CC BY
40
и проявляется в незначительном повышении стрессовых гормонов, которое связаны с болевой реакцией на взятие крови. При такой реакции отсутствуют изменения функционального состояния кроветворных органов.
Литература
1. Городецкая И.В. Роль тиреоидных гормонов в адаптивных реакциях организма на антагонистические стрессоры // Патологическая физиология. 2000. № 3. С. 32.
2. Нотова С.В., Дускаева А.Х., Мирошников С.В. Оценка влияния пищевого стресса на психофизиологические и метаболические показатели // Вестник Оренбургского государственного университета. 2012. № 10 (146). С. 54—57.
3. Санин А.В. Понятие стресса и стрессорных факторов // Ветеринарная клиника. 2005. № 6. С. 8—11.
4. Кузнецов А.И., Васильева Т.А. Способ определения стрессовой чувствительности служебных собак // Актуальные проблемы в ветеринарии, биологии и экологии: матер. междунар. науч.-практич. конф., посвящ. 100-летию со дня
рождения проф. А.В. Есютина. Троицк: Изд-во ЮУрГАУ, 2016. С. 40-45.
5. Кузнецов А.И. Характеристика обмена веществ у стресс-чувствительных свиноматок в условиях промышленной технологии // Свиноводство. 1990. № 4. С. 4.
6. Кузнецов А.И., Сунагатуллин Ф.А. Способ оценки по стрессчувствительности // Свиноводство. 1991. № 1. С. 6.
7. Мифтахутдинов А.В., Терман А.Н. Методологические основы определения стрессовой чувствительности кур путём моделирования локального адаптационного синдрома // Актуальные и новые направления сельскохозяйственной науки: матер. VIII междунар. науч.-практич. конф. молодых учёных, посвящ. 75-летию проф. А.Т. Фарниева. Ч. 2. Владикавказ: Изд-во «Горский госагроуниверситет», 2012. С. 120-122.
8. Мифтахутдинов А.В. Экспериментальные подходы к диагностике стрессов в птицеводстве (обзор) // Сельскохозяйственная биология. 2014. № 2. С. 20-30.
9. Горизонтов П.Д., Белоусова О.И., Федотова М.И. Стресс и система крови. М.: Медицина, 1983. 239 с.
10. Джексон М. Ветеринарная клиническая патология. Введение в курс / перев. Т. Лисицыной. М.: Аквариум-Принт, 2009. 384 с.
Гистоархитектоника кишечника цыплят-бройлеров в постинкубационном онтогенезе
О.А. Матвеев, к.б.н., А.А. Торшков, д.б.н., профессор, ФГБОУ ВО Оренбургский ГАУ
Промышленное птицеводство в Российской Федерации в настоящее время развивается успешно и вносит значительный вклад в обеспечение населения продуктами питания, являясь наиболее скороспелой и экономически выгодной отраслью животноводства [1].
Для получения современных представлений о гистофизиологии пищеварительной системы птицы и обоснования применения кормовых добавок и кормов для формирования её продуктивных качеств требуется изучение особенностей гистологического строения кишечника, характерных для каждого кросса [2].
Гистологическому строению кишечника птиц различных кроссов посвящены работы многих авторов [3—7], но морфологических исследований, касающихся гистоархитектоники кишечника цыплят-бройлеров кросса Arbor Acres, в доступной литературе нами не обнаружено.
Цель исследования — изучить гистологическое строение двенадцатиперстной, слепой и прямой кишки цыплят-бройлеров в постинкубационном онтогенезе.
Материал и методы исследования. Объектом для изучения гистологического строения кишечника служили цыплята-бройлеры кросса Arbor Acres в возрасте 1, 7, 14, 21, 28 и 45 сут. Убой и обескровливание цыплят-бройлеров в висячем положении осуществляли по общепринятой методике (резекция больших нёбных артерий и вен по А.В. Комарову). В течение 15—20 мин. после убоя вскрывали грудобрюшную полость птиц и отбирали материал для изготовления гистологических
срезов — образцы поперечных фрагментов тонкого и толстого отделов кишечника. Полученный материал промывали в 0,85%-ном растворе натрия хлорида, затем фиксировали в 10%-ном растворе нейтрального формалина, блоки заливали в парафин [8]. На ротационном микротоме Accu-Cut® SRM™ 200 (Сакура) готовили срезы толщиной 5—7 мкм, окрашивали их гематоксилином и эозином. Для фотографирования микропрепаратов кишечника использовали микроскоп «Микмед-6» с оптико-механическим адаптером АОТ-lC-Canon для фотоаппарата Canon EOS с соответствующим программным обеспечением.
Результаты исследования. Кишечник суточных цыплят-бройлеров имеет типичное строение для трубчатых органов всех позвоночных и состоит из трёх слоёв — слизистого, мышечного и серозного.
Слизистая оболочка двенадцатиперстной кишки цыплят-бройлеров образует выросты — ворсинки и трубчатые углубления — крипты, в эпителии, выстилающем кишечные ворсины, выделяют две субпопуляции клеток: каёмчатые и бокаловидные, соотношение которых равно 9:1. Каёмчатые клетки имеют типичную цилиндрическую форму, цитоплазма слабо оксифильная, ядра базофильные, овальной формы (рис. 1 А, Б). Цитоплазма бокаловидных клеток пенистая, слабо оксифильная, треугольное ядро смещено к базальному полюсу клетки.
Крипты — трубчатые структуры, глубоко врастающие в собственную пластинку слизистой оболочки. Эпителий дна крипты представлен низко дифференцированными формами клеток, пребывающих в состоянии пролиферации. По мере продвижения эпителиоцитов от дна крипты в дистальные отделы кишечной ворсинки проис-
ходит их цитодифференцировка в каёмчатые или бокаловидные клетки.
Собственная пластинка слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки представлена рыхлой соединительной тканью, коллагеновыми и эластическими волокнами. Кроме того, в поле зрения визуализируется множество клеток лейкоцитарного ряда: эозинофилов и лейкоцитов. Мышечная пластинка слизистой оболочки тощей кишки состоит из внутреннего продольного и наружного циркулярного слоёв гладкомышечных клеток. Подслизи-стая основа представлена рыхлой соединительной тканью, в ней сосудистые коллекторы и нервные стволы подслизистого нервного сплетения, просветы дуоденальных желёз не визуализируются.
Мышечная оболочка представлена гладкими миоцитами, структурно подразделяющимися на два слоя — циркулярный и продольный. На поверхности кишечник покрыт серозной оболочкой, имеющей классическое гистологическое строение.
В суточном возрасте слепая кишка цыплят-бройлеров имеет характерный складчатый рельеф, ворсинки не выявляются (рис. 2 А, Б). Эпителиальная составляющая слизистой оболочки тождественна таковой для двенадцатиперстной кишки. Так, в ней выделяются каёмчатые эпителиоциты и бокаловидные клетки, причём их численность колеблется в пределах 6:4.
Крипты — трубчатые, локализуются вблизи мышечной пластинки слизистой оболочки, дно
Рис. 1 - Гистоструктура двенадцатиперстной кишки суточных цыплят-бройлеров:
1 - слизистая оболочка; 2 - мышечная оболочка; 3 - серозная оболочка; 4 - собственная пластинка слизистой оболочки; 5 - кишечная ворсинка. А - окраска гематоксилином и эозином, ув.х100; Б - окраска гематоксилином и эозином, ув.х200
Рис. 2 - Гистоструктура слепой кишки суточных цыплят-бройлеров:
1 - слизистая оболочка; 2 - мышечная оболочка; 3 - серозная оболочка; 4 - собственная пластинка слизистой оболочки. А - окраска гематоксилином и эозином, ув.х100; Б - окраска гематоксилином и эозином, ув.х400
Рис. 3 - Гистоструктура прямой кишки суточных цыплят-бройлеров:
1 - слизистая оболочка; 2 - мышечная оболочка; 3 - скопление лимфоидной ткани. А - окраска гематоксилином и эозином, ув.х100; Б - окраска гематоксилином и эозином, ув.х400
крипт представлено интенсивно пролиферирующи-ми низко дифференцированными безкаёмчатыми эпителиоцитами.
Собственная пластинка слизистой оболочки слепой кишки традиционно представлена рыхлой соединительной тканью и сосудами ГМЦР, расположенными в ней, а также обилием клеток лейкоцитарного ряда (рис. 2Б). Архитектоника мышечной и серозной оболочки идентична таковой у двенадцатиперстной кишки.
Прямая кишка суточных цыплят-бройлеров имеет специфический рельеф слизистой оболочки, отличный от вышеописанных отделов кишечника, что, по-видимому, объясняется продольной ориентацией складок по отношению к полости кишки, крипты не выявляются. Эпителиальная выстилка в большей своей массе представлена бокаловидными клетками в соотношении 4:6 (рис. 3 А, Б).
Под собственной пластинкой слизистой оболочки визуализируются скопления лимфоидных клеток, формирующих подобие солитарных фолликул. Паренхима лимфоидных узелков представлена
ретикулярной тканью и лимфоцитами на разных стадиях дифференцировки. Локально отмечаются лимфобласты на разных этапах митоза.
К 14-м суткам в кишечнике цыплят-бройлеров появляется тенденция к визуальному увеличению толщины мышечного слоя во всех исследуемых участках (рис. 4А-В).
Кроме того, в двенадцатиперстной и слепой кишке отмечается увеличение высоты кишечных ворсинок и рельефа слизистой оболочки соответственно. Собственная оболочка и подслизистая основа приобретают способность дальнейшего развития; мышечная оболочка слабо визуализируется, разбиваясь на отдельные пучки гладкомышечных клеток; просветы дуоденальных желёз нами не выявлены; хорошо визуализируются кровенаполненные сосудистые коллекторы гемомокроциркуляторного русла.
В собственной пластинке слизистой оболочки прямой кишки отмечается укрупнение лимфоидных образований. Соотношение типов эпителиальных клеток — столбчатые/бокаловидные сохраняет свои пропорции 4:6.
Рис. 4 - Гистоструктура двенадцатиперстной, слепой и прямой кишки 14-суточных цыплят-бройлеров:
А - двенадцатиперстная кишка; Б - слепая кишка; В - прямая кишка. Окраска гематоксилином и эозином, ув.х100
Рис. 5 - Гистоструктура двенадцатиперстной, слепой и прямой кишки цыплят-бройлеров на 28-е сутки (А-В): А - дуоденальные железы в фазе активной секреции; Б - лимфоидные образования слепой кишки; В - усиление сосудистой и нервной трофики прямой кишки. А, Б - окраска гематоксилином и эозином, ув.х100; В - окраска гематоксилином и эозином, ув.х400
Рис. 6 - Гистоструктура двенадцатиперстной, слепой и прямой кишки цыплят-бройлеров на 45 сутки (А-В): А - усиление сосудистой и нервной трофики двенадцатиперстной кишки; Б - преобразование рельефа слизистой оболочки слепой кишки; В - превалирование бокаловидных клеток в слизистой оболочке прямой кишки. А, Б - окраска гематоксилином и эозином, ув.х100; В - окраска гематоксилином и эозином, ув.х400.
Во временном интервале 28 сут. в двенадцатиперстной кишке выявляются подслизистые сложные трубчатые дуоденальные железы с морфологическими признаками интенсивной выработки кишечного сока, поскольку их просветы заполнены слабоокрашивающимся, имеющим пенистый вид субстратом (рис. 5 А).
Стенка доуденальной железы представлена однослойным низкопризматическим эпителием, ядро смещено к базальному полюсу, в апикальной части эпителиоцита визуализируется обилие вакуолей с созревающим секретом. Прочие параметры сопоставимы с таковыми в ранее исследуемый период.
Слепая кишка цыплят-бройлеров на 28-е сут. постинкубационного онтогенеза демонстрирует тенденцию к образованию на границе подслизи-стого слоя и мышечной оболочки слепой кишки обособленных лимфоидных образований (рис. 5, Б).
К 28-м суткам прямая кишка в отличие от вышележащих отделов кишечника имеет максимально развитую сосудистую и нервную трофику, что, вероятно, объясняется наиболее интенсивным в этот период ростом бедренной мускулатуры и становлением иммунной функции, прилежащей фабрициевой бурсы (рис. 5 В).
Глубина складок слизистой оболочки увеличивается, равно как и количество бокаловидных клеток (3: 7) относительно ранее изученного периода.
К моменту достижения цыплятами-бройлерами убойного возраста 45 сут. для двенадцатиперстной кишки становится характерным визуальное утолщение продольного мышечного слоя, в межмышечном пространстве выявляются магистральные сосуды и мелкие безмиелиновые нервные волокна, а непосредственно под серозной оболочкой отмечаются крупные сосудисто-нервные пучки (рис. 6А).
Слизистая и мышечная оболочки слепой кишки не претерпевают существенных морфологических изменений. Однако к моменту наступления убойного возраста — 45 суток, рельеф слизистой оболочки приобретает классический вид, вероятно,
обеспечивающий наиболее эффективные процессы пищеварения (рис. 6 Б).
В прямой кишке к 45 суточному возрасту численность бокаловидных клеток ещё сильнее возрастает, достигая соотношения 2:8 по отношению к прочим эпителиоцитам слизистой оболочки прямой кишки (рис. 6 В). В собственной пластинке слизистой выявляются процессы миграции через венулы значительного количества клеток лейкоцитарного ряда, преимущественно за счёт лимфоидных клеток (вероятно, перераспределяясь, продукты цитодиф-ференцировки мозговых зон лимфоэпителиальных фолликулов бурсы Фабрициуса обеспечивают гуморальный гомеостаз).
Вывод. Гистоархитектоника двенадцатиперстной, слепой и прямой кишки цыплят-бройлеров характеризует не только процесс цитодифферен-цировки их отдельных компонентов, смену типа питания, интенсификацию пристеночного пищеварения и всасывания, но также и косвенно отображает динамику роста локомоторного аппарата.
Литература
1. Бобылев Г.В. Селекция: настоящее и будущее // Птицеводство. 2006. № 11. С. 2-5.
2. Понкратова Т.Ю. Семченко В.В. Морфометрическая характеристика двенадцатиперстной кишки цыплят-бройлеров кросса Росс 308 по истечении 15-х и 21-х суток постна-тального периода // Вестник Омского государственного аграрного университета. 2017. № 1 (25). С. 109-114.
3. Грозина А.А., Пронин В.В., Дюмин М.С. Морфологическая оценка стенки кишечника цыплят кросса «КОББ 500» на фоне применения антибиотика и пробиотика // Сельскохозяйственные животные. 2014. № 4. С. 16-17.
4. Жарова Е.Ю., Ткачёв А.А. Морфология толстого кишечника кур кросса «ИЗА-браун» // Птицеводство. 2007. № 10. С. 38.
5. Тучемский Л.И. Гистологическая характеристика желудочно-кишечного тракта у курочек породы корниш в постнатальном онтогенезе / Л.И. Тучемский, Ж.В. Емануйлова, В.В. Ни-китченко [и др.] // Птицеводство. 2012. № 5. С. 5-8.
6. Тучемский Л.И. Гистологическая характеристика желудочно-кишечного тракта у курочек породы плимутрок в постна-тальном онтогенезе / Л.И. Тучемский, Ж.В. Емануйлова, В.В. Никитченко [и др.] // Птицеводство. 2012. № 5. С. 9-12.
7. Шестаков В.А. Гистоструктура слепых кишок бройлеров в норме и при экспериментальном эшерихиозе // Птицеводство. 2015. № 3. С. 13-15.
8. Семченко В.В., Барашкова С.А., Артемьев В.Н. Гистологическая техника: учебное пособие. 2-е изд., стереотип. Омск: Омская медицинская академия, 2003. 152 с.
