим изменениям, структура костных клеток стирается, отдельные из них набухают, наблю-
мейюа!. news ор иогтн caucasus
2020. Vоl. 15. 155. 1
дается ослабление окраски ядер вплоть до их лизиса, местами встречаются пикнотичные костные клетки. При травматической фрагментации костных структур описанные некробиотические изменения в костных клетках могут быть более выраженными, между колла-геновыми волокнами визуализируются крупные фрагменты остеопластического материала (рис. 1 - а).
Рис. 1. Микропрепараты нижней челюсти кролика через 3 суток после начала эксперимента в 1-й (а, в) и 2-й (б, г) основных группах: а - крупные фрагменты остеопластического материала (1) между коллагеновыми волокнами (2); б - кровоизлияния с выпадением пигмента гемосидерина (1), выпот фибрина (2) и фокусы очагов некроза трабекул (3). Окраска гематоксилином и эозином. Ок. 10. Об. 20 (а, б); в - Ю67+ клетки (1). ИГХ реакция на Ю67. Продукт реакции коричневого цвета. Ок. 10. Об. 20; г - NSE + клетки около кровеносного сосуда (1). ИГХ реакция на NSE. Продукт реакции коричневого цвета. Ок. 10. Об. 40
В стенке костного дефекта появляются признаки резорбции. Костный край дефекта, ровный в 1-е сутки, в последующем начинает подвергаться узурации. В отдельных участках по костному краю к 3-м суткам отмечаются кровоизлияния с выпадением пигмента гемосидерина и фокусы очагов некроза трабекул, проникновение клеточных элементов в содержимое искусственного дефекта кости, среди которых, помимо полинуклеаров, лимфоцитов и макрофагов, определяются веретенообразные юные фибробла-сты (рис. 1 - б).
Иммуногистохимическая экспрессия маркеров Ю67+ и NSE+ к данному сроку наблюдения слабовыра-женная, тип экспрессии - ядерный (рис. 1 - в, г).
К 7-м суткам в основных группах после операции в костном дефекте хорошо выражен монолитный блок имплантированного синтетического биоматериала, а также остатки кровяного сгустка, представленного массами фибрина. Выражено новообразование осте-огенной клеточно-волокнистой ткани, местами содержащей мелкие кровеносные сосуды. Непосредственно у стенок дефекта наблюдается формирование нежной
сеточки из юных костных балок. Новообразованные костные трабекулярные структуры напластовываются на зрелую кость, в результате чего на 7-е сутки наблюдается построение на периферии дефекта ободка из рыхлой костной мозоли (рис. 2 - а).
Помимо указанных юных костных структур, в ре-парате обнаруживаются также и островки хондроида.
Особенно выражено образование хондроидного компонента в месте смыкания регенераторных остеоидных почек, надвигающихся навстречу друг другу со стороны надкостницы. Описанные картины в сроки до 7 суток характерны только для 1-й и 2-й групп.
На 10-20-е сутки в костном дефекте по-прежнему обнаруживается ткань трансплантата, представленная микрофрагментами костных структур и хряща, а также рыхлыми волокнистыми массами, окрашивающимися оксифильно. Клеточные элементы в структурах импланта-та частично лизированы (рис. 2 - б). Между плотными фрагментами массы биоматериала видны грубопучковые структуры фибробластических элементов, довольно часто встречаются гигантские многоядерные клетки. Как костные, так и хрящевые микрофрагменты подвергаются резорбции, что выражается в снижении интенсивности их окраски, изъеденности краев, а также появлении в центральных их участках остеонов-полостей неправильной формы, заполненных отдельными крупными клетками и фибробластоподобными макрофагами. В самом дефекте обнаруживаются обширные участки разрастаний грубой клеточно-волокнистой остеоген-ной ткани, которая по направлению к периферии переходит в структуры костной мозоли. У края костного дефекта мозоль представлена мелкопетлистой трабе-кулярной сетью, по направлению к центру дефекта эта сеть становится более редкой, а сами костные структуры - более тонкими и мелкими, менее дифференцированными, чем в периферическом отделе. В костной ткани, непосредственно примыкающей к дефекту, отмечаются умеренно выраженные резорбтивные изменения с появлением в эрозивных лакунах остеокластов (рис. 2 - в).
При сравнительном сопоставлении препаратов 1-й и 2-й основных групп отмечается более интенсивное формирование костной мозоли в препаратах с гиа-луроновой кислотой, причем процессы созревания и вторичной перестройки костной мозоли к 20-м суткам во 2-й группе также протекают интенсивнее, чем в 1-й группе.
ORiGiNAL RESEARCH
■ Experimental medicine
Рис. 2. Микропрепараты нижней челюсти кролика через 7 (а), 10 (б), 20 (в) суток, 1 (г, д, е) месяц после начала эксперимента в 1-й (а, в, д) и 2-й (б, г, д) основных группах: а - напластовывание новообразованных костных трабекулярных структур (1) на зрелую кость (2) с построением ободка из рыхлой костной мозоли (3). Окраска по Маллори. Ок. 10. Об. 20; б - распад хряща на островки (1), хаотичное формирование костных структур, с заменой хондробластов на остеоциты (2). Окраска по Маллори. Ок. 10.
Об. 40; в - мелкопетлистая трабекулярная сеть костной мозоли (1), остеокласты в эрозивных лакунах (2). Окраска гематоксилином и эозином. Ок. 10. Об. 20; г - Ю67+ клетки различного размера между волокнами зрелой соединительной ткани периоста (1). ИГХ реакция на Ю67. Продукт реакции коричневого цвета. Ок. 10. Об. 40; д - NSE + клетки около кровеносного сосуда (1). ИГХ реакция на NSE. Продукт реакции коричневого цвета. Ок. 10. Об. 40; е - крупные ЕМА+ клетки около формирующихся кровеносных сосудов (1).
ИГХ реакция на ЕМА. Продукт реакции коричневого цвета. Ок. 10. Об. 40
Через 1 месяц после начала эксперимента костные дефекты в 1-й и 2-й группах практически полностью замещены регенератом. В центральных отделах костной мозоли иногда встречаются островки хондроидной ткани. Костные структуры репарата на значительных по протяженности территориях претерпели вторичную перестройку, на периферии костной мозоли они построены из тонковолокнистого костного вещества, отмечается формирование остеогенных систем, в цен-
тральных зонах они менее зрелые, все еще построены из грубоволокнистого костного вещества.
При иммуногистохи-мическом исследовании к данному сроку наблюдения между коллагено-выми волокнами сформированной ткани периоста отмечались многочисленные клетки с экспрессией К167+(рис. 2 - г), ней-роэндокринные клетки локализовались вдоль кровеносных сосудов, что подтверждалось умеренной (2 балла) ядерной экспрессией иммуно-реактивного материала (рис. 2 - д). Особо следует отметить интенсивную (3 балла)экспрессию иммунореактивного материала ЕМА+ в препаратах 2-й группы, тип экспрессии мелко-гранулярный, преимущественно цитоплазматический (рис. 2 - е).
через 3 месяца визуализируются все структуры костной мозоли из тонковолокнистого вещества, процессы вторичной постройки завершаются. К исходу 6 месяцев реактивные изменения нативной костной ткани полностью купируются, отмечается восстановление трабекулярного строения, периостальные костные напластования репарата, заполнившего дефект, редуцируются.
Изучение гистопре-паратов в контрольной группе (дефект под кровяным сгустком) свидетельствует об отсутствии существенной динамики в формировании костного репарата. Вслед за воспалительно-реактивными изменениями в области операционной травмы, которые стихают к 20-м суткам наблюдения, дефект заполняется грубо-рубцовой соединительной тканью, которая определяется во все сроки вплоть до 6 месяцев после операции (рис. 3 - а, б).
Анализ иммуногистохимического статуса (рис. 3 -в, г) препаратов контрольной группы свидетельствует о крайне низкой реактивности как клеток гемопоэти-ческого (ЕМА+), так и нейроэктодермального (^Е+) происхождения, а также пролиферирующих клеток стадии интерфазы (К167+), интенсивность экспрессии которых оказалась значительно ниже показателей,
medical news of north caucasus
2020. Vol. 15. Iss. 1
Рис. 3. Микропрепараты нижней челюсти кролика через 7 (а), 10 (б), 20 (в) суток и 1 (г) месяц после начала эксперимента в контрольной группе: а - мелковолокнистая соединительная ткань с зонами обширных геморрагий (1), неплотно примыкающих к стенкам костного дефекта (2). Окраска гематоксилином и эозином. Ок. 10. Об. 20; б - мелкие кровоизлияния вокруг сосудов капиллярной сети (1). Окраска гематоксилином и эозином. Ок. 10. Об. 20; в - единичная Ю67+ клетка (1). ИГХ реакция на Ю67. Продукт реакции коричневого цвета. Ок. 10. Об. 100; г - единичная ЕМА+ клетка между волокнами незрелой соединительной ткани периоста. ИГХ реакция на ЕМА. Продукт реакции коричневого цвета. Ок. 10. Об. 20
в виде новообразования коротких и слабоветвя-щихся костных балочек в пределах 10-20 суток опыта. В последующие сроки процессы новообразования кости не имели тенденции к существенной активизации.
Заключение. Таким образом, результаты экспериментальной апробации остеопластических материалов на основе ГАП и ТКФ как с добавлением гиалуроновой кислоты, так и без нее свидетельствуют об их высокой остеогенной активности. Значительная пористость состава создает оптимальные условия для формирования костной ткани в промежутках между гранулами. Биоматериалы не вызывают патологических реакций в окружающей костной ткани, рассасываются синхронно с построением костного матрикса, быстро замещаются формирующимися костными структурами, чем обусловливается полное замещение костного дефекта мозолью, с последующим формированием зрелой кости. Добавление в резорбиру-емую двухфазную смесь с активатором склейки гра-
установленных в 1 и 2-й группах наблюдения (рис. 3 -в, г).
Репаративный остеогенез в контрольной группе проявлял себя лишь слабой периостальной реакцией
нул гиалуроновой кислоты потенцирует остеостимулирующий эффект всей композиции и ускоряет репаративный остеогенез.
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
AMTepaTypa/References
1. Alayan J., Ivanovski S. Biological and technical outcomes of restored implants after maxillary sinus augmentation -Results at 1-year loading. Clinical Oral Implants Research. 2019;30(9):849-860. https://doi.org/10.1111/clr.13489
2. Zeng J.-H., Qiu P., Xiong L., Zhang T. Bone repair scaffold coated with bone morphogenetic protein-2 for bone regeneration in murine calvarial defect model: Systematic review and quality evaluation. International Journal of Artificial Organs. 2019;42(7):325-337. https://doi.org/10.1177/0391398819834944
3. Ishack S., Mediero A., Wilder T., Ricci J. L., Cronstein B. N. Bone regeneration in critical bone defects using three-dimensionally printed p-tricalcium phosphate/ hydroxyapatite scaffolds is enhanced by coating scaffolds with either dipyridamole or BMP-2. Journal of Biomedical Materials Research - Part B Applied Biomaterials. 2017;105(2):366-375. https://doi.org/10.1002/jbm.b.33561
4. Shanbhag S., Pandis N., Mustafa K., Nyengaard J. R., Stavropoulos A. Bone tissue engineering in oral peri-implant defects in preclinical in vivo research: A systematic review and meta-analysis. Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine. 2018;12(1):336-349. https://doi.org/10.1002/term.2412
5. Tomasi C., Regidor E., Ortiz-Vigon A., Derks J. Efficacy of reconstructive surgical therapy at peri-implantitis-related
bone defects. A systematic review and meta-analysis. Journal of Clinical Periodontology. 2019;46(S21):340-356. https://doi.org/10.1111/jcpe.13070
6. Acevedo C. A., Olguín Y., Briceño M., Jaques A., Ortiz R. Design of a biodegradable UV-irradiated gelatin-chitosan/ nanocomposed membrane with osteogenic ability for application in bone regeneration. Materials Science and Engineering. 2019;99(2):875-886. https://doi.org/10.1016/j.msec.2019.01.135
7. Iviglia G., Kargozar S., Baino F. Biomaterials, current strategies, and novel nano-technological approaches for periodontal regeneration. Journal of Functional Biomaterials. 2019;10(1):3-10. https://doi.org/10.3390/jfb10010003
8. Rodríguez-Rodríguez R., Espinosa-Andrews H., Velasquillo-Martínez C., García-Carvajal Z. Y. Composite hydrogels based on gelatin, chitosan and polyvinyl alcohol to biomedical applications: a review. International Journal of Polymeric Materials and Polymeric Biomaterials. 2020;69(1):1-20.
https://doi.org/10.1080/00914037.2019.1581780
9. Щетинин Е. В., Сирак С. В., Рубникович С. П., Кочка-рова З. М., Андреев А. А. [и др.]. Морфометрические показатели репаративной регенерации костной ткани в условиях лекарственного ультрафонофореза гидрокортизоном и гиалуроновой кислотой. Меди-
ORiGiNAL RESEARCH
i Experimental medicine
цинский вестник Северного Кавказа. 2019;14(4):660-663. [Shchetinin E. V., Sirak S. V., Rubnikovich S. P., Kochkarova Z. M., Andreev A. A. [et al.]. Morphometric parameters of reparative regeneration of the bone tissue in
terms of medicinal phonophoresis with hydrocortisone and hyaluronic acid. Medicinskii vestnik Severnogo Kavkaza. -Medical News of North Caucasus. 2019;14(4):660-663. (In Russ.)]. https://doi.org/10.14300/mnnc.2019.14163
Сведения об авторах:
Сирак Сергей Владимирович, доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой стоматологии; тел.: 88652350551; e-mail: sergejsirak@yandex.ru
Андреев Антон Александрович, аспирант; тел.: 88652350551; e-mail: kafedra@mail.ru
Рубникович Сергей Петрович, доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой ортопедической стоматологии и ортодонтии с курсом детской стоматологии; тел.: +375172922561; e-mail: rubnikovichs@mail.ru
Слетов Александр Анатольевич, доктор медицинских наук, профессор кафедры хирургичской стоматологии и челюстно-лицевой хирургии; тел.: 88652355536; e-mail: ddt111@yandex.ru
Кочкарова Зухра Магомедовна, аспирант кафедры гистологии; тел.: 88652352628; e-mail: azrch_1991@rambler.ru Вафиади Николай Дмитриевич, студент; тел.: 88652352684; e-mail: patphysiology@stgmu.ru
Ленев Вадим Николаевич, кандидат медицинских наук, доцент кафедры стоматологии; тел.: 88652350551; e-mail: lenevstom@yandex.ru
Щетинин Евгений Вячеславович, доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой патологической физиологии; тел.: 88652352684; e-mail: patphysiology@stgmu.ru
© Коллектив авторов, 2020
УДК 616.831-005.4/576.311.347/615.32
DOI - https://doi.org/10.14300/mnnc.2020.15026
ISSN - 2073-8137
ИЗУЧЕНИЕ ЦЕРЕБРОПРОТЕКТИВНЫХ СВОЙСТВ ХРИЗИНА И ХРИЗАНТЕМИНА В УСЛОВИЯХ ФОКАЛЬНОЙ ИШЕМИИ ГОЛОВНОГО МОЗГА
А. В. Воронков, Д. И. Поздняков, С. А. Нигарян
Пятигорский медико-фармацевтический институт - филиал Волгоградского государственного медицинского университета, Российская Федерация
CEREBROPROTECTIVE PROPERTIES OF CHRYSIN AND CHRYZANTEMINE UNDER CONDITIONS OF THE FOCAL CEREBRAL ISCHEMIA
Voronkov A. V., Pozdnyakov D. I., Nigaryan S. A.
Pyatigorsk Medical and Pharmaceutical Institute - a branch of the Volgograd State Medical University, Russian Federation
Изучались церебропротекторные свойства хризина и хризантемина в условиях фокальной ишемии головного мозга. Исследование было проведено на 30 крысах-самцах линии Wistаr массой 250-300 г. Ишемическое повреждение головного мозга воспроизводили методом необратимой окклюзии правой средней мозговой артерии. В качестве препарата сравнения был выбран Мексидол (100 мг/кг, Мосхимфармпрепараты, Россия). Концентрацию молочной и пировиноградной кислот определяли энзиматическим колориметрическим методом с применением стандартного набора реактивов производства НПФ «Арбис+» (Санкт-Петербург, Россия). Для проведения оценки содержания гомоцистеина в плазме крови применяли стандартный набор реактивов «DiaSys» (Германия). Степень гидрации головного мозга определяли методом высушивания. Оценку зоны некроза производили трифенилтетразолиевым методом. Введение хризина и хризантемина вызывает снижение уровня образования лактата (7,94 %; р<0,05 и 12,83 %; р<0,05), пирувата (105,04 %; р<0,05 и 51,23 %; р<0,05), гомоцистеина (13,96 %; р<0,05 и 26,75 %; р<0,05), а также способствует уменьшению степени некроза (86,6 %; р<0,05 и 39,45 %; р<0,05) и отека головного мозга (9,37 %; р<0,05 и 11,68 %; р<0,05) в сравнении с группой животных негативного контроля. Исследуемые соединения превосходили референтный препарат по своему влиянию на образование пирувата (хризин вызывал уменьшение на 37,47 % (р<0,05), хризантемин - на 18,52 %; р<0,05 в сравнении с группой животных, получавших Мексидол. Стоит отметить, что Мексидол (уменьшение на 83,4 %; р<0,05) и хризин (уменьшение на 86,6 % (р<0,05) практически одинаково способствуют снижению степени некроза мозговой ткани в сравнении с группой крыс негативного контроля. Таким образом, можно говорить о перспективности дальнейшего углубленного исследования соединений хризин и хризантемин с целью изучения их церебропротективных свойств.
Ключевые слова: ишемия, ишемический инсульт, флавоноиды, хризин, хризантемин
