Генетический полиморфизм секретоглобина SCGB1A1 и его роль в развитии бронхиальной астмы у детей Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

УДК: 616.248:575.224.234 - 053.2/6

Н.К.Малая, Н.Н.Каладзе, К.Д.Малый

ГЕНЕТИЧЕСКИЙ ПОЛИМОРФИЗМ СЕКРЕТОГЛОБИНА SCGB1A1 И ЕГО РОЛЬ В РАЗВИТИИ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМЫ У ДЕТЕЙ

Медицинская академия имени С.И. Георгиевского ФГАОУ ВО «Крымский федеральный университет им. В.И. Вернадского»,

г. Симферополь, Республика Крым, Россия

РЕЗЮМЕ

Патогенез бронхиальной астмы, как мультифакториального заболевания, зависит от сочетанного влияния многих факторов. К таким факторам относится в частности секретоглобин SCGB1A1 - многофункциональный белок с небольшим молекулярным весом, обладающий выраженным иммуномодулиррющим и противовоспалительным действием. Для гена SCGB1A1. располь-

ной астмы. Целью исследования было определение степени A(38)G полиморфизма гена секретоглобина SCGB1A1 у детей в крымской популяции, для выяснения возможной взаимосвязи между степенью данного полиморфизма и развитием легочной патологии, в частности бронхиальной астмы и рецидивирующего бронхита.

Нами были обследовано 75 больных бронхиальной астмой, 19 больных рецидивирующим бронхитом без эпизодов обструкции, и контрольная группа - 20 детей. Определение полиморфизма проводилось с помощью ПЦР с последующей регистрацией результатов с помощью электрофореза.

В результате исследования было выяснено, что частоты аллельных сочетаний генетических вариантов исследованного полиморфизма у больных бронхиальной астмой, рецидивирующим бронхитом и в контрольной группе отличаются между собой. Так, у больных бронхиальной астмой частота носителей гомозиготного варианта АА ниже, а среди больных рецидивирующим бронхитом выше, чем в контрольной группе. Частота гетерозигот AG наоборот, регистрировалась выше среди больных бронхиальной астмой, чем у больных рецидивирующим бронхитом и в контрольной группе. Также, среди больных рецидивирующим бронхитом частота гетерозигот AG существенно ниже, чем гомозигот. Кроме того, анализ генетического полиморфизма у больных с разной степенью тяжести бронхиальной астмы показал преобладание гетерозигот AG у больных с тяжёлым течением заболевания. Полученные результаты возможно использовать в прогностических целях для оценки перспектив развития синдрома обструкции.

Ключевые слова: бронхиальная астма, рецидивирующий бронхит, дети, генетический полиморфизм, секретоглобин SCGB1A1

SUMMARY

The pathogenesis of bronchial asthma as a multiple disease depends of complex effect of many factors. Among these factors is secretoglobin SCGB1A1. It is the multifunctional protein which has small molecular weight and has immunomodulatory and antiinflammatory effect. For 11-th chromosome gen SCGB1A1 the A(38)G polymorphism is described. It is associated with the increased chance of bronchial asthma progress. The purpose of the research was the finding of the stage of A(38)G polymorphism of secretoglobin gen SCGB1A1 among children in Crimea for finding possible links between the stage of this polymorphism and progress of the lung pathology as a bronchial asthma and recurrent bronchitis.

We observed 75 children with bronchial asthma, 19 children with recurrent bronchitis without obstruction and the control group - 20 children. For fixation of polymorphism was used the Polymerase chain reaction with the result registration using electrophoresis. As the result was finding that the frequency of allelic combinations of genetic variations of the polymorphism among children with the bronchial asthma, recurrent bronchitis and control group are differ from each other. The frequency of carriers of homozygous AA variation is lower among children with bronchial asthma and it is higher among children with recurrent bronchitis than among children from control group. The frequency of AG heterozygote was higher among children with bronchial asthma than among children with recurrent bronchitis and control group. Also among children with recurrent bronchitis the frequency of AG heterozygote was much more lower than homozygote. The analysis of genetic polymorphism of children with different severity of bronchial asthma revealed the domination AG heterozygote among children with highly severe stage of illness. The received results can be used for prognosis of the progress of obstruction syndrome. Keywords: bronchial asthma, children, genetic polymorphism, secretoglobin SCGB1A1

Бронхиальная астма (БА), в настоящее время -одна из глобальных проблем здравоохранения. За последние годы заболеваемость БА выросла в 22,5 раза [1], и распространённость БА в различных регионах мира колеблется от 1 до 18% [2,3]. Проблема БА особенно актуальна для педиатрии в связи с более тяжелым, по сравнению с взрослыми пациентами, течением болезни, более частыми и тяжёлыми осложнениями [2, 4]. Для России, где заболеваемость БА среди детей, по ряду оценок, составляет 5-10%, проблема БА тоже очень актуальна. По статистическим данным Министерства здравоохранения РФ число больных БА ежегодно увеличивается в среднем на 7% [2, 4].

БА по своему патогенезу представляет из себя типичное мультифакториальное заболевание - то есть развитие её симптомокомплекса зависит от сочетанного влияния многих факторов, обеспечивающих функционирование слизистой респираторного тракта [5,6]. Продукт секреции клеток Клара - секретоглобин 8СОБ1А1 - один из таких факторов, влияющих на функционирование слизи-

стой. Секретоглобин SCGB1A1 - белок с небольшим молекулярным весом (16 тыс. D) , синтезируемый у млекопитающих эпителиальными клетками дистальных бронхиол (клетками Клара), а также клетками слизистых эндометрия и урогени-тального тракта. Секретоглобин представляет собой гомодимер, с двумя дисульфидными связями между субъединицами, и обладает выраженным иммуномодулирующим и противовоспалительным действием [7,8]. Ген секретоглобина SCGB1A1, длиной 4172 нуклеотида, расположен в 11 хромосоме (11q12.2), и содержит три экзона [9,10], первый из экзонов, нетранслируемый, входит в состав т.н. downstream promoter element (DPE). Для гена секретоглобина описано несколько видов полиморфизма, один из которых - A(38)G (замена А на G в 38 положении первого экзона) - ассоциируется с повышенной вероятностью развития БА [10, 11, 12]. В связи с тем, что степень генетического полиморфизма в различных этно-географических группах населения может довольно значительно различаться, целью настоящего исследования и

явилось определение степени полиморфизма A(38)G гена SCGB1A1 у детей в крымской популяции, для выяснения возможной взаимосвязи между степенью данного полиморфизма и развитием БА.

Материалы и методы.

Исследовались образцы ДНК, полученные от детей, страдающих бронхиальной астмой (БА), рецидивирующим бронхитом без эпизодов обструкции (РБ), и здоровых. Всего на настоящий момент обследовано 114 детей в возрасте от 6 до 16 лет, (средний возраст 12,4±3 лет).

Группа больных БА составила 75 человек [51 человек - мальчики (68%), 24 - девочки (32%)]. Из них 63% больных (47 детей) находились в состоянии ремиссии и 37% (28 детей) - в состоянии обострения. У 38 пациентов (50,7%) диагностирована интермиттирующая БА, у 26 пациентов (34,7%) - легкая персистирующая БА, у 10 (13,3%) - средней тяжести персистирующая БА, у 1 пациента (1,3%) -тяжёлая персистирующая БА.

Группа больных РБ составила 19 человек, и контрольная группа здоровых детей без пульмонологической патологии - 20 человек.

Образцы ДНК для исследования выделяли из периферической крови и слюны обследуемых методом фенол-хлороформной экстракции [13].

Исследование А(38^ полиморфизма проводилось с помощью по-лимеразной цепной реакции методом аллельной дискриминации (т.н. метод ARMS - Amplification-refractory mutation system [14]). Приме-

нялась система из трех праймеров с последовательностями в соответствии с работой [15] - двух прямых аллелеспецифических, различающихся по 3-концевому нуклеотиду: Прямой 1 5'CAgAgACggAACCAgAgACA Прямой 2 5'AgAgACggAACCAgAgACg и общего обратного праймера 5' TCCTgAgAgTTCCTAAgTCC

Синтез праймеров осуществлен в НПФ «Синтол», Россия. Полимеразная цепная реакция проводилось в объеме 25 мкл в двух пробирках, в одной из которых находился прямой праймер 1 и обратный праймер, во второй - прямой праймер 2 и обратный праймер. После проведения амплификации и последующего электрофореза в 3% агарозном геле в присутствии бромистого этидия проводилась детекция результатов амплификации в ультрафиолетовом свете [16]. У гомозигот эффективная амплификация происходила только в одной из пробирок, что регистрировалось по наличию флуоресцирующей зоны в одном из амплифицированных образцов, у гетерозигот эффективная амплификация происходила в обеих пробирках, и флуоресцирующие зоны регистрировалось в обоих образцах. Вычислялись частоты аллелей и частоты аллельных сочетаний и их соответствие равновесию Харди-Вайнберга по критерию х2 с расчетными, отвергая нулевую гипотезу при Р<0,05 [17,18].

Результаты и обсуждение

Частоты встречаемости аллельных вариантов A(38)G у различных групп обследованных детей приведены в таблице 1.

Таблица 1

Частоты аллельных вариантов у пациентов с БА, РБ и в контрольной группе.

Больные БА Больные РБ Здоровые Х2 Больные БА/ здоровые Х2 Больные РБ/ здоровые Х2 Больные БА/ Больные РБ

Кол-во случаев Частота аллели Кол-во случаев Частота аллели Кол-во случаев Частота аллели

Аллель A 47 0,3133 14 0,3684 14 0,3500 0,0038 0,0009 0,0082

Аллель G 103 0,6867 24 0,6316 26 0,6500 0,0021 0,0005 0,0048

Всего 150 1,0000 38 1,0000 40 1,0000

Из данных таблицы видно, что во всех группах обследованных более распространена аллель ^ составляя 63-69%, в то время как аллель А составила 31-37%. Достоверные различия в частотах встречаемости аллелей А и G исследованного ло-куса в исследованных группах не выявлены.

Из данных таблицы 2 видно, что при анализе частот аллельных вариантов гена секретоглобина у больных с разной степенью тяжести БА, во всех группах преобладает аллель G (59-71%), по сравнению с аллелью А (29-40%). Но достоверные различия при этом не выявлены.

Таблица 2

Частоты аллельных вариантов у пациентов с разной степенью тяжести БА

1 ступень БА 2 ступень БА 3-4 ступень БА Х2 1ступ. БА/2 ступ. БА Х2 1 ступ. БА/ 3 ступ. БА Х2 2 ступ. БА/ 3 ступ. БА

Кол-во случаев Частота аллели Кол-во Частота аллели Кол-во Частота аллели

Аллель А 22 0,2895 16 0,3077 9 0,4090 0,0010 0,0349 0,0250

Аллель G 54 0,7105 36 0,6923 13 0,5910 0,0004 0,0242 0,0174

Всего 76 1,0000 52 1,0000 22 1,0000

Таблица 3

Частоты аллельных сочетаний области А(38)С первого экзона гена 8ССБ1А1 внутри групп пациентов с БА,

РБ и в контрольной группе.

Больные БА (n=75) Больные РБ (n=19) Здоровые (n=20)

Частота X2 набл./ ожид Частота X2 набл./ ожид Частота X2 набл./ ожид

Набл. Ожид. Набл. Ожид. Набл. Ожид.

Абс Доля Абс Доля Абс Доля

AA 4 0,0533 0,0982 0,0205 6 0,3158 0,1357 0,2390** 3 0,1500 0,1225 0,0062

AG 39 0,5200 0,4303 0,0187 2 0,1053 0,4654 0,2786** 8 0,4000 0,4550 0,0066

GG 32 0,4267 0,4715 0,0043 11 0,5789 0,3989 0,0812* 9 0,4500 0,4225 0,0018

Всего 75 1,0000 1,0000 19 1,0000 1,0000 20 1,0000 1,0000

Примечание: Различия достоверны с вероятностью * - р<0,05, ** - р<0,01

Из данных таблицы 3 видно, что частоты встре- бронхиальной астмой и в контрольной группе ста-чаемости аллельных вариантов в группе больных тистически не отличаются от ожидаемых величин,

т.е равновесие Харди-Вайнберга внутри этих групп не нарушено. Однако в группе больных рецидивирующим бронхитом наблюдаются значительные достоверные различия между наблюдаемыми и ожидаемыми частотами встречаемости всех аллельных вариантов. Так, частоты гомози-

готных аллельных сочетаний, как АА, так и ОО, значительно увеличены, а гетерозиготное аллель-ное сочетание АО встречается чрезвычайно редко. Практически 90%, пациентов при ожидаемых 44 %, в этой группе демонстрируют гомозиготное состояние.

Таблица 4

Частоты аллельных сочетаний области А(38)С первого экзона гена секретоглобина 8ССБ1А1 внутри групп пациентов с разной степенью тяжести БА

Больные 1 ступ. БА (п=38) Больные 2 ступ. БА (п=26) Больные 3 -4 ступ. БА (п=11)

Частота х2 набл./ ожид Частота х2 набл./ ожид Частота х2 набл./ ожид

Набл. Ожид. Набл. Ожид. Набл. Ожид.

Абс Доля Абс Доля Абс Доля

АА 2 0,0526 0,0838 0,0116 2 0,0770 0,0947 0,0033 0 0 0,1673 0,1673**

АО 18 0,4737 0,4114 0,0094 12 0,4615 0,4260 0,0030 9 0,8182 0,4834 0,2319**

ОО 18 0,4737 0,5048 0,0019 12 0,4615 0,4793 0,0007 2 0,1818 0,3493 0,0803*

Всего 38 1,0000 1,0000 26 1,0000 1,0000 11 1,0000 1,0000

Примечание: Различия достоверны с вероятностью * - р<0,05, ** - р<0,01

Из данных таблицы 4 видно, что у больных БА 1 и 2 ступени не наблюдается достоверных различий между наблюдаемыми и ожидаемыми частотами аллельных вариантов, и равновесие Харди-Вайнберга не нарушено. Однако у больных БА 3 и 4 ступени - есть достоверные различия между наблюдаемыми и ожидаемыми частотами встречае-

мости всех аллельных вариантов - то есть уменьшение числа гомозиготных аллельных сочетаний -ОО до 18% по сравнению с ожидаемыми 34%, и полное отсутствие гомозиготного сочетания АА, и при этом резкое увеличение частоты гетерозиготного аллельного сочетания АО - до 81 % против ожидаемого 48%.

Таблица 5

Сравнение частот аллельных сочетаний области А(38)С гена 8ССБ1А1 между группами пациентов с БА, РБ и контрольной группой.

Аллельн. сочетание Пациенты с БА Пациенты с РБ Контроль х2 больные БА /здоровые х2 больные РБ /здоровые х2 больные БА /больные РБ

АА 0,0533 0,3158 0,1500 0,0623* 0,1833** 0,2182**

АО 0,5200 0,1053 0,4000 0,0360 0,2171** 1,6332**

ОО 0,4267 0,5789 0,4500 0,0012 0,0369 0,0400*

Всего 1,0000 1,0000 1,0000

Примечание: Различия достоверны с вероятностью * - р<0,05, ** - р<0,01

Из данных таблицы 5 видно, что по частоте ал-лельных сочетаний наблюдаются выраженные различия. Наименее выражены различия между больными с бронхиальной астмой и контрольной группой. Достоверные различия наблюдаются только по аллельному сочетанию АА, которое у пациентом с астмой встречалось достоверно реже. Гораздо более выражены различия между группой больных рецидивирующим бронхитом и контрольной группой, и особенно между группами больных бронхиальной астмой и с рецидиви-

рующим бронхитом - частота встречаемости гомозиготного аллельного сочетания АА значительно выше, а гетерозиготного АО - значительно ниже. Подчеркнуто значительные различия между группами больных бронхиальной астмой и рецидивирующим бронхитом проявляются также в частотах гомозиготного аллельного сочетания ОО, достоверно более частого у пациентов с рецидивирующим бронхитом, в то время как разница при сравнении с контрольной группой недостоверна.

Таблица 6

Сравнение частот аллельных сочетаний области А(38)С гена 8ССБ1А1 между группами пациентов с различной степенью тяжести БА

Аллельн. сочетание Пациенты с 1 ступ. БА Пациенты с 2 ступ. БА Пациенты с 3 - 4 ступ. БА х2 больные 1 ступ. БА/2 ступ. БА х2 больные 1 ступ. БА/3 ступ. БА х2 больные 2 ступ. БА/3 ступ. БА

АА 0,0526 0,0770 0 0,0077 0,0028 0,0059

АО 0,4737 0,4615 0,8182 0,0003 0,1451** 0,1555**

ОО 0,4737 0,4615 0,1818 0,0003 0,4687** 0,4303**

Всего 1,0000 1,0000 1,0000

Примечание: Различия достоверны с вероятностью * - р<0,05, ** - р<0,01

Из данных таблицы 6 видно, что при сравнении д между собой частот аллельных сочетаний в раз- п ных группах БА по степени тяжести наблюдаются Б

достоверные различия между больными 1, 2 ступеней тяжести и больными 3, 4 ступенями тяжести БА. У больных средней тяжести и тяжелой степе-

ни БА достоверно повышена частота встречаемости гетерозиготного аллельного сочетания AG по сравнению с больными интермиттирующей и лёгкой персистирующей формой БА, и достоверно понижена частота встречаемости аллельного сочетания GG. При сравнении больных 1 и 2 ступеней БА между собой достоверных отличий не наблюдается.

Из сопоставления данных таблиц 1, 3 и 5 видно, что хотя по частоте аллелей выраженных различий между исследованными группами нет, с некоторой недостоверной тенденцией большей встречаемости аллели А у пациентов рецидивирующим бронхитом и в контрольной группе по сравнению с больными бронхиальной астмой, и при отсутствии достоверных различий в частотах встречаемости аллельных сочетаний внутри контрольной группы и у больных бронхиальной астмой, внутри группы пациентов с рецидивирующим бронхитом регистрируются значительные отличия в частотах аллельных сочетаний от равновесных, т.е. имеет место значительное нарушение равновесия Харди-Вайнберга. То, что носители гетерозиготного варианта AG встречаются в группе пациентов с рецидивирующим бронхитом настолько редко, может быть либо следствием сниженной жизнеспособности их носителей (что требует исследования достаточно больших выборок), либо результатом неоднородности самой исследуемой группы, множественными причинами возникновения данного патологического состояния, а также небольшим количеством случаев в исследованной выборке.

Различия в частотах встречаемости аллельных сочетаний становятся особенно выраженными при сравнении между исследованными группами. Наиболее выражены различия в частоте встречаемости гомозиготного варианта АА - частота достоверно выше у пациентов с рецидивирующим бронхитом и достоверно ниже у пациентов с бронхиальной астмой, по сравнению с контрольной группой. Между группами пациентов с бронхиальной астмой и контрольной группой по другим аллельным сочетаниям достоверных различий нет. Но у группы пациентов с рецидивирующим бронхитом наблюдаются весьма высокие различия по частотам всех трех аллельных сочетаний как с контрольной группой, так и особенно с группой пациентов с бронхиальной астмой. В данном случае, как и при анализе отклонения частот аллель-ных сочетаний от равновесного, это может быть следствием небольшого числа случаев в исследованной выборке, а также может являться результатом этио-патогенетической неоднородности случаев внутри самой выборки. В любом случае обнаруженное явление нуждается, на наш взгляд, в дальнейшем исследовании.

Из сопоставления данных таблиц 2, 4, 6 видно, что у больных с более тяжёлой степенью тяжести БА наблюдаются достоверные различия частот встречаемости аллельных сочетаний, с преобладанием гетерозигот AG над гомозиготами GG и АА, чем у больных с более лёгким течением БА. Таким образом, можно говорить о том, что в случае встречаемости у пациента гетерозиготного ал-лельного сочетания генетического полиморфизма А(38^ вероятность более тяжелого течения бо-

лезни выше, чем у носителей гомозиготного ал-лельного сочетания. То есть частота встречаемости аллельного сочетания гена секретоглобина SCGB1A1 может использоваться для прогноза вероятности развития тяжёлой степени БА.

Выше отмечалось, что в группе пациентов с бронхиальной астмой частота аллели А несколько ниже, а частота гомозиготного аллельного сочетания АА достоверно ниже, чем аналогичные показатели в контрольной группе, т.е. из приведенных данных видно, что однонуклеотидный A(38)G полиморфизм взаимосвязан с заболеваемостью бронхиальной астмы. Это согласуется с известными литературными данными, показывающими, что A(38)G полиморфизм ассоциирован с возникновением и течением ряда патологических состояний, в патогенезе которых играет роль иммунная система. Так, отмечалось, что указанный полиморфизм, кроме влияния на заболеваемость и течение астмы, ассоциируется также с заболеваемостью саркоидо-зом [15], атопическим дерматитом [19], онкопато-логией [20] и др..

Относительно встречаемости различных полиморфных вариантов A(38)G-полиморфизма в популяции в литературе существует ряд противоречивых мнений. Так, в ряде работ [21] не было обнаружено взаимосвязи между развитием патологического процесса и данным видом полиморфизма, в ряде работ такая взаимосвязь обнаруживалась, однако характер генетической изменчивости наблюдался разный - в работе [22] у пациентов с бронхиальной астмой частота гомозиготного ал-лельного сочетания АА была выше, в то время как в работах [23,24] регистрировалась обратная картина. Также в литературе неоднократно отмечалось, что степень A(38)G-полиморфизма гена сек-ретоглобина отличается в различных этно-географических популяциях [12,22,24]. Не исключено, что как популяционные различия, так и различия в оценке тяжести и особенностей течения астматического процесса могут влиять на получаемые результаты. Обнаруженные нами особенности A(38)G полиморфизма у детей, больных бронхиальной астмой, с учётом степени тяжести процесса, говорят о перспективности данного направления исследований, продолжение которого во взаимосвязи с уровнем циркулирующего секретог-лобина SCGBlAl (утероглобина СС16) позволит лучше понять природу и возможности влияния на воспалительный процесс при бронхиальной астме.

Выводы

При определении степени A(38)G-полиморфизма гена секретоглобина SCGB1A1 у детей в крымской популяции выявлена взаимосвязь между степенью данного полиморфизма и развитием легочной патологии, в частности бронхиальной астмы и рецидивирующего бронхита

Частоты аллельных сочетаний генетических вариантов данного полиморфизма отличаются у больных бронхиальной астмой, рецидивирующим бронхитом и в контрольной группе. Частота гомозигот АА среди больных бронхиальной астмой ниже, а среди больных рецидивирующим бронхитом выше, чем в контрольной группе, частота ге-терозигот AG среди больных бронхиальной астмой

выше, чем в контрольной группе и у больных рецидивирующим бронхитом.

Частоты аллельных сочетаний генетических вариантов полиморфизма секретоглобина различаются в зависимости от степени тяжести БА, с пре-

обладанием частоты гетерозигот АО у больных с тяжёлым течением процесса.

Частота гетерозигот АО среди больных рецидивирующим бронхитом ниже, чем гомозигот АА и ОО.

Литература

1. Глобальная стратегия лечения и профилактики бронхиальной астмы. Пересмотр 2011г. Под ред. Белевского А.С., М: Российское респираторное общество, 2012г. - 107 стр.

2. Чучалин А.Г. и др. Национальная программа «Бронхиальная астма у детей. Стратегия лечения и профилактика», М.: «Атмосфера», 2008г. - 106 стр.

3. Бронхиальная астма, проблемы и достижения. По материалам 15-го ежегодного конгресса европейского респираторного общества Текст. // Клиническая иммунология. Аллергология. Инфектология. — 2005. — № 1.1. C. 9-16.

4. Бронхиальная астма: современные концепции диагностики и лечения. Научно-информационный материал. Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н.И.Пирогова. - М.: «Ассоциация московских вузов» - 2011. - 127 стр.

5. Литвинець Л.Я. Молекулярно-генетичш основи i стратепя ана-лiзу бронхiальноl астми в д^ей //Здоровье ребёнка. - 2012. - №7 (42). - С. 85-89

6. Фрейдин М.Б., Пузырев В.П. Геномные основы подверженности атопическим заболеваниям // Молекулярная медицина. - 2007. -№ 3. - С. 26-35.

7. Mukherjee AB, Zhang Z, Chilton BS. Uteroglobin: a steroid-inducible immunomodulatory protein that founded the Secretoglobin superfamily // Endocr. Rev.-2007. - Vol. 28 (7), No 12. - pp707-725.

8. Burbure C., Pignatti P. et al. Uteroglobin-Related Protein 1 and Clara Cell Protein in Induced Sputum of Patients with Asthma and Rhinitis // CHEST. - 2007. - Vol. 131, No 1. - pp. 172-179

9. http://www.genecards.org/cgi-bin/carddisp.pl?gene=SCGB1A1

10. Nie W., Xue Ch., Chen J., Xiu Q. Secretoglobin 1A member 1(SCGB1A1) + 38 A|G polymorphism is associated with asthma risk: A meta-analysis // Gene. - 2013. - Vol.528, No.2 . - pp. 304308

11. Ku MS, Sun XL, Lu KH. The CC16 A38G polymorphism is associated with the development of asthma in children with allergic rhinitis. // Clin. Exp. Allergy. - 2011. - Vol. 41, No 6, - pp. 794800.

12. Ray R., Choi M., Zhang Z. Uteroglobin Suppresses SCCA Gene Expression Associated with Allergic Asthma. // The Journal of Biological Chemistry. - 2005. - March 18, 280. - pp. 9761-9764.

13. Маниатис Т., Фрич Е.Ф., Сэмбрук Д. Молекулярное клонирование. Методическое руководство // М. Мир, 1984. - 480 стр.

14. Newton C.R., Graham A., Heptinstall L.E. e.a. Analysis of any point mutation in DNA. The amplification refractory mutation system (ARMS). // Nucleic Acids Res., 1989; v. 17: 2503-2516.

15. Janssen R., Sato H., Grutters J.C. e.a. The Clara Cell 10Adenine38Guanine Polymorphism and Sarcoidosis Susceptibility in Dutch and Japanese Subjects

16. //Am.J.Respir.Crit.Med. - 2004. - Vol.170. - pp1185-1187.

17. Молекулярная клиническая диагностика. Методы: пер. с англ. / Под ред. Херрингтона С., Макги Дж. - М., Мир, 1999. - 558 стр.

18. Лакин Г.Ф., Биометрия // М., Высшая школа, 1990. - 352 стр.

19. Кайданов Л.З. Генетика популяций //М., Высшая школа, 1996. -320 стр.

20. Candelaria, P.V., Backer, V., Laing, I.A. e.a. Association between asthma-related phenotypes and the CC16 A38G polymorphism in an unselected population of young adult Danes. // Immunogenetics. -2005. - Vol. 57, No 1-2. - pp. 25-32.

21. Saito, M., Kimoto, M., Araki, T. e.a. Proteome analysis of gelatin-bound urinary proteins from patients with bladder cancers. . // Eur. Urol. - 2005. - Vol. 48, No. 5. - pp.865-867.

22. Mansur A.H. Secretoglobin 1A1 gene and asthma predisposition: what is the evidence? //

23. Clin. Exp. Allergy. - 2009. - Vol.39. - pp. 8 - 11.

24. Menegatti E., Nardacchione A., Mirella A. e.a. Polymorphism of the Uteroglobin Gene in Systemic Lupus Erythematosus and IgA Nephropathy //Lab. Invest. - 2002. - Vol. 82 - pp. 543-546.

25. Mukherjee A.B., Zhang Z., Zheng F. Uteroglobin in the treatment of IgA mediated autoimmune disorders. Patent USA W00062795, example 12.

26. Laing A., De Klerk N.H., Turne S.W. Cross-sectional and longitudinal association of the secretoglobin 1A1 gene A38G polymorphism with asthma phenotype in the Perth Infant Asthma Follow-up cohort. // Clin Exp Allergy. - 2009. - Vol. 39. - pp. 62-71.

Данные об авторах

Малая Наталья Константиновна

Старший лаборант кафедры педиатрии, физиотерапии и курортологии ФПМКВКи ДПО Медицинской академии имени С.И. Георгиевского, ФГАОУ ВО «Крымский федеральный университет им. В.И. Вернадского». Адрес: 295051, Россия, Республика Крым, г.Симферополь, ул. Дзюбанова, 25/77, кв. 110 e-mail: nm_sn@mail.ru тел. +79788483121 Каладзе Николай Николаевич

Зав. каф. педиатрии, физиотерапии и курортологии ФПМКВКи ДПО Медицинской академии имени С.И. Георгиевского, ФГАОУ ВО «Крымский федеральный университет им. В.И. Вернадского». док.мед.наук., профессор. e-mail: evpediatr@rambler.ru тел. кафедры +38(0652) 27-66-26 Малый Константин Дмитриевич

Ст. преподаватель каф. биохимии Медицинской академии имени С.И. Георгиевского, ФГАОУ ВО «Крымский федеральный университет им. В.И. Вернадского». канд.мед.наук, e-mail: kdmaly@mail.ru Тел.: +7978110175