CC BY
5
Определение фурадана и его метаболитов в биосредах проводили следующим образом.
При анализе крови цельную кровь собирали в пробирку, смоченную 5 % раствором лимоннокислого натрия. 1 мл цитратной крови помещали в пробирку и приливали 2 мл дистиллированной воды для разрушения эритроцитов, тщательно перемешивали и переливали в делительную воронку емкостью 250 мл. Экстрагировали пробу дважду смесью хлороформа и диэтилового эфира по 8 мл в течение 15 мин на шюттель-аппара-те. После отделения жидкостей нижний слой сливали в круглодонную колбу емкостью 50 мл со шлифом. Экстракт пропускали через слой в 1 см безводного сернокислого натрия, помещенного в воронку. Колбу с объединенным экстрактом подсоединяли к холодильнику и под вакуумом, для создания которого использовали водоструйный насос, при температуре 40°С отгоняли растворитель до объема 0,2—0,3 мл.
Для анализа мочи брали 5 мл из суточного количества мочи. Дважды экстрагировали смесью хлороформа и диэтилового эфира по 8 мл в течение 15 мин на шюттель-аппарате. Эстракт объединяли, высушивая над сернокислым натрием, в колбе емкостью 50 мл и отгоняли под вакуумом до объема 0,2—0,3 мл. Концентрированный экстракт из проб крови и стандартные растворы фурадана и его метаболитов (0,5—20 мкг) при помощи стеклянного капилляра наносили на хроматографическую пластинку «Силуфол». Сосуд, где находился экстракт, тщательно обмывали небольшими порциями ацетона (0,3 мл) и наносили в центр пятна. Пластинку хроматографи-ровали в подвижном растворителе бензол — этил-ацетат в соотношении (13:7) и высушивали на воздухе при комнатной температуре до исчезновения запаха растворителей, затем обрабатывали 15% раствором едкого калия в 60% этанола, через 2—3 мин — раствором п-нитрофенилдиазо-нием.
Исследование экстракта мочи проводили с помощью двумерной хроматографии. На хроматографическую пластинку на расстоянии 15 мм от левого края и 15 мм от нижнего края капилляра с помощью капиллярной пипетки наносили исследуемую пробу. С правой стороны пластин-
ки на расстоянии 15 мм от нижнего края микро-пипетой наносили стандартные растворы фурадана, первого, четвертого и пятого метаболитов. Отделяли пробу от стандарта вертикальной чертой, которая находится на расстоянии 115 мм от левого края пластинки. Пластинку с нанесенными растворами помещали в камеру для хрома-тографирования, куда за 10—15 мин до разгонки наливали смесь растворителей хлороформ — днэтнловый эфир (18:8) для фурадана и первого метаболита, в другую камеру — хлороформ — диэтиловый эфир (25:7) —для фурадана, четвертого и пятого метаболитов. Пластинку ставят левым краем в растворитель так, чтобы она была погружена не более чем на 0,5 см. После того как фронт растворителя поднимется до проведенной черты, пластинку вынимают из камеры и оставляют на несколько минут на воздухе для испарения растворителя. После того как пластинка высохнет, ее повторно хроматографируют в системе для определения фурадана и 3-оксикар-бофурана гексан — ацетон в соотношении 15:10 для фурадана, З-окси-7-фенола и З-кето-7-фено-ла — бензол — этилацетат (19,5:10,5), повернув на 90° относительно первой разгонки. После того как растворитель поднимется на 10 см от старта, пластинку вынимают и высушивают на воздухе до полного испарения следов растворителя. Пластинку обрабатывают проявляющими реактивами: 15% раствором едкого кали в 60% этаноле, через 2—3 мин — п-нитрофенилдиазонием. При этом на месте локализации препаратов проявляются пятна сиреневого цвета. Применение указанных систем подвижных растворителей позволяет разделить пестициды на хроматограмме.
Количественное определение проводили путем сравнения интенсивности окраски и размеров пятен проб и стандартных растворов. Чувствительность метода 0,5 мкг для фурадана и его метаболитов в анализируемых пробах мочи и крови.
Литература. Оськина В. Н. — Гиг. и сан., 1981, № 9, с. 45—46.
2. Wogn L., Fisher F. M. — J. Agricult. Food Chem., 1975, v. 23, p. 315—316.
Поступила 17.11.81
УДК в13.298:878:74в.22|-074:547.538.Г4|
В. Ф. Новицкий, А. Л. Перцовский
ГАЗОХРОМАТОГРАФИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ МИКРОКОЛИЧЕСТВ СТИРОЛА В РАСТВОРАХ, ИМИТИРУЮЩИХ ПИЩЕВЫЕ ПРОДУКТЫ
Белорусский НИ санитарно-гигиенический институт, Минск
Материалы, изготовленные из полимерных смол на основе стирола, являются одними из самых дешевых пластмасс и находят широкое применение во многих-отраслях народного хозяйства и в быту. •''>)
Предупредительный санитарный надзор за выделением стирола из бытовых материалов предусматривает допустимую концентрацию мономера (ДКМ) в модельных средах, находившихся как в непосредственном, так и опосредован-
и
ß
Газожидкостные хроматограм-
мы дибромида стирола. а — дибромид стирола в н-гексане; б — гекса новый экстракт стирола из ыодолыюй среды; пики: I — и-гсксан, 2 — дибромид стирола.
4 2 0 4 2 0
ном через воздух контакте с полистиролом, не превышающую 0,01 мг/л (И. А. Жашкова; Т. В. Чернова). Определение указанного мономера в таких малых концентрациях — трудная задача вследствие их недостаточной избирательности, чувствительности и сложности. Более эффективными для этой цели оказались хроматографиче-ские методы. Однако применение газохроматогра-фического метода с использованием пламенно-ионизационного детектора при предварительном концентрировании стирола (Л. И. Петрова и соавт.) достаточно чувствительно при содержании мономера в растворе до 0,007 мг/л, что далеко не всегда достаточно при определении стирола на уровне запаха.
Наиболее чувствительным методом для обнаружения стирола на таком уровне оказалось газо-хроматографическое определение мономера в виде его дибромпроизводного. При этом используется электронно-захватный детектор, чувствительность которого к бромпроизводным примерно в 500 раз выше, чем чувствительность пламенно-ионизационного детектора к самому стиролу (СоэЫка).
Целью наших исследований явилась разработка высокочувствительного газохроматографиче-ского метода определения следовых количеств стирола, мигрирующего в модельные среды, имитирующие пищевые продукты. Сущность предлагаемого метода заключается в концентрировании стирола из водной среды с помощью растворителя, перевода мономера в дибромид и последующего анализа полученного раствора на хроматографе с электронно-захватным детектором. Из исследованных нами растворителей (пентан, н-гексан, гептан, изооктан, эфир, бензол, толуол, бутилацетат) был выбран н-гексан. В процессе всей разработки методики ГЖХ-анализа как при извлечении стирола из модельных сред, так и при последующем бромировании вытяжки мономера была установлена целесообразность его применения.
Реакцию бромировання стирола, разработанную при условии экстрагирования его неводным растворителем, проводили следующим образом. 200 мл модельной среды с определенной концентрацией стирола в делительной воронке экстрагировали на аппарате для встряхивания тремя пор-
циями н-гексана (по 7 мл каждая) в течение 15 мин. Объединенный экстракт доводили до метки в мерной колбе на 25 мл и бромировали 5 мл его 0,25 мл 1—2 % свежеприготовленной бромной воды в пробирке со шлифом при встряхивании на водяной бане при 45±2 °С в течение 10 мин. Затем 5 мкл реакционной смеси вводили в испаритель хроматографа.
Из испытанных нами неподвижных фаз наиболее приемлемыми оказались силиконовое масло ДС-550 (5 %) и полифенилсиликоновое масло Лукоонл МФ (10 % от массы твердого носителя силанизированного хроматона N—AW 0,20— 0,25 мм). Условия разделения на обеих фазах были идентичными (температура детектора 240°С; температура испарителя 250°С, скорость газа-носителя — азота особой частоты 60 мл/мин; скорость диаграммной ленты потенциометра 600 мм/ч), за исключением температуры, при которой выдерживалась стеклянная колонка длиной 1,5 м и диаметром 3,5 мм. Колонка с Лукооилом МФ термостатировалась при 160 °С, а с ДС-550 —при 180 °С.
Минимально определяемое количество 1,2-ди-бромстнрола на обеих насадках колеблется в пределах 0,005—0,01 мкг, что в пересчете на стирол дает возможность определять его по предлагаемому методу в модельных средах с концентрациями 0,0002—0,0004 мкг/мл (мг/л) и выше. Чувствительность метода может быть повышена на порядок путем концентрации гексановых вытяжек. Количественный анализ 1,2-дибромсти-рола выполняли методом абсолютной калибровки по площадям пиков. Для построения калибровочных кривых проводили анализ соответствующих модельных сред путем добавки в них спиртового раствора стирола известной концентрации. В области концентраций дибромида стирола 0,005—0,1 мг/л Калибровочная кривая имела линейный характер. Ошибка ГЖХ-анализа растворов дибромида стирола не превышала 1,4 %. Характерная хроматограмма, получаемая при определении стирола в виде его дибромида, приведена на рисунке.
Важнейшие условия успешного применения предлагаемого метода — точность и воспроизводимость дозировки проб (5 мкл). Требуется также строгое соблюдение тождественности условий хроматографирования при калибровке прибора и анализе проб. При соблюдении этих условий ошибка определения стирола в растворах, имитирующих пищевые продукты, не превышает 4 %. Разработанную методику применяли в натурных условиях как для анализа вытяжек модельных растворов из полистирольных пластиков (АБС-пластик 110Э, ударопрочный полистирол 070039), используемых при изготовлении внутренней облицовки и деталей камер бытовых холодильников, так и для анализа этих же растворов путем опосредованного через воздух контакта с внутренним шкафом холодильника.
В качестве модельных растворов, имитирующих пищевые продукты, использовали дистиллированную воду, 5 % раствор хлористого натрия, 0,3 % раствор молочной кислоты, 2 % раствор лимонной кислоты и 2 % раствор уксусной кислоты, содержащей 2 % поваренной соли. В растворах был обнаружен стирол в концентрациях от 0,0002 до 0,005 мг/л.
Литература. Жашкова И. А. — В кн.: Научно-практическая конф. молодых гигиенистов и санитарных врачей. 12-я. Материалы. М„ 1969, с. 271—272. Петрова Л. И.. Бойкова 3. К.. Гуричева 3. Г. — В кн.: Са-нитарно-химнческий анализ пластмасс. Л., 1977, с. 74—76. Чернова Т. В. — Вопр. питания, 1971, № 5, с. 56—58. возЫка /.—Л. СгошаЬгй., 1977, у. 136, р. 95—103.
Поступила 21.12.81
УДК 613.95-02:613.1
Т. С. Хачатрян
МЕТОДИЧЕСКИЕ ПОДХОДЫ К ИЗУЧЕНИЮ КОМПЛЕКСНОГО ВЛИЯНИЯ ФАКТОРОВ СРЕДЫ НА СОСТОЯНИЕ ЗДОРОВЬЯ
ДЕТЕЙ
Ереванский государственный институт усовершенствования врачей
Изучение комплексного влияния факторов окружающей среды на состояние здоровья населения, разработка методики подобных исследований, а также выявление более информативных показателей состояния среды и здоровья являются важнейшими направлениями современных научных исследований (Г. И. Сидоренко; К. А. Буштуева; М. Г. Шандала и Я. И. Звиняцков-ский, и др.). Существующие методы исследования комплексного влияния факторов среды на здоровье населения предполагают изучение его в различных районах с выраженным различием факторов внешней среды. При этом важным требованием является отбор одинаковых в социаль-но-гигиеническом отношении групп наблюдения, различающихся лишь проживанием в районах с разным уровнем загрязнения среды, что позволит обоснованно исключить влияние на состояние здоровья населения ряда биологических и социально-гигиенических факторов.
Известно, что на состояние здоровья детей влияет не только и не столько загрязнение среды, сколько ряд биологических и социально-гигиенических факторов (К. А. Буштуева и И. С. Случан-ко). Окружающая среда, представляя «комплекс физических, химических, биологических, а также социальных факторов»в реальных условиях оказывает на человека комплексное воздействие. В связи с этим можно предположить, что биологические и социально-гигиенические факторы могут усиливать или, наоборот, ослаблять воздействие остальных факторов среды на состояние здоровья.
Цель настоящей работы — уточнение методики изучения комплексного влияния среды на здоровье населения. Кроме того, в нашу задачу входила оценка роли отдельных факторов и их совокупности в комплексном влиянии среды на здоровье детей, а также сравнение информативности ряда показателей среды и здоровья населения.
1 Влияние окружающей среды на здоровье человека. Изд. ВОЗ. Женева, 1974. с. 15.
Исследования проводили в одном из городов Армении у детей в возрасте 3—7 лет, посещающих детские дошкольные учреждения различных микрорайонов города. Из факторов среды учитывали те, по которым выявлялись количественные различия — в частности, по загрязненности атмосферного воздуха (оценивающейся по индексу опасности, предложенному М. А. Пинигиным и со-авт.; по коэффициенту К-проценту средних проб, превышающих ПДК; в баллах согласно рекомендациям М. Г. Шандалы и Я. И. Звиняцковского; по коэффициенту суммации — сумме отношений средней концентрации к соответствующим ПДК), по высоте над уровнем моря, климатическим условиям (по 7 показателям), ряду планировочных факторов (по 5). Наряду с этим учитывали различия в условиях жизни обследованных детей, выявленных с помощью специальных социально-гигиенических методов исследования. Были выделены 8 факторов для включения в корреляционный анализ (Т. С. Хачатрян и соавт.). Несмотря на то что уровень медицинского обслуживания в различных микрорайонах города был почти равноценным, в корреляционный анализ включили также ряд параметров его качества (обеспеченность врачами на 10 000 детей, степень специализации поликлинического приема и диспансеризации в раннем возрасте).
При оценке состояния здоровья детей (около 4000 детей, родившихся и проживших полные 3 года в данном районе при условии, что родители обращались в поликлинику по поводу каждого заболевания) рассматривали все показатели, которые можно было получить на основании карты развития, а также данные дополнительных антропометрических исследований, полученных в динамике развития детей в дошкольных учреждениях (около 50 показателей). Одновременно использовали интегральный показатель комплексной оценки «физическое состояние» (Т. С. Хачатрян и соавт.). Физическое развитие оценивали с помощью соответствующих таблиц по со-
