HayKOBHH BicHHK .HbBiBCbKoro Ha^OHaibHoro ymBepcurery BeTepHHapHOi MegnuUHH Ta 6i0TexH0iroriH iMeHi C.3. f^H^Koro Scientific Messenger of Lviv National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies named after S.Z. Gzhytskyj
doi: 10.15421/nvlvet7310
ISSN 2518-7554 print ISSN 2518-1327 online
http://nvlvet.com.ua/
УДК 636.7.09:612.1:616-099
Г1 • • • • • • • • л*
1ематолопчн1 i оюхш1чш показники кров1 собак за умов застосування «Неоверму» та протектор1в-антитоксикант1в
Харювсъка державна зооветеринарна академiя, вул. Академiчна, 10, смт. Мала Данилiвка, Дергачiвсъкий район, Хартесъка обл., 62341, Украгна
У статт1 наведет дат щодо впливу на оргатзм собак антигелъмттного та гмуномоделюючого препарату «Неоверм» за умов введення його в шлунок тварин протягом тръох дгб, та резулътати його застосування в комбтацп з препаратами, що м1стятъ антиоксидантн i мембраностабтзуючг речовини. Для захисту оргатзму вгд токсичног дп «Неоверму» вико-ристовували препарати за двома схемами: «Е-Селен» i «Кверцетин», фосфолтдний гепатопротектор «Лесфалъ» i «зелена гречка» (добавка в корм меленого необробленого зерна гречки як природного джерела кверцетину). Поргвняння проводили з контролъною групою та групою, яка отримувала тыъки «Неоверм». Встановлено, що використання «Неоверму» собакам як на 7, так i на 14 добу, мало негативний вплив на гематологгчн показники та активтстъ ферментгв кровг, яю вгдо-бражаютъ функцюналъний стан печiнки. Зокрема встановлено зниження кiлъкостi еритроцитiв та рiвня гемоглобту, а також значне тдвищення активностi дiагностичних ферментiв: алантовог (АЛТ), аспарагтовог (АСТ), гаммаглутамшо-вог (ГГТ) трансфераз та лужног фосфатази (ЛФ). Запропонован обидвi схеми корекцп токсичного впливу препарату «Неоверм» у собак призводило до вiдновлення ендогенних антитоксичних ресурав, тобто до поступовог нормалiзацii гемато-логiчних показниюв та активностi тдикаторних ферментiв кровi (зниженню активностi АСТ, АЛТ, ГГТ, ЛФ i ЛДГ та нормалiзацii кiлъкостi еритроцитiв та гемоглобту), що е тдставою для використання цих препаратiв у якостi протекто-рiв-антитоксикантiв за умов застосування «Неоверму».
Knmnoei слова: Неоверм, собаки, Е-селен, Кверцетин, Лесфалъ, алантамтотрансфераза, аспартатамтотрансфераза, гаммаглутамытрансфераза, необроблене зерно гречки, зелена гречка, лужна фосфатаза.
Харьковская государственная зооветеринарная академия, ул. Академическая, 10, пгт. Малая Даниловка, Дергачевский район, Харьковская обл., 62341, Украина
У статье приведены данные о влиянии на организм собак антигельминтного и иммуномоделирующего препарата «Неоверм» при условии введения его в желудок животных на протяжении трёх суток, и результаты его применения в комбинации с препаратами, которые содержат антиоксидантные и мембраностабилизирующие вещества. Для защиты организма от токсического воздействия «Неоверма» использовали препараты по двум схемам: «Е-Селен» и «Кверцетин», фосфо-липидный гепатопротектор «Лесфаль» и «зеленая гречиха» (добавка в корм дробленого необработанного зерна гречихи как природного источника кверцетина). Сравнения проводили с контрольной группою и группой, которая получала только «Неоверм». Установлено, что использование «Неоверма» собакам как на 7, так и на 14 сутки, имело негативное влияние на гематологические показатели и активность ферментов крови, которые отражают функциональное состояние печени. Это отмечено снижением количества эритроцитов и уровня гемоглобина, а также значительным повышением активно-
Citation:
Zhukova, I.O., Kostyuk, I.O., Svitlychna-Kulak, Yu.S. (2017). Hematological and biochemical blood indices of dogs when using «Neoverm» and protectors-antioxidants. Scientific Messenger LNUVMBT named after S.Z. Gzhytskyj, 19(73), 46-49.
1.О. Жукова, 1.О. Костюк, Ю.С. Свгглична-Кулак [email protected]
Гематологические и биохимические показатели крови собак при применении «Неоверма» и протекторов-антитоксикантов
И.А. Жукова, И.А. Костюк, Ю.С. Светличная-Кулак [email protected]
сти диагностических ферментов: аланиновой (АЛТ), аспарагиновой (АСТ), гаммаглутамиловой ГГТ) трансфераз и щелочной фосфатазы (ЛФ). Обе предложенные схемы коррекции токсичного влияния препарата «Неоверм» у собак приводило к восстановлению эндогенных антитоксических ресурсов, то есть к постепенной нормализации гематологических показателей и активности индикаторных ферментов крови (снижению активности АСТ, АЛТ, ГГТ, ЛФ, ЛДГ и нормализации количества эритроцитов и гемоглобина), что является основанием для использования этих препаратов в качестве протекторов-антитоксикантов при условии применения «Неоверма».
Ключевые слова: Неоверм, собаки, Е-селен, Кверцетин, Лесфаль, необработанное зерно гречихи, «зеленая гречиха», аланинаминотрансфераза, аспартатаминотрансфераза, гаммаглутамилтрансфераза, щелочная фосфатаза.
Hematological and biochemical blood indices of dogs when using «Neoverm»
and protectors-antioxidants
I.O. Zhukova, I.O. Kostyuk, Yu.S. Svitlychna-Kulak [email protected]
Kharkov state zooveterinary academy, Akademichna Str., 1, Mala Danylivka, Kharkiv region, Dergachi district, 62341, Ukraine
The article presents the data on the effect of antihelmintic and imunomodulating drug «Neoverm» on the dogs' body when the drug was administered into the stomach of the animals within three days and the results of its application in the combination with the drugs that contain antioxidant and membrane stabilizing substances. To protect the body from toxic action of «Neoverm» the drugs were used under two schemes: «Е-Selenium» and «Quercetin», phospholipid hepaprotector «Lesphal» and «green buckwheat» (a feed additive - pre-ground raw buckwheat as a natural source of quercetin). The result a were compared with the control group and the group that received only «Neoverm». It has been found out that the use of «Neoverm» for the dogs both on the 7th and 14th days had a negative impact on the hematological parameters and the activity of blood enzymes that reflects the functional state of the liver. In particular, the reduction in the number of erythrocytes and the level of hemoglobin as well as the significant increase in the activity of diagnostic enzymes: alanine (ALT), asparagine (AST), gammaglutamyl (GGT) transferases and alkaline phosphatase (ALP) have been revealed. The proposed schemes to correct the toxic effect of the drug «Neoverm» in dogs led to the restoration of endogenous antitoxic resources, that is, to a gradual normalization of hematological parameters and the activity of indicatory enzymes of blood (the decrease in the activity ofAST, ALT, GGT, ALP and LDH and the normalization of the number of red blood cells and hemoglobin) and that is the basis for the use of the above drugs as protectors-antioxidants when «Neoverm» is used.
Key words: Neoverm, dogs, E-Selenium, Quercetin, Lesphal, alanine aminotransferase, aspartate aminotransferase, alkaline phosphatase,gammaglutamyltransferase, raw buckwheat grain, buckwheat green.
Вступ
Одшею з проблем протипаразитарних заходiв е висока пристосовшсть паразипв до еколопчних умов, наявшсть механiзмiв адаитацп щодо лжарських засо-бiв, яш застосовуються у практищ ветеринарно! ме-дицини. Досить перспективними у цьому напрямку е бюпестициди, похщш авермектишв (Berezovskyi, 2000; Tishyn, 2015). Неоверм - препарат, який взноситься до ще! групи з основною дшчою речовиною iвермектином (сумш пдрованих авермектишв В1а i В1в), у дозi 10 мг/100 см3). Це новий, розроблений в Укрш'ш лшарський препарат широкого спектру до, для профшактики та л1куваиия свшських, домашшх тварин та птищ, що мютить групи сполук, яш проду-куються грунтовими мшрооргашзмами Streptomyces avermitilis, i мае не тшьки протипаразитарну, але й iмуностимулюючу дш.
Однак, о^м терапевтично! протипаразитарно! ак-тивносп «Неоверм», за передозування, може несприя-тливо впливати на оргашзм тварин i викликати клшь чш ознаки отруення i патолопчш змши в органах i системах. Для усунення цього ефекту, актуальним е розробка методiв i засобiв корекцп токсичного впливу на оргашзм ксенобютишв, для чого разом з засобами для дегельмштизацп застосовують рiзнi комбшаци антиоксиданпв, гепато- i кардiопротекторiв, вггамш-них i мшеральних добавок тощо (Zhukova et а1., 2016).
Метою роботи е встановлення особливостей токсично! дп «Неоверму», при застосуванш його собакам впродовж 3 дб, та корекщя цього процесу за допомо-гою речовин з антиоксидантними i мембранопротек-торними властивостями.
MaTepia™ i методи дослвджень
У дослiдi використали 24 безпородш собаки, якi належать Центру поводження з тваринами (м. Харкав). Тварини вшом 1-2 роки, масою 10-15 кг були роздшеш на чотири групи: I група - контрольна (n = 6), II, III i IV - досладш (n = 18). Собаки II, III i IV груп отримували «Неоверм», щоденно впродовж трьох дiб. Препарат вводили у шлунок по 0,6 мг/кг маси (1/10 ЛДга для щурiв). Крiм того, III дослвдна група одержувала одноразово препарат «Е-селен» шдшшрно у дозi 0,04 см3 i «Кверцетин», перорально у дозi 100 мг/кг щодня. Тваринам IV групи застосову-вали гепатопротектор «Лесфаль», внутрiшньовенно двiчi з штервалом у 7 днiв у дозi 5 см3 на 1 голову, а також додавали у корм порошок необробленого зерна гречки (як джерело кверцетину). Змелене зерно запа-рювали перед згодовуванням i додавали до корму в iндивiдуальнiй шлькосп з розрахунку 2 г на 10 кг маси тша. Контрольнiй (I груш) «Неоверм» i препара-ти не задавали.
Клiнiчнi i бiохiмiчнi дослвдження кровi проводили на 7 i 14 добу тсля введения «Неоверму». У тварин
визначали шльшсть еритроципв за допомогою кал1б-рувальних графЫв (Zabolockij and Poljakov, 1965), концентрацш гемоглоб1ну - гемоглобшциашдним методом (Mahan'ko and Gerasimenko, 1974; Kondrahin et al., 1985), кшьшсть лейкоципв тдраховували у камер1 Горяева.
У сироватщ кров1 визначали актившсть ферменпв: лактатдепдрогенази (ЛДГ, КФ 1.1.1.27) - за методом Савелла i Товарека (Kamyshnikov, 2003); лужно! фос-фатази (ЛФ) (К.Ф. 3.1.3.1.), аспартат-амiнотрансферази (АсАТ) (К.Ф.2.6.1.1.) та аланшамь нотрансферази (АлАТ) (К.Ф.2.6.1.2.) за допомогою тест-наборiв фiрми «Фелтат^агностика», м. Дншро; гамма-глутамiлтрансферази (ГГТ) (К.Ф.2.3.2.1) - за допомогою тест-реактивiв фiрми PLIVA-Lachema Diagnostika s.r.o., Чехiя.
Показники активносп ферментiв розраховували за даними спектрофотометричних дослвджень за кольо-ровими реакщями. Результати обробляли статистично
з використанням програм Microsoft Excel, вiрогiднiсть отриманих даних оцiнювали за критерiем Ст'юдента.
Результати та ix обговорення
Протягом дослвду у тварин не вiдмiчено клiнiчних ознак отруення. Встановлено, що на 7 добу ввд початку введения «Неоверму» у кровi собак II дослвдно! групи вiдмiчене зниження кiлькостi еритроцитiв на 29,6%, а через 14 дiб - на 28,4% (Р < 0,05) по вадно-шенню до контролю. При додаванш до рацiону собак «Кверцетину» i «Е-селену» (III група) та комбшацп «Неоверм» + «зелена гречка» + «Лесфаль» (IV група) на 7 i 14 добу дослвдження рiзницi у кiлькостi еритро-цитiв по ввдношенню до контролю не вiдмiчалось, але в порiвняннi з групою, яка одержувала тшьки «Неоверм» вiдмiчено пвдвищення цього показника ввдповь дно на 32,8-34,6% на 7 добу та 24,6-25,8% на 14 добу дослщжень (табл. 1).
Таблиця 1
Гематолог1чш i бшх1м1чш показники KpoBi собак за введення «Неоверму», «Е-селену», «Лесфалю» i
Групи тварин Строки дослщження, доба
7 | 14
Юльюсть еритроципв, Т/дм3
I - Контроль 5,21 ± 0,1 5,33 ± 0,4
II - «Неоверм» 4,02 ± 0,6' 4,15 ± 0,411
III- «Неоверм» + «Кверцетин»+ «Е-селен» 5,34 ± 0,122 5,17 ± 1,402
IV -«Неоверм» + «зелена гречка» + «Лесфаль» 5,41 ± 0,112 5,22 ± 0,42
Концентращя гемоглобшу, г/дм3
I - Контроль 127,2 ± 6,9 134,7 ± 7,2
II - «Неоверм» 96,4 ± 2,61 101,3 ± 9,01
III - «Неоверм» + «Кверцетин»+ «Е-селен» 120,6 ± 2,64 127,0 ± 10,24
IV -«Неоверм» + «зелена гречка» + «Лесфаль» 130,4 ± 3,34 129,2 ± 2,24
Кшьюсть лейкоципв, Г/дм3
I - Контроль 8,7 ± 0,4 9,2 ± 0,3
II - «Неоверм» 9,5 ± 0,2 9,7 ± 0,41
III- «Неоверм» + «Кверцетин»+ «Е-селен» 9,2 ± 0,3 8,7 ± 0,34
IV -«Неоверм» + «зелена гречка» + «Лесфаль» 8,8 ± 0,28 9,3 ± 0,41
Актившсть ЛФ, Од/дм3
I - Контроль 69,7 ± 3,4 62,3 ± 3,1
II - «Неоверм» 229,4 ± 9,63 238,3 ± 11,03
III- «Неоверм» + «Кверцетин»+ «Е-селен» 138,4 ± 2,62,4 124,8 ± 9,32,4
IV -«Неоверм» + «зелена гречка» + «Лесфаль» 122,4 ± 3,31,2 120,2 ± 8,21,2
Актившсть АлАТ, Од/дм3
I - Контроль 21,0 ± 0,3 27,3 ± 0,2
II - «Неоверм» 36,2 ± 0,83 51,6 ± 2,23
III - «Неоверм» + «Кверцетин»+ «Е-селен» 24,4 ± 0,71 29,4 ± 0,71
IV -«Неоверм» + «зелена гречка» + «Лесфаль» 25,7 ± 0,111 30,6 ± 0,5
Актившсть АсАТ, Од/дм3
I - Контроль 13,0 ± 0,3 16,3 ± 0,2
II - «Неоверм» 25,2 ± 0,83 29,6 ± 2,23
III - «Неоверм» +«Кверцетин»+ «Е-селен» 14,4 ± 0,74 20,8 ± 0,74
IV -«Неоверм» + «зелена гречка» + «Лесфаль» 15,6 ± 0,34 19,3 ± 0,54
Актившсть ГГТ, Од/дм3
I - Контроль 1,3 ± 0,1 1,4 ± 0,08
II - «Неоверм» 2,1 ± 0,83 1,9 ± 2,2*
III - «Неоверм» +«Кверцетин»+ «Е-селен» 1,5 ± 0,0722 1,6 ± 0,12
IV -«Неоверм» + «зелена гречка» + «Лесфаль» 1,6 ± 0,12 1,5 ± 0,52
Прим1тки: 1 - р1зниця значень в1рогщна за (Р < 0,05) вщносно контролю, 2 - за (Р < 0,05) вщносно значень II дослщно! групи, 3 (Р < 0,01) вщносно значень у контроле 4 - за (Р < 0,01) вщносно значень у II дослщнш груш тварин
Аналопчш змши вiдмiченi щодо концентраци ге-моглобiну, а саме, зниження вмюту цього показника в nopÎBHHHHÎ з контролем у II rpyni на 32,0% на 7 добу i на 33,0% на 14 добу дослвду. У III i IV груш цей пока-зник був нижчим за контроль у межах 4-6%, але ви-щим у порiвняннi з II групою на 24,5-25,4% на 7 добу i на 24,6-40,3% (Р < 0,01) ввдповщно.
Дослiдження вмiсту лейкоципв у кровi собак не виявило суттево1 рiзницi як у дослщних, так i у конт-рольнш групах тварин i вiн знаходився у межах фiзiо-логiчноï норми.
За перюд дослiду реестрували тдвищення актив-ностi лужно1 фосфатази у II груш тварин, що одержу-вала тiльки «Неоверм» у 3,3 рази на 7 i у 3,8 рази - на 14 добу (Р < 0,01). Показники активносп цього ферменту також були вищими за контроль у III груш на 98,0% - на 7 добу i у 2 рази на 14 добу дослщу та у IV груш - на 75,6% i 88,1% ввдповщно.
У порiвняннi з II групою тварин актившсть ЛФ на 7 i 14 добу була нижчою у III груш на 65,7-90,9% i у IV - на 87,4-97,8% (Р < 0,05) вадповщно.
На 7 i 14 добу дослщжень (табл. 1) у II, III, IV групах собак вiдмiчено збшьшення по вщношенню до контролю активносп АЛТ на 72,4-89,0% (P < 0,01), 16,2-7,7% i 22,4-12,1% (P < 0,05), вщповщно та активносп АСТ на 93,8-81,6% (P < 0,01), 10,8-27,6% i 9,8-8,4% ввдповщно, але у порiвняннi з II групою собак актившсть АСТ на 7 i 14 добу була також нижчою у III груш на 75,0-43,3% i у IV - на 61,5-53,4% (Р < 0,05) вщповвдно.
Схож1 змши помiченi i у показниках активносп гамма-глутамштрансферази. Так, у порiвняннi з контролем вiдмiчено тдвищення активносп ГГТ у груш тварин, що одержувала тшьки «Неоверм» (II) на 61,5%, (Р < 0,01) на 7 добу i на 35,7% (Р < 0,05) - на 14. У порiвняннi з II дослщною групою актившсть цього ферменту була нижчою у III груш на 7 i 14 добу досладжень на 40,0-18,8% i у IV - на 31,3-26,7% (Р < 0,05) вщповвдно.
В цшому можна зазначити, що актившсть вах до-слвджуваних шдикаторних ферменпв за умов засто-сування «Неоверму» в уах групах перевищувала кон-трольш показники i на 7, i на 14 добу дослвду, але у III i IV групах, використання препарапв антиоксидантноï дп i додавання меленого зерна гречки у корм, призве-ло до зниження активносп АЛТ, АСТ, ЛФ i ГГТ.
Так змши активносп ферменпв ввдображають по-кращення функцiонального стану печшки i е результатом протекторноï мембранотропноï дiï антиоксида-нпв на клiтини.
Висновки
1. За результатами дослвджень встановлено, що «Неоверм» у дослвджуванш дозi, спричиняе негатив-ний вплив на гематологiчнi показники, можливо шляхом пригнiчення еритропоезу, що супроводжуеться достовiрним зниженням кшькосп еритроцитiв i вмю-ту в них гемоглоб^.
2. За введення з терапевтичною метою «Неовер-му» вiдмiчено тдвищення активносп ендогенних ферменпв кровi iз групи трансфераз (АЛТ, АСТ, ГГТ) та лужно! фосфатази, що сввдчить про гепатотоксич-ний мехаиiзм впливу цього препарату на оргашзм;
3. Застосування разом iз «Неовермом» препарапв «Е-селен», «Кверцетин», «Лесфаль» та додавання у корм необробленого меленого зерна гречки дае ефект ввдновлення ендогенних антитоксичних ресурсiв (зниження активносп iндикаторних ферментiв печш-ки нормалiзацil кiлькостi еритроцитiв та гемоглоб^) кровi собак i е пвдставою для використання цих препарапв у спрямованiй протекторнiй дп.
Бiблiогpaфiчнi посилання
Berezovskyi, A.V. (2000). Likoopirnist zooparazytiv ta deiaki shliakhy yii podolannia. Veterynarna medytsyna Ukrainy. 3, 33-34 (in Ukrainian). Tishyn, O.L. (2015). Farmako-toksykodynamika kompleksnoho protyparazytarnoho preparatu na osnovi aversektynu S i klozantelu ta odyn iz shliakhiv zmenshennia yoho pobichnoho vplyvu: avtoref. dys. ... doktora veter. nauk, 40 (in Ukrainian). Lystivka-vkladka dlia zastosuvannia neovermu. - TOV
«AT Biofarm», 2013.(in Ukrainian). Zhukova, I.O., Svitlychna-Kulak, Yu.S., Lonhus, N.I. (2016). Korektsiia stanu antyoksydantnoho zakhystu u sobak za otruiennia neovermom. Naukovyi visnyk LNUVMBT imeni S.Z Hzhytskoho. 18, 3(70), 95-99 (in Ukrainian).
Zabolockij, V.T., Poljakov, V.F. (1965). Metodika podscheta jeritrocitov na kolorimetre tipa FJeK-M. Tr. Vsesojuz. in-ta jeksperim. veterinarii. 31, 281-286 (in Russian).
Kondrahin, I.P., Kurilov, N.V., Malahov, A.G. (1985). Klinicheskaja laboratornaja diagnostika v veterinarii : spravochnoe izdanie. M.: Agropromizdat, 143-145 (in Russian).
Mahan'ko, A.V., Gerasimenko, V.G. (1974). Tablicy dlja opredelenija cvetnogo pokazatelja i soderzhanija gemoglobina v jeritrocite sel'skohozjajstvennyh zhivotnyh. K.: Urozhaj (in Russian). Kamyshnikov, V.S. (2003). Kliniko-biohimicheskaja laboratornaja diagnostika : Spravochnik: V 2 t. Mn: Interpresservis, 1 (in Russian). Metod vyznachennia aktyvnosti luzhnoi fosfatazy u syrovattsi krovi ta tkanynakh : prospekt firmy «Filisit Diahnostyka» (Ukraina), 2 (in Ukrainian). Vyznachennia aktyvnosti alanin- i
aspartamaminotransferaz u syrovattsi krovi ta tkanynakh metodom AlAT-mikro ta AsAT-mikro : prospekt firmy «Filisit Diahnostyka» (Ukraina), 2 (in Ukrainian).
Metod vyznachennia aktyvnosti hamma-hlutamiltransferazy: prospekt firmy «PLIVA-Lachema Diagnostika» s.r.o. Karasek 1, 621 33 Brno, CZ, 2 .(in Ukrainian).
Стаття надiйшла до редакцп 16.03.2017