Генетическое разнообразие популяции вируса клещевого энцефалита на территории Национального парка "Алханай" (Забайкальский край)

Сидорова Елена Александровна; Карань Людмила Станиславовна; Борисова Татьяна Ивановна; Адельшин Ренат Викторович; Андаев Евгений Иванович; Трухина Анна Гавриловна; Туранов Александр Олегович; Нагибина Ольга Алексеевна; Погодина Ванда Вацлавовна; Лапа Светлана Эдуардовна; Балахонов Сергей Владимирович

ГЕНЕТИЧЕСКОЕ РАЗНООБРАЗИЕ ПОПУЛЯЦИИ ВИРУСА КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТА НА ТЕРРИТОРИИ НАЦИОНАЛЬНОГО ПАРКА «АЛХАНАЙ» (ЗАБАЙКАЛЬСКИЙ КРАЙ)

Елена Александровна Сидорова1, Людмила Станиславовна Карань2, Татьяна Ивановна Борисова1, Ренат Викторович Адельшин1, Евгений Иванович Андаев1, Анна Гавриловна Трухина1,

Александр Олегович Туранов3, Ольга Алексеевна Нагибина4, Ванда Вацлавовна Погодина5,

Светлана Эдуардовна Лапа6, Сергей Владимирович Балахонов1 ('Иркутский научно-исследовательский противочумный институт, директор - д.м.н., проф. С.В. Балахонов; ^Центральный НИИ эпидемиологии, Москва, директор - академик РАМН д.м.н. проф. В.И. Покровский; 3Центр гигиены и эпидемиологии в Забайкальском крае, гл. врач - В.И. Игнатьев; 4Читинская противочумная станция, директор - В.А. Агапов, 5Институт полиомиелита и вирусных энцефалитов им. М.П. Чумакова РАМН, Москва, директор - член-корр. РАМН, д.м.н. проф.

М.И. Михайлов; ^Управление Роспотребнадзора по Забайкальскому краю, руководитель - В.И. Пинтусов)

Резюме. В работе представлены результаты исследования штаммов вируса клещевого энцефалита (КЭ), выделенных в 1999-2011 гг. от иксодовых клещей и диких грызунов на территории Национального парка «Алханай» Забайкальского края. На территории парка установлена сочетанная циркуляция двух генотипов вируса КЭ - дальневосточного и сибирского, выделены «886-84-подобные» штаммы, отличающиеся от представителей сибирского и дальневосточного генотипов, и микст-штамм, сочетающий признаки сибирского и дальневосточного генотипов.

Ключевые слова: вирус клещевого энцефалита, генотип, секвенирование, ген Е.

GENETIC VARIETY OF TICK-BORNE ENCEPHALITIS VIRUS POPULATION IN ALKHANAY NATIONAL PARK (TRANSBAIKAL REGION)

E.A. Sidorova1, L.S. Karan2, T.I. Borisova1, R.V. Adelshin1, E.I. Andaev1, A.G. Trukhina1, A.O. Turanov3,

O.A. Nagibina4, V.V. Pogodina5, S.E. Lapa6, S.V. Balakhonov1 (Irkutsk Antiplague Research Institute of Siberia and Far East of Rospotrebnadzor; 2Central Research Institute of Epidemiology of Rospotrebnadzor, Moscow; 3Center of Hygiene and Epidemiology in Transbaikal region of Rospotrebnadzor; 4Chita Antiplague Station of Rospotrebnadzor, Chita; 5Institute of Poliomyelitis and Virus Encephalitis by M.P. Chumakov of RAMS, Moscow; 6Administration of Rospotrebnadzor at Transbaikal region)

Summary. In our research are presented the results of tick-borne encephalitis (TBE) virus strains, isolated in 1999-2011 from Ixodes ticks and wild rodents in the National Park “Alkhanay” (Transbaikal region). Combined circulation of two TBE virus genotypes, Far Eastern and Siberian, was established. Moreover «886-84-like» strains differed from the Siberian and Far Eastern genotypes were isolated in the National Park and a mixed strain combining features of the Siberian and Far Eastern genotypes.

Key words: tick-borne encephalitis virus, genotype, sequencing, gene Е.

Клещевой энцефалит - природно-очаговое вирусное инфекционное заболевание, возбудитель которого открыт на Дальнем Востоке в 1937 г. [8]. Согласно современной международной классификации вирус КЭ относится к роду Flavivirus семейства Flaviviridae. В настоящее время выделяют три генотипа вируса КЭ: дальневосточный, сибирский и европейский [11]. В свою очередь сибирский генотип делится на два больших подтипа: азиатский и европейский (или балтийский), в составе азиатского подтипа выделяют два кластера: первый с прототипным штаммом Vasilchenko, второй -с прототипным штаммом Zausaev [2]. Кроме того, в 7080-е годы прошлого века в Эхирит-Булагатском районе Иркутской области впервые выделены от клещей Ixodes persulcatus и полевки красно-серой своеобразные по антигенной структуре и отличающиеся от изолятов сибирского и дальневосточного генотипов штаммы 17879 и 886-84. Оригинальность штаммов показана А.Г. Трухиной [9] в реакции диффузной преципитации в агаре с моноспецифическими перекрестно-истощенными сыворотками. К настоящему времени получены генетические доказательства особенностей этих штаммов: по результатам филогенетического анализа штаммы распределились в отдельные клады и не были отнесены ни к одному из трех ранее изученных генотипов [4]; расширены представления об ареале «886-84-подобного» варианта вируса КЭ (не только Иркутская область, но и Республика Бурятия, Забайкальский край, Монголия); показано их участие в формировании очаговых форм КЭ с летальным исходом [1,10].

На большей части территории Российской Федерации распространены сибирский и дальневосточный геноти-

пы вируса КЭ с преобладанием сибирского [6,7]. На территориях с одновременной циркуляцией вируса КЭ разных генотипов (Кемеровская, Свердловская, Иркутская, Ярославская области, Республика Алтай, Забайкальский край и Казахстан) выделены микст-штаммы, сочетающие признаки сибирского и дальневосточного генотипов [5].

Учитывая большое значение особенностей региональных популяций вируса КЭ как для анализа фундаментальных вопросов его эволюции, так и решения практических задач, направленных на совершенствование прогноза эпид-ситуации, диагностики, профилактики и лечения, нами проводится изучение гено- и фенотипических свойств штаммов вируса КЭ, выделенных в различных районах Забайкальского края от больных КЭ с летальным исходом, иксодовых клещей и диких грызунов.

Цель работы: изучение генетических особенностей штаммов вируса КЭ, выделенных на территории Национального парка «Алханай» Забайкальского края.

Материалы и методы

В работе использованы 10 штаммов вируса КЭ, изолированных специалистами Читинской ПЧС (7) и Иркутского научно-исследовательского противочумного института (3) из полевого материала: иксодовые клещи Ixodes persulcatus и Dermacentor silvarum и мелкие млекопитающие - полевка красная (Clethrionomys rutilus), полевка Максимовича (Microtus Maximowiczii), собранного на территории Национального парка «Алханай» в 1999-2011 гг. (табл. 1).

Изоляцию вируса проводили на 2-3 суточных новорожденных белых мышах (НБМ) по общепринятой

методике; индикацию - в ИФА и ПЦР, идентификацию выделенных агентов - в реакции нейтрализации (РН) в культуре клеток СПЭВ.

Выделение РНК из вируссодержащей суспензии мозга проводили набором реагентов «Рибо-преп», обратную транскрипцию - «Реверта-Ъ-100» и детекцию РНК вируса - тест-системой «АмплиСенс TBE-FL» производства АмплиСенс (ФБУН ЦНИИ эпидемиологии Роспотребнадзора, Москва) в соответствии с инструкциями изготовителя.

Генотипирование штаммов осуществляли двумя методами: ОТ-ПЦР в режиме реального времени с гибридизационно-флуоресцентной детекцией с гено-типспецифическими зондами и секвенированием участка гена белка Е длиной 1268 п.н. Для амплификации кДНК использовали набор реагентов «АмплиСенс» с праймерами, комплементарными гену Е вируса КЭ. Расшифровку нуклеотидных последовательностей проводили на автоматическом секвена-торе «ABI Prism DNA Seq^ncer 3130» (Applied Biosystems, США) с набором реактивов «ABI Prism Big Dye Terminator Kit v.3.1.».

Полученные нуклеотидные последовательности анализировали с помощью программы BioEdit v.7.0.9.0. Филогенетический анализ проводили с помощью программы MEGA v.5 методом Maximum Likelihood, модель TN93, G+I. Для сравнения использовали последовательности гена Е вируса КЭ разных генотипов, взятые из GenBank: Sofin-HO (AB062064), Vasilchenko (AF069066), Zausaev (AF527415), 0shima-5-10 (AB062063), Neudoerfl

(U27495), Aina (JN003206), Cht-22 (JN003208), Cht-653 (JN003207), Senzhang (AY182009), Ekaterinburg-716-09 (GQ845428), Kemerovo-134-08 (GQ845433),

Ekaterinburg-859-09 (GQ845427), Vologda-157-08 (GQ845434), Vologda-208-08 (GQ845437), Vologda-166-08 (GQ845435), 178-79 (EF469661), Dalnegorsk (FJ402886), EK-328 (DQ486861), Kavalerovo (FJ402885), Svetlogorie (GU121642), Glubinnoe-2004 (DQ862460), Primorye-18 (GQ228395), Primorye-86 (EU816455), Primorye-253 (EU816451), Primorye-633 (HM859894), Hypr (U39292), Salem (FJ572210), Toro-2003 (DQ401140), 886-84

(EF469662), 740-84 (EU878282), 617-90 (EU878283), 71184 (EU878281), Omsk haemorrhagic fever virus (X66694).

Результаты и обсуждение

Национальный парк «Алханай» создан в 1999 г., его площадь 138,2 тыс. га. Границы парка сформированы по бассейновому принципу и проходят по Даурскому и Могойтуйскому хребтам. Рельеф - среднегорный с абсолютными высотами до 1000-1200 м. Парк расположен на стыке двух геоморфологических регионов - Даурского и Онон-Аргунского. Центральную часть парка составляет горный массив, покрытый смешанными и хвойными лесами. Расположенная на меньших высотах над уровнем моря южная часть парка занята преимущественно степями. Национальный парк находится в условиях резко континентального климата со средней температурой января -22,5°С; июля - +18,4°С. Территория парка богата разнообразием флоры и фауны. Кроме того, «Алханай» отличает наличие природно-культового комплекса свя-

тынь северного буддизма [3]. К настоящему времени Национальный парк мало обследован в отношении КЭ, а число как паломников, так и туристов, посещающих его в сезон активности иксодовых клещей, возрастает (в среднем за июнь-сентябрь парк посещает более 30 тыс. гостей).

Генотипирование 9 штаммов вируса КЭ в ОТ-ПЦР в режиме реального времени с генотипспецифическими зондами (табл. 1) показало, что три штамма относятся к вирусу КЭ сибирского генотипа (АІ^апау 46-99, АІ^апау 68В-00, АШЬапау 106-01); два - дальневосточного (АШЬапау 104-01, АШЬапау б4-00), один (АШЬапау 44-99) типирован как микст-штамм, сочетающий признаки сибирского и дальневосточного генотипов. Определить генотип трех штаммов (АІ^апау 43-99,

Alkhanay 3094/9-10, Alkhanay 3094/18-10) данным методом не удалось.

Семь из девяти штаммов, генотипированных в ОТ-ПЦР в режиме реального времени, и штамм Alkhanay 17-11 параллельно исследованы методом секвенирова-ния фрагмента гена белка Е длиной 1268 п.н. (табл. 1). С использованием этого метода типированы штаммы вируса КЭ дальневосточного (2) и сибирского (3) генотипов, а также «886-84-подобные» (3). Анализ полученных нуклеотидных последовательностей показал, что штаммы дальневосточного генотипа (Alkhanay 104-01 и Alkhanay 64-00) имеют высокий уровень гомологии со штаммом Glubinnoe-2004 (94,7 и 95,3% соответственно). Уровень различия между штаммами Alkhanay 104-01 и Alkhanay 64-00 достигает 2,9%. В нуклеотидных последовательностях гена белка Е оба штамма имеют маркерную аминокислоту в позиции 206 - серин, что является типичным для представителей дальневосточного генотипа, а также аминокислоту треонин в позиции 366, характерную только для штаммов Glubinnoe, Senzhang и Svetlogorie (рис. 1). Тогда как у остальных штаммов, нуклеотидные последовательности которых использованы для филогенетического анализа, в данной позиции находится аминокислота аспарагин. Замена аминокислоты в позиции 366 гена Е отмечена нами ранее и у других штаммов, выделенных в Забайкальском крае от больных КЭ людей с летальным исходом [1].

Три штамма сибирского генотипа (Alkhanay 4699, Alkhanay 68В-00, Alkhanay 17-11) разделились на два кластера Zausaev и Vasilchenko (рис. 1). Штамм Alkhanay 46-99 кластеризуется с группой штаммов Zausaev, Kemerovo-134-08, Ekaterinburg-716-09 и имеет характерную аминокислоту гистидин в позиции 234. Отличает штамм Alkhanay 46-99 от прототипного Zausaev замена аминокислоты лизин на аргинин в позиции 228. Подобная замена встречается у штаммов, выделенных в Эстонии (EK-328), Иркутской (178-79), Вологодской (Vologda-157-08), Кемеровской областях (Кемерово-8-11-05).

Таблица 1

Результаты генотипирования штаммов вируса КЭ, выделенных на территории Национального парка «Алханай» Забайкальского края

№ п/п № штамма Год изоля- ции Источник изоляции Генотипирование штаммов

ОТ-ПЦР в режиме реального времени с генотипспецифическими зондами секвенирование фрагмента гена белка Е (1268 п.н.)

1 Alkhanay 43-99 1999 I. реки!саШ не типируется 886-84-подобный

2 Alkhanay 44-99 1999 I. реки!саШ микст-штамм н/и

3 Alkhanay 46-99 1999 I. реки!саШ сибирский сибирский

4 Alkhanay 64-00 2000 полевка Максимовича дальневосточный дальневосточный

5 Alkhanay 68В-00 2000 красная полевка сибирский сибирский

6 Alkhanay 104-01 2001 I. реки!саШ дальневосточный дальневосточный

7 Alkhanay 106-01 2001 I. реки!саШ сибирский н/и

8 Alkhanay 3094/9-10 2010 красная полевка не типируется 886-84-подобный

9 Alkhanay 3094/18-10 2010 красная полевка не типируется 886-84-подобный

10 Alkhanay 17-11 2011 О. вНуагит н/и сибирский

Примечание-, н/и - не исследован.

Рис. 1. Филогенетическое древо вируса клещевого энцефалита, построенное на основе нуклеотидных последовательностей фрагмента гена Е (1268 п.н.) с помощью метода максимального правдоподобия (изученные штаммы выделены полужирным курсивом).

Штаммы кластера Vasilchenko Alkhanay 68В-00 и Alkhanay 17-11 не различаются - фрагменты гена Е идентичны между собой (100%) и имеют в позиции 81 замену (Thr^Ala), характерную для единичных штаммов из Вологодской, Ярославской, Иркутской областей и Хабаровского края. В позиции 119 у этих штаммов установлена редкая мутация (Val^Ala), присутствующая у единичных штаммов из Иркутской области, входящих в кластер Vasilchenko, одного изолята из Вологодской области и у всех штаммов с архипелага Коккола, Финляндия. Уровень гомологии штаммов Alkhanay 68В-00 и Alkhanay 17-11 со штаммом Vasilchenko достигает 96,3%.

Штаммы Alkhanay 43-99, Alkhanay 3094/9-10, Alkhanay 3094/18-10 генотипированы как «886-84-подобные» с уровнем гомологии между собой 98,7-99,1% и характерными для них аминокислотами аргинин в

позиции 408 и изолейцин в позиции 455. Уникальные замены имеют штаммы Alkhanay 3094/18-10 (Ala^Gly) в позиции 72 и Alkhanay 43-99 в позиции 436 (Ala^Val).

Таким образом, впервые с применением современных молекулярно-генетических методов изучена представительная группа штаммов, выделенных на территории Национального парка «Алханай». Показана сочетанная циркуляция на обследованной территории двух самостоятельных генотипов вируса - дальневосточного (2 штамма) и сибирского (3), «886-84-подобного» варианта (3), отличающегося не только от дальневосточного и сибирского, но и европейского генотипов. Кроме того, из пула клещей

I. persulcatus выделен микст-штамм, который реагирует со специфическими зондами как сибирского, так и дальневосточного генотипов. Штаммы вируса КЭ сибирского генотипа представлены двумя кластерами Vasilchenko и Zausaev.

Высокая генетическая вариабельность вируса КЭ вероятно обусловлена разнообразием ландшафтно-биоценотических условий (горные, таежные, лесостепные ландшафты) и видовым разнообразием прокормителей иксодовых клещей, поддерживающих циркуляцию возбудителя КЭ. Однако полная характеристика региональной популяции вируса КЭ возможна только при ее изучении с использованием комплекса молекулярно-биологических методов генотипирования штаммов или изолятов вируса: ОТ-ПЦР в режиме реального времени с генотипспецифи-ческими зондами; секвениро-вание фрагмента гена белка Е, содержащего маркерную аминокислоту, или секвениро-вание полноразмерной последовательности гена Е; анализ полиморфизма длин рестрикционных фрагментов.

Результаты наших исследований поднимают ряд вопросов, представляющих практический интерес, в частности, влияние генетической вариабельности возбудителя КЭ на эпидемиологические и эпизоотологиче-ские проявления природных очагов инфекции, что невозможно без их адекватного мониторинга. Проведение таких исследований позволит обосновать связь распространения разных генотипов вируса КЭ с ландшафтно-биоценотическими особенностями очаговых территорий и степенью их антропогенной трансформации, оценить целесообразность применения диагностических и специфических профилактических препаратов на основе штаммов, представляющих разные генотипы вируса и уточнить роль сибирского, дальневосточного генотипов и «886-84-подобного» варианта вируса КЭ в формировании региональной патологии.

ЛИТЕРАТУРА

1. Андаев Е.И., Борисова Т.И., Трухина А.Г. и др. Структура популяции вируса клещевого энцефалита в Забайкальском крае // Матер. VII Всерос. научно-практ. конференции с меж-дународ. участием «Молекулярная диагностика - 2010». - М., 2010. - Т. 2. - С.206-208.

2. Инфекции, передаваемые клещами, в Сибирском регионе / Под ред. В.В. Власова, В.Е. Репина; Рос. акад. наук, Сиб. отд-ние, Ин-т хим. биол. и фунд. медицины. - Новосибирск: Изд-во СО РАН, 2011. - 395 с.

3. Малая энциклопедия Забайкалья. Природное наследие / Под ред. РФ. Гениатулина. - Новосибирск: Наука, 2009. - 689 с.

4. КараньЛ.С., МаленкоГ.В., Бочкова Н.Г. и др. Применение молекулярно-генетических методик для изучения структуры штаммов вируса клещевого энцефалита // Бюллетень СО РАМН. - Новосибирск, 2007. - №4 (126). - С.34-40.

5. Карань Л.С., Шопенская Т.А., Платонов А.Е. и др. Молекулярные методы в алгоритме мониторинга очагов клещевых трансмиссивных инфекций // Молекулярная диагностика - 2007. Сб. трудов VI Всерос. научн.-практ. конф. с междунар. участием. - М., 2007. - Т. II. - С.316-317.

6. Погодина В.В., Бочкова Н.Г., КараньЛ.С. и др. Сибирский и дальневосточный подтипы вируса клещевого энцефалита в европейских и азиатских регионах России: генетическая и антигенная характеристика штаммов // Вопр. вирусол. -2004. - №4. - С.20-25.

7. Погодина В.В., Карань Л.С., Колясникова Н.М. и др. Эволюция клещевого энцефалита и проблема эволюции возбудителя // Вопр. вирусол. - 2007. - №5. - С.16-21.

8. Смородинцев А.А., Дубов А.В. Клещевой энцефалит и его профилактика. - М., 1986. - 232 с.

9. Трухина А.Г. Особенности популяции вируса клещевого энцефалита в зоне распространения двух серотипов вируса на территории Прибайкалья: Дисс...канд. мед наук . - Иркутск, 1989. - 179 с.

10. Хаснатинов М.А., Данчинова Г.А., Кулакова Н.В. и др. Генетическая характеристика возбудителя клещевого энцефалита в Монголии // Вопр. вирусол. - 2010. - №3. - С.27-32.

11. Heinz F.X., Collett M.S., Purcell R.H., et al. Family Flaviviridae // Virus taxonomy: classification and nomenclature of viruses: 7 report of the International committee of taxonomy of viruses. - San Diego, 2000. - P1217-1225.

Информация об авторах: Сидорова Елена Александровна - м.н.с., 664047, г. Иркутск, ул. Трилиссера, 78, тел.: (3952) 220135, e-mail: [email protected]; Борисова Татьяна Ивановна - к.б.н., с.н.с.; Адельшин Ренат Викторович -к.б.н., с.н.с.; Балахонов Сергей Владимирович - д.м.н., профессор, директор; Андаев Евгений Иванович - д.м.н., заместитель директора, заведующий лабораторией; Трухина Анна Гавриловна - к.м.н., ученый секретарь;

Карань Людмила Станиславовна - н.с.; Туранов Александр Олегович - заместитель главного врача;

Погодина Ванда Вацлавовна - д.м.н., профессор, заслуженный деятель науки РФ, заведующий лабораторией; Нагибина Ольга Алексеевна - заведующий лабораторией; Лапа Светлана Эдуардовна - к.м.н., заместитель руководителя.

ОЧАГОВЫЕ ФОРМЫ КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТА У ДЕТЕЙ ПРИМОРЬЯ

Анастасия Анатольевна Черникова, Альвина Васильевна Гордеец,

Валентина Александровна Шаркова, Татьяна Сергеевна Хегай (Владивостокский государственный медицинский университет, ректор - д.м.н., проф. В.Б. Шуматов)

Резюме. В статье представлены результаты изучения особенностей проявления очаговой формы клещевого энцефалита у 31 ребёнка. Очаговые формы клещевого энцефалита отличались крайне тяжелой симптоматикой, с выраженными общетоксическими и общемозговыми симптомами, тяжелыми поражениями нервной системы с развитием судорог, потери сознания, периферических вялых параличей, гемипарезов спастического характера, появление патологических стопных знаков, развития косоглазия, птоза, бульбарного синдрома, а в 22,6% случаев отмечалось двухволновое течение болезни. Представлены результаты иммунологического реагирования системного цитокинового статуса. Установлена однонаправленность изменений системного цитокинового статуса: гиперпродукция ИНФу и ИЛ-10. В динамике заболевания - активное снижение уровня ИЛ-10, что вероятно свидетельствует о развитии Th1/Th2 типа иммунного ответа.

Ключевые слова: клещевой энцефалит, очаговые проявления, дети, цитокины.

THE FOCAL FORMS OF TICK-BORNE ENCEPHALITIS IN CHILDREN IN PRIMORYE

A.A. Chernikova, A.V. Gordeets, V.A. Sharkova, T.S. Hegai (Vladivostok State Medical University)

Summary. There have been presents the results of studying the characteristics of focal forms of manifestation of tick-borne encephalitis in 31 children. Focal forms of tick-borne encephalitis is characterizing by extremely severe symptoms, with severe general toxic and cerebral symptoms, severe lesions of the nervous system with the development of seizures, loss of consciousness, peripheral flaccid paralysis, spastic hemiparesis nature, occurrence of pathological Iambic signs of strabismus, ptosis, bulbar syndrome, and in 22,6% of cases we observed during two-wave of the disease. The results of the immunological responses of systemic cytokine status have been presented. There have been defined the unidirectional changes in the systemic cytokine status: hyperproduction of INFy and IL-10. In the process of the disease was noted the active reduction of IL-10, which probably indicates the development of Th1/Th2 type of immune response.

Key words: tick-borne encephalitis, focal manifestations, children, cytokines.

Очаговая форма клещевого энцефалита (КЭ) наиболее тяжелая и в некоторых регионах России наиболее часто регистрируется [1,2]. В последние годы в эндемичных регионах отмечается рост заболеваемости клещевым энцефалитом [3,5]. В Приморском крае первые случаи заболевания были зафиксированы еще в 30-х годах прошлого века. С тех пор наблюдались и спады,

и подъёмы заболеваемости. На протяжении последней четверти XX века и в первом десятилетии XXI заболеваемость трансмиссивными инфекциями достигла беспрецедентно высоких уровней [4].

Целью настоящего исследования явилось изучение частоты и характера очаговых форм клещевого энцефалита у детей в условиях г. Владивостока.

Genetic variety of tick-borne encephalitis virus population in Alkhanay national park (Zabaikalskij region, Russia)12Central Research Institute of Epidemiology of Rospotrebnadzor, Moscow

Текст научной работы на тему «Генетическое разнообразие популяции вируса клещевого энцефалита на территории Национального парка "Алханай" (Забайкальский край)»