ГИСТОХИМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ШИК-РЕАКЦИИ ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ ЗОЛОТИСТЫХ ХОМЯКОВ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ОПИСТОРХОЗЕ ДО И ПОСЛЕ ЛЕЧЕНИЯ ЭРЛИМОМ
НестерокЮ.А., НачеваЛ.В., БеззаботноеН.О.
ГБОУ ВПО «Кемеровская государственная медицинская академия» Минздравсоцразвития РФ
Введение. При изучении механизма действия антигельминтиков наиболее существенными являются вопросы о гистохимической реактивности, как организма паразита, так и хозяина. Г истохимические методы определяют распределение химических соединений в клетках тканей и органов системы «паразит-хозяин», изменение локализации и количества углеводов и белков при воздействии на хозяина антигельминтиками. Одним из важных углеводов для паразита и хозяина является гликоген, который содержится в организме в местах высокой метаболической активности и служит источником глюкозы, то есть энергетическим субстратом. Информации о перераспределении гликогена при экспериментальном описторхозе практически нет. Ранее изучалось только влияние антигельминтиков на содержание углеводных компонентов в органах и тканях трематод, включая и описторхов, взятых из эксперимента (Бибик О.И.,2007; Начева Л.В., Бибик О.И., 2007; Бибик О.И., Начева Л.В., 2008; Начева Л.В., Бибик О.И., Нестерок Ю.А., 2010). Но гистохимические исследования на наличие и распределение углеводного компонента, в том числе и гликогена, в тканях самого хозяина не изучены.
Цель исследования - оценить изменения содержания и распределения гликогена и мукопротеидов в тканях поджелудочной железы золотистых хомяков при экспериментальном описторхозе до, и после воздействия эрлимом.
Материалы и методы. Материалом для исследований служила поджелудочная железа золотистых хомяков (Mesocricetus auratus) на которых была создана модель хронического описторхоза. Контролем служила поджелудочная железа, взятая от животных, не зараженных метацеркариями описторхов. Хомяки были пролечены фитопрепаратом эрлимом в дозе 0,023 г/кг тела животного в течение 5 суток и вскрыты через 14 дней после терапии. После фиксации органы обрабатывали по общепринятой гистологической методике и заливали в смесь парафина с воском. Срезы, толщиной 5-7 мкм окрашивали гематоксилин-эозином и для выявления гликогена использовали гистохимический метод: ШИК-реакцию по Мак-Манусу с ферментативным контролем - амилазой и диастазой. Препараты после окрашивания изучались в световом микроскопе Микмед-6.
Результаты исследования. В поджелудочной железе золотистых хомяков с экспериментальным описторхозом при постановке Шик-реакции четко определялась углеводная дистрофия, которая выражалась отеком межацинарных пространств, за счет чего ацинусы были сдавлены и многие из
284
них разрушены; определялся распад их выводных протоков (лизис стенок). В ацинусах мало встречали Шик-положительных веществ. Часто выявляли зернистые включения темного цвета, которые не были похожи на гликоген, но в тоже время могут быть деструктивными углеводными компонентами. Докраска гематоксилином подчеркивала деструкцию ядер, их деформацию и снижение базофильности хроматина. В общей массе разрушенных ацинусов обнаруживались Шик-положительные углеводные соединения, имеющие вид зёрен, которые окрашивались в бледно-розовый цвет.
При Шик-реакции в межацинарных пространствах описторхозной железы обнаруживали отросчатые синцитиальные структуры, что можно считать предвестником злокачественного течения процесса. В ацинарных клетках наблюдали интенсивную вакуолизацию, гипергидроз цитоплазмы, за счет чего объем клеток был увеличен и ядра не определялись. Зёрна Шик-положительных веществ были темного цвета, мелкие и практически одинаковых размеров.
Гистохимические исследования показали, что реактивность тканей поджелудочной железы у золотистого хомяка при экспериментальном описторхозе достаточно хорошо выражена, что проявлялось положительной фуксинофилией при Шик-реакции. Особое внимание было обращено на окрашивание апикальной части эпителия протоков, которые проявляли яркомалиновый цвет, так, как и аденоматозные железы. Сходность этой реакции служит доказательством того, что аденоматозные структуры имеют сродство с эпителиальной выстилкой протоков.
После воздействия эрлимом результаты Шик-реакции показали, что, по сравнению с клетками поджелудочной железы золотистых хомяков с описторхозом, зёрен Шик-положительного типа было не очень много, что можно связать с активацией эвакуации секрета из клеток ацинусов железы. В то же время отмечено было, что окраска этих зёрен не имела опалесценции. Эти зёрна не следует отождествлять с гликогеном. Мы считаем их скоплениями мукопротеидов, входящих в состав секрета.
Воздействие эрлимом способствовало снижению явлений отечности, ослаблению гидропической дистрофии, а также усилению секреции клетками ацинусов, что было отмечено выше. Местами в некоторых ацинусах наблюдались крупные вакуоли с глыбками, интенсивно окрашивающихся при Шик-реакции. Это углеводные соединения, которые не эвакуировались из ацинарных клеток, не проявляли опалесценции и не являлись гликогеном, что подтверждалось контрольными ферментативными реакциями. Отсутствие гликогена не следует рассматривать как отрицательный эффект воздействия антигельминтика, так как в контрольной группе у хомяков без описторхоза, в поджелудочной железе он не определялся.
Вывод. Гистохимический анализ Шик-реакции поджелудочной железы золотистых хомяков при экспериментальном описторхозе до и после лечения эрлимом показал, что антигельминтик способствует снижению явления
285
углеводной дистрофии и восстановлению функции клеток, что следует рассматривать как благоприятное воздействие препарата на ткань хозяина.
Литература: 1. Бибик О.И.// Труды ВИГИС. М., 2007. - т.45. - С.40-45. 2. Начева Л.В., Бибик О.И.// Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями. М., 2007. - вып.8. - С.241-244. 3. Бибик О.И., Начева Л.В.//Российский паразитологический журнал. М., 2008. - №3. - С.72-75. 4. Начева Л.В., Бибик О.И., Нестерок Ю.А.// Сб.мат.научн.конф. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями». М., 2010. - вып.11. - С.312-314.
Histochemical analysis of Schick-reaction of pancreas of golden hamsters at experimental Opisthorchis felineus infection before and post treatment by erlim. Nesterok Yu.A., Nacheva L.V., Bezzabotnov N.O. Kemerovo State Medical Academy.
Summary. Histochemical analysis of Schick-reaction of pancreas of golden hamsters at experimental O. felineus infection before and post treatment by erlim has shown that anthelmintic promotes reduction of carbohydrate dystrophy and restoration of cell functions what can be considered as the positive effects of an agent on host tissue.
ВОЗРАСТНАЯ И СЕЗОННАЯ ЗАРАЖЕННОСТЬ ТЕЛЯТ И МОЛОДНЯКА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА КОКЦИДИЯМИ И ДИАРЕЯ ПРИ СТОЙЛОВОМ СОДЕРЖАНИИ
Никитин В. Ф., Дудка Н.С.
ГНУ ВНИИ гельминтологии им. К.И. Скрябина
В предыдущей статье мы представили результаты нашей работы по изучению инвазированности телят и молодняка крупного рогатого скота гельминтами и кокцидиями при стойловом содержании традиционного типа в ОАО «Б. Алексеевское» Московской области. Была выявлена высокая степень зараженности, в частности: экстенсинвазированность нематодами и
кокцидиями телят в целом составляла 68,58%, тёлок и нетелей - 82,5%. В числе нематод - стронгилоиды, стронгиляты и чаще кокцидии -криптоспоридии и эймерии (Дудка Н.С., Никитин В.Ф., 2011).
С целью профилактики и борьбы с этими инвазиями нас интересовала встречаемость их в разные сезоны и с учетом проявления клинических признаков. По наблюдениям в хозяйстве у телят и молодняка нередки случаи расстройства пищеварения, сопровождающиеся диареей, а иногда без нее, но с наличием слизисто-кровянистых прожилок в кале.
286