Научная статья на тему 'Гистохимическая характеристика нейтрофилов периферической крови у женщин с хронической герпес-вирусной инфекцией на разных этапах гестации'

Гистохимическая характеристика нейтрофилов периферической крови у женщин с хронической герпес-вирусной инфекцией на разных этапах гестации Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

CC BY
748
29
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Соловьева А. С.

Используя гистохимические методы исследования, определяли уровень ферментативной активности нейтрофилов периферической крови у женщин с хронической герпес-вирусной инфекцией (ХГВИ) в разные триместры беременности. Полученные данные указывают на закономерное изменение цитохимического статуса лейкоцитов периферической крови при герпес-вирусной инфекции у женщин во время беременности. Обострение ХГВИ приводит к увеличению интенсивности метаболических процессов наряду с усилением энергетических процессов. Подтверждением этому явилось повышение уровня активности сукцинатдегидрогеназы и снижение аденозинтрифосфатазной активности. Повышение активности ряда окислительно-восстановительных ферментов, свидетельствующее о гиперфункции митохондрий, а также лизосомального фермента кислой фосфатазы в процессе обострения герпетической инфекции, является показателем повышения функциональной активности механизмов адаптации. Латентное течение ХГВИ характеризовалось сниженными уровнями метаболических показателей в ответ на хроническое перенапряжение фагоцитов.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Histochemical characteristics of peripheral blood neutrophils in female patients with chronic herpes-virus infection at different gestation periods

Histochemical methods have been used to determine the enzyme activity level of peripheral blood neutrophils in female patients with chronic herpes-virus infection (HVI) during different gestation trimesters. The research data suggest changes in cyto-chemical status of peripheral blood leukocytes In patients with herpes-virus infection during gestation period HVI exacerbation leads to the increase in metabolic process activity and energy processes. This manifested in increase in succinatedehydrogenase activity and decrease in adenosinetriphosphate activity. Enhanced activity of oxidation-reduction enzymes indicating mitochondria hyper function, as well as lysosomal enzyme acid phosphotase during HVI exacerbation suggests increase in functional activity of adaptation mechanisms. Latent HVI course results in decreased metabolic values in response to chronic phagocyte overload.

Текст научной работы на тему «Гистохимическая характеристика нейтрофилов периферической крови у женщин с хронической герпес-вирусной инфекцией на разных этапах гестации»

УДК 618.3:578.825.11:612.015.11/ 12:616.155.34 А.С.Соловьева

ГИСТОХИМИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА НЕЙТРОФИЛОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ У ЖЕНЩИН С ХРОНИЧЕСКОЙ ГЕРПЕС-ВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИЕЙ НА РАЗНЫХ ЭТАПАХ ГЕСТАЦИИ

ГУ Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания СО РАМН

РЕЗЮМЕ

Используя гистохимические методы исследования, определяли уровень ферментативной активности нейтрофилов периферической крови у женщин с хронической герпес-вирусной инфекцией (ХГВИ) в разные триместры беременности.

Полученные данные указывают на закономерное изменение цитохимического статуса лейкоцитов периферической крови при герпес-вирусной инфекции у женщин во время беременности. Обострение ХГВИ приводит к увеличению интенсивности метаболических процессов наряду с усилением энергетических процессов. Подтверждением этому явилось повышение уровня активности сукцинатдегидрогеназы и снижение аденозин-трифосфатазной активности. Повышение активности ряда окислительно-восстановительных ферментов, свидетельствующее о гиперфункции митохондрий, а также лизосомального фермента -кислой фосфатазы в процессе обострения герпетической инфекции, является показателем повышения функциональной активности механизмов адаптации. Латентное течение ХГВИ характеризовалось сниженными уровнями метаболических показателей в ответ на хроническое перенапряжение фагоцитов.

SUMMARY

A.S. Solovieva

HISTOCHEMICAL CHARACTERISTICS OF PERIPHERAL BLOOD NEUTROPHILS IN FEMALE PATIENTS WITH CHRONIC HERPES-VIRUS INFECTION AT DIFFERENT GESTATION PERIODS

Histochemical methods have been used to determine the enzyme activity level of peripheral blood neutrophils in female patients with chronic herpes-virus infection (HVI) during different gestation trimesters. The research data suggest changes in cyto-chemical status of peripheral blood leukocytes

In patients with herpes-virus infection during gestation period HVI exacerbation leads to the increase in metabolic process activity and energy processes. This manifested in increase in succi-natedehydrogenase activity and decrease in adenosinetriphosphate activity. Enhanced activity of oxidation-reduction enzymes indicating mitochondria hyper function, as well as lysosomal enzyme - acid phosphotase during HVI exacerbation suggests increase in functional activity of

adaptation mechanisms. Latent HVI course results in decreased metabolic values in response to chronic phagocyte overload.

Вирусу простого герпеса (ВПГ) в организме хозяина противостоят различные иммунные механизмы, включая цитотоксические Т-лимфоциты, естественные киллеры, гуморальный иммунитет, мононук-леарные фагоциты и цитокины [5, 6]. Учитывая тот факт, что в контроле герпес-вирусной инфекции принимает участие большое разнообразие факторов, трудно переоценить вклад каждого из них. Тем не менее, первая линия защиты при инфекции представлена неспецифическими защитными факторами организма. При этом полиморфно-ядерные лейкоциты поглощают и разрушают ВПГ, тем самым препятствуя дальнейшему инфицированию тканей [1, 3, 17]. Известно, что ВПГ тесно взаимодействует с лейкоцитами. При этом возникают грубые повреждения хромосом и большие скопления антигена ВПГ в лейкоцитах.

Известно, что отрицательное влияние на плод при герпес-вирусной инфекции оказывают циркулирующие в организме токсины, изменения в биохимическом составе крови беременной женщины [4, 13]. Тяжесть течения заболевания матери оказывает прямое влияние на прерывание беременности, мертворожде-ния [11]. При внутриутробном заражении имеет значение то, что слабо вирулентный вирус часто представляет основную опасность для плода, оставаясь бессимптомным у матери [12]. В литературе имеется достаточное количество материала, касающегося патогенеза, клинического течения, осложнений, возникающих при герпетической инфекции у женщин во время беременности, противовирусного иммунитета [2, 9, 10, 14]. Однако, до сих пор остается малоизученным вопрос об изменениях метаболического характера в лейкоцитах периферической крови у женщин, беременность которых осложнена герпес-вирусной инфекцией.

Цитохимические исследования широко используют не только для диагностики различных нозологических форм, но и в качестве прогноза дальнейшего течения заболевания и контроля за проводимым лечением [15]. Тем более, что цитохимические показатели лейкоцитов периферической крови несут раннюю информацию о развитии патологического процесса в организме даже в тех случаях, когда другие тесты (количество лейкоцитов, С-реактивный белок, белковый спектр крови и др.) не успевают проявиться [16]. В аспекте значимости клинических исследований данные об активности данных ферментов являются информативными параметрами реактивности клеток

крови, отражающих усиление или ослабление метаболических процессов, а также состояние стабильности клеточных мембран [8].

Исходя из вышеперечисленного, целью нашей работы явилось исследование ферментативной активности нейтрофилов периферической крови у беременных с хронической герпесвирусной инфекцией (ХГВИ) на разных этапах гестации.

Материалы и методы исследования

Проводилось обследование 117 женщин в возрасте от 18 до 36 лет. Обострение ХГВИ на разных этапах гестации отмечалось у 58 беременных. В период латентного течения ХГВИ обследовано 59 женщин. Диагноз устанавливался клинически на основании жалоб, анамнестических данных и характерных морфологических элементов высыпаний (локальная эритема, сгруппированные везикулы, эрозии, покрытые сероватым налетом с тенденций к слиянию). Так как в ряде случаев герпетическая инфекция в период беременности проявляется в виде стертых и бессимптомных форм, она может быть распознана лишь с помощью лабораторных тестов. Поэтому в нашей работе диагноз подтверждался обнаружением специфических к вирусу простого герпеса иммуноглобулинов классов М и в, регистрируемых иммунофер-ментным анализом. С целью коррекции иммунного и интерферонового статуса применяли курс терапии иммуноглобулином с титром антител к вирусу простого герпеса и «Виферон» (150 000 МЕ) [14].

В качестве материала исследования взята перифе-

рическая кровь вышеописанных групп женщин. Лей-коконцентрат получали путем отстаивания гепарини-зированной крови в термостате при температуре 37°С в течение 20-30 минут.

Цитохимические показатели нейтрофильных лейкоцитов исследовали по следующим методам: сукци-натдегидрогеназу(СДГ) - по A.M.Seligman и

A.M.Rutenburg (1951) в модификации E.Shelton и W.C.Schneider (1952); кислую фосфатазу (КФ) - по М. Burston (1958) в модификации A.Goldberg (1965); аденозинтрифосфатазу (АТФазу) - по

З. Лойда (1982) [7].

Результаты исследования

Анализируя данные, полученные при обследовании женщин с латентным течением ХГВИ на разных этапах беременности, следует отметить некоторые особенности в гистохимической характеристике лейкоцитов. Начало беременности характеризовалось тем, что уровень ферментативной активности СДГ был повышен, в основном, за счет процентного количества клеток со средней и максимальной степенью интенсивности этого энзима (табл. 1). Закономерным и логическим следствием этого явилось снижение уровня активности АТФазы к концу госпитализации, при этом количество клеток со средней и высокой степенью активности фермента снизилось в среднем на 10% (табл. 2). Выявленные изменения, по-видимому, обусловлены хронической нагрузкой и отражают состояние функционального перенапряжения фагоцитов в период ремиссии. Используя метод

Таблица 1

Ферментативная активность СДГ в нейтрофилах периферической крови (в %) у беременных с ХГВИ в стадии ремиссии, М±т

Группы Степень активности цитофотометрической плотности, усл. ед.

следы реакции 0,5-1,0 1,0-10 27-29 220-225

I триместр 13,43±3,29 44,31±8,61*** 51,14±4,85 37,08±5,48*** 20,86±2,27 14,30±4,33** 14,57±0,64 4,25±0,22***

II триместр 40,0±3,81 24,8±2,99*** 50,56±4,17 45,25±2,82*** 31,00±2,36 23,00±1,92*** 13,88± 0,47 6,95±0,73***

III триместр 10,47±0,81 53,75±1,46*** 39,78± 3,70 26,74±3,92*** 37,50± 2,99 16,32± 1,44*** 12,25± 0,22 3,19±0,72***

Примечание: здесь и далее - в числителе значение до лечения, в знаменателе - после лечения; достоверность различий показателей: * - р<0,05, ** - р<0,01, *** - р<0,001.

Таблица 2

Ферментативная активность АТФазы в нейтрофилах периферической крови (в %) у беременных с ХГВИ в стадии ремиссии, М±т

Группы Степень активности цитофотометрической плотности, усл. ед.

следы реакции 0,5-1,0 1,0-10 27-29 220-225

I триместр 1,75±0,76 52,58±0,14*** 29,72±0,94 20,47±3,21*** 49,34±4,52 24,82±4,37*** 9,19±1,74 2,33±1,16***

II триместр 5,56±0,97 37,42± 1,12*** 30,54± 2,69 17,65± 1,44*** 52,67±4,25 39,12±3,71*** 11,25±1,13 5,81±1,86***

III триместр 3,27±0,84 59,12±0,87*** 29,54±2,15 12,44± 2,21*** 58,03±3,04 24,18±4,13*** 9,16±1,47 3,46±1,19***

цитофотометрирования, активность кислой фосфата-зы распределили по степени проявления в спектре рН (5,2-6,7). Так, при рН 5,2 отмечалась следовая реакция ферментативной активности (0,5-1,0 усл.ед.); при рН 5,7 - степень активности лейкоцитов со слабо выраженной реакцией составляла 1,0-10 усл. ед.; со средней степенью активности - 27-29 усл. ед.; при явно выраженной реакции - 220-225 усл.ед. Характерно то, что в I триместре при самом низком значении рН (5,2) отсутствовали клетки с высокой степенью активности, в результате чего ферментативная активность нейтрофилов при этом значении рН была наименьшей по сравнению со всеми остальными данными (табл. 3). В этот период беременности с латентно протекающей инфекцией наибольшее количество клеток с максимальной активностью кислой фосфомоноэстеразы проявлялось при рН 5,7 и составляло 22,67±0,77% прореагировавших клеток. На среду со значением рН 6,7 наибольшее количество клеток (37,33±2,38%) проявило низкую ферментативную активность кислой фосфатазы. Тем не менее, по общей степени активности на всем протяжении I триместра беременности отмечалась сниженная ферментативная активность кислой фосфатазы в стадии ремиссии ХГВИ по сравнению с аналогичными данными в группе беременных с обострением герпесвирусной инфекции.

Во II и III триместрах беременности анализ ферментативной характеристики нейтрофилов показал следующее. На всем протяжении этого периода бе-

ременности отмечался высокий уровень активности сукцинатдегидрогеназы, максимальное значение которого наблюдалось во II триместре (табл. 1). Это происходило, в основном, за счет увеличения процентного содержания клеток (13,88±0,47%) с максимальной активностью этого фермента, измеренного спектрофотометрическим способом. В этот период отмечался наиболее высокий уровень активности АТФазы по сравнению с этим показателем в I и III триместрах беременности (табл. 2). Возможно, повышенный уровень СДГ-активности явился компенсаторной реакцией на хроническую антигенную нагрузку и функциональное перенапряжение фагоцитов у больных в период ремиссии. Анализируя ферментативную активность кислой фосфатазы во вторую половину беременности, обнаружено следующее. При самом низком значении рН (5,2) наибольшее количество клеток (68,45±4,25% - во II триместре и 65,42±5,01% - в III триместре) находилось в инертном состоянии, а количество нейтрофилов с высокой степенью активности либо было минимальным (1,87±0,07% - во II триместре, табл. 4), либо они отсутствовали совсем (III триместр, табл. 5). Оценивая динамику изменений ферментативной активности этого энзима, необходимо отметить, что изначально не ярко выраженная активность снижалась (за некоторым исключением) после проводимого лечения иммуноглобулинами с титром антител к ВПГ.

Таблица 3

Ферментативная активность кислой фосфатазы в нейтрофилах периферической крови (в %) у беременных с ХГВИ в стадии ремиссии в I триместре беременности, М±т

рН Степень активности цитофотометрической плотности, усл. ед.

следы реакции 0,5-1,0 1,0-10 27-29 220-225

5,2 54,69±4,85 20,00±1,57 25,31±0,92 0

49,67±4,18*** 28,00±1,62*** 22,33±0,98*** 0

5,7 20,67±3,72 32,67±2,51 25,33±1,40 22,67±0,77

27,00±1,04* 39,00±1,56*** 21,50±1,32*** 12,50±1,12***

6,2 27,50±2,00 32,37±2,86 29,00±1,57 11,13±0,72

29,60±1,07* 37,21±2,50*** 26,67±2,03*** 6,52±0,93***

6,7 28,58±1,07 37,33±2,38 28,00±2,50 6,09±0,13

28,83±2,00 48,67±3,82*** 20,67±2,35*** 1,83±0,09***

Таблица 4

Ферментативная активность кислой фосфатазы в нейтрофилах периферической крови (в %) у беременных с ХГВИ в стадии ремиссии во II триместре беременности, М±т

рН Степень активности цитофотометрической плотности, усл. ед.

5,2 следы реакции 0,5-1,0 1,0-10 27-29 220-225

68,45±4,25 80,67±4,39*** 24,10±1,28 14,80±1,40*** 5,64±0,80 3,00±0,57*** 1,81±0,07 1,53±0,07

5,7 17,71±1,55 60,71±0,84*** 48,08±3,63 31,71±2,20*** 28,00±2,85 27,67±2,63 5,50±1,94 1,33±1,72***

6,2 30,29±1,97 30,95±2,22* 41,89±3,84 34,29±2,61*** 25,82±1,19 25,43±1,98 2,00±0,25 9,33±1,25***

6,7 43,91±3,12 44,01±2,83 20,22±1,14 18,86±1,38 29,70±1,74 31,33±2,98 6,17±1,66 5,80±1,54**

В I триместре беременности у женщин с остропро-текающей герпесвирусной инфекцией в результате поглощения антигена, резко активизируются метаболические процессы, происходящие в клетке, направленные на переваривание фагоцитируемого вещества.

Поэтому следует обратить внимание на повышенную активность сукцинатдегидрогеназы (табл. 6) и, как следствие, снижение уровня активности АТФазы (табл. 7), что явилось адекватной реакцией в ответ на повышенный титр антител в этот период (1:6400-1:12800).

Такие изменения свидетельствуют об усилении процессов внутриклеточного дыхания в нейтрофилах по мере повышения антигенной нагрузки и напряжения окислительных процессов. Тем не менее, наи-

большую активность в киллинге поглощенных веществ принимают кислые фосфомоноэстеразы в определенном спектре рН (5,2-6,7). Так в I триместре в группе беременных с обострением герпес-вирусной инфекцией количество нейтрофилов со средней и высокой степенью активности значительно увеличивается в среднем от 2 до 20% по сравнению с аналогичными данными в группе с латентно протекающей инфекцией (табл. 8). Соответственно, снижается количество клеток, в которых активность кислой фос-фатазы не выявлялась. Тем не менее, гидролитическая активность лейкоцитов при вспышке герпетической инфекции, подтверждавшейся высоким титром антител к вирусу простого герпеса (1:12800) была

Таблица 5

Ферментативная активность кислой фосфатазы в нейтрофилах периферической крови (в %) у беременных с ХГВИ в стадии ремиссии в III триместре беременности, М±т

рН Степень активности цитофотометрической плотности, усл. ед.

следы реакции 0,5-1,0 1,0-10 27-29 220-225

5,2 65,42±5,01 72,11±5,20*** 26,38±1,72 23,56±1,44*** 8,20±1,07 4,33±0,94*** 0 0

5,7 39,26±2,75 24,78±2,17 30,56±2,31 5,40±1,27

54,98±0,34*** 15,13±3,77*** 24,33±1,12*** 5,56±1,33*

6,2 32,36±2,71 28,67±1,78 26,67±1,35 12,30±1,42

31,80±1,63 21,78±2,46*** 21,78±2,46*** 9,75±1,25***

6,7 46,02±2,74 20,00±1,53 27,78±1,85 6,20±0,49

52,67±2,07*** 18,44±1,85*** 23,00±2,02*** 5,89±1,02

Таблица 6

Ферментативная активность СДГ в нейтрофилах периферической крови (в %) у беременных с ХГВИ в стадии обострения, М±т

Группы Степень активности цитофотометрической плотности, усл. ед.

следы реакции 0,5-1,0 1,0-10 27-29 220-225

I триместр 5,82±0,6 49,75±0,8*** 44,36±4,43 22,50±3,25*** 43,91±2,50 26,75±1,93*** 5,91±0,91 1,00±0,03***

II триместр 1,0±0,05 28,16±1,2*** 60,09±4,60 50,50±4,18*** 28,18±0,74 14,17±1,38*** 10,18±0,64 7,17±1,97*

III триместр 83,4±2,8 68,23±3,5*** 50,00±3,08 26,71±3,58*** 10,60±1,83 2,71±1,89*** 6,00±1,20 2,35±0,26***

Таблица 7

Ферментативная активность АТФазы в нейтрофилах периферической крови (в %) у беременных с ХГВИ в стадии обострения, М±т

Группы Степень активности цитофотометрической плотности, усл. ед.

следы реакции 0,5-1,0 0,5-10,0 27-29 220-225

I триместр 13,08±0,17 36,35±0,04*** 50,52± 3,84 35,59±3,17*** 32,23±3,16 25,23± 3,93*** 4,17±0,13 2,83± 1,35

II триместр 21,62±0,09 47,29± 1,41*** 59,36±3,14 29,04± 1,85*** 32,17± 1,92 20,57±3,16*** 6,85± 1,02 3,10±1,96***

III триместр 15,77± 1,14 15,77±0,16 47,68± 4,72 21,94±2,05*** 34,43± 2,26 27,33± 3,82*** 2,12±0,75 1,59± 0,36

гораздо выше, чем в группе с ХГВИ в стадии ремиссии. Этому способствовало проявление ферментативной активности кислой фосфатазы со средней степенью цитофотометрического анализа при рН 5,7; 6,2 и 6,7, количество клеток которых соответствовало 47,22±3,95; 40,25±3,10 и 40,25±2,91 процентам. К концу госпитализации отмечалось снижение активности СДГ, при которых процентное содержание клеток уменьшилось в 2-5 раз (при низкой и высокой степени цитофотометрической активности, соответственно). Несмотря на снижение уровня активности кислой фосфомоноэстеразы к концу лечения, количество клеток, например, с высокой степенью цитофо-тометрической активностью этого энзима при значениях рН 6,2 и 6,7 все же превышало аналогичные значения при латентном течении заболева-ния(11,58±1,89 и 6,52±0,93%; 12,15±1,43 и

1,83±0,09%, соответственно).

Метаболическая активность лейкоцитов периферической крови у женщин с обострением ХГВИ во II триместре имела следующие особенности. Известно, что кроме концентрации аллергена на интенсивность метаболических процессов в нейтрофилах оказывает влияние тип сформировавшихся иммунных комплексов, усиливающих или угнетающих активность фагоцитов. Возможно, после проведенного курса лечения иммуноглобулином с титром АТ к ВПГ в условиях избытка антител создаются крупнорешетчатые иммунные комплексы, которые вызывают интенсивный ответ нейтрофилов при поглощении. К тому же, такая динамика положительно

коррелировала с нарастающими уровнями

тающими уровнями активности сукцинатдегидроге-назы (табл. 6) и АТФазы (табл. 7). По-видимому, это свидетельствовало о повышении уровня метаболической активности клеток и связанных с ней энергетических возможностях нейтрофилов. На всем протяжении острого инфекционного периода исходная фосфатазная активность нейтрофилов превышала таковые значения в группе с латентнопротекающей инфекцией, что достигалось возрастанием гидролитической активности при всех значениях рН (5,2-6,7). Наибольшее повышение ферментативной активности происходило в спектре рН 5,7; 6,2 и 6,7, при которых кислая фосфатаза проявлялась с явно выраженной реакцией и составляла в количественном соотношении 40,33±2,80; 37,86±1,71 и 46,00±3,17%, соответственно (табл. 9). Возможно, это связано с увеличением опсонической способности нейтрофилов и, как следствие, увеличение метаболической активности этих клеток.

III триместр беременности в период обострения герпес-вирусной инфекции характеризовался высоким уровнем метаболической активности клеток периферической крови. Подтверждением этому явился высокий уровень активности СДГ, который к концу госпитализации снизился за счет количественного содержания клеток с низкой, средней и высокой степенью интенсивности (50,00±3,08 и 26,71±3,58%; 10,60±1,83 и 2,71±1,89%; 6,00±1,20 и 2,35±0,26%, р<0,001). В то же время, отмечался исходно повышенный уровень активности АТФазы, который, снижаясь к концу госпитализации, все же оставался вы-

Таблица 8

Ферментативная активность кислой фосфатазы в нейтрофилах периферической крови (в %) у беременных с ХГВИ в стадии обострения в I триместре беременности, М±т

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

рН Степень активности цитофотометрической плотности, усл. ед.

следы реакции 0,5-1,0 1,0-10 27-29 220-225

5,2 56,44±2,00 73,03±2,96*** 26,71±1,74 20,22±1,34*** 14,63±0,45 6,75±1,47*** 2,22±0,13 0

5,7 7,86±1,80 23,81±3,35*** 40,14±2,69 38,67±3,37* 47,22±3,95 35,67±3,37*** 4,78±1,07 1,85±0,83***

6,2 0,62±0,56 41,32±2,61*** 46,57±3,55 31,10±3,52*** 40,25±3,10 15,00±1,63*** 12,56±1,34 11,58±1,89

6,7 15,12±0,56 26,77±2,45*** 34,63±2,86 26,08±2,76 40,25±2,91 35,00±2,58*** 20,00±1,87 12,15±1,43***

Таблица 9

Ферментативная активность кислой фосфатазы в нейтрофилах периферической крови (в %) у беременных с ХГВИ в стадии обострения во II триместре беременности, М±т

рН Степень активности цитофотометрической плотности, усл. ед.

следы реакции 0,5-1,0 1,0-10 27-29 220-225

5,2 63,89±4,57 31,86±2,70 4,25±1,63 0

73,25±3,30*** 20,50±3,81*** 6,25±1,63 0

5,7 3,92±1,57 32,00±3,78 40,33±2,80 13,75±1,09

28,50±2,54*** 24,60±1,76*** 36,50±3,34*** 10,40±1,58***

6,2 0,06±0,80 46,75±1,35 37,86±1,71 15,33±1,33

21,10±0,09*** 39,80±2,50*** 25,60±3,06*** 13,50±1,66***

6,7 2,14±0,23 40,00±3,16 46,00±3,17 11,86±1,20

34,20±2,69*** 35,60±2,69*** 26,00±1,71*** 4,20±0,54***

Таблица 10

Ферментативная активность кислой фосфатазы в нейтрофилах периферической крови (в %) у беременных с ХГВИ в стадии обострения в III триместре беременности, М±т

рН Степень активности цитофотометрической плотности, усл. ед.

следы реакции 0,5-1,0 1,0-10 27-29 220-225

5,2 52,87±4,57 32,88±3,64 14,25±0,07 0

70,57±3,21*** 22,00±2,33*** 7,43±1,14*** 0

5,7 1,29±1,49 66,56±3,92 28,29±2,58 3,86±1,08

15,11±1,72*** 58,67±2,40*** 24,00±1,23** 2,22±0,91***

6,2 10,65±1,38 56,56±3,92 28,22±2,53 4,56±1,71

30,19±2,33*** 48,50±2,44*** 18,64±3,13*** 2,67±1,70***

6,7 10,15±1,05 42,00±3,72 43,25±2,56 4,60±2,54

14,50±0,96*** 41,00±3,45 39,00±3,47*** 5,50±2,87*

ше уровня показателей группы с латентным течением заболевания, в основном, за счет процентного содержания клеток с низкой и средней степенью активности фермента (табл. 7). В III триместре беременности в стадии обострения герпес-вирусной инфекции при рН 5,2, несмотря на то, что 52,87±4,57% клеток почти не проявили гидролитическую активность, фосфатаз-ная активность превышала аналогичный показатель в группе с латентным течением инфекции (табл. 10). При рН 5,7 лишь 1,29±1,49% лейкоцитов проявили следовую реакцию активности кислой фосфатазы, 66,56±3,92% клеток прореагировали с низкой степенью активности, 28,29±2,58% - со средней и 3,86±1,08% - с высокой степенью активности. Почти такая же реакция на вспышку инфекции наблюдалась и при рН 6,2. Наибольшая гидролитическая активность нейтрофилов отмечалась при значении рН 6,7, причем, по степени активности их количественный состав распределился следующим образом: почти не проявили фосфатазную активность всего 10,15±1,05% клеток. При спектрофотометрической регистрации интенсивности реакции 1,0-10 усл. ед. (что соответствовало низкой степени активности при цитофотометрии) обнаружено 42,00±3,72% лейкоцитов, а со средней и высокой степенью гидролитической активности (что соответствовало 27-29 и 220-225 усл. ед.) прореагировало 43,25±2,56 и 4,60±2,54%, соответственно. К концу лечения иммуноглобулином с титром антител к вирусу простого герпеса отмечалось снижение ферментативной активности кислой фосфатазы на протяжении всего спектра рН (5,2-5,7). Возможно, это объяснялось снижением метаболической активности как результат завершения переваривающего процесса и связанных с этим перестройкой фосфолипидного слоя мембран клеток, изменением их физикохимических свойств (вязкость, проницаемость и т.д.).

Из вышеописанного фрагмента материала следует, что обострение ХГВИ приводит к увеличению интенсивности метаболических процессов наряду с усилением энергетических процессов. Подтверждением этому явилось повышение уровня гидролитической активности фосфомоноэстеразы, СДГ и снижение АТФазной активности.

Таким образом, подтверждено, что ХГВИ оказывает влияние на характер окислительновосстановительных процессов в лейкоцитах перифе-

рической крови. Полученные данные указывают на закономерное изменение цитохимического статуса лейкоцитов периферической крови при герпесвирусной инфекции у женщин во время беременности. Повышение активности ряда окислительновосстановительных ферментов, свидетельствующее о гиперфункции митохондрий, а также лизосомального фермента - кислой фосфатазы в процессе обострения герпетической инфекции, является, возможно, показателем повышения функциональной активности механизмов адаптации вследствие перестройки гормонального статуса. По-видимому, все это является результатом нарушения микроциркуляции, окислительно-восстановительных процессов, гипоксии. Латентное течение ХГВИ характеризовалось сниженными уровнями метаболических показателей в ответ на хроническое перенапряжение фагоцитов.

ЛИТЕРАТУРА

1. Нейтрофилы, их роль в регуляции метаболизма тканей [Текст]/Н.И.Бахов, Л.З.Александрова,

B.Н.Титов//Успехи современной биологии.-1987.-Т.104, вып.2.-С.281-296.

2. Ведение беременности при герпесвирусной, цитомегаловирусной инфекциях, краснухе, хлами-диозе и токсоплазмозе [Текст]/Болтович А.В. [и др.]//Науч. вестн. Тюмен. мед. акад.-2000.-№2.-

C.54-67.

3. Роль нейтрофилов в регуляции антимикробной резистентности[Текст]/И.И.Долгушин//Вестн. акад. мед. наук.-2002.-№3.-С.16-20.

4. Перинатальные аспекты герпетической инфекции [Текст]/З.С.Зайдиева, В.Л.Тютюнник, Н.В.Орджоникидзе//Акуш. и гин.-1999.-№1.-С.4-8.

5. Интенсивность гуморального иммунного ответа к герпес-вирусам как индикатор иммунологической недостаточности организма [Текст]/Кологривова Е.Н. [и др.]//Журн. микробиол. эпидемиол. и биол.-2000.-№6.-С.45-48.

6. Герпесвирусная инфекция в конце ХХ века [Текст]/Т.В.Латышева, Л.М.Хутиева//Аллерг., астма и клин. иммунол.-2001.-№4.-С.16-23.

7. Гистохимия ферментов. Лабораторные методы [Текст]/З.Лойда, Р.Госсрау, Т.Шиблер; пер. с англ.-М.: Мир, 1982-270 с.

8. Хемилюминесценция и гистохимия лейкоци-

тов периферической крови больных бронхиальной астмой [Текст]/М.Т.Луценко, И.А.Плюснина//Бюл. физиол. и патол. дыхания.-2000.-Вып.7.-С.49-54.

9. Герпес и антифосфолипидный синдром у беременных [Тевсг]/А.Д.Макарация, Н.В.Долгушина//Акуш. и гин.-2001.-№5.-С.53-56.

10. Акушерская тактика у пациенток с герпетической инфекцией [Текст]/Н.В.Орджоникидзе,

В.Л.Тютюнник//Акуш. и гин.-2001.-№4.-С.56-59.

11. Генитальный герпес. Этиология, патогенез, клиника, диагностика, планирование беременности

[Текст]/Н.В.Орджоникидзе, В.Л.Тютюнник, Л.А.Мар-ченко//Акуш. и гин.-2001.-№3.-С.61-63.

12. Особенности течения и ведения беременности при внутриутробном инфицировании плода [Текст]/ И.С.Сидорова, И.Н.Черненко, А.А.Сидоров//Рос. вестник перинатологии и педиатрии.-1998.-№4.-С.13-17.

13. Иммунитет и генитальный герпес

[Текст]/Г.Т.Сухих, М.В.Ванько, В.И.Кулаков.-

Н.Новгород, 1997.-224 с.

14. Недостаточность плаценты и ВПГ-инфекция [Текст]/В. Л. Тютюнник//Акуш. и гин.-2000.-№6.-С.57.

15. Хроматографический профиль щелочной фос-

фомоноэстеразы плаценты при нормальной и осложненной беременности [Текст]/Н.И.Цирельников,

Н.П.Воронина, Н.Л.Лукьянчикова//Бюл.Сиб. отд-ния РАМН.-2001.-№1.-С.95-97.

16. Reactivation of human herpesvirus 6 and 7 in pregnant women [Text]/ Masahiro О. [at al.]//J. Med.Virol.-2002.-Vol.67, № 3.-P.354-358.

17. Effect of immune complexes on human Neutrophil phagocytic function [Text]/G.Starkebaum, R.A.N.Jimenez, W.P.Arend//J.Immunol.-1982.-Vol.128, № 1.-P.141-147.

П □ □

УДК 616.24-097-053.4/.6

Т.Ф.Боровская, Э.Х.Курпас, О.Е.Гусева, М.В.Ефименко, В.К.Козлов, Е.В.Пичуева, С.Г.Гандуров

ОСОБЕННОСТИ ИММУННОГО СТАТУСА И ЦИТОКИНОВОГО ПРОФИЛЯ У ДЕТЕЙ С БРОНХОЛЕГОЧНОЙ ДИСПЛАЗИЕЙ ПРИ РАЗЛИЧНЫХ ВАРИАНТАХ ОБОСТРЕНИЯ

Хабаровский филиал ДНЦ ФПД СО РАМН - НИИ охраны материнства и детства, Дальневосточный государственный медицинский университет РЕЗЮМЕ

Изучали состояние системного иммунитета периферической крови и особенности цитокинового статуса у детей с хронической бронхолегочной патологией. Выявили различия в иммунном реагировании у детей с врожденными пороками легких на фоне различных типов обострения хронического процесса. Провели анализ особенностей иммунного ответа с исследованием цитокинового статуса с учетом особенностей клинического течения по типу бронхообструктивного синдрома и локального воспалительного процесса в легочной ткани.

SUMMARY

T.F.Borovskaya, E.H.Kurpas, O.E.Guseva, M.V.Efimenko, V.K.Kozlov, E.V.Pichueva,

S.G.Gandurov

IMMUNE STATUS AND CYTOKINE PROFILE PECULIARITIES IN CHILDREN WITH BRONCHO-PULMONARY DYSPLASIA WITH DIFFERENT DEGREES OF EXACERBATION

Systemic peripheral blood immunity and cytokine status peculiarities in children with chronic broncho-pulmonary pathology have been studied. Study results showed differences in immune reactions of children with congenital lung disorders during exacerbation stage. Immune response peculiarities and cytokine status in children showing broncho-obstructive syndrome symptoms and focal inflammation in lung tissues have been analyzed.

В настоящее время остается актуальной проблема предупреждения и лечения бронхолегочных заболеваний у детей. В структуре первичной заболеваемости эта патология занимает одно из первых мест у детей всех возрастных групп [7]. Со времени первого описания бронхолегочной дисплазии (БЛД), опубликованного Wh. 1г. Могйтс'ау в 1967 году, прошло 30 лет. Тем не менее, она остается предметом пристального внимания клиницистов и ученых, работающих в области неонатологии [11]. Это объясняется как ростом частоты БЛД (с 67 до 75%), так и не вполне удовлетворительным пониманием патогенетических закономерностей ее развития и отсутствием эффективных методов профилактики и патогенетической терапии. БЛД остается главной причиной летальных исходов, происходящих после выписки детей из стационара [9]. Данная патология в настоящее время считается вторым по частоте хроническим бронхолегочным заболеванием детского возраста после бронхиальной астмы [2]. БЛД обусловлена морфологическими изменениями в виде уменьшения диаметра бронхов, гипертрофии и гиперплазии гладкой мускулатуры бронхиол и бронхов, плоскоклеточной метаплазии бронхиального эпителия, облитерирующего бронхиолита, перибронхиаль-ной гиперпластической инфильтрации, персистирую-щего интерстициального отека, интерстициального фиброза и может проявляться в виде пневмонии с наличием бронхообструкции или без нее [2, 10].

Цель исследования: изучение особенностей иммунного статуса и цитокинового профиля у детей с БЛД при обострении по типу бронхообструктивного синдрома (БОС) и по пневмоническому типу.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.