ГИДРОФИЛЬНЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ РИБОФЛАВИНА ДЛЯ АНТИМИКРОБНОЙ ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ

Бородина Т.Н.; Толордава Э.Р.; Николаева М.Е.; Соловьев А.И.; Романова Ю.М.; Хайдуков Е.В.; Панченко В.Я.

https://doi.org/10.17116/molgen20213904121

Гидрофильные производные рибофлавина для антимикробной фотодинамической терапии

1ФНИЦ «Кристаллография и фотоника» РАН, Москва, Россия;

2НИЦ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи, Москва, Россия;

3Московский технологический университет МИРЭА, Москва, Россия

РЕЗЮМЕ

Цель работы. Исследовать антибактериальные и антивирусные свойства дериватива рибофлавина (Витамин B2) — флавин-мононуклеотида и его производного, синтезированного путем конъюгации с полиэтиленгликолем (Рф-ПЭГ). Материал и методы. В работе были изучены флавинмононуклеотид и конъюгат рибофлавина с полиэтиленгликолем. В качестве клинических изолятов были использованы Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli и Salmonella typhimurium.

Результаты. В условиях растущего числа устойчивых к антибиотикам микроорганизмов необходим поиск новых стратегий, направленных на инактивацию патогенов и предотвращение развития их резистентности к лекарственным препаратам. Антимикробная фотодинамическая терапия (аФДТ) является перспективным подходом, позволяющим инактивировать патогены вне зависимости от их статуса устойчивости к антибиотикам. В работе исследованы антибактериальные и антивирусные свойства дериватива рибофлавина (Витамин B2) — флавинмононуклеотида и его производного, синтезированного путем конъюгации с полиэтиленгликолем (Рф-ПЭГ).

Заключение. Показано, что водорастворимые производные рибофлавина являются эффективными фотосенсибилизаторами и обеспечивают инактивацию как грамположительных, так и грамотрицательных микроорганизмов при аФДТ в условиях in vitro.

Ключевые слова: патогенные микроорганизмы, антимикробная фотодинамическая терапия, фотосенсибилизатор, рибофлавин. ИНФОРМАЦИЯ ОБ АВТОРАХ:

Бородина Т.Н. — https://orcid.org/0000-0003-4076-5078; e-mail: borodina@crys.ras.ru Толордава Э.Р. — https://orcid.org/0000-0002-9920-2432; e-mail: tolordava.eteri@yandex.ru Николаева М.Е. — e-mail: mesarycheva@gmail.com Соловьев А.И. — e-mail: dronnias@gmail.com

Романова Ю.М. — https://orcid.org/0000-0002-8547-1711; e-mail: genes2007@yandex.ru Хайдуков Е.В. — https://orcid.org/0000-0002-3900-2949; e-mail: khaydukov@mail.ru Панченко В.Я. — e-mail: panch@laser.ru

Автор, ответственный за переписку: Бородина Т.Н. — e-mail: borodina@crys.ras.ru КАК ЦИТИРОВАТЬ:

Бородина Т.Н., Толордава Э.Р., Николаева М.Е., Соловьев А.И., Романова Ю.М., Хайдуков Е.В., Панченко В.Я. Гидрофильные производные рибофлавина для антимикробной фотодинамической терапии. Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. 2021;39(4):21—26. https://doi.org/10.17116/molgen20213904121

Antimicrobial photodynamic activity of hydrophilic riboflavin derivatives

'Federal Scientific Research Centre «Crystallography and Photonics» of Russian Academy of Sciences, Moscow, Russia; 2N.F. Gamaleya National Research Center, Moscow, Russia; 3MIREA — Russian Technological University, Moscow, Russia

ABSTRACT

The aim of this work. To investigate the antibacterial and antiviral properties of the riboflavin derivative (Vitamin B2) — flavin mononucleotide and its derivative synthesized by conjugation with polyethylene glycol (Rf-PEG).

Materials and methods. Flavin mononucleotide and a conjugate of riboflavin with polyethylene glycol were investigated. Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, and Salmonella typhimurium were used as clinical isolates. Results. With the growing number of antibiotic-resistant microorganisms, it is necessary to search for new strategies aimed at inactivating pathogens and preventing the development of their drug resistance. Antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) is a promising approach to inactivate pathogens regardless of their antibiotic resistance status. The work investigated the antibacterial and antiviral properties of the derivative of riboflavin (Vitamin B2) — flavin mononucleotide and its derivative synthesized by conjugation with polyethylene glycol (Rf-PEG).

Conclusion. It has been shown that hydrophilic riboflavin derivatives are effective photosensitizers and provide inactivation of both gram-positive and gram-negative microorganisms during aPDT in vitro.

Keywords: pathogenic microorganisms, antimicrobial photodynamic therapy, photosensitizer, riboflavin.

INFORMATION ABOUT THE AUTHORS:

Borodina T.N. — https://orcid.org/0000-0003-4076-5078; e-mail: borodina@crys.ras.ru Tolordava E.R. — https://orcid.org/0000-0002-9920-2432; e-mail: tolordava.eteri@yandex.ru Nikolaeva M.E. — e-mail: mesarycheva@gmail.com Solov'ev A.I. — e-mail: dronnias@gmail.com

Romanova Yu.M. — https://orcid.org/0000-0002-8547-1711; e-mail: genes2007@yandex.ru Khaydukov E.V. — https://orcid.org/0000-0002-3900-2949; e-mail: khaydukov@mail.ru Panchenko V.Ya. — e-mail: panch@laser.ru

Corresponding author: Borodina T.N. — e-mail: borodina@crys.ras.ru TO CITE THIS ARTICLE:

Borodina TN, Tolordava ER, Nikolaeva ME, Solov'ev AI, Romanova YuM, Khaydukov EV, Panchenko VYa. Antimicrobial photodynamic activity of hydrophilic riboflavin derivatives. Molekulyarnaya Genetika, Mikrobiologiya i Virusologiya (Molecular Genetics, Microbiology and Virology). 2021;39(4):21-26. (In Russ.). https://doi.org/10.17116/molgen20213904121

Введение

С ростом числа антибиотикорезистентных микроорганизмов во всем мире существует острая необходимость в поиске новых стратегий, направленных на инактивацию патогенов и обеспечение низкого потенциала развития их резистентности. Антимикробная фотодинамическая терапия (аФДТ) — это новый подход к уничтожению патогенов, который не зависит от существующего статуса устойчивости к антибиотикам и в силу своей неспецифичности не предполагает развитие резистентности [1].

Метод аФДТ основан на возбуждении фотосенсибилизатора (ФС) светом с последующей наработкой активных форм кислорода (АФК) [2]. АФК способны разрушать биомолекулы (липиды, белки, нуклеиновые кислоты), вызывая лизис клеток микроорганизмов и их гибель. Преимущественное нацеливание на клетки микроорганизмов в сравнении с клетками млекопитающих обеспечивается выбором подходящей структуры ФС [3]. Дополнительная селективность метода может быть обеспечена посредством местного введения ФС в инфицированную область и ограничением зоны светового воздействия. Существует большое разнообразие ФС, которое включает как широко известные хромофоры, такие как ме-тиленовый синий [4], роза бенгальская [5], индоци-анин зеленый [6], так и, например, новые катионные производные тетрапиррольных структур — порфи-рины [7], фталоцианины [8] и бактериохлорины [9]. Данные соединения обладают достаточно высокой антибактериальной световой активностью, однако им присуща и темновая токсичность в отношении клеток эукариот, что лимитирует их применение в методе аФДТ.

Рибофлавин (Рф) является природным фотосенсибилизатором (ФС), который способен генерировать больше синглетного кислорода, чем многие синтетические ФС [10]. Благодаря своим фотохимическим свойствам и способности вырабатывать активные формы кислорода (АФК), показана высокая эффективность Рф для противоопухолевой терапии при облучении ультрафиолетовым (УФ) и синим

светом [11]. Кроме того, его фотоактивация возможна светом ближнего инфракрасного излучения, например, за счет конъюгации с апконвертирующими наночастицами, что позволяет образовывать АФК на глубине биоткани до 1 см [12]. Отсутствие темно-вой токсичности и мутагенности Рф позволяет использовать его фотосенсибилизирующие свойства в клинической практике для инактивации патогенов в плазме крови, обеспечивая снижение рисков заражения инфекциями при трансфузии [13].

Из-за ограниченной глубины проникновения света в биоткани, метод аФДТ наиболее перспективен при лечении поверхностных ран. При этом особенно важно обеспечивать контролируемую диффузию аплицируемых на рану препаратов, которая определяется молекулярной массой соединения [14]. В данной работе мы использовали как низкомолекулярное производное рибофлавина (Рф, мол. масса 456), так и синтезированное нами соединение Рф-ПЭГ (мол. масса 2376) для изучения их фотосенси-билизирующих свойств в отношении клинических изолятов Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli и Salmonella typhimurium в условиях in vitro. Противовирусная активность фотосенсибилизатора была исследована на препарате колифага.

Материалы и методы

В работе использовали флавинмононуклеотид (ФМН) производства ОАО «Фармстандарт — Уфа-ВИТА» (Россия) и рибофлавин производства «Сигма» (Германия). Для синтеза конъюгата Рф-ПЭГ были использованы уксусная кислота, уксусный ангидрид, хлорная кислота, трет-бутилбромацетат, диметилфо-рамид, карбонат цезия, ПЭГ-2000, трифторуксусная кислота, дихлорметан, хлороформ, метанол, соляная кислота, N-гидроксисукцинимид, 4-диметиламино-пиридин, диизопропилэтиламин производства «Сигма» (Германия).

Масс-спектрометрический анализ проводили на времяпролетном МАЛДИ-масс-спектрометре Ul-traflextreme (Bruker Daltonics, Billerica, MA, США).

Облучение клинических изолятов проводили све-тодиодом с максимумом на длине волны 365 нм («По-лироник», Россия). Доза облучения в экспериментах составляла 30 Дж/см2.

Бактериальные штаммы и бактериофаг. Клинические изоляты Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli и Salmonella typhimurium были получены из коллекции ФНИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи. Для оценки фототоксических свойств флавинмоно-нуклеотида использовали фаговый препарат (коли-фаг — «Пиобактериофаг поливалентный очищенный») производства «Микроген» (Россия).

Для приготовления питательной среды использовали 1,5% раствор агара в LB-бульоне производства Difco (США).

Фотоинактивация планктонных бактерий и фага. В чашку Петри с 2 мл бульонной культуры вносили по 0,2 мг исследуемого вещества и оставляли в течение 15 мин. В контрольные чашки препарат не добавляли. После часа облучения бульонную культуру из каждой чашки титровали методом серийных разведений и высевали на чашки Петри для определения КОЕ/мл. Для исследования противовирусной активности фотосенсибилизатора в чашку петри с 2 мл фагового препарата вносили по 0,2 мг исследуемого вещества и облучали в течение 1 ч. Количество активных фаговых частиц после облучения определяли методом Грация.

Метод стекающей капли. Каплю ночной бульонной культуры наносили на плотную питательную среду и давали стечь, наклонив чашку Петри под углом 45°. Далее на «дорожку бактериальной культуры» наносили ФМН и облучали в течение 1 ч.

Результаты и обсуждение

Рф представляет собой слаборастворимые в воде кристаллы, поэтому для оценки антибактериальных свойств была выбрана его водорастворимая форма — ФМН. Для увеличения молекулярного веса Рф и получения водорастворимого конъюгата использовался полиэтиленгликоль (ПЭГ). ПЭГ представлен водорастворимыми, нетоксичными и биосовместимыми полимерами, применяемыми в производстве фармацевтических препаратов. Конъюгация с ПЭГ используется для улучшения растворимости и стабильности, уменьшения иммуногенности и частоты дозирования препаратов. Поэтому мы ожидали, что конъюгация Рф с ПЭГ будет способствовать улучшению его гидрофильности и создаст стерический барьер, ограничивающий взаимодействие с белками плазмы.

Водорастворимый высокомолекулярный конъ-югат Рф-ПЭГ был синтезирован по следующей методике.

На первом этапе для инактивации гидроксиль-ных групп в остатке рибитола и улучшения растворимости при дальнейших модификациях рибофла-

вина был получен 2',3',4',5'-тетраацетилрибофлавин путем нагрева коммерческого рибофлавина до 40 °С с обратным холодильником в смеси уксусная кислота/уксусный ангидрид, 1/1, в присутствии каталитического количества 57% хлорной кислоты. Полученный 2',3',4',5'-тетраацетилрибофлавин очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле системой растворителей СНС13/МеОН=12/1. Выход соединения составил 90%. Структура 2',3',4',5'-те-траацетилрибофлавина была подтверждена спектроскопией ЯМР (см. приложение 1). В спектре присутствовали сигналы: 2.25 (с, 3Н, Ас), 2.18 (с, 3Н, Ас), 2.04 (с, 3Н, Ас), 1.71 (с, 3Н, Ас).

Модификацию защищенного рибофлавина проводили по 3-положению изоаллоксазино-вого макроцикла. Нуклеофильное замещение те-траацетилрибофлавина проводили трет-бутил-бромацетатом в абсолютном ДМФА в присутствии карбоната цезия в качестве основания с получением продукта №-трет-бутоксиметил-2',3',4',5'-тетраацетилрибофлавина. Полученный №-трет-бутоксиметил-2',3',4',5'-тетраацетилрибофлавин очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле системой растворителей СН-С13/МеОН=8/1. Выход соединения составлял 91%. Структура №-трет-бутоксиметил-2',3',4',5'-тетраацетилрибофлавина была подтверждена спектроскопией ЯМР. В спектре присутствовали сигналы: 4.67 (с, 2Н, СН2-СОО1Ви), 1.12 (с, 9Н, Жи).

Для создания амидной связи с ПЭГ получали свободную карбоксильную группу путем удаления трет-бутильной защитной группы в карбоксиме-тильном остатке трифторуксусной кислотой в растворе дихлорметана. Полученный №-карбоксиметил-2',3',4',5'-тетраацетилрибофлавин очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле системой растворителей СНС13/МеОН=5/1. Выход соединения составлял 94%. Структура №-карбоксиметил-2',3',4',5'-тетраацетилрибофлавина была подтверждена спектроскопией ЯМР. В спектре отсутствовал сигнал 1.12 (с, 9Н, ?Ви).

Для активации карбоксильной группы использовали метод активированных эфиров, для этого полученный №-карбоксиметил-2',3',4',5'-тетраацетилрибофлавин растворяли в ДМФА и обрабатывали гидрохлоридом 1-этил-3-(3-диметиламино-пропил)карбодиимида при перемешивании в течение 4 ч при комнатной температуре. Реакцию пэгилиро-вания активированного эфира №-карбоксиметил-2', 3' ,4', 5' -тетраацетилрибофлавина проводили с гетеробифункциональным полиэтиленгликолем NH2-PEG2000-OMe в ДМФА с использованием диизо-пропилэтиламина в каталитических количествах. Полученный пэгилированный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле системой растворителей СНС13/МеОН=4/1. Выход соединения составил 57%. Структура 5-(ПЭГ -а-

Влияние фотодинамического воздействия производных рибофлавина на значения КОЕ/мл клинических изолятов и количество БОЕ/мл фага после облучения

Количество микроорганизмов и фага (КОЕ/мл и БОЕ/мл)

Микроорганизмы -ХТТТГ-т.,,. „„„-

_контроль роста_ФМН_РФ-ПЭГ_

Staphylococcus aureus 3*105 0 6*10

Pseudomonas aeruginosa 6*105 0 2x10

Escherichia coli 2x105 6*10 3*10

Salmonella tiphymorium 3*105 0 1x102

Колифаг_5*105_14_1x102_

Рис. 1. Масс-спектры флавинмононуклеотида (а), коньюгата рибофлавин-полиэтиленгликоль (б) и область спектра Рф-ПЭГ, соответствующая высокомолекулярному ПЭГ (в).

мидометил)-2',3',4',5'-тетраацетилрибофлавина была подтверждена спектроскопией ЯМР. В спектре присутствовал сигнал: 3.75 (с, 180Н, ПЭГ-H).

На последнем этапе было необходимо гидроли-зовать сложноэфирные группы в остатке рибитола действием п-толуолсульфокислоты в метаноле в течение 5 ч при кипении. Полученный раствор соединения упаривали досуха, затем растворяли в минимальном количестве насыщенного раствора бикарбоната натрия и осаждали концентрированной HCl. Образовавшийся осадок соединения фильтровали и промывали изопропанолом и гексаном. Выход соединения составлял 63%. Структура 5-(ПЭГ2000-а-мидометил)-рибофлавина была подтверждена спек-

троскопией ЯМР. В спектре отсутствовали сигналы: 2.25 (с, 3Н, Ас), 2.18 (с, 3Н, Ас), 2.04 (с, 3Н, Ас), 1.71 (с, 3Н, Ас).

Дополнительно как синтезированный конъ-югат, так и ФМН, были исследованы с помощью масс-спектрометрии (рис. 1). Масс-спектры показали наличие характеристических пиков ФМН (см. рис. 1, а) и Рф (см. рис. 1, б) в исследуемых образцах. На рис. 1, в представлена область, соответствующая ПЭГ в образце конъюгата ПЭГ-Рф.

Была проведена оценка антибактериальной и антивирусной активности ФМН и конъюгата Рф-ПЭГ на планктонных культурах патогенных микроорганизмов Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa,

Рис. 2. Подавление роста Salmonella typhimurium, Staphylococcus aureus и Pseudomonas aeruginosa при фотоактивации ФМН (а) и воздействие ФМН на колифаг (б).

Прерывание бактериальной дорожки на месте нанесения препарата свидетельствует об его антибактериальной активности (метод стекающей капли). На контрольной чашке (слева) видны бляшки (результат литического действия фага), а на опытном образце (справа) визуализируется только одна бляшка.

Escherichia coli, Salmonella typhimurium и на бактериофаге (колифаг).

Проведенные исследования показали, что ФМН и Рф-ПЭГ обладают ярко выраженными антибактериальными свойствами, что проявляется значительным подавлением количества КОЕ исследуемых бактерий (см. таблицу). Полученные результаты демонстрируют практически полное подавление роста Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli и Salmonella typhimurium при использовании ФМН. При этом в негативных контролях было показано, что образцы без облучения, как и сам процесс облучения, не оказывали влияния на жизнеспособность исследуемых микроорганизмов. Данные результаты были подтверждены с помощью модифицированного метода стекающей капли, который относится к категории скрининговых исследований. После инкубации в термостате на траектории стекания бульонной культуры образовывался плотный рост бактериальной культуры, который прерывался на месте нанесения фотосенсибилизатора. Так, на рис. 2, а наглядно показано подавление роста бактериальных культур на участке нанесения ФМН с последующим облучением. Следует отметить, что бактериальные культуры, не подверженные воздействию препарата, сохраняли свою жизнеспособность.

На примере бактериофага (колифага) были исследованы антивирусные свойства производных рибофлавина. Было показано, что после облучения в течение 1 ч, количество бляшкообразующих частиц (БОЕ)

сократилось на 3 порядка, что демонстрирует эффективность использования производных рибофлавина в качестве антивирусного препарата. На рис. 2, б приведен пример одного типичного эксперимента, который наглядно показывает уменьшение числа бляшко-образующих единиц.

Заключение

Полученные результаты показали, что низкомолекулярный ФМН и высокомолекулярный конъю-гат Рф-ПЭГ обладают антимикробной активностью по отношению как грамположительным, так и гра-мотрицательным микроорганизмам. Эффективность подавления микроорганизмов в условиях in vitro составила 4 порядка при концентрации фотосенсибилизатора 0,2 мг (для конъюгата выполнялся пересчет на активную часть молекулы) и дозе облучения 30 Дж/см2. Модифицированным методом стекающей капли продемонстрировано ингибирующее воздействие деривативов Рф по отношению к Salmonella typhimurium, Staphylococcus aureus и Pseudomonas aeruginosa. Показана активность ФМН в отношении фаговых частиц, что демонстрирует перспективы применения производных Рф при антивирусной терапии. Использование соединений с разной молекулярной массой может обеспечить пролонгированное антибактериальное действие активного компонента в результате контролируемой диффузии аплицируе-мых на рану препаратов.

Финансирование. Работа выполнена при финансировании Министерства науки и высшего образования в рамках выполнения работ по Государственному заданию ФНИЦ «Кристаллография и фотоника» РАН в части исследования фотосенсибилизирующих свойств конъюгата рибофлавина и гранта РФФИ 20-

04-60357 в части изучения антимикробной и антивирусной активности производных рибофлавина.

Конфликт интересов.

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов. The authors declare no conflicts of interest.

AMTEPATYPA/REFERENCES

1. D'Costa VM, King CE, Kalan L, Morar M, Sung WW, Schwarz C, et al. Antibiotic resistance is ancient. Nature. 2011;31;477(7365):457-461. https://doi.org/10.1038/nature10388

2. Krammer B, Verwanger T. in Photodynamic Medicine: From Bench to Clinic. 2016;2:63-74.

https://doi.org/10.1039/9781782626824-00063

3. Sperandio FF, Huang YY, Hamblin MR. Antimicrobial photodynamic therapy to kill Gram-negative bacteria, Recent Pat Anti-infect Drug Discov. 2013;8(2):108-120.

https://doi.org/10.2174/1574891x113089990012

4. Wainwright M, Crossley KB. Methylene Blue — a therapeutic dye for all seasons? J Chemother. 2002;14:431-443. https://doi.org/10.1179/joc.2002.14.5.431

5. Amescua G, Arboleda A, Nikpoor N, Durkee H, Relhan N, Aguilar MC, et al. Rose Bengal Rose Bengal Photodynamic Antimicrobial Therapy: A Novel Treatment for Resistant Fusarium Keratitis. Cornea. 2017;36:1141-1144. https://doi.org/10.1097/IC0.0000000000001265

6. Chiniforush N, Pourhajibagher M, Parker S, Shahabi S, Bahador A. The in vitro effect of antimicrobial photodynamic therapy with indocyanine green on Enterococcus faecalis: Influence of a washing vs non-washing procedure. Photodiagnosis Photodyn Ther. 2016;16:119-123. https://doi.org/10.1016Zj.pdpdt.2016.09.007

7. Maisch T, Bosl C, Szeimies RM, Lehn N, Abels C. Photodynamic effects of novel XF porphyrin derivatives on prokaryotic and eukaryotic cells. Anti-microb Agents Chemother. 2005;49:1542-1552. https://doi.org/10.1128/AAC.49.4.1542-1552.2005

8. Vecchio D, Dai T, Huang L, Fantetti L, Roncucci G, Hamblin MR. Antimicrobial photodynamic therapy with RLP068 kills methicillin-resistant Staph-

ylococcus aureus and improves wound healing in a mouse model of infected skin abrasion PDT with RLP068/Cl in infected mouse skin abrasion. J Bio-photonics. 2013;6(9):77-81. https://doi.org/10.1002/jbio.201200121

9. Huang L, Krayer M, Roubil JG, Huang YY, Holten D, Lindsey JS, et al. Stable synthetic mono-substituted cationic bacteriochlorins mediate selective broad-spectrum photoinactivation of drug-resistant pathogens at nanomolar concentrations. J Photochem Photobiol B. 2014;141C:119-127. https://doi.org/10.1016/j.jphotobiol.2014.09.016

10. Entsch B, Ballou DP. Flavins. Encyclopedia of Biological Chemistry. 309313. Amsterdam: 2013. Elsevier, 3232 p.

11. Akasov RA, Sholina NV, Khochenkov DA, Alova AV, Gorelkin PV, Erofeev AS, et al. Photodynamic therapy of melanoma by blue-light photoactivation of flavin mononucleotide. Sci Rep. 2019;9:9679. https://doi.org/10.1038/s41598-019-46115-w

12. Khaydukov EV, Mironova KE, Semchishen VA, Generalova AN, Nechaev AV, Khochenkov DA, et al. Riboflavin photoactivation by upconversion nanoparticles for cancer treatment. Sci Rep. 2016;6:35103. https://doi.org/10.1038/srep35103

13. Goodrich RP, Platz MS. The Design and Development of Selective, Pho-toactivated Drugs for Sterilization of Blood Products. Drugs of the Future. 1997;(2):159-171.

https://doi.org/10.1358/D0F.1997.022.02.400935

14. Davies CE, Wilson MJ, Hill KE, Stephens P, Hill CM, Harding KG, et al. Use of molecular techniques to study microbial diversity in the skin: Chronic wounds reevaluated, Wound Repair Regen. 2001;9:332-340. https://doi.org/10.1046/j.1524-475x.2001.00332.x

Поступила в редакцию 03.09.2021 Received 03.09.2021 После доработки 30.09.2021 Revised 30.09.2021 Принята к публикации 30.09.2021 Accepted 30.09.2021

ГИДРОФИЛЬНЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ РИБОФЛАВИНА ДЛЯ АНТИМИКРОБНОЙ ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Бородина Т.Н., Толордава Э.Р., Николаева М.Е., Соловьев А.И., Романова Ю.М.

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Бородина Т.Н., Толордава Э.Р., Николаева М.Е., Соловьев А.И., Романова Ю.М.

ANTIMICROBIAL PHOTODYNAMIC ACTIVITY OF HYDROPHILIC RIBOFLAVIN DERIVATIVES

Текст научной работы на тему «ГИДРОФИЛЬНЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ РИБОФЛАВИНА ДЛЯ АНТИМИКРОБНОЙ ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ»