CC BY
0
https://doi.org/10.33647/2074-5982-19-4-70-80
(«О
BY 4.0
ГЕНОПРОТЕКТОРНАЯ АКТИВНОСТЬ АНТОЦИАНСОДЕРЖАЩЕГО КОМПЛЕКСА ARONIA MELANOCARPA
О.Ю. Рыбалкина1'2'*, О.В. Неупокоева1, О.Л. Воронова1, Т.Г. Разина1, Г.И. Калинкина2, В.Ю. Андреева2, Е.А. Киселева1, А.А. Чурин1, Е.П. Зуева1, В.В. Жданов1
1 Научно-исследовательский институт фармакологии и регенеративной медицины имени Е.Д. Гольдберга ФГБНУ «Томский национальный исследовательский центр РАН» 634028, Российская Федерация, Томск, пр. Ленина, 3
2 ФГБОУ ВО «Сибирский государственный медицинский университет» Минздрава России 634050, Российская Федерация, Томск, Московский тракт, 2
Антоцианы относятся к флавоноидным соединениям, входящим в группу полифенолов. Одной из богатых этой группой БАВ является A. melanocarpa (Michx.) Elliott. — рябина черноплодная. Химический анализ показал, что антоциансодержащий комплекс, полученный из плодов А. melanocarpa, состоит из антоцианов, флавоноидов, фенолокислот и катехинов. Доминирующими компонентами являются антоцианы. Накопилось огромное количество данных, доказывающих, что плоды аронии обладают широким спектром фармакологической активности. С целью оценки безопасности применения антоциансодержащего комплекса из плодов A. melanocarpa проведено генотоксиче-ское исследование растительного комплекса с последующим изучением его влияния на мутагенез на модели доксорубицин-индуцированной генотоксичности в клетках костного мозга мышей линии С57В1/6. Показано, что применение растительного комплекса в дозе 225 мг/кг не оказало влияния на цитогенетические показатели клеток костного мозга животных после одно-, двухкратного введения. Использование антоциансодержащего комплекса привело к снижению повреждения ДНК, вызванного введением доксорубицина, через 24, 48 ч после введения цитостатика. Таким образом, представленные данные о снижении повреждающего действия доксорубицина на ДНК антоциансодержащим комплексом А. melanocarpa могут стать основой для создания препарата-корректора цитостатической терапии злокачественных новообразований.
Ключевые слова: генотоксичность, доксорубицин, антоцианы, Aronia melanocarpa, флавоноиды Конфликт интересов: авторы заявили об отсутствии конфликта интересов.
Финансирование: исследование проведено в рамках работ по выполнению государственного задания НИИФиРМ им. Е.Д. Гольдберга, Томский НИМЦ, тема «Поиск, разработка и изучение механизмов действия синтетических и природных биологически активных субстанций полученных, в том числе, на основе биотехнологий, для фармакологической коррекции различных патологических процессов».
Для цитирования: Рыбалкина О.Ю., Неупокоева О.В., Воронова О.Л., Разина Т.Г., Калинкина Г.И., Андреева В.Ю., Киселева Е.А., Чурин А.А., Зуева Е.П., Жданов В.В. Генопротекторная активность антоциансодержащего комплекса Aronia melanocarpa. Биомедицина. 2023;19(4):70-80. https://doi.org/10.33647/2Q74-5982-19-4-7Q-8Q
Поступила 27.06.2023
Принята после доработки 01.10.2023
Опубликована 10.12.2023
GENOPROTECTIVE ACTIVITY OF ARONIA MELANOCARPA ANTHOCYANIN-CONTAINING COMPLEX
Olga Yu. Rybalkina1,2*, Oksana V. Neupokoeva1, Olga L. Voronova1, Tatyana G. Razina1, Galina I. Kalinkina2, Valeria Yu. Andreeva2, Elena A. Kiseleva1, Aleksey A. Churin1, Elena P. Zueva1, Vadim V. Zhdanov1
1 Goldberg Research Institute of Pharmacology and Regenerative Medicine, Tomsk National Research Medical Center of the Russian Academy of Sciences
634028, Russian Federation, Tomsk, Lenina Ave., 3
2 Siberian State Medical University of the Ministry of Health Care of Russia
634050, Russian Federation, Tomsk, Moskovskiy Tract, 2
Anthocyanins are flavonoid compounds belonging to the group of polyphenols. A. melanocarpa (Michx.) Elliott chokeberry is known to be rich in these bioactive substances. The previously conducted chemical analysis showed that an anthocyanin-containing complex obtained from A. melanocarpa fruits comprise anthocyanins, flavonoids, phenolic acids, and catechins, with anthocyanins being the dominant components. A large amount of data indicates that Aronia fruits exhibit a wide spectrum of pharmacological activity. In this work, we assess the safety of an anthocyanin-containing complex obtained from A. melanocarpa fruits by its genotoxic study followed by an analysis of its effect on mutagenesis. To this end, a model of doxorubicin-induced genotoxicity in bone marrow cells of C57Bl/6 mice was used. The plant complex under study at a dose of 225 mg/kg had no effect the cytogenetic parameters of animal bone marrow cells after a single or double administration. The use of the anthocyanin-containing complex led to a decrease in DNA damage caused by the administration of doxorubicin, 24 and 48 hours after the introduction of a cytostatic agent. Hence, the data obtained can serve as the basis for the creation of a drug corrector for cytostatic therapy of malignant neoplasms
Keywords: genotoxicity, doxorubicin, anthocyanins, Aronia melanocarpa, flavonoids Conflict of interest: the authors declare no conflict of interest.
Funding: the study was carried out as part of the work on the implementation of the state task of the Goldberg Research Institute of Pharmacology and Regenerative Medicine, Tomsk National Research Medical Center, Russian Academy of Sciences, topic "Search, development and study of the mechanisms of action of synthetic and natural biologically active substances obtained, including those based on biotechnology, for the pharmacological correction of various pathological processes".
For citation: Rybalkina O.Yu, Neupokoeva O.V, Voronova O.L., Razina T.G., Kalinkina G.I., Andreeva VYu., Kiseleva E.A., Churin A.A., Zueva E.P., Zhdanov V.V. Genoprotective Activity of Aronia melanocarpa Anthocyanin-Containing Complex. Journal Biomed. 2023;19(4):70-80. https://doi.org/10.33647/2074-5982-19-4-70-80
Submitted 27.06.2023 Revised 01.10.2023 Published 10.12.2023
Введение эффекты природных соединений ослабляВ настоящее время наблюдается рост ются, когда биологически активные смеси интереса к исследованию растительных разделяются на компоненты и вводятся от-продуктов, имеющих широкий спектр дельно [25]. К числу перспективных источ-биологически активных веществ (БАВ) ников БАВ относится арония черноплодная, и применявшихся в народной медицине Aronia melanocarpa (Michx.) Elliott семейст-без научного подтверждения их безвредно- ва Rosaceae. Одной из основных групп БАВ сти и пользы для здоровья. Как отмечают аронии являются антоцианы. Наряду с эти-токсикологи, биологи и фармакологи, часто ми веществами арония содержит другие
фенольные соединения, углеводы, органические кислоты, аминокислоты, минералы, витамины, ароматические соединения [16].
Плоды A. melanocarpa являются офи-цинальным лекарственным сырьем [4] и внесены в Государственный реестр лекарственных средств (гос. регистрация на сухие плоды № 85/301/5, на свежие — № 71/609/16, № 73/941/24) [5]. В литературе описаны иммуномодулирующие, про-тивово спалительные, антибактериальные, противовирусные, кардио- и гепатопротек-торные, антиоксидантные свойства сырья аронии черноплодной [16]. В экспериментах на животных показана антидиабетическая активность плодов и листьев аронии [18].
В настоящее время в НИИФиРМ имени Е.Д. Гольдберга Томского НИМЦ проводятся исследования антоциансодержащего комплекса из плодов A. melanocarpa (АСК). В экспериментах установлены противоопухолевая, антиметастатическая активность изучаемого растительного средства, а также его способность повышать эффективность химиотерапии перевиваемых опухолей [2, 12]. Кроме того, показано стимулирующее действие АСК на эритроидный росток кроветворения у мышей как с опухолью, так и без нее [11].
Согласно современным рекомендациям, для оценки безопасности новых фармакологических препаратов на этапе доклинических исследований обязательным является изучение их генотоксических свойств. Проведение генотоксикологического исследования соединений растительного происхождения, в частности A. melanocarpa, обусловлено способностью некоторых хорошо известных природных средств демонстрировать цитогенетические эффекты in vivo. Известно, что растительные соединения поступают в организм в сложных смесях, претерпевают метаболические превращения, что также может оказывать потенциально опасный эффект. Таким образом, целью настоящей работы явилось изуче-
ние возможных мутагенных свойств ан-тоциансодержащего комплекса из плодов A. melanocarpa, а также исследование его действия на доксорубицин-индуцирован-ную генотоксичность в клетках костного мозга мышей линии С57В1/6.
Материалы и методы
Эксперимент выполнен на 60 конвенциональных мышах-самках линии С57В1/6 массой 20-21 г в возрасте 3 мес. 1 категории (сертификат качества № 188-05), полученных из отдела экспериментального биомоделирования НИИФиРМ им. Е.Д. Гольдберга Томского НИМЦ. Содержание животных и дизайн экспериментальных исследований одобрены Комиссией по контролю за содержанием и использованием лабораторных животных НИИФиРМ им. Е.Д. Гольдберга и соответствовали ГОСТу 33215-2014 «Правила оборудования помещений и организация процедур при работе с лабораторными животными», а также международным правилам, принятым Директивой 2010/63/EU Европейского парламента и Совета Европейского союза (22.09.2010) по охране животных, используемых в научных целях.
Для моделирования геномных нарушений в клетках костного мозга животных использовали доксорубицин (Doxorubicin) (ДКС) — широко используемый в онкологии цитостатический препарат из группы антибиотиков антрациклинового ряда. Препарат обладает выраженной противоопухолевой активностью. В эксперименте использовали доксорубицин (ДКС) под торговым названием Адрибластин быстрорастворимый ("Pfizef', США). Препарат растворяли стерильным физ. р-ром и вводили однократно внутрибрюшинно животным в дозе 6 мг/кг.
Объектом исследования являлся АСК, выделенный из плодов A. melanocarpa на кафедре фармацевтического анализа СибГМУ Сырье, культивируемое в окрест-
ностях г. Томска, было собранно в период полного созревания. Плоды сушили тепловой конвекторной сушкой при температуре 40-50°С до воздушно-сухого состояния.
АСК получали 95% этанолом, содержащим 1% кислоты хлористоводородной концентрированной, методом противоточной многоступенчатой реперколяции с законченным циклом. Готовый растительный комплекс отстаивали при температуре не выше +10°С не менее 2 сут до получения прозрачной жидкости, затем фильтровали и хранили при температуре не выше +5°С в защищенном от света месте. Сухой остаток АСК определяли с помощью весового влагометра MS-70 ("AND", Япония).
Содержание биологически активных веществ в растительном комплексе определяли спектрофотометрическим методом с использованием комплексообразующей реакции с 5% спиртовым р-ром алюминия хлорида [6]. Показания снимали на спектрофотометре СФ-2000. Расчет суммы фла-воноидов проводили с использованием удельного показателя поглощения (Е1см1%) комплекса рабочего стандартного образца рутина с алюминия хлоридом при длине волны 415,00 нм равного 260,00. Определение фенолокислот и антоцианов в исследуемом экстракте проводили методом прямой спектрофотометрии. В качестве стандартных образцов использовали кислоту хло-рогеновую (фенолокислоты) и цианидин-3-О-глюкозид (антоцианы). Содержание фенолокислот определяли по удельному показателю поглощения (Е1см1%) кислоты хлорогеновой, который при длине волны 327,00±2,00 нм составляет 507,00±2,00 нм [8]. Для расчета суммы антоцианов в экстракте использовали удельный показатель поглощения (Е1см1%) известного вещества цианидин-3-О-глюкозида, который при длине волны 546,00±2,00 нм составляет 100,00±2,00 нм [1]. Катехины определяли спектрофотометрическим методом, основанном на образовании комплекса
свободных катехинов с железо-тартратным реактивом в присутствии фосфатного буфера [9]. Содержание аскорбиновой кислоты и органических кислот определяли титри-метрическим методом [6].
АСК деалкоголизировали на водяной бане, доводили до прежнего объема дистиллированной водой и вводили здоровым мышам внутрижелудочно в дозе 225 мг/кг (в расчете на сухой остаток) одновременно с доксорубицином с первых суток и затем ежедневно в течение 10 сут. Основанием для выбора дозы АСК послужили результаты ранее проведенных экспериментов [2, 12]. Животные контрольной группы получали эквиобъемное количество дистиллированной воды per os по схеме АСК и физ. р-р внутрибрюшинно в день введения ци-тостатика.
Для оценки цитогенетических нарушений через 24, 48 ч после введения цитоста-тика исследовали хромосомы в метафазных пластинках костного мозга по модифицированному методу Форда [10]. На препаратах обнаруживались клетки с одиночными фрагментами, пробелами хромосом, их учитывали на 100 исследованных клеток от каждого животного. Подсчитывали количество клеток с хромосомными и парными повреждениями и редукцию генотоксиче-ского эффекта в %. Сроки исследования были выбраны с целью изучения в динамике процесса становления и элиминации мутаций. Так, 24 и 48 ч являются стандартными согласно «Руководству по проведению доклинических исследований лекарственных средств» [10].
Редукцию генотоксического эффекта мутагена (РГЭ) вычисляли по формуле:
РГЭ = ((М - (АМ + М)/М) х 100 %, где М — частота мутаций, индуцированных мутагеном; АМ+М — частота мутаций, наблюдаемых в варианте комбинированного воздействия антимутагена и мутагена. Этот показатель отражает долю мутаций, редуцируемых антимутагеном [3].
Полученные данные подвергались статистической обработке методами вариационной статистики с использованием пакета программ «StatPlus 2009». Вычисляли среднее значение (M) и стандартную ошибку среднего (m). При распределениях, отличных от нормального, использовали непараметрический критерий Вилкоксона — Манна — Уитни. Достоверность различий между качественными признаками проверяли при помощи ф — углового преобразования Фишера. Уровень значимости критериев задавали равным 1 и 5%.
Результаты и их обсуждение
Химический анализ показал, что АСК, выделенный из плодов А. melanocarpa, состоит из антоцианов, флавоноидов, фено-локислот и катехинов. Доминирующими компонентами являются антоцианы. При проведении стандартизации АСК из плодов А. melanocarpa, полученного на 95% подкисленном этаноле, показано, что сухой остаток экстракта составляет 15,00±0,27% и содержит 5,83±0,25% антоцианов. Помимо фенольных соединений, АСК из плодов А. melanocarpa содержит в своем составе органические кислоты (4,70±0,40% сух. остатка) и аскорбиновую кислоту (0,87±0,02% сух. остатка) (табл. 1).
Представленные данные о химическом составе растительного комплекса согласуются
Таблица 1. Содержание фенольных соединений в ан-тоциансодержащем комплексе из плодов Aronia melanocarpa (Michx.) Elliot., полученном на 95% подкисленном этаноле (% на сухой остаток экстракта) Table 1. The content of phenolic compounds in the antho-cyanin-containing complex from the fruits of A. melanocarpa (Michx.) Elliot., obtained on 95% acidified ethanol (% of the dry residue of the extract)
БАВ Сухой остаток, %
Антоцианы 5,83±0,25
Флавоноиды 3,25±0,20
Фенолокислоты 0,27±0,01
Катехины 0,24±0,02
с имеющимися в литературе сведениями. Так, антоцианы по количественному содержанию являются доминирующим классом полифенолов. В основном они представляют собой смесь четырех различных гликозидов цианидина: 3-О-галактозида, 3-О-глюкозида, 3-О-арабинозида и 3-О-оксилозида. Кроме того, в минимальном количестве в аронии представлены другие антоцианы: пелар-гонидин 3-О-галактозид и пеларгонидина арабинозид. Общее содержание антоцианов может колебаться от 307 до 1480 мг на 100 г сырой массы [19].
В эпоху импортозамещения интерес к изучению новых фармакологических свойств различных биологически активных соединений, в частности антоцианов, обусловлен наличием у этих веществ широкого спектра потенциальных мишеней, на которые они могут воздействовать на уровне как структурных и функциональных систем в клетке, так и в организме в целом. Известно, что антоцианы активно мета-болизируются в ЖКТ. Именно эти метаболиты, из-за своей повышенной биодоступности, более биологически активны, чем исходные антоцианы. А. melanocarpa является одним из самых богатых источников полифенолов среди других растений и отличается высоким содержанием про-цианидинов, антоцианидинов, в то время как флавонолы присутствуют в небольших количествах [16].
Известно, что среди растительных биологически активных веществ встречаются генотоксиканты, проявляющие эти эффекты в высоких дозах. Так, ряд исследователей демонстрируют генотоксичность флавоноидов in vitro и in vivo. В качестве примера можно привести известные и распространенные соединения этого ряда — кверцетин и генистеин [7]. С целью выявления генотоксических свойств изучаемого антоциансодержащего комплекса в эксперимент была включена группа животных, которым его вводили изолиро-
ванно. Показано, что АСК, используемый в дозе 225 мг/кг, не оказывал влияния на ци-тогенетические показатели клеток костного мозга животных после одно-, двухкратного введения (табл. 2).
Доказательство полезности полифенолов в химиотерапии злокачественных новообразований требует неопровержимого экспериментального подтверждения. В эксперименте, посвященном изучению влияния антоциансодержащего комплекса из плодов А. те1апосагра на генотоксическое действие цитостатика, получены следующие результаты. Через 24 ч после введения доксорубицина в дозе 6 мг/кг в клетках костного мозга показано увеличение числа клеток с хромосомными повреждениями в 5,9 раза ф<0,01) по сравнению с соответствующим показателем у животных контрольной группы. Среди нарушений в результате цитостатического воздействия были обнаружены одиночные фрагменты и пробелы: их количество возросло в 30,0 и 3,9 раза ф<0,01) соответственно. Кроме того, присутствовали единичные парные фрагменты (рис.). Через 48 ч наблюдения
цитогенетические показатели клеток костного мозга в группе мышей, получавших противоопухолевый препарат, оставались на том же уровне (табл. 2). Полученные результаты изучения влияния доксорубицина на ДНК клеток согласуются с данными литературы. Показано, что антрациклиновый антибиотик способен вызвать нарушения в структуре ДНК посредством ингибиции топоизомеразы II, а также активации окислительного стресса [20].
Основным критерием эффективности перспективных генопротекторных средств является уменьшение доли метафазных пластинок с аберрантными нарушениями. Анализ метафаз клеток костного мозга мышей в группе, получавшей доксорубицин и АСК из плодов А. те1апосагра, позволил выявить снижение повреждающего действия цитостатика во все сроки наблюдения. Через 24 ч после введения цитостатическо-го препарата в группе его сочетанного использования с АСК доля метафазных пластинок с пробелами хромосом снизилась в 4,4 раза, а клеток с хромосомными повреждениями — в 1,6 раза по сравнению
ЕТРМ
щ
r-Ml
0fl
Ш1
Рис. 1. Фотографии метафазных пластинок костного мозга мышей-самок линии C57BI/6 через 24 ч после однократного введения доксорубицина (а) и антоциансодержащего комплекса из плодов Aronia melanocarpa (Michx.) Elliot. L. (b). Окраска азур-эозином, иммерсионный объектив 100. Примечание: стрелкой показаны структурные нарушения (одиночный фрагмент).
Fig. 1. Photographs of metaphase plates of the bone marrow of female mice of the C57BI/6 line 24 hours after a single injection of doxorubicin (a) and anthocyanin-containing complex from the fruits of Aronia melanocarpa (Michx.) Elliot. L. (b). Stained with azure-eosin, immersion objective 100. Note: the arrow shows structural disturbances (single fragment).
Таблица 2. Динамика цитогенетических показателей клеток костного мозга мышей-самок линии C57Bl/6 после однократного введения доксорубицина и АСК из плодов А. melanocarpa (Michx.) Elliot (M±m) Table 2. Dynamics of cytogenetic parameters of bone marrow cells of C57Bl/6 female mice after a single injection of doxorubicin and ASA from the fetuses of A. melanocarpa (Michx.) Elliot (M±m)
Группа наблюдения, доза х количество введений(число животных в группе) Одиночных фрагментов (M±m) Пробелов хромосом (гепов) (M±m) Клетки с хромосомными повреждениями, % РГЭ, %
на 100 исследованных метафаз
Через 24 ч после введения доксорубицина
1. Контроль (n=5) 0,20±0,20 1,80±0,66 2,00±0,63
2. ДКС, 6 мг/кг х 1 (n=5) 6,00±1,26 7,00±1,10 11,80±1,02
1-2 (р<0,01) 1-2 (р<0,01) 1-2 (р<0,01)
3. ДКС, 6 мг/кг х 1 + АСК, 225 мг/кг х 1 (n=5) 6,60±0,68 1,60±0,51, 2-3 (р<0,01) 7,60±0,40, 2-3 (р<0,01) 36
4. АСК, 225 мг/кг х 1 (n=5) 0,60±0,40 0,80±0,58 1,40±0,93
Через 48 ч после введения доксорубицина
1. Контроль (n=5) 0,80±0,49 0,80±0,49 1,60±0,75
2. ДКС, 6 мг/кг х 1 (n=5) 4,20±1,50 8,00±0,89 12,20±1,28
1-2 (р<0,01) 1-2 (р<0,01) 1-2 (р<0,01)
3. ДКС, 6 мг/кг х 1 + АСК, 225 мг/кг х 2 (n=5) 3,80±1,02 1,00±0,32, 2-3 (р<0,01) 4,60±0,68, 2-3 (р<0,01) 62
4. АСК, 225 мг/кг х 2 (n=5) 3,20±1,36 0,80±0,49 3,60±1,33
Примечание: в группы включали по 5 животных, у каждой мыши исследовали 100 клеток. Перед уровнем значимости р указаны номера сравниваемых групп.
Note: the groups included 5 animals, 100 cells were examined in each mouse. Before the significance level p, the numbers of the compared groups are given.
с показателями у мышей в группе монохимиотерапии (табл. 2). Парных фрагментов не выявлено. Через 48 ч зафиксировано снижение количества метафаз со структурными нарушениями после двукратного применения АСК: процентное содержание клеток с пробелами и хромосомными повреждениями уменьшалось, соответственно, в 8,0 и 2,7 раза в группе комбинированного использования цитостатика и средства растительного происхождения (табл. 2). Следует отметить, что показатели редукции генотоксического эффекта в группах комбинированного применения доксорубицина и АСК, зафиксированные по отношению к группе изолированного использования цитостатика, составили 36 и 62% через 24 и 48 ч соответственно. Показатель редукции генотоксического эффекта является высоким, если превышает 50%.
Таким образом, полученные данные свидетельствуют о выраженном генопротек-торном действии антоциансодержащего комплекса из плодов А. melanocarpa в условиях повреждения клеток костного мозга доксорубицином. Обсуждая возможный механизм защитного действия на ДНК растительного комплекса, следует отметить его выраженное антиоксидантное действие, превышающее многие известные природные антиоксиданты. Антирадикальное действие антоцианов обусловлено их структурными особенностями: числом ги-дроксильных групп, наличием катехино-вого фрагмента в В-кольце и иона оксония в С-кольце, паттерном гидроксилирования, метилирования, ацилирования и гликозили-рования [17]. Среди антоциановых аглико-нов наибольшую антиоксидантную активность проявляют цианидин, дельфинидин, за которыми в порядке уменьшения сле-
дуют мальвидин, пеонидин, пеларгонидин, петунидин [21].
В организме человека антиоксидантные свойства антоцианов реализуются путем их прямого взаимодействия со свободными радикалами. Так, в работе [24] показано, что фенольные соединения, содержащиеся в плодах аронии, являются наиболее активными поглотителями катион-радикала ABTS (2,2'-азинобис3-этилбензотиазолин-6-сульфонат). Оценка антиоксидантной активности экстрактов из ежевики, черной смородины, аронии, малины и красной смородины показала, что экстракт А. melanocarpa обладает высоким потенциалом снижения числа свободных радикалов DPPH (2,2-дифенил-1-пикрилгидразил) [14]. Аналогичные результаты, полученные другими авторами, подтвердили способность этанольных экстрактов аронии, богатых фенольными соединениями, удалять радикал DPPH [22]. Известно, что основной вклад в удаление радикалов DPPH вносит антоциановая фракция (66,7%), за которой следуют проантоцианидиновые фракции (25,1%), флавонолы и фенольные кислоты (8,2% от общей активности) [15].
Другим механизмом действия антоциа-нов, приводящим к удалению свободных радикалов, может быть модулирование антиоксидантной защитной системы организма [23]. Так, показана способность антоцианов связываться в цитоплазме с AhR-
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ | REFERENCES
1. Андреева В.Ю., Калинкина Г.И., Коломиец Н.Э., Исайкина Н.В. Методика определения антоцианов в плодах аронии черноплодной. Фармация. 2013;3:19-21. [Andreeva V.Yu., Kalinkina G.I., Kolomiec N.E., Isajkina N.V. Metodika opredeleniya antocianov v plodah aronii chernoplodnoj. [Method for the determination of anthocyanins in the fruits of black chokeberry]. Pharmacy. 2013;3:19-21. (In Russian)].
2. Андреева В.Ю., Шейкин В.В., Калинкина Г.И., Разина Т.Г., Зуева Е.П., Рыбалкина О.Ю., Уль-рих А.В. Разработка средства на основе плодов аронии черноплодной (Aronia melanocârpa (Michx.) Elliot), повышающего эффективность
рецептором, проходить в ядро и запускать альтернативную транскрипцию генов, экс-прессирующих детоксицирующие ферменты, — глутатион эстрансферазу (GSTP), супероксиддисмутазу, каталазу, что резко уменьшает повреждение ДНК. Известно, что процианидины являются ингибиторами NADPH-оксидазы, кофермента некоторых ферментов, катализирующих окислительно-восстановительные реакции в живых клетках [13].
Выводы
Таким образом, представленные данные о снижении повреждающего действия док-сорубицина на ДНК антоциансодержащим комплексом А. melanocarpa могут стать основой для создания препарата-корректора цитостатической терапии злокачественных новообразований. Область применения подобных растительных комплексов может не ограничиваться их использованием в онкологии. Известно, что токсическим действием на генетический аппарат клеток обладают многие известные препараты, которые относятся к различным фармакологическим группам (противовоспалительные, противовирусные, психотропные, проти-восудорожные и др.). С целью снижения генотоксического действия применяемой фармакотерапии может быть рекомендован антоциансодержащий комплекс из плодов А. melanocarpa.
химиотерапии опухолей. Химия растительного сырья. 2020;4:219-226. [Andreyeva V.Yu., Shey-kin V.V., Kalinkina G.I., Razina T.G., Zuyeva Ye.P., Rybalkina O.Yu., Ul'rikh A.V. Razrabotka sredstva na osnove plodov aronii chernoplodnoj (Aronia melanocarpa (Michx.) Elliot), povyshayushchego effek-tivnost' himioterapii opuholej [Development of a drug based on the fruits of chokeberry (Aronia melanocarpa (Michx.) Elliot), which increases the effectiveness of tumor chemotherapy]. Khimiya rastitel'nogo syr'ya [Chemistry of plant materials]. 2020;4:219-226. (In Russian)]. DOI: 10.14258/jcprm.2020046339.
3. Гончарова Р.И., Даливеля О.В., Кужир Т.Д. Кластогенность этилметансульфоната и диметил-терефталата в микроядерном тесте и пути ее модификации. Цитология и генетика. 2002;36(1):14-25. [Goncharova R.I., Dalivelya O.V., Kuzhir T.D. Klastogennost' etilmetansul'fonata i dimetilteref-talata v mikroyadernom teste i puti ee modifikacii [Clastogenicity of ethyl methanesulfonate and dimethyl terephthalate in the micronucleus test and ways of its modification]. Cytology and genetics. 2002;36(1):14-25. (In Russian)].
4. Государственный реестр лекарственных средств: науч. издание. М.: Минздрав России. 2020:1006. [Gosudarstvennyj reestr lekarstvennyh sredstv: nauch. izdanie [State Pharmacopoeia of the Russian Federation: scientific publication]. Moscow: Minzdrav Rossii. 2020:1006. (In Russian)].
5. Государственная Фармакопея Российской Федерации: науч. издание. М.: Минздрав России. 2007:684. [Gosudarstvennaya Farmakopeya Rossijskoj Federacii: nauch. izdanie [State Pharmacopoeia of the Russian Federation: scientific publication]. Moscow: Minzdrav Rossii. 2007:684. (In Russian)].
6. Государственная Фармакопея Российской Федерации: науч. издание. М.: Минздрав России. 2018:1004. [Gosudarstvennaya Farmakopeya Rossijskoj Federacii: nauch. izdanie [State Pharmacopoeia of the Russian Federation: scientific publication]. Moscow: Minzdrav Rossii. 2018:1004. (In Russian)].
7. Дурнев А.Д., Лапицкая А.С. Генотоксикология соединений растительного происхождения. Экологическая генетика. 2012;10(3):41-52. [Durnev A.D., Lapickaya A.S. Genotoksikologiya soedinenij ras-titel'nogo proiskhozhdeniya [Genotoxicology of compounds of plant origin] Ekologicheskaya gene-tika [Environmental genetics]. 2012;10(3):41-52. (In Russian)].
8. Коломиец Н.Э., Калинкина Г.И., Сапронова Н.Н. Стандартизация листьев крапивы. Фармация. 2011;6:22-24. [Kolomiec N.E., Kalinkina G.I., Sapro-nova N.N. Standartizaciya list'ev krapivy [Nettle leaf standardization]. Pharmacy. 2011;6:22-24. (In Russian)].
9. Красникова Е.В. Разработка технологии натурального пищевого красителя из аронии черноплодной с использованием искусственного холода: дис. ... канд. техн. наук. С.-Пб, 2003:148. [Krasnikova E.V. Razrabotka tekhnologii natural'nogo pishchevogo krasitelya iz aronii chernoplodnoj s ispol'zovaniem iskusstvennogo holoda [Development of technology for natural food coloring from chokeberry using artificial cold]: dis. ... cand. tekhn. sci. Saint Petersburg, 2003:148. (In Russian)].
10. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. Под ред. Р.У Хабриева. 2-е изд., перераб. и доп. М.: Медицина, 2005:832. [Rukovodstvo po eksperimental'nomu (doklinicheskomu) izucheniyu
novyh farmakologicheskih veshchestv [Guidelines for the experimental (preclinical) study of new pharmacological substances]. Ed. by R.U. Khabriev. 2nd ed., revised. and additional. Moscow: Medicina Publ. 2005:832. (In Russian)].
11. Рыбалкина О.Ю., Разина Т.Г., Зуева Е.П., Андреева В.Ю., Зюзьков Г.Н., Калинкина Г.И., Жданов В.В. Перспективы использования Aronia melanocarpa (Rosaceae) в онкологической практике. Растительные ресурсы. 2022;58(3):222-235. [Rybalkina O.Yu., Razina T.G., Zueva E.P., Andreeva V.Yu., Zyuz'kov G.N., Kalinkina G.I., Zhdanov V.V. Perspektivy ispol'zovaniya Aronia melanocarpa (Rosaceae) v onkologicheskoj prak-tike [Prospects for the use of Aronia melanocarpa (Rosaceae) in oncological practice]. Rastitel'nye resursy [Plant resources]. 2022;58(3):222-235. (In Russian)]. DOI: 10.31857/S0033994622030098.
12. Рыбалкина О.Ю., Разина Т.Г., Сафонова Е.А., Киселева Е.А., Ульрих А.В., Андреева В.Ю., Исайкина Н.В., Калинкина Г.И., Зуева Е.П. Aronia melanocarpa и Sorbus aucuparia (Rosaceae) как перспективные источники получения антоциансодер-жащих комплексов для дополнительной терапии перевиваемых опухолей. Растительные ресурсы. 2021;2:186-192. [Rybalkina O.Yu., Razina T.G., Safonova E.A., Kiseleva E.A., Ul'rikh A.V., Andreeva V.Yu., Isaikina N.V., Kalinkina G.I., Zueva E.P. Aronia melanocarpa i Sorbus aucuparia (Rosaceae) kak perspektivnye istochniki polucheniya antocian-soderzhashchih kompleksov dlya dopolnitel'noj tera-pii perevivaemyh opuholej [Aronia melanocarpa and Sorbus aucuparia (Rosaceae) as promising sources for obtaining anthocyanin-containing complexes for additional therapy of transplantable tumors] Rastitel'nye resursy [Plant resources]. 2021;2:186-192. (In Russian)]. DOI: 10.31857/S0033994621020072.
13. Alvarez E., Rodino-Janeiro B.K., Jerez M., Ucieda-Somoza R., Nùnez M.J., Gonzalez-Juanatey J.R. Procyanidins from grape pomace are suitable inhibitors of human endothelial NADPH oxidase. J. Cell Biochem. 2012;113(4):1386-1396. DOI: 10.1002/ jcb.24011.
14. Benvenuti S., Pellati F., Melegari M., Bertelli D. Polyphenols, anthocyanins, ascorbic acid, and radical scavenging activity of Robus, Ribes and Aronia. J. Food Sci. 2004;69:164-169.
15. Jakobek L., Seruga M., Medvidovic-Kosanovic M., Novak I. Anthocyanin content and antioxidant activity of various red fruit juices. Deutshe Lebensm. — Rundsch. 2007;103:58-64.
16. Jurendic T., Sœtar M. Aronia melanocarpa Products and By-Products for Health and Nutrition: A Review. Antioxidants (Basel).2021;10(7):1052. DOI: 10.3390/ antiox10071052.
17. Yang M., Koo S.I., Song W.O., Chun O.K. Food matrix affecting anthocyanin bioavailability: review. Curr.
Med. Chem. 2011;18(2):291-300. DOI: 10.2174/0929 86711794088380.
18. Kokotkiewicz A., Jaremicz Z., Luczkiewicz M. Aronia Plants: A Review of Traditional Use, Biological Activities, and Perspectives for Modern Medicine. J. Med. Food. 2010;13:255-269. DOI: 10.1089/ jmf.2009.0062.
19. Kulling S.E., Rawel H. Chokeberry (Aronia Melanocarpa) — A Review on the Characteristic Components and Potential Health Effects. Planta Medica. 2008;74:1625-1634. DOI: 10.1055/s-0028-1088306.
20. Lu Y., Xu D., Zhou J., Ma Y., Jiang Y., Zeng W., Dai W. Differential responses to genotoxic agents between induced pluripotent stem cells and tumor cell lines. J. Hematol. Oncol. 2013;6(1):71. DOI: 10.1186/17568722-6-71.
21. Lucioli S. Anthocyanins: mechanism of action and therapeutic efficacy. In: Capasso A. (Ed.). Medicinal Plants as Antioxidant Agents: Understanding Their
Mechanism of Action and Therapeutic Efficacy Research Signpost. Kerala, India. 2012:27-57.
22. Nakajima J., Tanaka I., Seo S., Yamazaki M., Saito K. LC/PDA/ESI-MS profilng and radical scavnging activity of anthocyanins in various berries. J. Biomed. Biotechnol. 2004;5:241-247.
23. Shih P.H., Yeh C.T., Yen G.C. Anthocyanins induce the activation of phase II enzymes through the an-tioxidant response element pathway against oxidative stress-induced apoptosis. J. Agric. Food Chem. 2007;55(23):9427-9435. DOI: 10.1021/jf071933i.
24. Tarko T., Duda-Chodak A., Sroka P., Satora P., Michalik J. Transformations of phenolic compounds in an in vitro model simulating the human alimentary tract. Food Technol. Biotechnol. 2009;47:456-463.
25. Yudina R.S., Gordeeva E.I., Shoeva O.Y., et al. Anthocyanins as functional food components. Vavilov-skii Zhurnal Genet Selektsii. 2021;25(2):178-189. DOI: 10.18699/VJ21.022.
СВЕДЕНИЯ ОБ АВТОРАХ | INFORMATION ABOUT THE AUTHOR
Рыбалкина Ольга Юрьевна*, к.б.н., доц., Научно-исследовательский институт фармакологии и регенеративной медицины имени Е.Д. Гольдберга ФГБНУ «Томский национальный исследовательский медицинский центр РАН»; ФГБОУ ВО «Сибирский государственный медицинский университет» Минздрава России; e-mail: [email protected]
Olga Yu. Rybalkina*, Cand. Sci. (Biol.), Assoc. Prof., Goldberg Research Institute of Pharmacology and Regenerative Medicine, Tomsk National Research Medical Center of the Russian Academy of Sciences; Siberian State Medical University of the Ministry of Health Care of Russia; e-mail: [email protected]
Неупокоева Оксана Владимировна, к.б.н., Научно-исследовательский институт фармакологии и регенеративной медицины имени Е.Д. Гольдберга ФГБНУ «Томский национальный исследовательский медицинский центр РАН»; e-mail: [email protected]
Oksana V. Neupokoeva, Cand. Sci. (Biol.), Goldberg Research Institute of Pharmacology and Regenerative Medicine, Tomsk National Research Medical Center of the Russian Academy of Sciences;
e-mail: [email protected]
Воронова Ольга Леонидовна, к.б.н., Научно-исследовательский институт фармакологии и регенеративной медицины имени Е.Д. Гольдберга ФГБНУ «Томский национальный исследовательский медицинский центр РАН»; e-mail: [email protected]
Olga L. Voronova, Cand. Sci. (Biol.), Goldberg Research Institute of Pharmacology and Regenerative Medicine, Tomsk National Research Medical Center of the Russian Academy of Sciences;
e-mail: [email protected]
Разина Татьяна Георгиевна, д.б.н., Научно-исследовательский институт фармакологии и регенеративной медицины имени Е.Д. Гольдберга ФГБНУ «Томский национальный исследовательский медицинский центр РАН»; e-mail: [email protected]
Tatyana G. Razina, Dr. Sci. (Biol.), Goldberg Research Institute of Pharmacology and Regenerative Medicine, Tomsk National Research Medical Center of the Russian Academy of Sciences;
e-mail: [email protected]
Калинкина Галина Ильинична, д.фарм.н., проф., ФГБОУ ВО «Сибирский государственный медицинский университет» Минздрава России;
e-mail: galina [email protected]
Андреева Валерия Юрьевна, к.б.н., доц., ФГБОУ ВО «Сибирский государственный медицинский университет» Минздрава России; e-mail: [email protected]
Киселева Елена Александровна, Научно-исследовательский институт фармакологии и регенеративной медицины имени Е.Д. Гольдберга ФГБНУ «Томский национальный исследовательский медицинский центр РАН»; e-mail: elena [email protected]
Чурин Алексей Александрович, д.м.н., проф. РАН, Научно-исследовательский институт фармакологии и регенеративной медицины имени Е.Д. Гольдберга ФГБНУ «Томский национальный исследовательский медицинский центр РАН»;
e-mail: [email protected]
Зуева Елена Петровна, д.б.н., проф., Научно-исследовательский институт фармакологии и регенеративной медицины имени Е.Д. Гольдберга ФГБНУ «Томский национальный исследовательский медицинский центр РАН»; e-mail: [email protected]
Жданов Вадим Вадимович, д.м.н., проф., член-корр. РАН, Научно-исследовательский институт фармакологии и регенеративной медицины имени Е.Д. Гольдберга ФГБНУ «Томский национальный исследовательский медицинский центр РАН»;
e-mail: zhdanov [email protected]
Galina I. Kalinkina, Dr. Sci. (Pharm.), Prof., Siberian State Medical University of the Ministry of Health Care of Russia; e-mail: galina [email protected]
Valeria Yu. Andreeva, Cand. Sci. (Biol.), Assoc. Prof., Siberian State Medical University of the Ministry of Health Care of Russia; e-mail: [email protected]
Elena A. Kiseleva, Goldberg Research Institute of Pharmacology and Regenerative Medicine, Tomsk National Research Medical Center of the Russian Academy of Sciences; e-mail: elena [email protected]
Aleksey A. Churin, Dr. Sci. (Med.), Prof. of the RAS, Goldberg Research Institute of Pharmacology and Regenerative Medicine, Tomsk National Research Medical Center of the Russian Academy of Sciences;
e-mail: [email protected]
Elena P. Zueva, Dr. Sci. (Biol.), Prof., Goldberg Research Institute of Pharmacology and Regenerative Medicine, Tomsk National Research Medical Center of the Russian Academy of Sciences;
e-mail: [email protected]
Vadim V. Zhdanov, Dr. Sci. (Med.), Prof., Corr. Member of RAS, Goldberg Research Institute of Pharmacology and Regenerative Medicine, Tomsk National Research Medical Center of the Russian Academy of Sciences; e-mail: zhdanov [email protected]
* Автор, ответственный за переписку / Corresponding author
