ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ У СОБАК ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ КОМПЛЕКСНОЙ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОЙ ДОБАВКИ
О.Б. Сеин, В.А. Стариков
Аннотация. Приводятся результаты применения комплексной биологически активной добавки включающей янтарную кислоту, селен, экстракт расторопши и отходы биологического производства, полученные после культивирования клеток при изготовлении вакцин. Показано, что биологически активная добавка не оказывает отрицательного действия на организм собак. После ее применения у животных увеличивается показатель гематокрита, повышается содержание в крови эритроцитов и гемоглобина.
Ключевые слова: биологически активная добавка, коррекция, обмен веществ, отходы биологического производства, печень, расторопши экстракт, собаки, селен.
В настоящее время в городах отмечается рост количества животных, в том числе и собак, с нарушением обменных процессов, с иммунодефицитами и хроническими заболеваниями. Это связано с влиянием отрицательных факторов, присущим современным городам, к которым можно отнести загрязнение окружающей среды промышленными отходами, химическими и радиационными выбросами; насыщение воздуха вредными соединениями, повышенную шумность, транспортные перевозки и т.д.
Под влиянием стресс-факторов у собак возникают нарушения функциональной активности сердечнососудистой системы, желудочно-кишечного тракта, печени и других органов. Данные изменения требуют коррекции, для чего в ветеринарной практике используются различные препараты и биологически активные средства.
В последние годы появилось много кормовых и биологически активных добавок для животных, однако не все из них соответствуют рекламированным свойствам: одни добавки имеют низкую биологическую активность; другие - имеют высокую стоимость. Поэтому разработка и использование новых биологически активных препаратов, нормализующих обмен веществ и иммунобиологический статус у собак городской популяции, является актуальным вопросом для ветеринарной медицины.
Принимая во внимание актуальность и научно -практическую значимость указанной проблемы, целью настоящей работы являлось изготовление комплексной биологически активной добавки и изучение её биологических свойств. В частности перед нами стояла задача: определить белковый спектр крови у собак после применения полученной биологически активной добавки.
Для изготовления биологически активной добавки были использованы янтарная кислота, селен, экстракт расторопши и отходы биологического производства. Подбор компонентов биодобавки проводили с учетом их биологических свойств.
Янтарная кислота участвует в центральном звене метаболизма - в цикле трикарбоновых кислот, она связана с производством энергии, стимулирует поступление кислорода в клетки, обладает иммуностимулирующими свойствами.
Селен в изготовленном препарате представлен его органической формой, в виде препарата Сел-Плекс, который имеет более высокую биодоступность, не является окислителем (в отличие от селенита натрия), хорошо проникает в органы и ткани животных.
Расторопша относится к фитопрепаратам, целебные свойства которой известны. Препараты изготовленные на основе расторопши усиливают детоксикационную функцию печени, препятствуют разрушению гепатоци-тов и способствуют регенерации печеночной ткани. Расторопша содержит натуральное вещество силима-рин, которое обладает аонтиоксидантными свойствами, оказывает положительное влияние на функцию печени, укрепляет клеточные мембраны гепатоцитов и способствует образованию новых клеток.
Отходы биологического производства включенные в состав биодобавки представляют собой отходы, которые образуются в результате культивирования клеток при производстве вакцин. При этом было учтено, что для создания первичной культурной среды, согласно технологическим требованиям, используются типовые синтетические питательные среды МЕМ (минимальная среда Игла) и 199. Данные питательные среды представляют собой растворы определенного состава, основу которых составляют солевые компоненты. При этом минеральные вещества в этих средах подбираются таким образом, чтобы полученный раствор выполнял буферные функции, поддерживая постоянный кислотно -щелочной баланс среды в процессе культивирования клеток. Дополнительно в первичную культурную среду добавляется сыворотка крови крупного рогатого скота (10 %), содержащая 70 мг/мл белка. Таким образом, первичная культурная среда содержит комплекс питательных, энергетических, минеральных и других компонентов. В частности, в ней находятся практически все жизненно необходимые заменимые и незаменимые аминокислоты, а также комплекс витаминов.
Весьма важной особенностью является то, что в процессе культивирования клетки сами продуцируют в окружающую среду продукты обмена, пополняя состав культуральной жидкости биологически активными веществами. Об этом свидетельствуют результаты анализа отработанной культуральной жидкости. Ее состав в количественном отношении по некоторым компонентам превосходил первичную культурную среду.
В свою очередь, можно предположить, что продукты обмена культивируемых клеток обладают биости-мулирующими свойствами и могут оказывать индуцирующее влияние на обмен веществ в организме животных.
Второй важной особенностью отходов культураль-ного производства является то, что их биологическая эффективность в большей степени связана не столько с количеством присутствующих в ней ингредиентов, сколько с их соотношением. Именно оптимальное соотношение компонентов в отработанной культуральной жидкости обеспечивает ее биологическую ценность.
В свою очередь, проведенные ранее опыты сотрудниками кафедры терапии и акушерства ФГБОУ ВПО «Курская ГСХА» и кафедры анатомии, физиологии и хирургии ФГБОУ ВПО «Орловский ГАУ» на разных видах животных (белых мышах, морских свинках, кроликах и свиньях) показали, что отходы культурального производства не обладают токсичностью и анафилакто-генностью (В.Н. Масалов и др., 2012; О.Б. Сеин и др., 2013). По данным О.Б Сеина и др. (2006), включение в рацион поросят-отъемышей отходов культурального производства с 60- до 90-суточного возраста сопровождалось увеличением в их крови содержания общего белка в среднем на 9,4 г/л, альбуминов - на 2,2 %, гамма-глобулинов - на 3,5 %, общего кальция - на 0,3
Примечание: * при Р<0,05 по сравнению с контрольной группой
ммоль/л, неорганического фосфора - на 0,52 ммоль/л, витамина А - на 0,22 ммоль /л витамина Е - на 0,59 % ммоль/л. При этом в тканях длиннейшей мышцы спины и печени у поросят, получавших биоотходы, суммарное содержание свободных аминокислот было больше в среднем на 157,5 мкмоль/л (Р<0,01), незаменимых аминокислот - на 105,8 мкмоль/л (Р<0,001) и заменимых аминокислот - на 21,7 мкмоль/л (Р<0,02) по сравнению с контрольными животными.
Изготовленные препараты на основе отходов куль-турального производства, также показали высокую
биологическую эффективность (патенты РФ № 2470648, 2012 г.; № 2473340, 2013 г.).
Следует отметить, что не на всех биофабриках, производящих вакцины против вирусных заболеваний, отходы культурального производства используются в дальнейшем технологическом процессе. Во многих случаях данные отходы утилизируются.
Проверка изготовленной биологически активной добавки на лабораторных животных показала, что она безвредна, нетоксична и не оказывает побочных действий.
Таблица 1 - Общие гематологические показатели у собак получавших биологически активную добавку
Время исследования крови
Показатели до начала эксперимента через 10 дней через 20 дней через 30 дней
Группа
1 2 1 2 1 2 1 2
n 7 7 7 7 7 7 7 7
СОЭ, мм/час 3,4±0,04 3,5±0,11 3,6±0,06 3,5±0,08 3,4±0,08 3,3±0,06 3,5±0,05 3,4±0,08
Гематокрит, % 44,5±0,032 44,8±0,32 44,9±0,58 44,8±0,63 46,7±0,43 44,5±1,01 47,0±0,61 44,7±0,87
Эритроциты, • 1012/л 5,8±0,15 5,8±0,13 6,2±0,08* 5,9±0,07 6,8±0,14* 5,7±0,12 6,9±0,10 5,7±0,06
Лейкоциты, • 109/л 8,2±0,27 8,5±0,11 7,9±0,10 8,2±0,17 8,4±0,16* 9,0±0,12 8,8±0,15 9,0±0,08
Гемоглобин, г/л 123,5±0,89 124,7±0,40 128,0±0,72* 125,0±0,70 132,0± 0,98* 123,0±0,64 134,7±0,64* 125,5±0,44
С целью более детального выяснения биологических свойств изготовленной биодобавки нами был проведен эксперимент на собаках. Объектом исследований являлись беспородные собаки 2-3 - летнего возраста. Собакам первой (опытной) группы (7 гол.) скармливали биодобавку с кормом в дозе 10 мг/гол. ежедневно в течении 30 дней. Собаки второй (контрольной) группы (7 гол.) биодобавку не получали. Эксперименты проводили в условиях ветеринарной клиники «У охоты» (г. Мурманск).
У животных обеих групп брали кровь до начала эксперимента и на 10, 20 и 30 день эксперимента. В крови определяли скорость оседания эритроцитов (СОЭ), гематокрит, содержание эритроцитов, лейкоцитов и гемоглобина с использованием общепринятых методик (Клиническая лабораторная диагностика в ветеринарии.- М., 1985).
Результаты исследований показали (таблица 1), что после применения биодобавки у собак в крови повышалось содержание эритроцитов, а также увеличивался показатель гематокрита. Содержание общего количества лейкоцитов существенных изменений в период эксперимента не имело. Что касается гемоглобина, то его концентрация в крови собак первой группы изменялось параллельно динамике содержания эритроцитов.
У контрольных животных показатель гематокрита, содержание эритроцитов и гемоглобина в период эксперимента достоверных изменений не имели и были меньше по сравнению с собаками получавшими биологически активную добавку. Содержание лейкоцитов у собак контрольной группы находилось в пределах физиологических границ и не имело достоверных (р>0,05) различий по сравнению с собаками первой группы.
Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что изготовленная комплексная биологически активная добавка оказывает положительное влияние на гемопоэз подопытных животных. После ее скармливания увеличивался гематокрит, повышалось содержание в крови эритроцитов и лейкоцитов. Биологическая добавка не токсична, не вызывает аллергических реакций и других побочных явлений. Её можно рекомендовать к широкому применению в практике ветеринарной медицине.
Список использованных источников
1 Препарат для стимуляции обмена веществ и неспецифической резистентности животных / В.Н. Масалов, О.Б. Сеин, Д.О. Сеин, Е.А. Михеева, А.К. Ильючик // Описание к патенту РФ № 2470658. - бюл. № 36., 2012 г.
2 Способ получения препарата для стимуляции неспецифической резистентности и обмена веществ у животных / О.Б. Сеин, В.Н. Масалов, Д.О. Сеин, А.А. Долженков, Ю.В. Ховалкин, В.Е. Чернов // Описание к патенту РФ № 2473340. - бюл. № 3, 2013 г.
Информация об авторах
Сеин Олег Борисович, доктор биологических наук, профессор, заведующий кафедрой терапии и акушерства ФГБОУ ВПО «Курская ГСХА», тел. 53-15-55.
Стариков Виктор Александрович, аспирант ФГБОУ ВПО «Курская ГСХА», тел. 53-15-55.