CC BY
102
© СТРАМБОВСКАЯ Н.Н. - 2014 УДК 61 : 575.17 : 616.831 - 005
ГЕНЕТИЧЕСКИЙ ПОЛИМОРФИЗМ ОСНОВНЫХ БЕЛКОВ РЕНИН-АНГИОТЕНЗИН-АЛЬДОСТЕРОНОВОЙ СИСТЕМЫ И ТРОМБОЦИТАРНЫХ РЕЦЕПТОРОВ У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКОЙ ЦЕРЕБРОВАСКУЛЯРНОЙ ПАТОЛОГИЕЙ
Наталья Николаевна Страмбовская (Читинская государственная медицинская академия, ректор - д.м.н., проф. А.В. Говорин, Научноисследовательский институт молекулярной медицины, директор - д.м.н., проф. Ю.А. Витковский)
Резюме. Исследованы частоты аллелей и генотипов для 7 SNP маркеров: AGT(C521T), AGT(T704C), AGTR1(A1166C), GpIa(C807T), GpIIIa(T1565C), GpI^a(C434T), SELP(G1087A) и 2 инсерционно-делеционных полиморфизмов: АСЕ Ins/Del(287 п.н.), P2RY12 Н1/Н2 у больных хронической ишемией мозга и здоровых наблюдаемых, соответствующих по полу и возрасту группе больных. Анализ частот аллелей каждого из полиморфизмов в отдельности у больных в сравнении со здоровыми не выявил значимых различий. Сравнительный анализ генотипов показал более частое наблюдение у больных GpIa807TT (х=4,39; р<0,04), GpIIIaT1565TC (х=11,2; р<0,001) и GpIpa434TT (Х=11,6; р<0,0007), что может рассматриваться как один из факторов предрасположенности к болезни.
Ключевые слова: хроническая ишемия мозга, генетическая предрасположенность, генетический полиморфизм.
GENETIC POLYMORPHISM THE PRIMARY PROTEINS OF RENIN-ANGIOTENSIN-ALDOSTERON SYSTEM AND PLATELET'S RECEPTIONS IN PATIENTS WITH CHRONIC BRAIN ISCHEMIA
N.N. Strambovskaya (Chita State Medical Academy, Russia)
Summary. Allele and genotype frequencies of 7 single nucleotide polymorphisms: AGT(C521T), AGT(T704C), AGTR1(A1166C), GpIa(C807T), GpIIIa(T1565C), GpI^a(C434T), SELP(G1087A) and 2 insertion-deletion polymorphisms: АСЕ Ins/Del(287 p.n.), P2RY12 Н1/Н2 were studied in the patients with chronic brain ischemia and healthy subjects matched for sex and age. An analysis of allele frequencies for each polymorphisms in patients and controls did not reveal any significant differences. Frequency analysis showed that genotype GpIa807TT (x=4,39; р<0,04), GpIIIaT1565TC (x=11,2; р<0,001) and GpI^a434TT (x=11,6; р<0,0007) was higher in group of persons with chronic brain ischemia compared to the controls and can be associated with prediction for disease.
Key words: chronic brain ischemia, genetic susceptibility, genetic polymorphism.
Исследование генетических маркеров, отвечающих за наследственную предрасположенность к мультифак-ториальным заболеваниям, является одной из важнейших задач предиктивной медицины. Сегодня создаются специальные базы данных, которые позволяют обобщить информацию о функциях генов, и разработать вероятные прогнозы развития патологических процессов [1,2,6,10,11,17]. Особое место в таких исследованиях принадлежит изучению полиморфизма генов, вовлеченных в сердечно-сосудистые заболевания [2].
Дисциркуляторная энцефалопатия (хроническая ишемия мозга) представляет собой одно из наиболее распространенных прогрессирующих хронически текущих сосудистых заболеваний головного мозга проявляющегося расстройством его функций. По данным Научного центра неврологии РАМН, число больных с явлениями хронической ишемии головного мозга в нашей стране неуклонно растет, составляя, ориентировочно, не менее 700 на 100 тыс. населения [6]. В отличие от острых нарушений мозгового кровообращения, большинство случаев дисциркуляторной энцефалопатии связано с патологией не крупных экстракраниальных артерий или их основных интракраниальных ветвей, а мелких пенетрирующих мозговых артерий диаметром 40-200 мкм (церебральной микроангиопатией), от которых, в первую очередь, зависит кровоснабжение глубинных отделов мозга [6].
Цель работы. Изучение частот генотипов и аллелей маркеров генных сетей, потенциально ответственных за развитие хронической цереброваскулярной патологии: генов основных белков ренин-ангиотензин-альдостероновой системы (AGT - два полиморфизма AGT(C521T), AGT(T704C); AGTR1(A1166C); АСЕ Ins/ Del (287 п.н.)), генов основных протеинов тромбо-цитарных рецепторов (GpIa(C807T); GpIIIa(T1565C); GpIßa(C434T); P2RY12 Н1/Н2; SELP(G1087A)) у резидентов популяции Забайкальского края, не имеющих признаков цереброваскулярной патологии, и больных хронической ишемией мозга (ХИМ).
Материалы и методы
Клиническую группу составили 265 (135 женщин и 130 мужчин) больных в возрасте 56,3±11,7 лет, имеющих жалобы и объективные признаки хронической ишемии мозга II и III стадии без признаков декомпенсации. В качестве критериев включения, а также установления степени когнитивных нарушений, использовались оценочные шкалы: MMSE, тест слежения, тест рисования часов, шкала Хачински, тест Гамильтон. Сосудистый характер поражения подтверждался нейровизулизацион-но, а также шкалой ишемии NINDS-AIREN.
Контрольную группу составили 254 неродственных резидентов открытой популяции Забайкальского края (156 женщин, 98 мужчин) в возрасте 41,6±11,7 лет (р>0,05), проживающих в городе Чита, не имеющих на момент исследования объективных признаков сосудистой, в том числе и цереброваскулярной патологии.
Методом исследования послужила полимеразная цепная реакция с детекцией продукта амплификации в агарозном геле, либо в режиме реального времени на геномной ДНК лейкоцитов периферической крови.
Проведение исследования одобрено локальным этическим комитетом ГОУ ВПО ЧГМА, протокол №2 от 06.11.2009 г.
Для оценки соответствия распределений генотипов ожидаемым значениям при равновесии Харди-Вайнберга и для сравнения распределений частот генотипов и аллелей в двух субпопуляциях использовали критерий х2 с поправкой Йетеса. Об ассоциации аллелей или генотипов с предрасположенностью к изучаемой патологии судили по величине относительного риска заболевания (ОР) и отношения шансов события (ОШ). Границы 95%-го доверительного интервала (CI) вычисляли методом B. Woolf. Значения уровня p<0,05 рассматривались как статистически значимые. Статистическая обработка данных проводилась с использованием программного пакета Statistica 6.1 (StatSoft, USA).
Результаты и обсуждение
В ходе исследования обнаружены все искомые мутации в гомо- и гетерозиготном состоянии с частотным подчинением закону Харби-Вайнберга. В таблице 1 представлены результаты анализа распределения аллелей (доли) и генотипов (%) изучаемых ДНК-полиморфизмов в наблюдаемых группах.
Блок полиморфизма генов ренин-ангиотензин-альдостероновой системы включен в наше исследование вследствие того, что их продукты являются факторами риска развития артериальной гипертензии, которая способствует возникновению и прогрессированию сосудистой патологии [7,12]. Генетические вариации гена ангиотензиногена (ЛОТ) могут существенно влиять на концентрацию фермента в плазме. Наиболее значимые, с клинической точки зрения, варианты гена ЛОТ обусловлены точечными нуклеотидными полиморфизмами, приводящими к аминокислотным заменам в 174 и 235 кодонах гена - Т174М и М235Т соответственно. Они детерминируют повышенный уровень экспрессии ангиотензиногена [3,7,8,12,14,15,16,17]. Ген ЛОТШ кодирует один из четырех основных рецепторов ангио-
При анализе распределения аллелей и генотипов ЛОТ(С521Т) в контрольной группе отмечалось значительное преобладание ЛОТ521СС генотипа - 82,1%, в то время как в мировых популяциях [17] это значение несколько ниже. Кроме этого ЛОТ521ТТ-генотип регистрировался лишь у 1,5% резидентов, когда по данным литературы эта цифра составляет 5-10%. Соответственно, частота аллеля ЛОТ521Т данного полиморфизма в изучаемой популяции также была сниженной - 0,1. В клинической группе наблюдалось такое же распределение аллелей и генотипов (р>0,05), что дает нам возможность на уровне настоящего исследования исключить данный полиморфизм из потенциальных кандидатов. При изучении ЛОТ(Т704С) в контрольной группе отмечено преобладание гетерозиготного генотипа 45,5%, мутантных гомозигот выявлено 20,5%, что соизмеримо с данными различных популяционных исследований [15]. При сравнительном изучении распределения генотипов в клинической группе обнаружено преобладание количества Л0Т704СС-носителей (р>0,5) и уменьшение Л0Т704ТС-обладателей (р<0,01), однако распределение аллелей в двух субпопуляциях одинаково. ЛОТШ(А1166С) полиморфизм в частотах аллелей и
Таблица 1
Частоты аллелей и генотипов изучаемых полиморфизмов у больных хронической ишемией головного мозга (ХИМ) и в контрольной группе (КГ)
Полиморфизм SNP-ID аллель Частота аллеля, Р OR (95% CI:), p ОШ (95% CI:), p генотип Частота генотипа, % х2, (p)
КГ ХИМ КГ ХИМ
AGT Thr174Met rs4762 -521C -521T 0,9 0,1 0,9 0,1 0,99 (0,66;1,5) р>0,05 0,99 (0,63;1,58) р>0,05 -521CC -521CT -521TT 82,1 16,4 1,5 82,4 15,7 1,9 0,006; (>0,05) 0,04; (>0,05) 0,1; (>0,05)
AGT Met235Thr rs699 -704T -704C 0,57 0,43 0,57 0,43 1,01 (0,9;1,2) р>0,05 1,02 (0,78;1,35) р>0,05 -704TT -704TC -704CC 34 45.5 20.5 41.0 32,9 26.1 2,18; (>0,05) 6,4; (<0,01) 1,9; (>0,05)
AGTR1 rs5186 -1166A -1166C 0,76 0,24 0,75 0,25 1,03 (0,8;1,31) р>0,05 1,04 (0,76;1,43) р>0,05 -1166AA -1166AC -1166CC 58.5 34.5 7,0 58.1 33,8 8.1 0,007; (>0,05) 0,02; (>0,05) 0,19; (>0,05)
ACE Ins/Del 287п.н. rs34340 Ins Del 0,52 0,48 0,6 0,4 0,89 (0,77;1,04) р>0,05 0,81 (0,62;1,07) р>0,05 I/I I/D D/D 29.5 45 25.5 31,9 50.5 17.6 222 ;;; >>> ООО 000 )))
GpIa (ITGA2) Phe224Phe rs1126643 -807C -807T 0,63 0,37 0,58 0,42 1,14 (0,96;1,35) р>0,05 1,23 (0,93;1,63) р>0,05 -807CC -807CT -807TT 44.8 36.9 18,3 42.8 30.8 26,4 0,12; (>0,05) 1,6; (>0,05) 4,39; (<0,04)
GpIIIa (ITGB3) Leu33pro rs5918 -1565T -1565C 0,82 0,18 0,81 0,19 1,06 (0,8;1,41) р>0,05 1,07 (0,75;1,53) р>0,05 -1565TT -1565TC -1565CC 73,6 16,4 10,0 66,4 28,8 4,8 2,67; (>0,05) 11,2; (<0,001) 2,82; (>0,05)
GpIßa (GpIß-IX-V) Trp145Met rs2243093 -434C -434T 0,89 0,11 0,88 0,12 1,05 (0,72;1,54) р>0,05 1,06 (0,69;1,63) р>0,05 -434CC -434CT -434TT 78,1 21,4 0,5 79,3 17,8 2,9 0,08; (>0,05) 0,77; (>0,05) 11,6; (<0,0007)
P2RY12 (C139T,T74C, G52T,ins801) rs482 гаплотип H1 гаплотип H2 0,85 0,15 0,82 0,18 1,19 (0,87;1,63) р>0,05 1,23 (0,85;1,79) р>0,05 H1/H1 H1/H2 H2/H2 74,1 21,9 4,0 69,3 25,9 4,8 1,2; (>0,05) 0,94; (>0,05) 0,17; (>0,05)
ro Pr 5 ш _c 00 1— rs6131 -1087G -1087A 0,89 0,11 0,86 0,14 1,25 (0,88;1,8) р>0,05 1,3 (0,86;1,96) р>0,05 -1087GG -1087GA -1087AA 79,6 17,9 2,5 74 23,1 2,9 1,93; (>0,05) 1,84; (>0,05) 0,07; (>0,05)
Примечание: Жирным шрифтом выделены генотипы, являющиеся потенциальным фактором риска заболевания.
тензина II, расположенных в эндотелии сосудов и опосредующих все основные сердечно-сосудистые эффекты ангиотензина. Среди более чем 50 полиморфизмов гена AGTR1 наибольшее клиническое значение имеет полиморфизм, приводящий к замене в 1166 позиции А>С [4,7,14,17]. ACE является одним из ключевых ферментов ренин-ангиотензин-альдостероновой системы человека, задействованной в регуляции системного и почечного кровообращения, объема циркулирующей крови и водно-солевого обмена. На генетическом уровне вариабельность содержания фермента в крови связана с наличием варианта D-делеции (отсутствии) Alu-последовательности внутри интрона гена АСЕ. Носители полноразмерного (II - инсерционного) генотипа имеют самый низкий уровень фермента, в то время как у людей с D/D генотипом он максимален [4,5,9,12,17].
При изучении заявленного полиморфизма генов основных белков ренин-ангиотензин-альдостероновой системы обнаружено (табл. 1).
распределении генотипов в обеих наблюдаемых массивах был одинаков и сопоставим с данными литературы: AGTR1 1166АА - 58,5% и 58,1%; AGTR1 1166АС - 34,5% и 33,8%; AGTR1 1166СС - 7 и 8,1% в контрольной и клинической группах соответственно с равнозначным распределением аллелей (р>0,05). Вероятно, данное наблюдение позволяет также исключить данный полиморфизм из потенциальных предикторов цереброваскулярной патологии. Единственная из изучаемых мутация АСЕ Ins/ Del (287п.н.) в контрольной группе имела распределение, соответствующее общепопуляционному: ACEIns/Ins -29,5%, ACEIns/Del - 45%, АСЕ Del/Del - 25,5%. Однако ожидаемое увеличение частоты Del-аллеля у больных клинической группы не зарегистрировано, напротив, имело место незначительное (p>0,05) снижение частоты генотипа ACEIns/Del - 17,6% с увеличением доли Ins-аллеля до 0,6 (в контрольной группе - 0,52).
Важнейшей составляющей первичного гемостаза являются тромбоциты, изменение функциональных
свойств которых является существенным фактором в развитии артериальных тромбозов [1,2,3]. Свои основные функции тромбоциты реализуют через многочисленные рецепторы, генетический полиморфизм которых способствует изменению поведения пластинок в целом. Гликопротеиновый комплекс ОР1Ь/1Х^ является основным тромбоцитарным рецептором для фактора Виллебранда [2,4,13]. К настоящему времени описаны полиморфные варианты гена в двух локусах. Так замена С на Т в положении 3550 гена ОР1Ьа приводит к замене треонина на метионин в позиции 145 (’Йг145Ме1) [2,15], что, в свою очередь, вызывает конформационные изменения в области, примыкающей к месту связывания фактора фон Виллебранда с ОР1Ьа и увеличивает степень и скорость адгезии. КомплексОР1а/11а (другое название - интегрин а2/р1) играет основную роль при адгезии тромбоцитов коллагену. Нуклеотидная замена С на Т в позиции 807, не приводящая к замене аминокислоты, влияет на количество экспрессируемого ОР1а. Оказалось, что 807Т вариант гена ОР1а ассоциирован с повышением плотности рецептора на тромбоците и увеличением индуцируемой коллагеном агрегации тромбоцитов. Гетеродимер ОРПЬ/Ша (другое название - интегрин а11Ь/р3) является поверхностным рецептором тромбоцитов, который активируется в результате передачи сигнала от рецепторов адгезии GPVI и ОР1Ь/1Х/У, рецепторов, связанных с О-белком (например, рецепторы тромбина РЛБ.-1 и РЛИ.-4), и рецепторов АДФ (Р2У1и Р2У12) и обеспечивает взаимодействие тромбоцита с фибриногеном плазмы крови. Мутация 33Р приводит к повышенной склонности тромбоцитов к агрегации с часто пониженной эффективностью аспирина [2,17].
При изучении заявленного полиморфизма генов основных белков тромбоцитарных рецепторов обнаружено (табл. 1).
При изучении 0р1а(1Т0Л2)С807Т-полиморфизма в контрольной группе распределение генотипов соответствует общепопуляционному с преобладанием 0р1а807Сс - 44,8%, однако в клинической группе выявлено значимое преобладание 0р1а807ТТ-гомозигот - 26,4% против 18,3% (ОР=1,4; 95% С1: 1,0-2,08), носи-тельство мутантного аллеля в обеих субпопуляциях (контрольной и клинической) сравнительно не отличалось - 0,37 и 0,42 соответственно (р>0,05). При ис-
следовании Ор111а(1ТОВ3)Т1565С в группе резидентов Забайкальского края наблюдалось следующее распределение полиморфизма: Ор111аТ1565ТТ - 73,6%, ОрШаТ1565ТС - 16,4%, ОрШаТ1565СС - 10%. Среди больных отмечалось уменьшение количества носителей мутантного аллеля в гомозиготном состоянии, однако выявлено значительное преобладание гетерозиготного носительства - 28,8% против 16,4% (ОР=1,8; 95% С1: 1,2-2,6). Частота аллелей Ор111аТ1565С существенно не различалась (р>0,05). Частоты генотипов Ор1^а(Ор1^-ГХ^)С434Т полиморфизма в контрольной группе не отличались от общепопуляционных: Ор1^а434СС - 78,1%, Ор1^а434СТ - 21,4%, Ор1^а434ТТ - 0,5%, однако среди больных наблюдалось большее количество носителей Ор1^а434ТТ - 2,9% (ОР=5,8; 95% С1: 0,7-47,7), хотя частота аллелей была равнозначна (р>0,05). Генетический полиморфизм Р2ЯУ12(Н1/Н2) и &ЕЪР(01087Л) обнаружен в обеих группах наблюдения с одинаковым распределением генотипов и аллелей (табл. 1).
Таким образом, для формирования хронической ишемии мозга, согласно результатам нашего исследования, большую роль играет носительство генотипов: 0р1а807ТТ с риском развития заболевания в 1,4 раза; Ор111а1565ТС с риском развития в 1,8 раза; Ор1ра434ТТ с риском почти в 6 раз.
Анализ аллельного полиморфизма всех изученных генов у больных хронической ишемией мозга показал возможное влияние генетического статуса на возникновение хронического патологического васкулоцере-брального процесса. У больных хронической ишемией мозга, согласно исследованию, практически по всех генных сетях незначительно преобладали генотипы с гомозиготным состоянием мутантного аллеля. Наиболее значимо проявил себя полиморфизм генов тромбоци-тарных рецепторов с увеличением риска развития заболевания при носительстве гомозиготного генотипа 0р1а807ТТ, Ор111аТ1565ТС и Ор1^а434ТТ. Это обстоятельство можно объяснить доминирующим влиянием нарушений сосудисто-тромбоцитарного гемостаза в патогенезе хронической цереброваскулярной патологии и использованием настоящих данных не только в диагностических (выявление резистентности к отдельным группам дезагрегантов), но и лечебных мероприятиях предиктивного направления.
ЛИТЕРАТУРА
1. Авдонина М.А., Наседкина Т.В., Иконникова А.Ю. и др. Исследование ассоциации полиморфных маркеров генов F12, PON1, PON2, NOS2, PDE4D, H1F1a, GPIßa, CYP11B2 с ишемическим инсультом среди русского населения Центральной России // Журнал неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. - 2012. - №2. - С.51-54.
2. Воронина Е.Н., Филипенко М.Л., Сергевичев Д.С. и др. Мембранные рецепторы: функции и полиморфизм // Вестник ВОГиС. - 2006. - Т. 10. №3. - С.553-564.
3. Гайфуллина Р.Ф., Катина М.Н., Ризванова Ф.Ф. и др. Роль генетического полиморфизма в патогенезе цереброваскулярных заболеваний // Казанский медицинский журнал.
- 2012. - Т. 93. №4. - С.663-677.
4. Капустин С.И., Салтыкова Н.Б., Кобилянская В.А., Дрижун Ю.С. Особенности генетического полиморфизма компонентов системы гемостаза при различных клинических проявлениях венозного тромбоэмболизма // Вестник гематологии. - 2009. - Т. V. №1. - С.16-24.
5. КатинаМ.Н., ГайфуллинаР.Ф., ВаллиулинВ.В., Ризванов А.А. Роль генетического полиморфизма в формировании атеросклероза сосудов нижних конечностей // Казанский медицинский журнал. - 2012. - Т. 93. №3. - С.513-516.
6. Марков Х.М. Мозговой кровоток и церебральный инсульт. Часть 1. Регуляция церебрального кровообращения // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. -2013. - №1. - С.86-96.
7. Матвеева В.А. Молекулярно-генетическое исследование эссенциальной гипертензии: полиморфизм и транскрипционная активность генов воспалительного ответа: Автореф. дис. ... канд. мед. наук. - Уфа, 2012. - 24 с.
8. Нгуен Тхи Чанг Исследование ассоциации Thr174Met и Met235Thr гена ангиотензиногена с ишемической болезнью сердца в Ростовской области // Фундаментальные исследования. - 2010. - №3. - С.114-121.
9. Радьков О.В., Калинкин М.Н., Заварин В.В. Ассоциация инсерционно-делеционного полиморфизма гена ACE с факторами циркулирующего отдела ренин-ангиотензин-альдостероновой системы и функцией эндотелия микрососудов кожи при формировании гестоза // Бюллетень сибирской медицины. - 2011. - №4. - С.32-36.
10. Семинский И.Ж. Медицинская генетика: взгляд в будущее (лекция 6) // Сибирский медицинский журнал (Иркутск). - 2001. - Т. 29. №5. - С.68-73.
11. Семинский И.Ж. Структура генома человека (лекция 8) // Сибирский медицинский журнал (Иркутск). - 2002. - Т. 34. №5. - С.101-103.
12. Терещенко С.Н., Затейщиков Д.А., Жиров И.В., Носиков В.В. Полиморфизм генов ангиотензинпревращаю-щего фермента, ангиотензина II, NO-синтазы, эстрогеновых рецепторов и гендерные различия в их влиянии на развитие сердечно-сосудистой патологии // Кардиология. - 2009. - №4.
- С.58-62.
13. Чуканова Е.И., Ходжамжаров Б.Э., Чуканова А.С. Хроническая ишемия мозга (этиология, патогенез, лечение). Профилактика инсульта и сосудистой деменции // Российский медицинский журнал. - 2012. - №10. - С.517-521.
14. Шестаков А.М. Комплексный молекулярногенетический анализ полиморфизма генов-кандидатов гипертонической болезни в популяции русских жителей центрального Черноземья: Автореф. дис... канд. мед. наук. - М.,
2010. - 20 c.
15. Baudin B. Polymorphism in angiotensin II receptor genes and hypertension // Exp Physiol. - 2005. - Vol. 90. №3. - P277-282.
16. Mottl A.K. Shoham D.A., North K.E. Angiotensin II type 1 receptor polymorphisms and susceptibility to hypertension: a HuGE
review // Genet Med. - 2008. - Vol. 10/ №8. - Р560-574. Review.
17. Информационная система по медицински-значимым нуклеотидным полиморфизмам генома человека: сайт ФМБА НИИ Физико-химической медицины. - 2007. [Электронный ресурс] - Режим доступа: http://www.genepassport.ru. - загл. с экрана (дата обращения 06.09.2013).
REFERENCES
1. Avdonina M.A., Nasedkina T.V., Ikonnikova A.Yu., et al. Association study of polymorphic markers of F12, PON1, PON2, NOS2, PDE4D, H1F1a, GPIpa, CYP11B2 genes with ischemic stroke in Russian patients // Zhurnal nevrologii i psikhiatrii imeni S.S. Korsakova. - 2012. - №2. - P51-54. (in Russian)
2. Voronina E.N., Filipenko M.L., Sergeyevichev D.S., Pikalov
I.V. Platelet membrane glycoprotein receptors: function and polymorphism // Vestnik VOGiC. - 2006. - Vol. 10. №3. - P553-564. (in Russian)
3. Gayfullina R.F., Katina M.N., Rizvanova F.F., et al. Role of genetic polymorphism in the pathogenesis of cerebrovaskular disease // Kazanskiy medicinskiy zhurnal. - 2012. - Vol. 93. №4.
- P663-677. (in Russian)
4. Kapustin S.I., Saltykova N.B., Kobilyanskaya V.A., et al. Hemostatic genes polymorphisms in patients with distinct clinical manifestations of venous thromboembolism // Vestnik gematologii. - 2009. - Vol. V. №1. - P16-24. (in Russian)
5. Katina M.N., Gayfullina R.F., Valliulin V.V., Rizvanov A.A. The role genetic polymorphism in the formation of atherosclerosis in the vessels of lower extremities // Kazanskiy medicinskiy zhurnal. - 2012. - Vol. 93. №3. - P513-516. (in Russian)
6. Markov Kh.M. Brain blood flow and cerebral insult. Part 1. Regulation of cerebral circulation // Patologicheskaya fisiologiya i eksperimental’naya terapiya. - 2013. - №1. - P86-96. (in Russian)
7. Matveeva V.A. Molecular-genetic study of hypertension: polymorphism and transcriptionant genetic activity of inflammatory response: Avtoref. dis. ... cand. of medical science.
- Ufa, 2012. - 23 p. (in Russian)
8. Nguen Thi Trang Association between polymorphism T174M and M235T of the angiotensinogen gene and ischemic heart trouble in the Rostov population // Fundamental’nye issledovaniya. - 2010. - №3. - P114-121. (in Russian)
9. Radkov O.V., Kalinkin M.N., Zavarin V.V. Association of insertion deletion polymorphism of the ACE gene with factors of circulating rennin-angiotensin-aldosterone system
and endothelial function of skin microvassals in preeclampsia // Byulleten’ sibirskoy meditsiny. - 2011. - №4. - P32-36. (in Russian)
10. Seminsky I.J. The medical genetics: look into the future (Lecture 6) // Sibirskij Medicinskij Zurnal (Irkutsk). - 2001. - Vol. 29. №5. - P68-73. (in Russian)
11. Seminsky I.J. The structure of human genome // Sibirskij Medicinskij Zurnal (Irkutsk). - 2002. - Vol. 34. №5. - P101-103. (in Russian)
12. Tereshchenko S.N., Zateishchikov D.A., Zhirov I.V., et al. Polymorphism of ACE, Angiotensin II, NO-Synthase, estrogen receptor genes and gender differences in their effects on development of cardiovascular pathology // Kardiologiya. - 2009.
- №4. - P58-62. (in Russian)
13. Chukanova E.I., Khodzhamzharov B.E., Chukanova A.S. Chronic ischemia of the brain (the etiology, pathogenesis, treatment). Prevention of stroke and ischemic dementia // Rossiyskiy Meditsinskiy Zhurnal. - 2012. - №10. - P517-521. (in Russian)
14. Shestakov A.M. A Comprehensive molecular genetic analysis of polymorphisms of candidate genes responsible for essential hypertension in Russian inhabitants of Central Chernozem region of Russia: Avtoref. dis. ... cand. of medical science. - Moscow, 2010. - 20 p. (in Russian)
15. Baudin B. Polymorphism in angiotensin II receptor genes and hypertension // Exp Physiol. - 2005. - Vol. 90. №3. - P.277-282.
16. Mottl A.K. Shoham D.A., North K.E. Angiotensin II type 1 receptor polymorphisms and susceptibility to hypertension: a HuGE review // Genet Med. - 2008. - Vol. 10/ №8. - P560-574. Review.
17. Information system on the medically important human genome polymorphisms to be: Federal Medical & Biological Agency SRI of Physical-Chemical Medicine site. Available at: http://www.genepassport.ru. - The title screen (accessed 6 September 2013). (in Russian)
Информация об авторах:
Наталья Николаевна Страмбовская - заведующая лабораторией молекулярной генетики, к.м.н., доцент, 672090, г. Чита, ул. Горького 39а, НИИ молекулярной медицины, тел. (3022) 322861, факс (3022) 323058, e-mail: strambovskaya@yandex.ru
Information About the Author:
Natalya Nikolaevna Strambovskaya - head of the molecular genetics laboratory in Research Institute of molecular medicine for Chita State Medical Academy, candidate of medical sciences, associate professor; 39a Gorky Str., Chita, 672090 Research Institute of molecular medicine, phone 8(3022)322861, fax 8(3022)323058, mobile phone 89244770095, e-mail: strambovskaya@yandex.ru
© ИЛЛАРИОНОВА Е.А., КУЗНЕЦОВА А.Н. - 2014 УДК 543.42.062
РАЗРАБОТКА МЕТОДИКИ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ КЛОТРИМАЗОЛА
Елена Анатольевна Илларионова, Анастасия Николаевна Кузнецова (Иркутский государственный медицинский университет, ректор - д.м.н., проф. И.В. Малов, кафедра фармацевтической и токсикологической химии, зав. - д.х.н., проф. Е.А. Илларионова)
Резюме. Разработана унифицированная методика спектрофотометрического определения клотримазола в субстанции, отличающаяся использованием в качестве образца сравнения калия феррицианида и калия дихромата. Обоснованы оптимальные условия определения: растворитель - 0,1М раствор кислоты хлористоводородной, аналитическая длина волны - 264 нм. Определены коэффициенты пересчета. Относительное стандартное отклонение разработанной методики для субстанции составило 0,01.
Ключевые слова: спектрофотометрия, оптический образец сравнения, коэффициент пересчета, клотримазол, калия феррицианид, калия дихромат.
DEVELOPMENT OF THE METODS OF THE QUANTITATION DETERMINATION OF CLOTRIMAZOLE
E.A. Illarionova, A.N. Kuznetsova (Irkutsk State Medical University, Russia)
