CC BY
23УДК 575.1: 615.2
ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ, ОПРЕДЕЛЯЮЩИЕ РАЗЛИЧНЫЙ УРОВЕНЬ ЭКСПРЕССИИ ГЕНА OPRM1 У КРЫС ПОСЛЕ ВОЗДЕЙСТВИЯ
1-ФЕНЭТИЛ-4-ПИПЕРИДИЛ)-ПРОПИОНАНИЛИДА
И.С. Бердинских1, Н.С. Осечкина1, А.В. Бабкин1, А.С. Никифоров1, Г.В. Назаров1, В.Н. Быков1, М.Б. Иванов2
Научно-исследовательский испытательный институт военной медицины Военно-медицинской академии имени С.М. Кирова, 195043, г. Санкт-Петербург, Российская Федерация Федеральное государственное учреждение науки «Институт Токсикологии» Федерального медико-биологического агентства России, 192019, г. Санкт-Петербург, Российская Федерация
Исследованы генетические особенности, определяющие различный уровень экспрессии гена Оргт1 у белых нелинейных крыс после воздействия п-(1-фенэтил-4-пиперидил)-пропио-нанилида в дозе 1 ЛД16. Изучено распределение 6 полиморфных вариантов гена Оргт1 крыс: ге8174389, г8105312806, г§197580673, ге199420908, ге105551578, ге105958511, которые могут обуславливать восприимчивость животных к воздействию агонистов опиоидных рецепторов. Обнаружено генетическое разнообразие в аллельных вариантах для 3 полиморфизмов (М05312806, ^105958511, ге105551578). Анализ экспериментальных данных по выявлению зависимости экспрессии гена от его полиморфизмов продемонстрировал статистически значимую (р<0,05) ассоциацию генотипа АА полиморфизма ге105312806 и генотипа АА полиморфизма ^105958511 с более низким уровнем экспрессии гена Оргт1 в спинном мозге крыс спустя 24 часа после воздействия п-(1-фенэтил-4-пипери-дил)-пропионанилида, по сравнению с животными с генотипами ТТ и ОО, соответственно.
Ключевые слова: генетический полиморфизм, ген Oprm1, экспрессия, n-(1-фенэтил-4-пипери-дил)-пропионанилид
Введение. Применение опиоидных анальгетиков широко распространено в медицине в качестве обезболивающих средств. При использовании опиоидов основными фармакологическими эффектами являются антиноцицепция, седация и анальгезия. При этом они обладают рядом побочных эффектов, таких как: угнетение дыхания, гипоксия, гипотензия, гипотермия, тошнота, рвота, пристрастие и привыкание [1,2]. Развитие побочного действия, как правило, является дозо-зависимым и накладывает определенные ограничения на широкое использование наркотических анальгетиков в терапевтической практике. Эффективные дозы наркотических анальгетиков
существенно варьируются у человека, при этом индивидуальная чувствительность к препаратам данного класса может быть обусловлена как половыми, возрастными, эмоциональными, патологическими, так и генетическими факторами.
Механизм действия наркотических анальгетиков основан на их взаимодействии с ц-опи-оидными рецепторами, обнаруженными в головном и спинном мозге [3,4]. Известно, что ген Oprmi крыс, кодирующий ц-опиоидные рецепторы, локализован на коротком плече первой хромосомы (локус ipil) и содержит значительное число однонуклеотидных замен (Single Nucleotide Polymorphism, SNP) [5,6]. В литературе описыва-
Бердинских Ирина Сергеевна (Berdinskih Irina Sergeevna), научный сотрудник НИИИ ВМ ВМедА имени С.М. Кирова Министерства обороны Российской Федерации, 195043, г. Санкт-Петербург, irina_berdinskih@mail.ru.
Осечкина Наталья Сергеевна (Osechkina Natalya Sergeevna), младший научный сотрудник НИИИ ВМ ВМедА имени С.М. Кирова Министерства обороны Российской Федерации, 195043, г. Санкт-Петербург, dunats@rambler.ru.
Бабкин Александр Владимирович (Babkin Aleksandr Vladimirovich), научный сотрудник НИИИ ВМ ВМедА имени С.М. Кирова Министерства обороны Российской Федерации, 195043, г. Санкт-Петербург, babkinnik@yandex.ru.
Никифоров Александр Сергеевич (Nikiforov Aleksandr Sergeevich), кандидат биологических наук, доцент, ведущий научный сотрудник НИИИ ВМ ВМедА имени С.М. Кирова Министерства обороны Российской Федерации, 195043, г. Санкт-Петербург, nikiforov2004@mail.ru.
Назаров Георгий Валерьевич (Nazarov Georgiy Valerevich), доктор химических наук, доцент, начальник отдела НИИИ ВМ ВМедА имени С.М. Кирова Министерства обороны Российской Федерации, 195043, г. Санкт-Петербург, denis-100@list.ru.
Быков Владимир Николаевич (Bykov Vladimir Nikolaevich), доктор медицинских наук, доцент, начальник центра НИИИ ВМ ВМедА имени С.М. Кирова Министерства обороны Российской Федерации, 195043, г. Санкт-Петербург, bykov_imm@yahoo.com.
Иванов Максим Борисович (Ivanov Maksim Borisovich), доктор медицинских наук, заместитель директора по научной работе ФГБУН «Институт токсикологии Федерального медико-биологического агентства», 192019, г. Санкт-Петербург, m.b.ivanov@toxicology.ru
ются результаты исследований о влиянии полиморфизмов гена OPRM1 человека на индивидуальное восприятие ноцицептивного стимула [7,8] и развитие различных побочных эффектов при применении наркотических анальгетиков [7,9,10, 11]. Несмотря на большое количество публикаций, посвященных данной проблеме, полученные к настоящему времени результаты не нашли широкого применения в клинической практике. В то же время прогнозирование индивидуальных особенностей действия наркотических анальгетиков на организм позволит повысить безопасность их применения и определить более эффективные подходы к проведению терапии при интоксикациях. Для разработки подходов к индивидуализации, на первом этапе целесообразно провести исследования по выявлению ассоциации генетических полиморфизмов и уровня экспрессии гена Oprm1 с использованием лабораторных животных.
В этой связи целью настоящей работы было исследование распределения аллельных вариантов гена Oprm1 у белых беспородных крыс, а также установление ассоциации полиморфизмов с уровнем экспрессии исследуемого гена в головном и спинном мозге крыс после воздействия п-(1-фенэтил-4-пиперидил)-пропионанилида.
Материалы и методы исследования. Эксперименты выполнены на белых нелинейных крысах-самцах массой 180-240 г, содержавшихся в условиях вивария (питомник РАМН «Рапполово», Ленинградская область). За 12 ч до начала эксперимента животных лишали пищи. Животным однократно внутримышечно вводили п-(1-фенэ-тил-4-пиперидил)-пропионанилид в дозе 1 ЛД16. ДНК для проведения генотипирования выделяли через 1 сут из образцов периферической венозной крови с использованием автоматической станции для выделения нуклеиновых кислот «NorDiag Arrow» (Швеция) и коммерческого набора «Arrow Blood DNA Kit 500» (Швеция) по протоколу «DNA Blood 500».
Тотальную РНК для проведения анализа экспрессии выделяли из образцов спинного и головного мозга крыс с использованием автоматической станции для выделения нуклеиновых кислот «NorDiag Arrow» (Швеция) и коммерческого набора «Arrow RNA»(Швеция) по протоколу «RNA у.2.1».Выделенную РНК переводили в кДНК по протоколу High Capacity cDNA Reverse Transcription Kit, Applied Biosystems (США). Измерение концентрации выделенных образцов ДНК и РНК осуществляли с использованием спектрофотометра «BioSpec-nano» (Япония).
Для определения полиморфизмов гена Oprm1 крыс проводили полимеразную цепную реакцию в режиме реального времени (ПЦР-РВ) на амплификаторе «QuantStudio 12K Flex»,
Applied Biosystems (США), с использованием коммерческих праймеров и зондов, синтезированных и нанесенных производителем на пластины «OpenArray».C использованием робота для нанесения образцов «OpenArray AccuFill System», на пластины «OpenArray» наносились реакционная смесь, содержащая смесь для генотипирования TaqMan® OpenArray® Genotyping Master Mix, деионизованная вода и образцы ДНК [12]. Термоциклирование пластин «OpenArray» проводили по следующей программе: 950С - 600 с -1 цикл; (920С - 15 с, 600С - 60 с) - 40 циклов. Анализ данных ПЦР-РВ проводили с использованием специализированного программного обеспечения «HOME Genotyper».
Экспрессию гена Oprml в спинном мозге крыс, спустя сутки после введения n-(1-фенэтил-4-пи-перидил)-пропионанилида, оценивали также методом ПЦР-РВ, по отношению к гену-рефери 18S рРНК на амплификаторе «7900 HT Fast Real-Time PCR System», Applied Biosystems (США), с использованием коммерческой тест-системы Applied Biosystems (Rn01430371_m1). Термоциклирование осуществляли по следующей программе: 50°С -120 сек. - 1 цикл; 95°С - 600 сек. - 1 цикл; (95°С -15 сек., 60°С - 60 сек.) - 45 циклов. Анализ данных проводили с использованием программы RQ Manager v.1.2.1 [13].
Для определения относительного количества кДНК, соответствующего относительному количеству мРНК в анализируемом образце, использовали разведения пулированных исследуемых образцов, при помощи которых осуществлялось построение калибровочных кривых. Показатель уровня экспрессии гена определяли относительно гена-рефери 18s рРНК по следующей формуле:
УЭ= количество мРНК определяемого гена *до0% количество мРНК определяемого гена °'
в которой УЭ - относительный уровень экспрессии гена [14].
Статистическую обработку результатов производили с использованием программы Statistica 8.0. Для сравнения уровней экспрессии при носитель-стве различных генотипов использовали критерий Крускала-Уоллиса. Для попарного (множественного) сравнения генотипов использовали критерий Данна. Результаты представляли в виде Median 25%-75%.
Результаты и обсуждение. На основании информационно-теоретического поиска для анализа отобраны 6 полиморфных вариантов гена Oprm: rs8174389, rs105312806, rs197580673, rs199420908, rs105551578, rs105958511. Два из которых расположены в экзоне (кодирующей области гена: cds-synon и missence мутации), 3 в интро-не (не кодирующей части гена) и 1 в 3'- области гена [5]. Анализ образцов ДНК, выделенных из
крови белых крыс, позволил выявить частоту полиморфных вариантов гена Оргт1, которые отражены в таблице 1.
Анализ результатов, представленных в таблице 1, позволил выявить наличие трех возможных генотипов (гомозиготных вариантов по «диким» и «редким» аллелям, а также гетерозиготных вариантов) только для полиморфизмов ге105551578, ^105958511, г§105312806. Для остальных исследованных полиморфизмов (^8174389, «197580673 и «199420908) выявлено наличие только двух генотипов (гомозиготных вариантов по «диким» аллелям и гетерозиготных вариантов). Такое распределение может объясняться малой частотой «редких» аллелей в популяции крыс.
На следующем этапе работы, с использованием метода ПЦР-РВ, был проведен анализ УЭ гена Оргт1 в спинном и головном мозге крыс после воздействия п-(1-фенэтил-4-пиперидил)-пропио-нанилида. Для определения изменчивости УЭ гена Оргт1 у лабораторных животных с различными генотипами, были применены значения порогового цикла амплификации для гена-мишени (Оргт1) и гена-рефери (188 рРНК). С помощью математических преобразований [14] полученные данные переведены в относительные уровни экспрессии для носителей каждого из трех генотипов.
При проведении статистического анализа выявлена ассоциация двух полиморфных вариантов гена Оргт1 крыс («105312806 и «105958511) с его УЭ в спинном мозге у опытных (спустя 24 часа после введения препарата) животных. Результаты представлены в таблице 2.
Статистически значимых ассоциаций полиморфизмов исследуемого гена с его УЭ в головном мозге выявлено не было.
Стоит отметить, что при анализе УЭ гена Оргт1 в спинном мозге у интактных животных статистически значимой ассоциации аллельных вариантов с УЭ не выявлено. Однако обнаружено, что введение п-(1-фенэтил-4-пиперидил)-про-пионанилида в дозе 1 ЛД16 приводит к снижению УЭ в спинном мозге у опытных животных, по сравнению с интактными. Значения УЭ гена Оргт1 в спинном мозге у интактных и опытных крыс в зависимости от генотипа, представлены на рисунке 1.
Анализ результатов, представленных в таблице 2 и на рисунке 1, свидетельствует о наличии ассоциации генотипов двух исследованных полиморфизмов гена Оргт1 с его УЭ в спинном мозге лабораторных животных спустя сутки после введения п-(1-фенэтил-4-пиперидил)-про-пионанилида. Так, у опытных животных с генотипом ОО (г8105312806) УЭ гена Оргт1 был в 9 раз выше, по сравнению с животными с генотипом АА (при р=0,003). Различий в УЭ между животными с гетерозиготным генотипом ОА и гомозиготным генотипом АА, а также гетерозиготным генотипом ОА и гомозиготным генотипом ОО для «105312806 выявлено не было (при р=0,213 и р=1,000, соответственно). Схожие изменения были выявлены для полиморфизма «105958511. Было показано, что у опытных животных с генотипом ТТ УЭ гена Оргт1 был значимо в 6,8 раз выше, по сравнению с животными с генотипом АА (при р=0,002). Крысы-носители гетерозиготного генотипа ТА и гомозиготного генотипа АА, а также гетерозиготного генотипа ТА и гомозиготного генотипа ТТ не характеризовались значимыми различиями по данному показателю (при р=0,178 и р=0,712, соответственно).
Результаты изучения УЭ гена Оргт1 от его полиморфизма у животных при воздействии опи-
Таблица1
Частота вариантов гена 0ргт1 в исследованной группе крыс
№ п/п Генетический вариант Количество животных с различными генотипами, N (%)
Гомозигота по «дикому» аллелю Гетерозигота Гомозигота по «редкому» аллелю
1 G>A(ге8174389) GG 48 (96,0) GA 2 (4,0) AA 0 (0,0)
2 G>A (ГЭ105312806) GG 19 (38,0) GA 16 (32,0) AA 15 (30,0)
3 G>A(ге197580673) GG 48 (96,0) GA 2 (4,0) AA 0 (0,0)
4 ОГ (ге199420908) CC 48 (96,0) GA 2 (4,0) AA 0 (0,0)
5 A>C(ГЭ105551578) AA 19 (38,0) AC 22 (44,0) CC 9 (18,0)
6 ^(^105958511) TT 17 (34,0) TA 20 (40,0) AA 13 (26,0)
Примечание: в скобках указана частота встречаемости генотипов, %.
Таблица 2
Уровень экспрессии гена Оргт1 в спинном мозге у интактных и опытных крыс в зависимости
от генотипа, Ме (25; 75 регсе^Ме)
Полиморфизм Гено УЭ гена Oprm1, % Достоверные различия *
тип Интактные Опытные
< GG 5840,67 1394,57
л о (1608,93-10267,70) (814,83-1596,68) *
ю о 00 GA 3965,15 1075,87 AA<GG
CN т-Н (2565,31-4319,22) (862,78-1483,31) (при р=0,003)
ю о AA 1885,06 149,24
(1776,73-6820,49) (101,83-524,96) *
ТТ 8755,18 1394,57
л h^ (2926,15-12267,70) (814,83-1596,88) *
т-Н т-Н ю ТА 3779,46 965,41 AA<TT
00 ю СП (1786,65-4319,22) (275,39-1453,47) (при р=0,002)
ю о т-Н АА 1885,06 205,07
£2 (1776,73-6820,49) (78,27-641,30) *
Примечание: * достоверные различия УЭ гена Оргт1 между опытными животными с различными генотипами
оидных анальгетиков подтверждаются аналогичными и у человека. Так, при исследовании посмертных образцов головного мозга опиоид-ных наркоманов, показана связь аллельного варианта 118G (rs1799971A/G) с уменьшением экспрессии гена [15].
Проведенное исследование продемонстрировало статистически значимую (p<0,05) ассоциацию генотипов двух полиморфизмов rs105312806 (A/G) и rs105958511 (A/T) с УЭ гена Oprm1 в спинном мозге лабораторных животных после воздействия п-(1-фенэтил-4-пиперидил)-пропионанили-да в дозе 1 ЛД16. Крысы, носители гомозиготного генотипа АА (как по первому, так и второму полиморфизму), обладали более низким уровнем
экспрессии гена, в сравнении с носителями гомозиготных генотипов ОО и ТТ, соответственно. Таким образом, можно предположить, что крысы с различными генотипами по данным полиморфизмам в разной степени будут проявлять чувствительность к токсическим эффектам АОР.
Заключение. Проведенные исследования показали наличие генетического разнообразия по 3 полиморфным маркерам в гене Оргт1 крыс (^105312806, ^105958511 и ^105551578) из 6 исследованных. Выявлено, что УЭ гена Оргт1 снижается после воздействия п-(1-фенэтил-4-пиперидил)-про-пионанилида, а также широко варьирует в анализируемой выборке опытных животных
Рис. 1. Уровень экспрессии гена Oprml в спинном мозге у «интактных» и «опытных» крыс в зависимости от генотипов G>A (rs105312806) и T>A (rs105958511), Me (25; 75 percentile)
Примечание: * статистически значимые различия УЭ гена Oprm1 между опытными животными с гомозиготными генотипами по «диким» и «редким» аллелям; # - статистически значимые различия группы опытных животных от группы интактных животных; N-количество животных в группе.
с различными генотипами (rs105312806 (A/G) и rs105958511 (A/T).
Наличие полиморфизма в гене Oprm1 может привести к изменению уровня его экспрессии и, предположительно, к индивидуальной клинической картине после применения агонистов опиоидных рецепторов, зависимой от генотипа. Полученные результаты демонстрируют перспективность исследований в области изучения
полиморфных вариантов и экспрессии целевых генов и позволят спрогнозировать развитие индивидуальной, генетически детерминированной клинической картины, обусловленной воздействием наркотических анальгетиков с целью подбора оптимальных доз и схем терапии, а также в качестве дополнительных критериев при прогнозировании развития возможных побочных эффектов.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Диагностика, лечение психических
и поведенческих расстройств, вызванных употреблением опиоидов.Клиническое руководство. Бишкек. 2012.
2. Каркищенко Н. Н. Альтернативы биомедицины. Классика и альтернативы фармакотоксикологии. т. М.: ВПК; 2007.
3. Зайцев С.В., Ярыгин К.Н., Варфоломеев С.Д. Наркомания. Ней-ропептид-морфиновые рецепторы. М.: Издательство МГУ; 1993.
4. Minami M., Saton M. Molecular biology of the opioid receptors: structures, functions and distributions. Neurosci. Res. 1995; 23: 121-45.
5. dbSNP, a database for gene polymorphisms developed by the National
Center for Biotechnology Information and the National Human Genome Research Institute. Avaible at: http: //www.ncbi.nlm. nih.gov/SNP/
6. Opioid Gene Search Result. Avaible at:http://www.Rat Genome Database.com/.
7. Женило В. М., Махарин О. А. Влияние полиморфизма гена OPRM1 118A/G
на перцепцию боли и фармакодинамику наркотических аналгетиков. Общаяреа-ниматология. 2014; 1: 58 -
8. Fukuda K. et al. Association between OPRM1 gene polymorphisms and fentanyl sensitivity in patients undergoing painful cosmetic surgery.Pain. 2009; 147 (1-3): 194-2
9. Махарин, О.А., Женило В. М.,
Макляков Ю.С. Влияние полиморфизма А1^^-опиоидного рецептора OPRM1 на развитие осложнений тотальной внутривенной анестезии в раннем послеоперационном периоде: Материалы V Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы биологии, нанатехнологий и медицины». Ростов-на-Дону; 2013; 234 - 35.
10. Kasai S., Ikeda K. Pharmacogenomics of the human ^-opioid receptor Pharmacogenomics. 2011; 12: 1305-20.
11. Walter C., Lötsch J. Meta-analysis of the relevance of the OPRM1 118A>G genetic variant for pain treatment.Pain. 2009;
146 (3): 270-75.
12. TaqMan® OpenArray® Genotyping.
Getting Started Guide. 20Available at:
http://tools.lifetechnologies.com/content/
sfs/manuals/cms_058198.pdf
13. Relative Quantitation Using Comparative Ct Getting Started Guide for the 7900HT Fast System.
14. Мисюрин В.А. Исследование особенностей экспрессии и распространенности раково-тестикулярных генов: Дис. ... канд биол наук. М.; 2014.
15. Oertel B.G., Doehring A., Roskam B., Kettner M., Hackmann N., Ferreiros N., Schmidt P.H., l£tsch J. Genetic_epigenetic interaction modulates м-opioid receptor regulation. Hum. Mol. Genet. 2012;
21 (21): 4751-60.
REFERENCES:
1. Diagnosis and treatment of mental and behavior disorders in the result opioid use.The clinical guide.Bishkek.2012 (in Kirgiziia).
2. Karkishchenko N.N. Biomedicine alternatives. Classical and Alternative Pharmacotoxicology. Part M.: VPK.; 2007 (in Russian).
3. Zajjcev SV Jarygin K.N., VarfolomeevS.D. Addiction. Neuropeptide-morphine receptors.Moscow; 1993 (in Russian).
4. Minami M., Saton M. Molecular biology of the opioid receptors: structures, functions and distributions. Neurosci.Res. 1995; 23: 121-45.
5. dbSNP, a database for gene
polymorphisms developed by the National Center for Biotechnology Information and the National Human Genome Research Institute.Avaible at: http: //www.ncbi.nlm. nih.gov/SNP/
6. Opioid Gene Search Result. Avaible at:http://www.Rat Genome Database.com/.
7. Zhenilo V. M., Makharin O. A. The Influence of Gene Polymorphism OPRM1118A/G on the Perception of Pain and Pharmacodynamics of Narcotic Analgesics.0bshchaiareanimatologiia.2014; 1: 58 - 63 (in Russian).
8. Fukuda K. et al. Association between 0PRM1 gene polymorphisms and fentanyl sensitivity in patients undergoing painful cosmetic surgery. Pain. 2009;
147 (1-3): 194-2
9. Makharin O.A., Zhenilo V.M., Makliakov lu.S. The Influence of Gene Polymorphism OPRM1 118A/G on the complications of total intravenous anesthesia in the early postoperative period: Materials of the V International Scientific and Practical Conference «Actual problems of biology, nanotechnology and medicine». Rostov-on-Don; 2013; 234 - 35. (in Russian)
10. Kasai S., Ikeda K. Pharmacogenomics of the human ^-opioid receptor Pharmacogenomics. 2011; 12: 1305-20.
11. Walter C., Lotsch J. Meta-analysis of the relevance of the OPRM1 118A>G genetic variant for pain treatment. Pain. 2009;
146 (3): 270-75.
12. TaqMan® OpenArray® Genotyping. Getting Started Guide. 20Available at: http://tools.lifetechnologies.com/content/ sfs/manuals/cms_058198.pdf
13. Relative Quantitation Using Comparative Ct Getting Started Guide for the 7900HT Fast System.
14. Misiurin V.A. Investigation of the features of expression and prevalence of testicular cancer-gene: Dis. ...Candidate Biol of Sciences.M.; 2014. (in Russian)
15. Oertel B.G., Doehring A., Roskam B., Kettner M., Hackmann N., Ferreiros N., Schmidt P.H., l£tsch J. Genetic_epigenetic interaction modulates м-opioid receptor regulation. Hum. Mol. Genet. 2012;
21 (21): 4751-60.
I.S. Berdinskih1, N.S. Osechkina1, A.V. Babkin1, A.S. Nikiforov1, GV. Nazarov1, V.N. Bykov1, M.B. Ivanov2
GENETIC FACTORS DEFINING DIFFERENT EXPRESSION LEVELS OF OPRM1 GENE IN RATS AFTER EXPOSURE TO N-(1-PHENETHYL-4-PIPERIDYL) PROPIONANILIDE
Scientific Research Test Institute of Military Medicine, Medical Military Academy, 195043, Saint-Petersburg, Russian Federation 2Institute of the Toxicology, FMBA of Russia, 192019, Saint Petersburg, Russian Federation
Genetic specificities determining different expression levels of OPRM1 gene in white nonlinear rats were investigated after exposure to n-(1-phenethyl-4-piperidyl) propion anilide at the 1 LD16 dose. The distribution of genotypes of six polymorphic Oprml gene variants in rats: rs8174389, rs105312806, rs197580673, rs199420908, rs105551578, rs105958511 were studied. These variants may condition the sensitivity of animals to exposure to opioid receptors agonists. A genetic diversity was revealed in allelic versions of three polymorphisms (rs105312806, rs105958511, rs105551578). The analysis of experimental data showed a statistically significant association (p<0,05) of AA genotype in rs105312806 polymorphism and AA genotype in rs105958511 polymorphism with a more lower level of Oprm1 gene expression in rats spinal cord 24 hours after exposure to n-(1-phenethyl-4-piperidyl) propionanilide in comparison with animals with TT and GG genotypes accordingly.
Keywords: gene polymorphism, gene Oprm1, expression, n-(1-phenethyl-4-piperidyl) propionanilide
Переработанный материал поступил в редакцию 26.05.2015 г.
