CC BY
20
место значительное повышение коэффициента IFN-g/IL-4 (табл. 4).
Как видно из рисунка, при исследовании IFN-g выявляется высокий уровень в группе с сочетанием ХОБЛ и ГЭРБ. Концентрация IFN-g колеблется от290до 440 пг/мл.
ВЫВОДЫ
Таким образом, сочетание ГЭРБ с хронической об-структивной болезнью легких приводит к более активному течению воспаления, следствием чего являются более выраженные обструктивные нарушения. Появление предъутреннего кашля может рассматриваться как признак, помогающий заподозрить наличие ГЭРБ у больного хронической обструктивной болезнью легких.
ЛИТЕРАТУРА
1. Ивашкин, В. Т. Болезни пищевода /В. Т. Ивашкин,
A. С. Трухманов. - М.: Триада. 2000. - 179 с.
2. Кирилов, С. М. Патология пищеварительной системы при бронхиальной астме и хронической обструктивной болезни легких / С. М. Кирилов.
3. Минушкин, О. Н. Париет в России. Результаты многоцентрового клинического исследования / О. Н. Минушкин [и др.] // Рус. журн. гастроэнтерол. и гепатологии. - 2000. - № 6. - С. 43-46.
4. Федосеев, Г. Б. Бронхиальная астма / Г. Б. Федосеев,
B. И. Трофимов. - СПб., 2006. - С. 151.
5. Buist, A. S. What are the practical implications of current data on the worldwide prevalence of COPD? / A. S. Buist [et al]. - 2007. -№ 117 (9). - Р. 394-395.
6. Gaude, G. S. Pulmonary manifestations of gastroesophageal reflux disease / G. S. Gaude. - 2009. - № 4 (3). - Р. 115-123.
7. Long, M. D. Extra-esophageal GERD: clinical dilemma of
epidemiology versus clinical practice / M. D. Long, N. J. Shaheen. -2007. - № 9 (3). - Р. 195-202.
8. Malfertheiner, M. V. Bronchopulmonary manifestations of gastroesophageal reflux disease / M. V. Malfertheiner [et al]. - 2010. -№ 51. - Suppl. 1. - Р. 246-254.
РЕЗЮМЕ
Д. М. Халиль, В. И. Трофимов, А. А. Бибикова
Особенности течения хронической обструктивной болезни легких в сочетании с гастроэзофагальной рефлюксной болезнью
Сочетание хронической гастроэзофагальной рефлюксной болезни (ГЭРБ) с хронической обструктивной болезнью легких приводит к более активному течению воспаления, следствием чего являются более выраженные обструктивные нарушения. Появление предъутреннего кашля может рассматриваться как признак, помогающий заподозрить наличие ГЭРБ у больного хронической обструктивной болезнью легких.
Ключевые слова: хроническая обструктивная болезнь легких, гастроэзофагеальная рефлюксная болезнь.
SUMMARY
Д. M. Khalir, V. I. Trofimou, A. A. Bibikoua
Clinical picture of chronic obstructive pulmonary disease combined with gastroesophagenal reflux disease
The combination of gastroesophageal reflux disease (GERD)with chronic obstructive pulmonary disease (COPD) leads to a greater inflammation, resulting in a more severe obstructive disorder. Early morning caughing may be taken as a sign that helps to suspect the presence of GERD in the patients with COPD.
Key words: chronic obstructive pulmonary disease, gastroeso-phageal reflux disease.
© Коллектив авторов, 2012 г. УДК 616.831-089:615.849.19
О. В. Острейко, С. В. Можаев, Д. Е. Мацко, М. А. Шевцов, А. С. Поживил
ГИСТОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ОБЛАСТИ МОЗГА, ПОДВЕРГНУТОЙ ЛАЗЕРНОЙ ТЕРМОДЕСТРУКЦИИ
Кафедра неврологии и нейрохирургии с клиникой Санкт-Петербургского государственного медицинского университета имени академика И. П. Павлова; Отдел морфологии опухолей НИИ онкологии имени Н. Н. Петрова
ВВЕДЕНИЕ
В течение последних 20 лет лазерная термодеструкция является развивающимся направлением малоинвазивной нейрохирургии [1, 8, 10]. Этому способствует прогнозируемый эффект лазерного воздействия, малоинвазив-ность [4, 5]. В нейрохирургии происходит внедрение лазе-
ра инфракрасного диапазона, способного проникать в глубину мозга. Проникая в ткань, световая энергия адсорбируется и выделяется тепловая энергия. Последняя, нагревая ткань мозга, приводит к ее разрушению [6].
Цельданного исследования - установить изменения в тканях, производимые их нагревом лазерным излучением [7, 9, 11]. С практической точки зрения, важны особенности распространения зоны термодеструкции, безопасность такого воздействия на окружающие структуры мозга, что, в свою очередь, определяет возможности использования лазерного излучения как хирургического метода в нейрохирургии.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
В работе использован хирургический диодный лазер инфракрасного спектра с длиной волны 970 нм. Исследование выполнено на кроликах со средним весом 3,5 кг, доставленных из питомника Рапполово. Операции проводили в операционной ЦНИЛ СПбГМУ им. акад. И. П. Павлова. Источником лазерной энергии был хирургический диодный лазер мощностью 10 Вт с изменяемыми техническими характеристиками лазерного воздействия: мощность, экспозиция и режим излучения. Лазер произведен ООО <Милон», Санкт-Петербург.
ОРИГИНАЛЬНЫЕ РАБОТЫ
После стереотаксической термодеструкции мишени в мозге животные выводились из эксперимента в периоды от 2 до 4 недель. Мозг животных фиксировался в забуфе-ренном растворе формалина (рН=7,08). После фиксации делались срезы во фронтальной плоскости толщиной 5 мкм. Окраска микропрепаратов осуществлялась гематоксилин-эозином и по ван Гизону.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Окрашенные микропрепараты изучались под световым микроскопом с возможностями вывода цифрового изображения на монитор для детальной оценки. При исследовании микропрепарата в увеличении 1:100, окрашенного гематоксилин-эозином, на котором срез проходит через канал, от проходившего здесь кварцевого светово-локна и через полость после термодеструкции были выявлены четкие зоны изменения в мозге. Схематично микроскопические зоны лазерной термодеструкции показана на рисунке.
Так, в центре микропрепарата определяются раневой канал после введения световолокна и пустота как результат некроза. Кнаружи от нее следуют зона лимфоцитар-ной инфильтрации (зона зернистых шаров), а за ней -зона нейродегенеративных изменений.
При детальном изучении зон лазерной термодеструкции с увеличением 1:400 кнаружи от пустоты визуализируется непосредственная зона коагуляционного некроза округлой неправильной формы, в которой прослеживаются тени клеток, расширенные полнокровные сосуды, небольшие волокна нейроглии и диффузно расположенные очаги с распавшимися лейкоцитами. Лейкоциты представлены пластами зрелых и созревающих зернистых шаров, рассыпающихся у границы с зоной некроза. Наружные отделы слоя, образованного зернистыми шарами, без четких границ переходят в узкий слой с новообразованными сосудами, за которыми следует нерезко выраженный глиоз с расширенным микроциркуляторным руслом и единичными гемосидерофагами. В прилежащих к зоне некроза сосудах неизмененного мозга наблюдается пери-васкулярная инфильтрация.
Окраска микропрепаратов по ван Гизон при увеличении 1:400демонстрирует отчетливое коллагенообразова-ние на границе здорового мозга и наружных отделов зоны зернистых шаров. Указанная зона коллагенообразования соответствует нежной капсуле разделяющей кисту, появившуюся в результате рассасывания и санации зоны некроза, и неизмененный мозг.
Неоангиогенез как самостоятельный процесс обнаружен на границе мезенхимально-глиального рубца и вещества мозга. Сосуды из вещества мозга идут перпендикулярно к границе с рубцом, заканчиваясь в зоне колла-геноза, вероятно, осуществляя доставку пластических материалов для формирования мезенхимальной части мезенхимально-глиального рубца.
В 4-й зоне только в непосредственной близости от ме-зенхимально-глиального рубца мы наблюдали изменения
Схематичное соотношение зон воздействия лазерной энергии на мозг: 1 - раневой канал, через который вводилось све-
товолокно; 2 - полость, возникшая вследствие термодеструкции мишени; 3 -зона лимфоцитарной инфильтрации; 4 -зона нейродегенеративных изменений
в прилежащем веществе мозга в виде микрокист и пери-васкулярной инфильтрации. При этом внутренний просвет сосудов содержал эритроциты, что указывает на сохранение в нем кровотока. Микрокисты наблюдались в тех случаях, когда к зоне термодеструкции подводилась наибольшая доза энергии.
Изучение микропрепаратов показало, что зоны мозга очень четко различаются. Границей с неизмененным мозгом служит мезенхимально-глиальный рубец. Ко 2-й неделе после операции отчетливо прослеживаются вновь образовавшиеся сосуды, имеющие пластическую функцию.
Таким образом, выявленные зоны реакции мозга на воздействие лазерной энергии имеют свои четкие границы и морфологические характеристики. Важнейшим фактом является незначительность по протяженности зоны нейродегенеративных изменений. Отсутствуют повреждения в структурах мозга, граничащих с зоной воздействия лазера. Так, отчетливо визуализирована сохранность желудочкового сплетения и эпендимы в непосредственной близости от зоны термодеструкции.
ЛИТЕРАТУРА
1. Зозуля, Ю. А. Лазерная нейрохирургия / Ю. А. Зозуля, С. А. Ромоданов, В. Д. Розуменко. - Киев: Здоровья, 1992. - 168 с.
2. Неворотин, А. И. Лазерная рана в теоретическом и прикладном аспектах / А. И. Неворотин // Лазерная биология и лазерная медицина: практика: Мат. докл. Респ. школы-семинара. Ч. 2. -Тарту-Пюхяярве: Тартуский ун-т ЭССР, 1991. - С. 3-12.
3. Неворотин, А. И. Электронно-гистохимическая характеристика лазерного некроза / А. И. Неворотин // Архив. патол. -1989. - № 7. - С. 63-70.
4. Розуменко, В. Д. Методология малоинвазивной лазерной термодеструкции глиом полушарий большого мозга / В. Д. Розуменко, С. С. Макеев, А. В. Хоменко // Мшинвазивна нейрох!рурпя Украшський нейрох!рурпчний журн. - 2001. - № 2. - С. 3-7.
5. Розуменко, В. Д. Технология метода лазерной термодеструкции внутримозговых опухолей / В. Д. Розуменко [и др.] // Мшпнвазивна нейрохрурпя Украшський нейрохрурпчний журн. -2001. - № 2. - С. 38-40.
6. Розуменко, В. Д. Морфологическое обоснование применения метода лазерной термодеструкции в нейроонкологии / В. Д. Розуменко [и др.] // Украшський нейрох1рурпчний журн. -2003. - № 2. - С. 27-32.
7. Auvari, B. Effects of surface irrigation on the thermal response of tissue during laser irradiation / B. Auvari [et al] // Laser Surg. Med. -1994. - Vol. 14. - P. 386-395.
8. Krishnamurthy, S. Lasers in Neurosurgery / S. Krishnamurthy, S. K. Powers // Lasers in Surgery and Medicine. - 1994. - Vol. 15. -P. 126-167.
9. Rosomoff, H. Reaction of neoplasm and brain to laser / H. Ro-somoff, F. Carroll // Arch. Neurol. - 1966. - Vol. 14. - P. 143-148.
10. Sugiyama, K. Stereotactic interstitial laser-hyperthermia using Nd-YAG laser / K. Sugiyama [et al] // Stereotact. Funct. Neurosurg. -1990. - Vol. 54-55. - P. 501-505.
11. Welsch, A. J. Optical-thermal response of laser-irradiated tissue / A. J. Welsch, M. J. C. van Germet. - N.-Y.: Plenum press, 1995. - P. 4-5.
РЕЗЮМЕ
О. В. Острейко, С. В. Можаев, Д. Е. Мацко, М. А. Шевцов, А. С. Поживил
Гистологические характеристики области мозга, подвергнутой лазерной термодеструкции
В области термодеструкции мозга кроликов, достигнутой инфракрасным лазерным облучением, выявлены 3 четко отграниченные зоны: зона некроза, лимфоцитарной инфильтрации, нейро-дегенеративных изменений. Границей с неизмененным мозгом служит мезенхимально-глиальный рубец. Отсутствуют повреждения в структурах мозга, граничащих с зоной воздействия лазера.
Ключевые слова: лазерная термодеструкция мозга, зоны лазерного воздействия на мозг.
SUMMARY
O. V. Ostreyko, S. V. Mojaev, D. E. Matzko, M. A. Sheutsou, A. S. Pojiuil
Histological characteristics of the brain region exposed to laser thermodestruction
Three distinct zones: the zone of necrosis, the zone of infiltration, and the zone of neurodegenerative changes were revealed in the region of the rabbit brain after thermoablation with infrared irradiation. The mesenchymo-glial scar served as the border with the normal brain tissue. No changes were observed in the brain structures adjoined to the area of laser exposure.
Key words: laser thermoablation, zones of laser effect in the brain tissue.
© Коллектив авторов, 2012 г. УДК 616.858:575
С. Н. Пчелина, А. К. Емельянов, А. С. Дроздова, А. Ф. Якимовский, А. Л. Шварцман
МЕТОД «ДОЗЫ ГЕНА» НА ОСНОВЕ КОЛИЧЕСТВЕННОЙ ПЦР В РЕАЛЬНОМ ВРЕМЕНИ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ ДЕЛЕЦИЙ/МУЛЬ-ТИПЛИКАЦИЙ ЭКЗОНОВ ГЕНА PARK2 И ГЕНА SNCA У ПАЦИЕНТОВ С БОЛЕЗНЬЮ ПАР-КИНСОНА
Лаборатория молекулярной генетики человека Петербургского института ядерной физики имени Б. П. Константинова РАН; Отдел молекулярно-гене-тических технологий, кафедра нормальной физиологии Санкт-Петербургского государственного медицинского университета имени академика И. П. Павлова
Метод количественной полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени (Real-Time PCR) в настоящее время широко используется для определения количества копий вируса в организме, при оценке уровня экспрессии генов, для оценки числа копий гена при создании трансгенных животных и для оценки уровня амплификации генов в опухолевых тканях [10, 15, 18].
Принципиальной особенностью ПЦР в режиме реального времени является возможность детекции накопления продуктов амплификации непосредственно во время ее проведения. Для детекции ПЦР-продукта используются флуоресцентно-меченные ДНК-зонды (технологии TaqMan) или флуоресцентные красители (SYBR Green), обеспечивающие уровень флуоресценции, прямо пропорциональный количеству ПЦР-продукта. Все это позволяет повысить чувствительность метода ПЦР и избежать проведения последующего электрофореза ПЦР продуктов. При использовании стандартов, заданной концентрации ДНК, и построении стандартной кривой (циклов ПЦР до того, как прибор детектирует накопление продукта амплификации (значение CT) в зависимости от исходной концентрации ДНК) метод позволяет определять точную концентрацию ДНК/РНК в исследуемом образце. Метод количественной ПЦР в режиме реального времени получил широкое распространение и в настоящее время во многих лабораториях вытеснил методы полуколичественной ПЦР [6]. В частности, этот метод используется для диагностики ряда заболеваний, связанных с деле-циями или дупликациями генов [24]. Нами метод количественной ПЦР в режиме реального времени был применен для идентификации делеций/мультипликаций экзонов гена PARK2 и мультипликаций гена SNCA у пациентов с болезнью Паркинсона (БП).
БП - распространенное нейродегенеративное заболевание, связанное с гибелью дофаминергических нейронов в черной субстанции. Механизм нейродегенерации при БП остается неясным. По этой причине не существу-
