CC BY
34
Клиническая онкогематология. 2019;12(3):297-302
Клиническая онкогематология. 2019;12(3):297-302
МИЕЛОИДНЫЕ ОПУХОЛИ
Гиперэкспрессия гена WT1 в дифференциальной диагностике Ph-негативных миелопролиферативных заболеваний
Е.Г. Ломаиа1, Н.Т. Сиордия1, Е.Г. Лисина2,
О.М. Сендерова3, А.А. Силютина1, А.Ю. Зарицкий1
1 ФГБУ «НМИЦ им. В.А. Алмазова» Минздрава России, ул. Аккуратова, д. 2, Санкт-Петербург, Российская Федерация, 197341
2 ГБУЗ «Городская клиническая больница № 52 ДЗМ», ул. Пехотная, д. 3, Москва, Российская Федерация, 123182
3 ГБУЗ «Иркутская ордена "Знак Почета" областная клиническая больница», микрорайон Юбилейный, д. 100, Иркутск, Российская Федерация, 664049
РЕФЕРАТ
Цель. Оценить частоту гиперэкспрессии гена WT1 и ее клиническое значение при Ph-негативных миелопролиферативных заболеваниях (МПЗ).
Материалы и методы. В исследование включено 72 пациента с Ph-негативными МПЗ. Среди них были больные с первичным миелофиброзом (МФ; n = 32), вторичным МФ после истинной полицитемии (n = 7), истинной полицитеми-ей (ИП; n = 17) и эссенциальной тромбоцитемией (ЭТ; n = 16) с медианой возраста 57 лет (диапазон 19-78 лет). Медиана (диапазон) времени от постановки диагноза до даты исследования уровня экспрессии WT1 при ИП, ЭТ и МФ составила 9,4 (0-309), 14,4 (0-55) и 21,4 мес. (0-271 мес.) соответственно. Оценка экспрессии гена WT1 на 104 копий ABL проводилась методом количественной ПЦР. Результаты. Гиперэкспрессия гена WT1 выявлена исключительно у пациентов с МФ (у 34/39; 87 %). При ИП/ ЭТ гиперэкспрессии гена WT1 не отмечалось. Медиана уровня экспрессии гена WT1 при МФ составила 230 копий/104 копий ABL (диапазон 42,2-9316,45/104 копий ABL). Чувствительность и специфичность гиперэкспрессии гена WT1 при МФ по отношению к ИП/ЭТ составили 87 и 100 % соответственно. Выявлена четкая зависимость уровня экспрессии гена WT1 от размера селезенки, длительности заболевания, числа бластных клеток в крови, группы риска по шкале DIPSS. На уровень экспрессии гена WT1 не влияли пол и возраст пациентов, мутационный статус МФ, уровень лейкоцитов, тромбоцитов, гемоглобина. Заключение. Представляется, что высокие специфичность и чувствительность уровня экспрессии гена WT1 при МФ позволяют использовать данный маркер для дифференциальной диагностики Ph-негативных МПЗ. Не исключается связь уровня экспрессии гена WT1 с объемом опухолевой массы при МФ. Целесообразно изучать динамику уровня экспрессии гена WT1 для прогнозирования эффективности современной таргетной терапии.
MYELOID TUMORS
WT1 Gene Overexpression in Differential Diagnosis of Ph-negative Myeloproliferative Disorders
EG Lomaia1, NT Siordiya1, EG Lisina2, OM Senderova3, AA Silyutina1, AYu Zaritskey1
1 VA Almazov National Medical Research Center, 2 Akkuratova str., Saint Petersburg, Russian Federation, 197341
2 Municipal Clinical Hospital No. 52, 3 Pekhotnaya str., Moscow, Russian Federation, 123182
3 Irkutsk Regional Clinical Hospital, 100 Yubileinyi microdistrict, Irkutsk, Russian Federation, 664049
ABSTRACT
Aim. To assess the rate of WT1 gene overexpression and its clinical value in Ph-negative myeloproliferative disorders (MPD).
Materials & Methods. The trial included 72 patents with Ph-negative MPD. Among them there were patients with primary myelofibrosis (MF; n = 32), post-polycythemia vera MF (n = 7), polycythemia vera (PV; n = 17), and essential throm-bocythemia (ET; n = 16) with median age of 57 years (range 19-78 years). Median (range) time from diagnosis to the date of evaluating WT1 expression in PV, ET, and MF was 9.4 (0-309), 14.4 (0-55), and 21.4 months (0-271 months), respectively. WT1 expression in terms of WT1 copies/104 ABL copies was measured by quantitative PCR. Results. WT1 gene overexpression is revealed solely in patients with MF (in 34/39; 87 %). In PV/ET no WT1 gene overexpression was observed. Median WT1 expression in MF was 230/104 ABL copies (range 42.2-9,316.45/104 ABL copies). Sensitivity and specificity of WT1 gene overexpression in MF with respect to PV/ET were 87 % and 100 %, respectively. A distinct correlation was identified between WT1 gene expression level and spleen size, duration of the disease, blast cell count, and DIPSS risk group. WT1 gene expression level could be correlated neither with age and sex, nor with MF mutation status and leucocyte, thrombocyte, and haemoglobin levels.
Conclusion It appears that due to a high specificity and sensitivity of WT1 gene expression in MF it can be used as a marker for differential diagnosis of Ph-negative MPD. A correlation between WT1 gene expression and tumor mass in MF cannot be excluded. It is advisable to analyze the dynamics of WT1 expression level to predict the efficacy of current targeted therapy.
© 2019 практическая медицина
297
Ключевые слова: ген WT1, Ph-негативные миело-пролиферативные заболевания, миелофиброз, истинная полицитемия, эссенциальная тромбо-цитемия.
Keywords: WT1 gene, Ph-negative myeloproliferative disorders, myelofibrosis, polycythemia vera, essential thrombocythemia.
Получено: 27 декабря 2018 г. Принято в печать: 2 июня 2019 г.
Received: December 27, 2018 Accepted: June 2, 2019
Для переписки: Надия Тамазовна Сиордия, ул. Аккуратова, д. 2, Санкт-Петербург, Российская Федерация, 197341; тел.: +7(921)358-31-32; e-mail: [email protected] Для цитирования: Ломаиа Е.Г., Сиордия Н.Т., Лисина Е.Г. и др. Гиперэкспрессия гена WT1 в дифференциальной диагностике Ph-негативных миелопролиферативных заболеваний. Клиническая онкогематология. 2019;12(3):297-302.
doi: 10.21320/2500-2139-2019-12-3-297-302
For correspondence: Nadiya Tamazovna Siordiya, 2 Akkuratova str.,
Saint Petersburg, Russian Federation, 197341;
Tel.: +7(921)358-31-32; e-mail: [email protected]
For citation: Lomaia EG, Siordiya NT, Lisina EG, et al.
WT1 Gene Overexpression in Differential Diagnosis
of Ph-Negative Myeloproliferative Disorders. Clinical oncohematology.
2019;12(3):297-302 (In Russ).
doi: 10.21320/2500-2139-2019-12-3-297-302
ВВЕДЕНИЕ
Ген WT1 локализован на коротком плече хромосомы 11 (11p13) и кодирует транскрипционные факторы семейства цинк-пальцевых белков. Дикий тип данного гена или его мутантные формы могут регулировать транскрипцию генов RARa, c-MYC, BCL-2, PDGF-A, CSF-1 и др. [1-5], играющих определенную роль в гемопоэзе. Известно, что в норме WT1 экспрессируется в ранних предшественниках CD34+ и не обнаруживается в зрелых субпопуляциях гемопоэтических клеток [6, 7]. Мутации данного гена крайне редко выявляются при онкогематологических заболеваниях, тогда как доля пациентов с гиперэкспрессией гена WT1 при острых миелобластных лейкозах (ОМЛ) и миелодиспласти-ческих синдромах (МДС) значительная [8-11]. Точная роль данного гена в патогенезе заболеваний крови не установлена. Предполагается, что WT1 может влиять на пролиферативный потенциал лейкозных клеток, их жизнеспособность и выступать в роли онкогена при развитии гематологических опухолей [12]. Прогностическое значение исходного уровня гена WT1 при ОМЛ четко не определено, при этом динамика уровня его экспрессии активно используется для оценки минимальной остаточной болезни и прогнозирования отдаленных результатов терапии [13-15]. Клиническое значение гиперэкспрессии гена WT1 при других миелоидных опухолях, в т. ч. при Ph-негативных миелопролиферативных заболеваниях (МПЗ), активно изучается. Так, при МДС рост уровня экспрессии данного гена коррелирует с прогрессиро-ванием болезни и может быть предвестником трансформации в ОМЛ [16]. У пациентов с миелофиброзом (МФ) была показана связь уровня экспрессии гена WT1 с опухолевой массой, а также с группами риска по шкалам Dupriez и IPSS (International Prognostic Scoring System) [17].
В нашем исследовании гиперэкспрессия гена WT1 выявлялась у подавляющего большинства пациентов с первичным (ПМФ), вторичным после истинной полицитемии (пост-ИП МФ) или эссенци-альной тромбоцитемии (пост-ЭТ МФ) миелофиброзом.
У пациентов с МФ, получающих терапию ингибитором ]АК1/2-киназ руксолитинибом, уровень экспрессии ШТ1 коррелировал с размером селезенки и числом бластных клеток в крови [18, 19].
Цель настоящего исследования — оценить частоту гиперэкспрессии гена ШТ1 при всех классических Р^негативных МПЗ (МФ, ИП, ЭТ), а также сопоставить уровень его экспрессии с клинико-лаборатор-ными проявлениями заболеваний данной группы для выявления клинической значимости маркера.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
В исследование включено 72 пациента: 33 (46 %) мужчины и 39 (54 %) женщин. Из них пациентов с диагнозом ИП, ЭТ и МФ было 17 (24 %), 16 (22 %) и 39 (54 %) соответственно. Среди пациентов с МФ большинство были с ПМФ — 32 (82 %) из 39. Пост-ИП МФ был у 7 (18 %) из 39 больных. Пациентов с пост-ЭТ МФ в целевой группе не было. В исследование включены только пациенты с Р^негативными МПЗ, установленными в соответствии с критериями классификации ВОЗ 2008 г. Медиана возраста на момент включения в исследование в общей группе пациентов составила 57 лет (диапазон 19-78 лет). Существенных различий по возрасту в группах ИП (медиана 54 года, диапазон 21-78 лет), ЭТ (медиана 53 года, диапазон 19-73 года) и МФ (медиана 58 лет, диапазон 26-77 лет) не наблюдалось. Медиана времени от постановки диагноза до начала исследования была существенно выше в группе пациентов с МФ. Так, этот показатель в общей группе был 13,7 мес. (диапазон 0-309 мес.), а в группах ИП, ЭТ и МФ — 9,4 (диапазон 0-309 мес.), 14,4 (диапазон 0-55 мес.) и 21,4 мес. (диапазон 0-271 мес.) соответственно. Всем пациентам на момент первичного обращения по поводу МПЗ или позже с целью подтверждения диагноза проводилось исследование на мутации генов ]АК2, CALR и МРЬ. Частота выявления мутаций данных генов приведена в табл. 1.
У всех пациентов уровень транскрипта гена ШТ1 определяли в крови. С этой целью осуществляли забор крови в количестве 2,5 мл в пробирку ЭДТА-К3.
Оценка экспрессии гена WT1 проводилась путем количественной полимеразной цепной реакции (ПРЦ) с использованием стандартного набора Profilequant WT1 kit (Ipsogen, Франция) на ПЦР-анализаторе Rotorgene 6000. Результат выражался в нормализованном количестве копий WT1 на 104 копий ABL. Не учитывался результат при концентрации гена нормализатора менее 10 000 копий ABL на реакцию. Согласно рекомендациям D. Cilloni и соавт., пороговый уровень WT1 стандартизован и составляет 50/104 копий ABL в крови [20]. В связи с этим как повышенный (гиперэкспрессия) определяли уровень экспрессии гена WT1 > 50 копий/104 копий ABL.
При обработке данных были использованы методы описательной и сравнительной статистики.
РЕЗУЛЬТАТЫ
В ходе исследования гиперэкспрессия гена ШТ1 была выявлена у подавляющего большинства пациентов с МФ, тогда как у больных ИП и ЭТ этот показатель не превышал порогового значения. Медиана уровня экспрессии ШТ1 также была статистически значимо выше в группе пациентов с МФ по сравнению с группами ИП и ЭТ. В последних группах данный показатель был в пределах нормальных значений и сравнимым для ИП и ЭТ (р = 0,11). При этом у 6 (86 %) из 7 пациентов с
Таблица 1. Частота мутаций генов МК2, CALR и MPL у пациентов с Ph-негативными миелопролиферативными заболеваниями
МФ,
n = 39
Пост-
ИП, ЭТ, ПМФ, ИП МФ, Всего,
Мутации, n (%) n = 17 n = 16 n = 32 n = 7 n = 72
JAK2V617F 17 (100) 8 (50,0) 17(53,1) 7 (100) 49 (68,0)
CALR 0 8 (50,0) 11 (34,4) 0 19 (26,4)
MPL 0 0 1 (3,1) 0 1 (1,4)
Тройной 0 0 3 (9,4) 0 3 (4,2)
негативный
статус
ИП — истинная полицитемия; МФ — миелофиброз; ПМФ — первичный миелофиброз; пост-ИП МФ — миелофиброз после истинной полицитемии; ЭТ — эссенциальная тромбоцитемия.
пост-ИП МФ выявлялась гиперэкспрессия гена WT1, а медиана его уровня в этой группе была сравнимой с таковой в группе с ПМФ (p = 0,56). Так, медиана (диапазон) уровня WT1 у пациентов с ПМФ и пост-ИП МФ была одинаковой и составила 230 (2,6-9316,45) и 230 (47,9-6869,88) копий/104 копий ABL соответственно. Частота гиперэкспрессии гена WT1 и медиана его уровня у пациентов с ИП, ЭТ и МФ представлены в табл. 2. Чувствительность и специфичность гиперэкспрессии WT1 при МФ по отношению к ИП и ЭТ были высокими и составили 87 и 100 % соответственно.
У пациентов с ПМФ проанализирован уровень экспрессии гена WT1 в зависимости от мутационного статуса генов JAK2 и CALR. Он был выше у больных с положительным мутационным статусом гена CALR по сравнению с пациентами с мутацией JAK2V617F и составил 611 (2,6-6000) и 164 (12,07-9316,45) копий/104 копий ABL соответственно. Однако статистически значимых различий не получено (p < 0,5). Эти данные у пациентов с мутацией MPL и тройным негативным статусом из-за малого числа наблюдений (1 и 3 пациента соответственно) не подвергались сравнительному анализу. Тем не менее следует отметить, что у всех пациентов с тройным негативным статусом отмечалась гиперэкспрессия гена WT1 > 160 копий/104 копий ABL.
Мы также изучили зависимость уровня экспрессии гена WT1 у пациентов с МФ от целого ряда других клинико-гематологических показателей, таких как пол, возраст, размер селезенки, число бластных клеток в крови, уровень гемоглобина, лейкоцитов, тромбоцитов, группа риска по модифицированной шкале DIPSS (Dynamic International Prognostic Scoring System), активность лактатдегидрогеназы (ЛДГ), длительность МПЗ до исследования. С этой целью мы разделили уровень WT1 на: 1) нормальный (0-50), 2) высокий (> 50-500) и 3) очень высокий (> 500 копий/104 копий ABL). Среди изученных факторов выявлено, что пол, возраст, уровень лейкоцитов, тромбоцитов, гемоглобина, ЛДГ на степень экспрессии гена WT1 не влияли (p > 0,5). Статистически значимая разница получена в группах пациентов с различными длительностью болезни, размером селезенки, числом бластных клеток в крови, наличием неблагоприятной группы риска DIPSS (p < 0,05) (табл. 3).
Таблица 2. Уровень экспрессии гена WT1 при Ph-негативных миелопролиферативных заболеваниях _Показатель_ИП, n = 17_ЭТ, n = 16_МФ, n = 39_p
Частота гиперэкспрессии гена WT1, n (%) 0 0 34 (87) 0,0004
Медиана (диапазон) копий гена WT1/104 копий ABL_8,44 (0-34,8)_4,87 (0-36,12) 230 (2,6-9316,45) 0,0001
ИП — истинная полицитемия; МФ — миелофиброз; ЭТ — эссенциальная тромбоцитемия.
Таблица 3. Клинико-гематологические показатели, статистически значимо влияющие на уровень экспрессии гена WT1 у пациентов
с миелофиброзом
Уровень экспрессии WT1, копии/104 копий ABL Показатель 0-50 (n = 5) > 50-500 (n = 21) > 500 (n = 13) Всего
Медиана (диапазон) времени от диагноза миелофиброза до исследования уровня ШТ1, мес. 3,6 (0-67) 21,4 (2-271) 37,5 (0-160) 21,4 (0-271)
Медиана (диапазон) спленомегалии из-под реберной дуги, см 7 (2-18) 9,5 (2-30) 17 (1-24) 9 (1-30)
Случаи спленомегалии > 10 см из-под реберной дуги, п (%) 1 (20) 9 (43) 9 (69) 19 (49)
Число бластных клеток в крови > 1 %, п (%) 1 (20) 6 (29) 8 (62) 15 (38,5)
Пациенты промежуточной-2 и высокой групп риска, п (%) 1 (20) 9 (43) 8 (62) 18 (46)
В группе пациентов с числом бластных клеток в крови 1 % и более уровень экспрессии гена WT1 был статистически значимо выше по сравнению с группой пациентов без бластных элементов в крови и составил 611 (45,8-9316,45) и 149 (2,6-6000) копий/104 копий ABL соответственно.
ОБСУЖДЕНИЕ
За последнее десятилетие сделан прорыв в изучении биологии Р^негативных МПЗ. Выявлены молеку-лярно-генетические маркеры, играющие важную роль в патогенезе заболеваний данной группы. Мутации генов ]ЛК2, СЛЬЯ МРЬ являются высокоспецифичными для классических Р^негативных МПЗ. В то же время определить конкретное заболевание внутри этой группы с помощью перечисленных маркеров не представляется возможным. Так, мутация ]ЛК2У617¥ встречается при всех Р^негативных МПЗ данной группы, а мутации генов СЛ1Я и ЫРЬ выявляются как при ЭТ, так и при ПМФ [21-23]. При этом активно изучается влияние данных молекулярных маркеров на клиническое течение заболевания, его осложнений и их прогностическая роль [24-26]. У пациентов с ИП, ЭТ и ПМФ выявлены и другие молекулярно-генетиче-ские аберрации. Однако они также не являются строго специфичными, встречаются при многих миелоидных новообразованиях и, следовательно, не помогают в определении конкретной нозологической формы в пределах группы Р^негативных МПЗ [27, 28]. На сегодня единственным способом подтверждения диагноза ПМФ, а также перехода ИП и ЭТ в миелофиброз является морфологическая оценка костного мозга.
Диагностика МПЗ — комплексная, включает трепанобиопсию костного мозга [29], которая является обязательным элементом для подтверждения диагноза МФ, ИП и ЭТ в соответствии с Российскими рекомендациями по ведению пациентов с МПЗ [30]. Процедура инвазивная и болезненная. В редких случаях возможны тяжелые осложнения [31], поэтому важен поиск малоинвазивных методов диагностики МФ. В этом контексте данные, полученные в ходе нашего исследования, представляются интересными.
Так, у подавляющего большинства пациентов с МФ (87 %) выявлялась гиперэкспрессия гена WT1, тогда как этот маркер был в пределах нормы у всех пациентов с ИП и ЭТ. Интересно, что только у 1 (14 %) из 7 пациентов с пост-ИП МФ экспрессия гена ШТ1 была в пределах нормальных значений. Высокие специфичность и чувствительность данного теста позволяют разграничить МФ и другие Р^негативные МПЗ, такие как ИП и ЭТ. Представляется, что данный тест может быть надежным методом дифференциальной диагностики между ПМФ и ИП/ЭТ. Вероятно, этот тест также может использоваться для диагностики трансформации ИП/ЭТ во вторичный МФ. Большинство пациентов (86 %) с пост-ИП-МФ имели высокий уровень экспрессии WT1. Однако утверждать последнее сложно из-за небольшого числа наблюдений со вторичным МФ. Следует также иметь в виду, что среди пациентов со вторичным МФ не было случаев с пост-ЭТ МФ. В данное исследование также не вклю-
чены пациенты с префибротической формой ПМФ, в связи с чем невозможно оценить диагностическую ценность определения уровня экспрессии гена WT1 в этой группе пациентов.
В настоящей работе морфологическое исследование костного мозга выполнялось не одновременно с количественной оценкой уровня WT1, поэтому невозможно сопоставить степень фиброза костного мозга с уровнем экспрессии данного гена. Интересно, что в работе D. Gallo и соавт. динамика уровня экспрессии гена WT1 на фоне терапии ингибитором JAK1/2 рук-солитинибом коррелировала с динамикой степени фиброза костного мозга [17].
Причины гиперэкспрессии гена WT1 при МПЗ недостаточно изучены. Известно, что гиперэкспрессия гена WT1 наблюдается в CD34+ гемопоэтических предшественниках здоровых доноров, так же как и в опухолевых клетках при некоторых лейкозах [32]. В исследованиях было показано, что количество клеток CD34+ в крови как при ПМФ, так и при вторичном пост-ЭТ и пост-ИП МФ было значимо выше, чем у здоровых людей [33, 34]. Колониеобразующая способность гемопоэтических предшественников при лейкозах, а также при МПЗ отличается [35]. Интересно, что в исследовании B. Arora и соавт. количество клеток CD34+ было выше нормы у 86 % пациентов с ПМФ [32], что сопоставимо с долей пациентов с гиперэкспрессией гена WT1 в наших наблюдениях (87 %). Можно предположить, что при МФ уровень экспрессии WT1 служит суррогатным маркером количества клеток CD34+.
В представленной работе, как и в работе D. Gallo и соавт. [17], не удалось выявить четкую корреляцию между уровнем экспрессии гена WT1 и мутационным статусом гена JAK2 или CALR. При этом в обоих исследованиях выявлена взаимосвязь между уровнем экспрессии WT1 и рядом клинико-гематологических показателей. В нашей работе гиперэкспрессия гена WT1 наблюдалась статистически значимо чаще у пациентов с длительным анамнезом (28,2 vs 3,6 мес.), массивной спленомегалией (53 vs 20 %), бластными клетками в крови (41 vs 20 %), а также с промежу-точной-2 и высокой группами риска (50 vs 20 %).
В наблюдении D. Gallo и соавт. у 5 из 10 пациентов повышение экспрессии гена WT1 отмечалось за несколько месяцев до трансформации в ОМЛ, еще в отсутствие других признаков прогрессирования болезни [17]. В ретроспективном исследовании Р. А. Beer и соавт. показано, что у всех 16 пациентов со вторичным ОМЛ после JAK2V617F-позитивного МПЗ в анамнезе наблюдалась гиперэкспрессия гена WT1. Однако оценка экспрессии WT1 в дебюте заболевания или до момента трансформации не проводилась [23]. За время наблюдения только в 1 случае установлена трансформация болезни в ОМЛ. При этом как в хронической фазе МФ, так и после трансформации в ОМЛ уровень экспрессии гена WT1 существенно не менялся. Вероятно, требуется больше данных для уточнения прогностического значения изучаемого маркера с точки зрения развития вторичного ОМЛ у пациентов с МПЗ. Представляется, однако, что уровень экспрессии гена WT1 может отражать объем опухолевой массы при МФ.
Таргетная терапия ингибитором ]АК1/2 руксоли-тинибом при МФ существенно увеличивает продолжительность жизни пациентов с неблагоприятным прогнозом и приводит к значительному улучшению статуса больного (уменьшение селезенки, исчезновение общих симптомов) [36, 37]. В исследовании Т.И. Ионовой и соавт. было подтверждено, что у пациентов с МФ препарат значительно улучшает качество жизни [38]. Однако доля больных МФ с первичной или вторичной неэффективностью руксолитиниба оказалось высокой [36, 39]. Важно найти молекулярные маркеры, позволяющие на ранних этапах оценить степень и темпы прогрессирования заболевания. Это даст возможность своевременно включить в план лечения пациентов трансплантацию аллогенных гемопоэтических стволовых клеток. В этом контексте представляется целесообразным дальнейшее изучение роли гена WT1 в прогнозировании течения заболевания и результатов современной терапии.
КОНФЛИКТЫ ИНТЕРЕСОВ
Авторы заявляют об отсутствии конфликтов интересов.
ИСТОЧНИКИ ФИНАНСИРОВАНИЯ
Исследование не имело спонсорской поддержки.
ВКЛАД АВТОРОВ
Концепция и дизайн: Е.Г. Ломаиа, А.Ю. Зарицкий. Сбор и обработка данных: Н.Т. Сиордия, Е.Г. Лисина. Предоставление материалов исследования: Н.Т. Си-ордия, Е.Г. Лисина, А.А. Силютина, О.М. Сендерова. Анализ и интерпретация данных: Е.Г. Ломаиа, Н.Т. Сиордия.
Подготовка рукописи: Е.Г. Ломаиа, Н.Т. Сиордия. Окончательное одобрение рукописи: А.Ю. За-рицкий.
flMTEPATYPA/REFERENCES
1. Han Y, San-Marina S, Liu J, et al. Transcriptional activation of c-myc proto-oncogene by WT1 protein. Oncogene. 2004;23(41):6933-41. doi: 10.1038/ sj.onc.1207609.
2. Hewitt SM, Hamada S, McDonnell TJ, et al. Regulation of the proto-onco-genes bcl-2 and c-myc by the Wilms' tumor suppressor gene WT1. Cancer Res. 1995;55(22):5386-9.
3. Jin DK, Kang SJ, Kim SJ, et al. Transcriptional regulation of PDGF-A and TGF-beta by +KTS WT1 deletion mutants and a mutant mimicking Denys-Drash syndrome. Ren Fail. 1999;21(6):685-94.
4. Harrington MA, Konicek B, Song A, et al. Inhibition of colony-stimulating factor-1 promoter activity by the product of the Wilms' tumor locus. J Biol Chem. 1993;268(28):21271-5.
5. Hu Q, Gao F, Tian W, et al. Wt1 ablation and Igf2 upregulation in mice result in Wilms tumors with elevated ERK1/2 phosphorylation. J Clin Invest. 2011;121(1):174-83. doi: 10.1172/JCI43772
6. Maurer U, Brieger J, Weidmann E, et al. The Wilms' tumor gene is expressed in a subset of CD34+ progenitors and downregulated early in the course of differentiation in vitro. Exp Hematol. 1997;25(9):945-50.
7. Baird PN, Simmons PJ. Expression of the Wilms' tumor gene (WT1) in normal hemopoiesis. Exp Hematol. 1997;25(4):312-20.
8. King-Underwood L, Renshaw J, Pritchard-Jones K. Mutations in the Wilms' tumor gene WT1 in leukemias. Blood. 1996;87(6):2171-9.
9. Ho PA, Zeng R, Alonzo TA, et al. Prevalence and prognostic implications of WT1 mutations in pediatric acute myeloid leukemia (AML): a report from the Children's Oncology Group. Blood. 2010;116(5):702-10. doi: 10.1182/blood-2010-02-268953.
10. Tamaki H, Ogawa H, Ohyashiki K, et al. The Wilms' tumor gene WT1 is a good marker for diagnosis of disease progression of myelodysplastic syndromes. Leukemia. 1999;13(3):393-9. doi: 10.1038/sj.leu.2401341.
11. Miwa H, Beran M, Saunders GF. Expression of the Wilms' tumor gene (WT1) in human leukemias. Leukemia. 1992;6(5):405-9.
12. Alberta JA, Springett GM, Rayburn H, et al. Role of the WT1 tumor suppressor in murine hematopoiesis. Blood. 2003;101(7):2570-4. doi: 10.1182/blood-2002-06-1656.
13. Гиршова Л.Л., Будаева И.Г., Овсянникова Е.Г. и др. Прогностическое значение и корреляция динамики гиперэкспрессии гена WT1 и мутации гена NPM1 у пациентов с острым миелобластным лейкозом. Клиническая онко-гематология. 2017;10(4):485-93. doi: 10.21320/2500-2139-2017-10-4-485-493.
[Girshova LL, Budaeva IG, Ovsyannikova EG, et al. Prognostic Value and Correlation Between WT1 Overexpression and NPM1 Mutation in Patients with Acute Myeloblastic Leukemia. Clinical oncohematology. 2017;10(4):485-93. doi: 10.21320/2500-2139-2017-10-4-485-493. (In Russ)]
14. Мамаев Н.Н., Гудожникова Я.В., Горбунова А.В. Гиперэкспрессия гена WT1 при злокачественных опухолях системы крови: теоретические и клинические аспекты (обзор литературы). Клиническая онкогематология. 2016;9(3):257-64. doi: 10.21320/2500-2139-2016-9-3-257-264.
[Mamaev NN, Gudozhnikova YaV, Gorbunova AV. WT1 Gene Overexpression in Oncohematological Disorders: Theoretical and Clinical Aspects (Literature Review). Clinical oncohematology. 2016;9(3):257-64. doi: 10.21320/2500-21392016-9-3-257-264. (In Russ)]
15. Будаева И.Г., Гиршова Л.Л., Кузин С.О. и др. Прогностическое значение уровня гена WT1 у больных острыми миелоидными лейкозами с изолированной мутацией NPM1 и мутацией NPM1 c дополнительными молекулярными маркерами. Клиническая онкогематология. 2017;10(4):530-1.
[Budaeva IG, Girshova LL, Kuzin SO, et al. Prognostic Value of WT1 Gene Level in Patients with Acute Myeloid Leukemia with Isolated NPM1 and NPM1 Mutation with Additional Molecular Markers. Clinical oncohematology. 2017;10(4):530-1. (In Russ)]
16. Tamura H, Dan K, Yokose N, et al. Prognostic significance of WT1 mRNA and anti-WT1 antibody levels in peripheral blood in patients with myelodysplastic syndromes. Leuk Res. 2010;34(8):986-90. doi: 10.1016/j.leukres.2009.11.029.
17. Gallo D, Nicoli P, Calabrese C, et al. The Wilms' tumor (WT1) gene expression correlates with the International Prognostic Scoring System (IPSS) score in patients with myelofibrosis and it is a marker of response to therapy. Cancer Medicine. 2016;5(7):1650-3. doi: 10.1002/cam4.735.
18. Siordiya N, Lisina E, Butylin P, et al. Incidence of Elevated Expression of wt1 in Primary Myelofibrosis (pmf) and Postpv-, Postet Myelofibrosis and Its Dynamics during Ruxolitinib Treatment. Blood. 2016;128:5498.
19. Сиордия Н.Т., Булычева Е.Н., Холопова И.В. Частота встречаемости гиперэкспрессии WT1 у пациентов с миелоидными неоплазиями. Бюллетень Федерального Центра сердца, крови и эндокринологии им. В.А. Алмазова. 2012;6(17):116-20.
[Siordiya NT, Bulycheva EN, Kholopova IV. WT1 overexpression rate in patents with myeloid neoplasm. Byulleten' Federal'nogo Tsentra serdtsa, krovi i en-dokrinologii im. V.A. Almazova. 2012;6(17):116-20. (In Russ)]
20. Cilloni D, Renneville A, Hermitte F, et al. Real-time quantitative polymerase chain reaction detection of minimal residual disease by standardized WT1 assay to enhance risk stratification in acute myeloid leukemia: A European Leukemia Net study. J Clin Oncol. 2009;27(31):5195-201. doi: 10.1200/jco.2009.22.4865.
21. Vizmanos JL, Ormazabal C, Larrayoz MJ, et al. JAK2 V617F mutation in classic chronic myeloproliferative diseases: a report on a series of 349 patients. Leukemia. 2006;20(3):534-5. doi: 10.1038/sj.leu.2404086.
22. Nangalia J, Massie CE, Baxter EJ, et al. Somatic CALR Mutations in Myeloproliferative Neoplasms with Nonmutated JAK2 N Engl J Med. 2013;369(25):2391-405. doi: 10.1056/NEJMoa1312542.
23. Beer PA, Campbell PJ, Scott LM, et al. MPL mutations in myeloproliferative disorders: analysis of the PT-1 cohort. Blood. 2008;112(1):141-9. doi: 10.1182/blood-2008-01-131664.
24. Меликян А.Л., Суборцева И.Н., Судариков А.Б. и др. Клинические особенности эссенциальной тромбоцитемии и первичного миелофиброза в зависимости от молекулярных характеристик заболевания. Терапевтический архив. 2017;89(7):4-9. doi: 10.17116/terarkh20178974-9.
[Melikyan AL, Subortseva IN, Sudarikov AB, et al. Clinical features of essential thrombocythemia and primary myelofibrosis, depending on the molecular characteristics of disease. Terapevticheskii arkhiv. 2017;89(7):4-9. doi: 10.17116/ terarkh20178974-9. (In Russ)]
25. Жернякова А.А., Мартынкевич И.С., Шуваев В.А. и др. Молекулярно-генетические маркеры и особенности течения эссенциальной тромбоци-темии. Клиническая онкогематология. 2017;10(3):402-8. doi: 10.21320/25002139-2017-10-3-402-408.
[Zhernyakova AA, Martynkevich IS, Shuvaev VA, et al. Molecular Genetic Markers and Clinical Characteristics of Essential Thrombocythemia. Clinical oncohematology. 2017;10(3):402-8. doi: 10.21320/2500-2139-2017-10-3-402-408. (In Russ)]
26. Лисина Е.Г., Сиордия Н.Т., Бутылин П.А. и др. Клинико-лабораторные особенности эссенциального тромбоцитоза и первичного миелофиброза в зависимости от мутационного статуса генов JAK2 и CALR1. Онкогематология. 2017;12(3):8-16.
[Lisina EG, Siordiya NT, Butylin PA, et al. Clinical and laboratory features of essential thrombocytosis and primary myelofibrosis depending on JAK2 and CALR1 mutation status. Onkogematologiya. 2017;12(3):8-16. (In Russ)]
27. Delic S, Rose D, Kern W, et al. Application of an NGS-based 28-gene panel in myeloproliferative neoplasms reveals distinct mutation patterns in essential thrombocythaemia, primary myelofibrosis and polycythaemia vera. Br J Haematol. 2016;175(3):419-26. doi: 10.1111/bjh.14269.
28. Tefferi A. Novel mutations and their functional and clinical relevance in myeloproliferative neoplasms: JAK2, MPL, TET2, ASXL1, CBL, IDH and IKZF1. Leukemia. 2010;24(6):1128-38. doi: 10.1038/leu2010.69.
29. Arber DA, Orazi A, Hasserjian R, et al. The 2016 revision to the World Health Organization classification of myeloid neoplasms and acute leukemia. Blood. 2016;127(20):2391-405. doi: 10.1182/blood-2016-03-643544.
30. Меликян А.Л., Туркина А.Г., Ковригина А.М. и др. Клинические рекомендации по диагностике и терапии Ph-негативных миелопролиферативных заболеваний (истинная полицитемия, эссенциальная тромбоцитемия, первичный миелофиброз) (редакция 2016 г.). Гематология и трансфузиология. 2017;62(1, прил. 1):25-60.
[Melikyan AL, Turkina AG, Kovrigina AM, et al. Clinical recommendations for diagnosis and therapy of Ph-negative myeloproliferative disorders (polycythemia vera, essential thrombocythemia, primary myelofibrosis) (edition 2016). Gema-tologiya i transfuziologiya. 2017;62(1, Suppl 1):25-60. (In Russ)]
31. Bain BJ. Bone marrow biopsy morbidity: review of 2003. J Clin Pathol. 2005;58(4):406-8. doi: 10.1136/jcp.2004.022178.
32. Arora B, Sirhan S, Hoyer JD, et al. Peripheral blood CD34 count in myelofi-brosis with myeloid metaplasia: a prospective evaluation of prognostic value in 94 patients. Br J Haematol. 2005;128(1):42-8. doi: 10.1111/j.1365-2141.2004.05290.x.
33. Barosi G, Viarengo G, Pecci A, et al. Diagnostic and clinical relevance of the number of circulating CD34+ cells in myelofibrosis with myeloidmetaplasia. Blood. 2001;98(12):3249-55. doi: 10.1182/blood.V98.12.3249.
34. Xu M, Bruno E, Chao J, et al. Constitutive mobilization of CD34+ cells into the peripheral blood in idiopathic myelofibrosis may be due to the action of a number of proteases. Blood. 2005;105(11):4508-15. doi: 10.1182/blood-2004-08-3238.
35. Забелина Т.С., Постриганева Т.И., Сайдали М.А. и др. Колониеобразу-ющая способность клеток костного мозга и крови больных с различными формами лейкозов. Терапевтический архив. 1977;6:53-9.
[Zabelina TS, Postriganeva TI, Saidali MA, et al. Bone marrow and blood cell colony-forming ability in patients with different leukemia types. Terapevticheskii arkhiv. 1977;6:53-9. (In Russ)]
36. Harrison CN, Vannucchi AM, Kiladjian JJ, et al. Long-term findings from COMFORT-II, a phase 3 study of ruxolitinib vs best available therapy for myelofi-brosis. Leukemia. 2016;30(8):1701-7. doi: 10.1038/leu.2016.148.
37. Verstovsek S, Gupta V, Jason R, et al. A Pooled Overall Survival (OS) Analysis of 5-Year Data from the COMFORT-I and COMFORT-II Trials of Ruxolitinib for the Treatment of Myelofibrosis (MF). Blood. 2016;128(22):3110.
38. Ионова Т.И., Анчукова Л.В., Виноградова О.Ю. и др. Качество жизни и спектр симптомов у больных миелофиброзом на фоне терапии: данные клинической практики. Гематология и трансфузиология. 2016;61(1):17-25.
[Ionova TI, Anchukova LV, Vinogradova OYu, et al. Quality of life and symptoms in patients with myelofibrosis during the treatment: Data of clinical practice. Gematologiya i transfuziologiya. 2016;61(1):17-25. (In Russ)]
39. Foltz L, Palumbo GA, Martino B, et al. Safety and Efficacy of Ruxolitinib for the Final Enrollment of JUMP: An Open-Label, Multicenter, Single-Arm, Expanded-Access Study in Patients with Myelofibrosis (n=2233). Blood. 2016;128(22):3107.
