CC BY
16© Е.Н. Романова, А.В. Говорин, 2013
Генетический полиморфизм TNF-a, IL-10, eNOS у больных гриппом A/H1N1, осложненным пневмонией
Е.Н. РОМАНОВА, А.В. ГОВОРИН
Читинская государственная медицинская академия Минздрава России
TNF-a, IL-10, and eNOS gene polymorphisms in patients with influenza A/H1N1 complicated by pneumonia
E.N. ROMANOVA, A.V. GOVORIN
Chita State Medical Academy, Ministry of Health of Russia
Резюме
Цель исследования. Изучить особенности полиморфизма генов цитокинов (TNF G308A, IL-10 C592A, IL-10 C819T, IL-10 G1082A) и гена регуляции сосудистого тонуса (eNOS C786T) у пациентов с гриппом A/H1N1, осложненным пневмонией. Материалы и методы. Обследовали пациентов, находившихся на лечении по поводу пневмонии на фоне гриппа A/H1N1: 1-я группа (n=37) — пациенты с тяжелыми пневмониями; 2-я (n=74) — больные с нетяжелыми пневмониями; 3-я (n=68) — здоровые лица. Молекулярно-генетическое исследование проводили методом полимеразной цепной реакции. Концентрацию TNF-a, IL-10 и s-ICAM-1 в сыворотке крови определяли методом иммуноферментного анализа. Результаты. По сравнению с контрольной группой у пациентов с гриппозными пневмониями встречалось чаще гомозиготное носительство аллеля G полиморфизма (308 G/A) гена TNF. Значительно преобладал аллель G гена IL-10 (1082 G/A), преимущественно в виде гомозиготного носительства и аллель С гена IL-10 (592 C/A), в большей степени в виде гомозиготного варианта. Установлено преобладание аномальной гомозиготы полиморфизма Т/Т (786 C/Т) гена eNOS среди заболевших гриппозной пневмонией; напротив, в контрольной группе выявлены преимущественно носители гетерозиготы C/Т. В группе пациентов с генотипом C/Т содержание молекулы межклеточной адгезии s-ICAM-1 было ниже, чем при других вариантах полиморфизма (786 C/Т).
Заключение. Изучение генетического статуса пациента при гриппе A/H1N1 позволит оценивать тяжесть заболевания и прогнозировать возможные осложнения.
Ключевые слова: грипп A/H1N1, пневмония, полиморфизм генов, цитокины, эндотелиальная NO-синтаза.
Aim. To study the specific features of cytokine gene polymorphisms (such as TNF G308A, IL10 C592A, IL10 C819T, IL10 G1082A) and vascular tone regulatory gene polymorphism (еNOS C786T) in patients with influenza A/H1N1 complicated by pneumonia. Subjects and methods. Patients treated for pneumonia in the presence of influenza A/H1N1, divided into 3 groups: 1) 37 patients with severe pneumonia; 2) 74 with mild pneumonia; and 3) 68 healthy individuals, were examined. Molecular genetic testing was made using a polymerase chain reaction technique. Serum TNFa, IL-10 and s-ICAM-1 concentrations were measured by enzyme immunoassay.
Results. As compared to the control group, the patients with influenza-related pneumonia were more frequently homozygous for the G allele of the TNF 308 G/A polymorphism. The IL-10 G allele (1082 G/A) was considerably prevalent as homozygous carriage and the IL-10 G allele (592 G/A) was as a homozygous type to a greater extent. An abnormal zygote of the eNOS T/T (786 C/T) polymorphism was found to be prevalent among the patients with influenza-related pneumonia; on the contrary, there were mainly heterozygous C/T carriers in the control group. In the C/T genotype group, the level of soluble intercellular adhesion molecule 1 (sICAM-1) was lower than in other polymorphic variants (786 C/T).
Conclusion. The study of the patients' genetic status in influenza A/H1N1 will be able to evaluate the severity of the disease and to predict possible complications.
Key words: influenza A/H1N1, pneumonia, gene polymorphism, cytokines, endothelial NO synthase.
ГП — гриппозная пневмония 1Ь-10 — интерлейкин-10
ОРДС — острый респираторный дистресс-синдром 8-1СЛМ-1 — растворимая молекула межклеточной адгезии
ПЦР — полимеразная цепная реакция 1-го типа
eNOS — эндотелиальная МО-синтаза ЮТ-а — а-фактор некроза опухоли
В июне 2009 г. ВОЗ объявила о начале первой в новом тысячелетии пандемии гриппа. В России в числе первых пострадавших регионов был Забайкальский край [1]. Особенностью гриппа А/Н1Ш явилась высокая частота развития пневмоний. У некоторых больных поражение ле-
Сведения об авторах:
Говорин Анатолий Васильевич — д.м.н., проф., зав. каф. факультетской терапии; e-mail: pochta@medacadem.chita.ru
гочной ткани и осложнения на этом фоне развивались стремительно, несмотря на интенсивную терапию в условиях реанимационного отделения. В крае было зарегистрировано 57 летальных исходов [2]. По данным патоло-го-анатомических исследований у всех умерших выявле-
Контактная информация:
Романова Елена Николаевна — к.м.н., доц. каф. поликлинической терапии; тел.: +7(302)231-4254, +7(924)576-0299; e-mail: elena-r-chita@yandex.ru
ны признаки острого респираторного дистресс-синдрома (ОРДС) [2, 3].
Высокая частота развития поражения легких при гриппе A/H1N1 объясняется тропностью вируса к эпителиальным клеткам, в том числе к эндотелию, что определяет характерную клиническую картину гриппа и пневмонии на этом фоне [4]. Повышенная проницаемость капилляров легких, а также чрезмерная индукция цитоки-нов, повреждение эндотелия служат основными механизмами развития ОРДС [5].
Одним из аспектов изучения пневмоний является анализ показателей иммунной системы, в частности ци-токинов, имеющих как диагностическое, так и прогностическое значение. В свою очередь известно, что уровень иммунной реактивности организма закреплен генетически [6, 7]. К настоящему времени имеются единичные сведения о роли полиморфизма генов цитокинов в иммунопатогенезе пневмоний, однако эти данные широко варьируют [8]. Не разработаны также методы выявления предрасположенности к нарушениям в системе регуляции сосудистого тонуса, обусловленных мутациями в генах [9].
Целью настоящего исследования явилось изучение особенностей полиморфизма генов цитокинов (TNF G308A, IL-10 C592A, IL-10 C819T, IL-10 G1082A) и гена регуляции сосудистого тонуса (eNOS C786T) у пациентов с гриппом A/H1N1, осложненным пневмонией.
Материалы и методы
Обследовали пациентов, находившихся на лечении по поводу пневмонии на фоне высокопатогенного гриппа в стационарах города Читы в период с октября по декабрь 2009 г. Грипп A/H1N1 верифицирован методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) и при реакции торможения гемагглютинации: 1-я группа (и=37) — пациенты с тяжелыми пневмониями на фоне гриппа A/H1N1; 2-я (и=74) — больные с нетяжелыми пневмониями на фоне гриппа A/H1N1. Оценка тяжести пациентов в стационаре основывалась на степени дыхательной недостаточности, выраженности интоксикации, объеме воспалительной инфильтрации, наличии осложнений, декомпенсации сопутствующих заболеваний [10]. В 3-ю группу (n=68) вошли здоровые лица. Все группы были сопоставимы по полу и возрасту (средний возраст 40,5+12,7 года).
Молекулярно-генетическое исследование проводили методом ПЦР с аллельспецифичными праймерами (НПФ «Литех», Москва). ДНК выделяли при помощи наборов ДНК-экспресс кровь (НПФ «Литех», Москва). Детекцию продуктов амплификации проводили электрофоретическим способом в 3% агарозном геле.
Концентрацию а-фактора некроза опухоли (TNF-a), интер-лейкина-10 (IL-10) и растворимой молекулы межклеточной адгезии 1-го типа (s-ICAM-1) исследовали при гриппозных пневмониях (ГП) в 1—2-й день пребывания больных в стационаре методом твердофазного иммуноферментного анализа с помощью реактивов Вектор-Бест и Bender Medsystems соответственно.
Статистическую обработку данных проводили при помощи пакета программ Statistica 6.0. При сравнении групп использовали критерий Манна—Уитни. Для сравнения групп по качественному бинарному признаку применяли критерий х2 (точный критерий Фишера). Для определения частот аллельных вариантов генов использовался закон Харди—Вайнберга.
Результаты
Анализ полученных данных показал, что распределение частоты генотипов и аллелей в группе больных грип-
пом A/H1N1 и здоровых лиц для изучаемых полиморфных маркеров соответствовало закону Харди—Вайнберга.
Молекулярно-генетические исследования выявили, что гомозиготное носительство аллеля G полиморфизма (308 G/A) гена TNF в 1,5 раза (p=0,005) чаще наблюдалось у пациентов с ГП, в то время как гетерозиготы G/A встречались в 1,7 раза (p=0,005) реже среди больных, чем в контрольной группе (см. таблицу). Гомозиготное носительство аллеля А у больных гриппом и в контрольной группе встречалось одинаково часто. Не обнаружено различий в распределении аллельных вариантов гена TNF (308 G/A) между заболевшими и здоровыми лицами. При сравнении пациентов с различными аллелями и генотипами по степени тяжести ГП различий не выявлено (см. таблицу).
Как было показано ранее [11], концентрация TNF-a в периферической крови у больных ГП при тяжелом течении заболевания в 1,7 раза была выше, чем у пациентов с нетяжелым поражением. При изучении продукции TNF-a в крови в зависимости от полиморфизма (308 G/A) гена изучаемого цитокина значимых различий не выявили.
Сравнительное исследование частот генотипов полиморфных локусов IL-10 продемонстрировало, что носителей гомозиготного аллеля С полиморфизма (592 C/A) гена IL-10 в группе пациентов, заболевших гриппом, зарегистрировано в 2 раза (p=0,0002) больше, чем в контроле, а гетерозигот С/А было в 1,9 раза (p=0,0008) больше среди здоровых лиц. Не обнаружено различий между группами по распространенности генотипа А/А. Примечательно, что в группе пациентов с ГП распространенность аллеля С больше, чем в контрольной группе (р=0,03) (см. таблицу).
При изучении полиморфизма (819 C/Т) гена IL-10 не выявлено различий по распространенности генотипов С/С и С/Т в изучаемых группах. Распространенность гомозиготного носительства Т/Т среди представителей контрольной группы была в 2,2 раза (р=0,03) выше, чем у заболевших пневмонией на фоне гриппа A/H1N1. Различий между группами по частоте аллельных вариантов не отмечено (см. таблицу).
Анализ полиморфизма (1082 G/A) гена IL-10 показал, что гомозиготное носительство аллеля G встречалось в 1,8 раза (р=0,000) среди пациентов с ГП, в то время как гетерозиготы G/A — в 2,6 раза (р=0,0001) чаще среди здоровых лиц. Не обнаружено существенных различий между группами по распространенности аномальной гомозиготы А/А. Отмечено, что частота аллеля G в большей степени (р=0,006) доминирует среди больных гриппом по сравнению с контролем (см. таблицу).
При сравнении генетических вариантов IL-10 в зависимости от степени тяжести пневмонии различий не выявлено. Не обнаружено достоверных различий и по содержанию IL-10 в сыворотке крови заболевших с различными полиморфизмами изучаемого цитокина. Уровень противовоспалительного цитокина IL-10 в крови различался у пациентов в зависимости от тяжести ГП — максимальные уровни выявлены в группе больных с меньшей степенью тяжести, что свидетельствовало о его подавляющей роли в отношении провоспалительных цитокинов [11].
Исследование полиморфизма гена эндотелиальной NO-синтазы — eNOS (786 С/Т) у заболевших пневмонией на фоне гриппа А/Н1Ш и здоровых индивидуумов показало, что распространенность гомозиготного аллеля С не различалась в изучаемых группах. Гетерозиготы C/Т в 2
Частота аллелей и генотипов полиморфизма генов TNF G308A, IL-10 C592A, IL-10 C819T, IL-10 G1082A, eNOS C786T у больных гриппом А/ЖМ, осложненным пневмонией
Генотип Пациенты с пневмонией тяжелой нетяжелой Всего Контрольная группа
TNF G308A: n=37 n=74 n=111 n=66
аллель G 31 (83,5%) 57,5 (78%) 88,5 (78,5%) 45,5 (68,5%)
р=0,5 р1=0,1
аллель А 6 (16,5%) 16,5 (22%) 22,5 (21,5%) 20,5 (31,5%)
р=0,5 р1=0,1
G/G 26 (70%) 45 (61%) 71 (63%) 28 (42%)
р=0,3 р1=0,005
G/A 10 (27%) 25 (34%) 35 (31%) 315 (53%)
р=0,4 р1=0,005
A/A 1 (3%) 4 (5%) 5 (6%) 13 (5%)
р=0,5 р1=1
IL-10 C592A: n=37 n=73 n=110 n=68
аллель С 26 (70%) 49 (66,5%) 75 (67,5%) 35,5 (52%)
р=0,7 р1=0,03
аллель А 11 (30%) 24 (33,5%) 35 (42,5%) 32,5 (48%)
р=0,7 р1=0,03
C/C 20 (54%) 39 (53%) 59 (53%) 17 (25%)
р=0,9 р1=0,0002
C/A 12 (32%) 20 (27%) 32 (29%) 317 (54%)
р=0,6 р1=0,0008
A/A 5 (14%) 14 (20%) 19 (28%) 14 (21%)
р=0,5 р1=0,5
IL-10 C819T: n=26 n=63 n=89 n=62
аллель С 22 (84,5%) 49,5 (79%) 71,5 (80,5%) 44,5 (72,5%)
р=0,7 р1=0,2
аллель Т 4 (15,5%) 13,5 (21%) 17,5 (19,5%) 17,5 (27,5%)
р=0,7 р1=0,2
C/C 20 (77%) 42 (67%) 62 (70%) 40 (65%)
р=0,3 р1=0,5
C/T 4 (15%) 15 (24%) 19 (21%) 9 (15%)
р=0,4 р1=0,3
T/T 2 (8%) 6 (9%) 8 (9%) 13 (20%)
р=0,8 р1=0,03
IL-10 G1082A: n=34 n=69 n=103 1n=67
аллель G 30 (88%) 56,5 (82%) 86,5 (84,5%) 44 (65,5%)
р=0,5 р1=0,006
аллель А 4 (12%) 12,5 (18%) 16,5 (15,5%) 231 (34,5%)
р=0,5 р1=0,006
G/G 27 (79%) 51 (74%) 78 (76%) 219 (43%)
р=0,5 р1=0,000
G/A 6 (18%) 11 (16%) 17 (17%) 310 (45%)
р=0,8 р1=0,0001
A/A 1 (3%) 7 (10%) 8 (7%) 8 (12%)
р=0,2 р1=0,4
eNOS С786Т: n=36 n=74 n=110 n=47
аллель С 18 (50%) 67,5 (37%) 45,5 (41,5%) 24,5 (52,5%)
р=0,0001 р1=0,2
аллель Т 18 (50%) 46,5 (63%) 64,5 (58,5%) 22,5 (47,5%)
р=0,0001 р1=0,2
C/C 13 (36%) 20 (27%) 33 (30%) 13 (28%)
р=0,3 р1=0,8
С/Т 10 (28%) 15 (20%) 25 (23%) 23 (49%)
р=0,4 р1=0,001
Т/Т 13 (36%) 39 (53%) 52 (47%) 111 (23%)
р=0,1 р1=0,005
Примечание. р — для различий между группами больных с разной степенью тяжести; р1 — для различий между больными и контрольной группой.
раза (р=0,001) чаще наблюдались в контрольной группы, а аномальная гомозигота Т/Т оказалась в 2 раза (р=0,005) более распространенной среди заболевших ГП (см. таблицу).
Следует отметить, что у носителей гетерозиготы С/Т полиморфизма (786 С/Т) гена eNOS выявлено меньшее содержание одного из маркера активации эндотелия — s-ICAM-1 — в периферической крови по сравнению с другими генотипами изучаемого полиморфизма (р<0,05).
Обсуждение
Известно, что реализация воспалительного ответа у разных лиц может существенно различаться по интенсивности и продолжительности. В связи с этим значительный интерес представляет функциональный полиморфизм генов цитокинов, так как именно эти медиаторы вносят наибольший вклад в регуляцию иммунитета [6]. TNF-a является одним из наиболее значимых цитокинов при развитии патологии, и генетически запрограммированный повышенный или пониженный синтез фактора некроза опухолей сказывается на реактивности иммунной системы [12]. Промоторная зона гена TNF-a включает 8 полиморфных участков с единичными нуклеотидными заменами; важной для человека считается замещение гуанина аденином в положении 308 G/A [7, 12]. Ряд работ продемонстрировал, что полиморфизм -308А повышает транскрипционную активность гена TNF и соответственно продукцию цито-кина. Так, высокопродуцирующий аллель -308А был ассоциирован с ревматоидным артритом и системной красной волчанкой, тогда как низкопродуцирующий аллель -308G — c заболеваемостью туберкулезом [13]. Вероятно, функциональный полиморфизм гена TNF (-308A), связанный с повышенной продукцией данного цитокина, служит фактором риска развития тяжелых проявлений инфекционных заболеваний и развития аутоиммунных расстройств. Однако нарушения механизмов иммунной защиты от патогенов в большей степени ассоциируются с низкопродуцирующим вариантом полиморфизма гена TNF (-308G) [12].
В работе Е.А. Байгозиной при изучении больничных пневмоний риск развития заболевания оказался выше у носителей генотипов G/А + А/А. У больных при носи-тельстве генотипа А/А гена TNF наблюдалась максимальная концентрация данного цитокина в сыворотке крови по сравнению с таковой у носителей генотипов G/G и G/А, что обуславливало патогенетическое действие данного полиморфизма [8]. Однако полученные нами данные, напротив, продемонстрировали, что генотип G/G полиморфизма (308 G/A) гена TNF у пациентов с пневмониями на фоне гриппа А/Н1Ш встречается чаще, чем в контрольной группе. Причем у всех 5 пациентов с ОРДС выявлено носительство гомозиготы G/G, 3 из них умерли. Аналогичные данные при гриппе А/Н1Ш получены в исследованиях А. А. Петрова и соавт. [14]. При изучении продукции TNF-a в сыворотке крови в зависимости от генетических вариантов полиморфизма (308 G/A) гена TNF в нашей работе различий не обнаружено.
IL-10 — наиболее активный противовоспалительный цитокин. B. Schaaf и соавт. обнаружили, что концентра-
ция IL-10 в сыворотке крови у больных с сепсисом и генотипом -1082 G/G была выше, чем у носителей генотипа А/А или А/G. Это ассоциировалось с высоким уровнем летальности [15]. P. Gallagher и соавт. выявили ассоциацию между генотипом -1082 G/G, степенью тяжести пневмонии и уровнем летальности [16]. M. Gong и соавт. продемонстрировали взаимосвязь между генотипом -1082 G/G и развитием ОРДС [17]. В нашем исследовании аллель G гена IL-10 (1082 G/A) значительно доминировал у пациентов с ГП (84,5%), преимущественно в виде гомозиготного носительства. Кроме того, данный генотип по сравнению с другими исследуемыми генетическими полиморфизмами явился наиболее распространенным среди заболевших — был выявлен в 76% случаев, включая пациентов с ОРДС.
Из немногочисленных данных о роли полиморфизма (592 С/А) гена IL-10 при инфекционных заболеваниях известно, что у больных туберкулезом преобладало гомозиготное носительство аллеля А. При этом у пациентов выявлены максимальные уровни IL-10, а у больных с генотипом С/С обнаружен наиболее низкий уровень изучаемого цитокина [18]. В нашей работе частота аллеля С гена IL-10 (592 C/A) оказалась выше среди пациентов, заболевших гриппом, при этом превалировал генотип С/С. Распространенность гомозиготы А/А у больных и здоровых лиц не различалась.
Не обнаружено различий по распространенности аллельных вариантов гена IL-10 (819 C/Т), а также по частоте генотипов С/С и С/Т в изучаемых группах. В то же время гомозиготное носительство Т/Т определялось у большего числа представителей контрольной группы по сравнению с заболевшими пневмонией на фоне гриппа А/ H1N1.
Примечательно, что концентрация IL-10 в крови не различалась при сравнении показателей у пациентов с различными генетическими вариантами изучаемого ци-токина, а зависела от степени тяжести пневмонии [11].
Известно, что при гриппе в основе поражения различных органов и систем большую роль играют циркуля-торные расстройства [4], в этой связи особый интерес представляет выявление предрасположенности к нарушениям в системе регуляции сосудистого тонуса. К эндоте-лиальным факторам дилатации относится оксид азота (NO). Кроме того, NO угнетает пролиферацию клеток в гладкомышечном слое сосудов, ингибирует агрегацию тромбоцитов и адгезию нейтрофилов к эндотелию сосудов, способен вызывать повреждение клеток, в частности эндотелия, путем генерации свободных радикалов [19]. В работе K. Marco и соавт. установлено, что к уменьшению концентрации NO в кровеносном русле предрасполагает вариант -786 C гена eNOS [20].
Исследование полиморфизма гена eNOS (786 С/Т) у заболевших пневмонией на фоне гриппа А/Н1Ш выявило преобладание аномальной гомозиготы Т/Т. Гетерозиготы C/Т в 2 раза чаще наблюдались в контрольной группе. Полученные нами факты согласуются с результатами исследований Е.С. Кострюкова и соавт., в которых в небольшой группе пациентов с тяжелым течением гриппа А/ H1N1, включая 5 случаев с летальным исходом, продемонстрированы аналогичные данные [9].
При сопоставлении генотипа eNOS c содержанием s-ICAM-1 — одного из маркера активации эндотелия, вы-
явлена меньшая концентрация изучаемого показателя у носителей гетерозиготы С/Т полиморфизма (786 С/Т) гена eNOS.
Таким образом, полученные нами данные продемонстрировали, что по сравнению с контрольной группой у пациентов с ГП встречалось чаще гомозиготное носитель-ство аллеля G полиморфизма (308 G/A) гена TNF. Это могло обусловить нарушения механизмов иммунной защиты. Значительно преобладал у пациентов с ГП аллель G гена IL-10 (1082 G/A), преимущественно в виде гомозиготного носительства, что согласуется с данными других исследований при пневмониях. Среди заболевших гриппом превалировал аллель С гена IL-10 (592 C/A), в большей степени в виде гомозиготного варианта. Изучение распространенности аллельных вариантов гена IL-10 (819 C/Т) не выявило различий в изучаемых группах, а гомози-
готное носительство Т/Т оказалось значительно выше среди здоровых лиц. Взаимосвязь между тяжестью пневмонии и генотипами не обнаружена. Не выявлено различий и при изучении концентрации цитокинов TNF-a и ^-10 в сыворотке крови в зависимости от генетических вариантов изучаемых полиморфизмов. В то же время констатировано преобладание аномальной гомозиготы Т/Т полиморфизма (786С/Т) гена еNOS среди заболевших ГП; напротив, в контрольной группе выявлены преимущественно носители гетерозиготы С/Т. В группе пациентов с наличием «протективного» генотипа С/Т содержание s-ICAM-1 было ниже, чем при других вариантах полиморфизма (786 С/Т). В соответствии с этим изучение генетического статуса пациента при гриппе А/НЩ1 позволит оценивать тяжесть заболевания и прогнозировать возможные осложнения.
ЛИТЕРАТУРА
1. Организация и проведение противоэпидемических мероприятий в период эпидемии гриппа А(Н1Ш)/09 в октябре — декабре 2009 г. в Забайкальском крае. Под ред. Г.Г. Они-щенко. Новосибирск: Наука 2011.
2. Говорин А.В., Серебрякова О.М., Филев А.П., Романова Е.Н. Клинические особенности внебольничной пневмонии у больных гриппом А/НЩ1. Пульмонология 2010; 5: 27—29.
3. Чарторижская Н.Н., Сепп А.В., Пруткина, Е.В, Цыбиков Н.Н. Морфологическая характеристика поражения дыхательной системы при гриппе А/НЩ1 в Забайкальском крае. Бюл физиол и патол дыхания 2011; 39: 8—12.
4. Деева Э.Г. Грипп на пороге пандемии: Руководство для врачей. М: ГЭОТАР-Медиа 2008; 208.
5. Гельфанд Б.Р., Кассиль В.Л. Острый респираторный дистресс-синдром. М: Литтерра 2007; 232.
6. Симбирцев А.С., Громова А.Ю. Функциональный полиморфизм генов регуляторных молекул воспаления. Цитокины и воспаление 2005; 1: 3—10.
7. Байгозина Е.А., Совалкин В.И. Функциональный полиморфизм генов регуляторных молекул и цитокинов при нозоко-миальной пневмонии. Пульмонология 2008; 1: 116—120.
8. Байгозина Е.А., Совалкин В.И. Влияние полиморфизма гена CD14 на течение и исход нозокомиальной пневмонии. Мед иммунол 2010; 1—2: 95—102.
9. Кострюкова Е.С., Захаржевская Н.Б., Костин П.А. и др. Генетический анализ вируса гриппа А Н1Ш «пандемический» в условиях эпидемии. Тер арх 2012; 3: 48—54.
10. Чучалин А.Г., Синопальников А.И., Козлов Р.С. и др. Внеболь-ничная пневмония у взрослых: практические рекомендации по диагностике, лечению и профилактике. М 2010.
11. Романова Е.Н., Говорин А.В., Горбунов В.В., Лукьянов С.А. Уровень в крови цитокинов (1Р№у, ТМБа, ТЬ-10) и межкле-
точной адгезии (sICAM-1) при пневмонии у больных гриппом A/H1N1. Мед иммунол 2011; 4: 23—27.
12. Рыдловская А.В., Симбирцев А.С. Функциональный полиморфизм гена TNFa и патология. Цитокины и воспаление 2005; 3: 4—10.
13. Correa P., Gomez L., Cadena J., Anaya J. Autoimmunity and tuberculosis. Opposite association with TNF polymorphism. J Rheumatol 2005; 32: 219—224.
14. Петров А.А., Страмбовская Н.Н., Говорин А.В., Витковский Ю.А. Генетический полиморфизм CD14, TNFa и FCGR2A у больных гриппом A/H1N1 в Забайкальском крае. Мед иммунол 2011; 1: 83—86.
15. Schaaf B.M., Boehmke F., Esnaashari H. et al. Pneumococcal septic shock is associated with the interleukin-10 -1082 gene promoter polymorphism. Am J Respir Crit Care Med 2003; 168: 476— 480.
16. Gallagher P.M., Lowe G., Fitzgerald T. et al. Association of IL-10 polymorphism with severity of illness in community-acquired pneumonia. Thorax 2003; 58: 154—156.
17. Gong M.N., Thompson B.T., Williams P.L. et al. Interleukin-10 polymorphism in position 1082 and acute respiratory distress syndrome. Eur Respir J 2006; 27: 674—681.
18. Наследникова И.О., Уразова О.И., Воронкова О.В. и др. Ал-лельный полиморфизм генов цитокинов при туберкулезе легких. Бюл экспер биол и мед 2009; 8: 137—142.
19. Кузник Б.И. Клеточные и молекулярные механизмы регуляции системы гемостаза в норме и патологии. Чита: Экспресс-издательство 2010.
20. MarcoK.C., Braga G.U., BarbosaF. Determination of the effects of eNOS gene polymorphisms (T-786C and Glu298Asp) on nitric oxide levels in a methylmercure-exposed population. Toxicol Environmental Health 2011; Part A: 1323—1333.
Поступила 10.08.2012
