CC BY
43
© В.М.Брюханов, Я.Ф.Зверев, В.В.Лампатов, А.Ю.Жариков, О.В.Азарова, Ю.Г.Мотин, 2008 УДК 616.613-003.7:616.61-072.72]-092.4
В.М. Брюханов, Я.Ф. Зверев, В.В. Лампатов, А.Ю. Жариков, О.В. Азарова, Ю.Г. Мотин
ФУНКЦИЯ ПОЧЕК В УСЛОВИЯХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ОКСАЛАТНОГО НЕФРОЛИТИАЗА
V.M. Bryukhanov, Ya.F. Zverev, V.V. Lampatov, A.Yu. Zharikov, O.V. Azarova, Yu.G. Motin
FUNCTION OF THE KIDNEYS UNDER CONDITIONS OF EXPERIMENTAL OXALATE NEPHROLITHIASIS
Кафедры фармакологии и гистологии Алтайского государственного медицинского университета, Россия
РЕФЕРАТ
ЦЕЛЬЮ ИССЛЕДОВАНИЯ явилось изучение функции почек крыс в условиях экспериментального оксалатного нефролити-аза. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ. Самцы крыс Wistar на протяжении 3 недель получали в виде питья 1%-ный раствор этиленг-ликоля. В моче, собранной за сутки, определяли концентрацию оксалата, кальция и фосфора, а также активность маркерных ферментов лактатдегидрогензы (ЛДГ), у-глютамилтрансферазы (ГГТ) и N-ацетил-р-й-глюкозаминидазы (НАГ). Гистохи-мически методом Косса на почечных срезах крыс определяли наличие кальций-позитивных отложений. РЕЗУЛЬТАТЫ. Ежедневное употребление крысами этиленгликоля сопровождалось развитием гипероксалурии, что обусловлено повышенным образованием в печени ионов оксалата и созданием оксалатного сверхнасыщения в канальцевой моче. В ходе экспериментов выяснилось, что ферментативная активность мочи на фоне этиленгликоля существенно увеличивалась. Активность НАГ выросла почти в 20 раз, ГГТ - в 3,7 раза. Активность ЛДГ, повышавшаяся к исходу первой недели в 7,5 раза, затем постепенно возвращалась к исходному уровню. Эти изменения свидетельствуют о повреждении мембран клеток канальцев, сопровождающимся цитолизом, а также о выраженном нарушении функции почечных канальцев. Морфологическое исследование срезов почек показало наличие многочисленных кальций-позитивных депозитов, локализованных в основном на поверхности почечного сосочка. ЗАКЛЮЧЕНИЕ. В результате экспериментов с длительным потреблением крысами этиленгликоля получены неопровержимые свидетельства развития кальций-оксалатного нефролитиаза. На это указывают развившиеся гипероксалурия, ферментурия и наличие кальций-позитивных включений на поверхности почечных сосочков. Перечисленные изменения являются признаками экспериментальной мочекаменной болезни у крыс.
Ключевые слова: этиленгликоль, нефролитиаз, функция почек. ABSTRACT
THE AIM of the investigation was to study kidney functions in rats under conditions of experimental oxalate nephrolithiasis. MATERIAL AND METHODS. Male Wistar rats were given drinking water with 1% solution of ethylene glycol during 3 weeks. The concentration of oxalate, calcium and phosphorus was determined in daily urine. Activity of marker enzymes lactate dehydrogenase (LDG), y-glutamil transferase (GGT) and N-acetyl-p-D-glucosaminidase (NAG) was also determined. The presence of calcium-positive deposits on kidney slices was determined by the Koss histological method. RESULTS. Daily using ethylene glycol by rats was followed by the development of hyperoxaluria, which was due to increased formation of oxalate ions in the liver and appearance of oxalate supersaturation in tubule urine. In the experiments it was shown that enzymatic activation of urine against the background of ethylene glycol was substantially increased. Activity of NAG became 20 times higher, GGT - 3.7 times higher. LDG activity which had become 7.5 times higher by the end of the first week, then gradually returned to the initial level. These changes are evidence of injuries to the tubule cell membranes, followed by cytolysis and of pronounced impairment of the renal tubule function. Morphological investigation of kidney slices has detected numerous calcium-positive deposits localized mainly on the renal papilla surface. CONCLUSION. Experiments with continuous intake by rats of ethylene glycol have given an irrefutable proof of progression of calcium-oxalate nephrolithiasis. It points to the developed hyperoxaluria, fermenturia and the presence of calcium positive inclusions on the renal papilla surface. The above changes are signs of experimental urolithiasis in rats. Key words: ethylene glycol, urolithiasis, kidney function.
ВВЕДЕНИЕ
Оксалатный нефролитиаз - наиболее часто встречающийся тип мочекаменной болезни (МКБ). В современном мире на его долю приходится более 50% пациентов, страдающих МКБ [1-3]. По-
этому проблема лечения и профилактики оксалатного нефролитиаза остается весьма актуальной, несмотря на появление в последние годы новых достаточно эффективных и радикальных методов разрушения и удаления мочевых конкрементов.
Тем не менее, эти методы не ликвидируют причину заболевания, что обусловливает продолжение поисков лекарственных средств, обеспечивающих возможности патогенетического лечения МКБ. Одной из предпосылок этого является создание адекватных моделей заболевания для изучения новых терапевтических подходов в условиях доклинических испытаний [4-9]. Целью настоящей работы явилось моделирование мочекаменной болезни у крыс с помощью этиленгликоля и исследование функции почек в условиях экспериментального кальций-оксалатного нефролитиаза.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Эксперименты проводились на самцах крыс '^аг, которые находились в индивидуальных клетках, приспособленных для сбора мочи в условиях стандартной диеты. В течение трех недель животные получали в виде питья 1%-й раствор этиленг-ликоля. Через каждые 7 дней производили суточный сбор мочи, в которой определяли показатели суточной экскреции ионов оксалата, фосфата и кальция. Оксалаты в моче определялись методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием в качестве элюентов 80%-го раствора ацетонитрила при градиенте от 0 до 100% и фосфатного буфера (рН=7). Детектирование проводилось при длине волны Х=210 нм. Для расчетов применялся калибровочный график, который строили, используя стандартный раствор оксалат-иона в концентрации 4 мг/мл. Определение фосфатов осуществляли методом фотоэлект-роколориметрии (ФЭК) при длине волны ^=590 нм. Методика основана на реакции образования фос-форно-молибдено-ванадиевого комплекса, который имеет характерную желтую окраску. Ионы кальция в моче определялись методом пламенной фотометрии.
Одновременно в моче производили измерение ферментативной активности. В качестве показателей были выбраны три фермента: лактатдегид-рогеназа - ЛДГ (КФ1.1.1.27), у-глютамилтрансфе-раза - ГГТ (КФ2.3.2.2), ^ацетил-р-О-глюкозами-нидаза - НАГ (КФ3.2.1.52), которые являются типичными маркерами повреждения эпителия почечных канальцев. Активность ЛДГ определялась методом спектрофотометрии при длине волны ^=340 нм. В основе метода лежит реакция восстановления пирувата до молочной кислоты. Эта реакция катализируется ЛДГ, а ее скорость пропорциональна активности фермента. Каталитическая активность ГГТ, для измерения которой использовался метод ФЭК, рассчитывалась пропорционально количеству п-нитроанилина, образующегося в
результате реакции взаимодействия Ь-у-глутамил-3-карбокси-4-нитроанилида и глицилглицина. Детектирование п-нитроанилина осуществляли на фотоэлектроколориметре при длине волны ^=400 нм. Определение НАГ проводилось по модифицированной методике МагисИ [10]. Согласно этой методике активность НАГ пропорциональна количеству п-нитрофенола, образующегося в результате реакции гидролиза п-нитро-Ы-ацетил-р-глюко-замида, которую катализирует указанный фермент. Измерение количества п-нитрофенола производилось спектрофотометрически при длине волны ^=400 нм. Активность всех определяемых ферментов рассчитывалась относительно концентрации креатинина в моче, выражавшейся в мг/л, и обозначалась в единицах, как и/мг креатинина.
Морфологическое исследование почек крыс производили с использованием светооптической микроскопии. В качестве фиксирующей жидкости применяли 10%-й раствор формалина. Для оценки изменений коркового и мозгового вещества почки срезы ткани толщиной 4-6 мкм окрашивали гематоксилином и эозином. На срезах толщиной 10-15 мкм гистохимическим методом Косса определяли наличие соединений кальция. В результате фиксируются отложения кальция черного цвета, ядра - красные, остальные тканевые структуры - розовые. Увеличение Х100, Х400.
Полученные результаты обрабатывали статистическим методом вариационных рядов с использованием критерия Стьюдента.
РЕЗУЛЬТАТЫ
Применение этиленгликоля привело к развитию у всех животных выраженного оксалатного нефро-литиаза. Динамика экскреции с мочой исследуемых ионов представлена в табл. 1.
Из таблицы видно, что длительное потребление этиленгликоля приводило к существенному увеличению экскреции с мочой ионов оксалата. Уже к концу первой недели эксперимента выделение солей щавелевой кислоты в 2,3 раза превосходило исходный уровень. К окончанию же периода наблюдения экскреция оксалатов была выше контрольных значений более чем в 3 раза. Экскреция других фиксируемых ионов не изменялась столь существенно, хотя была подвержена довольно значительным колебаниям. По всей вероятности, последнее было обусловлено соответствующими колебаниями скорости клубочковой фильтрации (СКФ), зафиксированными по ходу эксперимента. Так, к концу второй недели наблюдения падение СКФ обусловило снижение экскреции всех определяемых ионов.
Таблица 1
Динамика экскреции ионов кальция, фосфора и оксалата у крыс в условиях приема
этиленгликоля (X±m)
Показатель Исходные данные Первая неделя Вторая неделя Третья неделя
Экскреция креатинина, мкМ/сутки 9,8±1,19 7,7±1,85 5,0±0,56* 12,3±2,19
Экскреция кальция, мМ/сутки 2,5±0,43 3,5±0,77 1,4±0,30 1,9±0,23
Экскреция фосфора, мг/сутки 16,7±1,78 28,3±5,49 13,4±2,76 20,1±2,22
Экскреция оксалата, мг/сутки 28,4±3,97 66,0±11,5* 53,8±10,1* 91,8±13,5*
Примечание: здесь и в таблице 2 звездочками обозначены достоверные отличия от исходных данных.
Таблица 2
Динамика ферментурии у крыс в условиях приема этиленгликоля (X±m)
Показатель Исходные данные Первая неделя Вторая неделя Третья Неделя
Экскреция креатинина, мкМ/сутки 9,8±1,19 7,7±1,85 5,0±0,56* 12,3±2,19
Экскреция ЛДГ 0,32±0,02 2,42±0,21* 1,71±0,29* 0,38±0,08
Экскреция ГГТ 0,70±0,14 1,39±0,24* 2,60±0,28* 2,42±0,20*
Экскреция НАГ 0,0077±0,0021 0,13±0,013* 0,16±0,019* 0,13±0,018*
Примечание: количественные показатели экскреции всех ферментов даны в пересчете на экскрецию креатинина и приведены в единицах U/мг креатинина в сутки.
В табл. 2 представлены результаты изменения выделения из организма основных маркерных ферментов, показывающих наличие повреждения почечного эпителия, по ходу употребления крысами этиленгликоля. Из данных, представленных в таблице, следует, что применение этиленгликоля привело к развитию выраженной ферментурии. Уже к исходу первой недели эксперимента экскреция ЛДГ проявила наивысшую чувствительность в сравнении с другими ферментами, достигнув максимума. Затем в процессе адаптации почки к патологическим условиям активность лактатдегид-рогеназы в моче постепенно снижалась и к окончанию третьей недели практически возвращалась к исходным значениям. Динамика ГГТ несколько отличалась. Для этого фермента было характерно менее интенсивное нарастание экскреции с мочой, когда через неделю после начала приема этиленгликоля этот показатель «лишь» в 2 раза превос-
Рис. 1. Вершина почечного сосочка. Негативная реакция на соединения кальция. Окраска по методу Косса. х200.
ходил исходный уровень. Затем выделение у-глю-тамилтрансферазы продолжало возрастать, превосходя исходные значения уже в 3,8 раза, и устанавливалось примерно на этом же уровне вплоть до конца периода наблюдения. Наиболее впечатляющий прирост был характерен для экскреции НАГ. Показатель активности этого фермента в моче, установившись к концу первой недели на уровне в 1315 раз превышающем контрольный, сохранялся в этих пределах на протяжении всего эксперимента.
Таким образом, в экспериментах с длительным приемом крысами этиленгликоля было зафиксировано резкое увеличение экскреции с мочой таких маркерных ферментов, как лактатдегидрогеназа, у-глютамилтрансфераза и ^ацетил-р-О-глюкоза-минидаза, что свидетельствует о значительных нарушениях функции почек. Косвенно это может указывать и на прогрессирование мочекаменной болезни.
Рис. 2. Скопление кальциевых депозитов на поверхности эпителия и на вершине почечного сосочка. Спущенный эпителий и белковые депозиты в просвете собирательных трубок. Окраска по методу Косса. х200.
Прямые доказательства развития нефролити-аза в ходе наших экспериментов были получены в результате морфологического исследования. На рис. 1 представлен срез почки интактной крысы, на котором достоверного наличия кальциевых депозитов не выявляется. На рис. 2 представлен типичный срез почки крысы, на протяжении трех недель потреблявшей этиленгликоль. На срезе отмечено наличие «кальцнй-позитивного материала» (до 100 и более включений в поле зрения) неправильной формы, часто с выпячиваниями в интер-стиций коркового и мозгового вещества почки с преимущественной локализацией в интерстиции почечного сосочка, на вершине сосочка по поверхности эпителия. В единичных случаях отмечено наличие «кальций-позитивного материала» в просвете собирательных трубок. Средний размер Са-позитивных включений составил 10,1±2,79 мкМ.
ОБСУЖДЕНИЕ
Известно, что одним из основных звеньев патогенеза мочекаменной болезни является образование в почечных канальцах нерастворимых соединений, которые при определенных изменениях физико-химических условий окружающей среды, накапливаясь, могут связываться между собой и формировать крупные кристаллы (камни), повреждающие стенки канальцев. При этом более 80% всех почечных камней состоят из нерастворимых солей кальция, чаще всего представленных окса-латом. Поэтому при моделировании нефролитиаза создаются такие экспериментальные условия, которые провоцируют усиленное образование в почках соли СаС204. Одним из таких условий является вторичная искусственная гипероксалурия. По современным представлениям вторичная гиперок-салурия может возникать в результате применения этиленгликоля [11,12]. Этиленгликоль - это низкомолекулярный двухатомный спирт, одним из продуктов метаболизма которого является оксалат-ион. Попадая в организм, этиленгликоль окисляется до глиоксалевой кислоты, из которой затем образуется оксалат-ион. Этот процесс протекает в цитоплазме и пероксисомах гепатоцитов, где катализируется двумя разными ферментами: лактатдегидрогеназой и гликолатоксидазой соответственно [12,13]. Поэтому хроническое применение данного вещества приводит к развитию вторичной гипероксалурии
Проведенные нами эксперименты показали, что в условиях длительного непрерывного употребления крысами 1%-го раствора этиленгликоля происходит значительное увеличение экскреции окса-латов с мочой. Исходя из полученных результа-
тов, можно с полным основанием полагать, что резкое увеличение выделения оксалатов из организма (гипероксалурия) обусловило создание их высокой концентрации в просвете почечных канальцев вплоть до сверхнасыщения, что, в свою очередь, обеспечило условия для выпадения кристаллов и последующего образования камней.
Как известно, существуют механизмы гормональной регуляции обмена фосфора и кальция. Поэтому мы изначально предполагали, что на фоне употребления крысами этиленгликоля, который не влияет прямо на этот обмен, скорее всего не произойдет существенных изменений динамики каль-цийуреза. Это предположение подтвердилось в ходе наших экспериментов - все изменения почечной экскреции фосфора и кальция носили недостоверный характер, хотя выделение этих ионов из организма и подвергалось колебаниям. Тем не менее, проведенные опыты показали, что количество ионов Са2+, выделяющегося за сутки с мочой в условиях длительного непрерывного употребления крысами этиленгликоля, вполне достаточно, чтобы прореагировать с повышенным количеством оксалата и образовать нерастворимую соль СаС204 в почечных канальцах. Наши расчеты показали, что согласно стехиометрии данной реакции для связывания 90 мг оксалат-иона, т.е. того количества, которое характеризует максимальный уровень гиперокслурии в наших экспериментах, необходимо лишь 1,02 ммоль ионов кальция, а мы зафиксировали значения, колебавшиеся в диапазоне 1,4 - 3,5 ммоль/сутки.
Важно отметить, что изменения экскреторной активности почек крыс на фоне этиленгликоля сопровождались увеличением ферментативной активности мочи. Одним из ключевых ферментов, позволяющих оценить функциональное состояние нефрона, является ^ацетил-р-О-глюкозаминида-за. Активность этого фермента локализована в ли-зо сомах. При этом НАГ, имея достаточно большую молекулярную массу (130-160 кОа), в норме практически не проникает через базальную мембрану и не обнаруживается в моче [14]. Эти данные нашли подтверждение и в наших экспериментах - в контроле активность НАГ была очень незначительна. Однако уже к исходу первой недели употребления крысами этиленгликоля она возросла многократно и затем на протяжении всего эксперимента оставалась на неизменно высоком уровне. Учитывая, что выделение лизосомальных ферментов в мочу может происходить без нарушения целостности плазматической мембраны клеток канальцев, т.е. путем внутриклеточной секреции и эк-зоцитоза, активность НАГ в моче может свиде-
тельствовать в первую очередь о функциональном нарушении почек [14-20]. Поэтому мы полагаем, что зафиксированная в ходе наших опытов повышенная активность данного фермента объясняется серьезной дисфункцией почечных канальцев.
В ходе наших экспериментов наблюдалось увеличение активности в моче еще одного фермента - у-глютамилтрансферазы. Подобная картина наблюдалась и другими авторами [16, 21, 22]. Гам-ма-глютамилтрансфераза - мембранно связанный фермент, который встречается во многих паренхиматозных органах. Однако наибольшее его количество обнаруживается в почках. Отметим, что в условиях ежедневного употребления крысами этиленгликоля наблюдался существенный последовательный рост активности ГГТ на протяжении всего опыта, что, по-видимому, обусловлено повреждением мембран клеток почечных канальцев, возникающим в наших экспериментальных условиях.
Картину изменения ферментативной активности мочи крыс на фоне этиленгликоля дополняет динамика активности лактатдегидрогеназы. Оказалось, что первая неделя эксперимента сопровождалась почти пятикратным увеличением таковой, что может свидетельствовать о значительном цитолизе клеток канальцев, поскольку ЛДГ - это ци-тозольный фермент, и в моче его повышенная активность наблюдается лишь в условиях разрушения клеток. Усиление высвобождения ЛДГ из клеточных культур под влиянием кристаллов ок-салата и повышение активности фермента в моче in vivo в условиях оксалатного нефролитиаза так же было зафиксировано рядом исследователей [15, 23-26]. Однако, начиная со второй недели употребления крысами этиленгликоля, активность ЛДГ поступательно снижалась, и в результате к концу опытов она уменьшилась до контрольных значений. По всей видимости, это объясняется тем, что процесс цитолиза постепенно ослабевает, вероятно, в результате активизации защитных систем, предотвращающих разрушение клетки.
Таким образом, исходя из анализа полученных результатов, можно предположить, что на фоне ежедневного употребления крысами этиленглико-ля возникает вторичная гипероксалурия, что, по-видимому, обусловлено повышенным образованием ионов оксалата в результате метаболизма эти-ленгликоля в печени, которые в большинстве своем выделяются из организма с мочой. Как следствие этого, в нефроне возникало выраженное повреждение клеточных мембран, сопровождающееся цитолизом на ранних этапах эксперимента. Все это проявлялось существенным нарушением функции
клеток почечных канальцев. Развитие нефролитиаза подтвердилось в ходе гистохимического исследования срезов почек крыс, получавших этиленгликоль. Множественные кальций-позитивные депозиты выявлялись главным образом на поверхности почечного сосочка, что полностью соответствует обычной локализации кристаллов оксалата как у людей, так и у экспериментальных животных [4, 6, 16, 19].
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
В результате экспериментов с длительным потреблением крысами этиленгликоля получены неопровержимые свидетельства развития у всех использованных животных кальций-оксалатного не-фролитиаза. На это указывают развившиеся гипероксалурия, ферментурия и наличие кальций-позитивных включений на поверхности почечных сосочков. Перечисленные изменения являются признаками экспериментальной мочекаменной болезни у крыс.
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК
1. Тиктинский ОЛ, Александров ВП. Мочекаменная болезнь. Питер, СПб., 2000; 3-12
2. Coe FL, Evan A, Worcester E. Kidney stone disease. J Clin Invest 2005; 115 (10): 2598-2608
3. Daudon M. Epidemiology of nephrolithiasis in France. Ann Urol (Paris) 2005; 39 (6):209-231
4. Khan SR, Hackett RL. Calcium oxalate urolithiasis in the rat: is it a model for human stone disease? A review of recent literature. Scan Electron Microsc 1985; Pt 2: 759-774
5. Kumar S, Sigmon D, Miller T et al. A new model of nephrolithiasis involving tubular dysfunction/injury. J Urol 1991; 146 (5): 1384-1389
6. Khan SR. Animal models of kidney stone formation: an analysis. World J Urol 1997;15 (4): 236-243
7. Hennequin C, Tardivel S, Medetognon J et al. A stable animal model of diet-induced calcium oxalate crystalluria. Urol Res 1998; 26 (1): 57-63
8. Bushinsky DA, Asplin JR, Grynpas MD et al. Calcium oxalate stone formation in genetic hypercalciuric stone-forming rats. Kidney Int 2002; 61: 975-987
9. Khan SR, Glenton PA, Byer KJ. Modeling of hyperoxaluric calcium oxalate nephrolithiasis: experimental induction of hyperoxaluria by hydroxyl-L-proline. Kidney Int 2006; 70 (5): 914-923
10. Maruch D. Rapid colorimetric assay of p-galactosidase and N-acetyl-p-glucosaminidase in human urine. Clin Chim Acta 1976; 73 : 453-446
11. Thamilselvan S, Hackett RL, Khan SR. Lipid peroxidation in ethylene glycol induced hyperoxaluria and calcium oxalate nephrolithiasis. J Urol 1997; 157 (3): 1059-1063
12. Green ML, Hatch M, Freel RW. Ethylene glycol induces hyperoxaluria without metabolic acidosis in rats. Am J Physiol Renal Physiol 2005; 289: F536-F543
13. Poore RE, Hurst CH, Assimos DG, Holmes RP. Pathways of hepatic oxalate synthesis and their regulation. Am J Physiol 1997; 1: 289-294
14. Бабаева НИ, Липицкая ИЯ, Творогова МГ, Титов ВИ. Диагностическое значение исследования активности N-ацетил-р^-глюкозаминидазы в моче (обзор литературы). Лаб дело 1991; 1: 9-16
15. Фидиркин АВ, Неймарк АИ, Звягинцев ЕН, Симонова ОГ. Экскреция оксалатов и активность некоторых фер-
ментов мочи у лиц, страдающих мочекаменной болезнью. В: Перспективные методы функциональной диагностики. Барнаул, 1994; 132
16. de Water R, Boeve ER, van Miert PP et al. Experimental nephrolithiasis in rats: the effect of ethylene glycol and vitamin D3 on the induction of renal calcium oxalate crystals. Scanning Microsc 1996; 10 (2): 591-601
17. Bazzi C, Petrini C, Rizza V et al. Urinary N-acetyl-p-glucosaminidase excretion is a marker of tubular cell dysfunction and a predictor of outcome in primary glomerulonephritis. Nephrol Dial Transplant 2002; 17 (11): 1890-1896
18. Sikora P, Glatz S, Beck BB et al. Urinary NAG in children with urolithiasis, nephrocalcinosis, or risk of urolithiasis. Pediatr Nephrol 2003; 18 (10): 996-999
19. Yamaguchi S, Wiessner JH, Hasegawa AT et al. Study of a rat model for calcium oxalate crystal formation without severe renal damage in selected conditions. Int J Urol 2005; 12 (3): 290-298
20. Skalova S, Kutilek S. Renal tubular impairment in children with idiopathic hypercalciuria. Acta Medica (Hradec Kralove) 2006; 49 (2): 109-111
21. Muthukumar A, Selvan R. Renal injury mediated calcium
oxalate nephrolithiasis: role of lipid peroxidation. Ren Fail 1997; 19 (3): 401-408
22. Veena CK, Josephine A, Preetha SP et al. Renal peroxidative changes mediated by oxalate: the protective role of fucaidan. Life Sci 2006; 79 (19): 1789-1795
23. Thamilselvan S, Hackett RL, Khan SR. Cells of proximal and distal tubular origin respond differently to challenges of oxalate and calcium oxalate crystals. J Am Soc Nephrol 1999; 10 [Suppl 14]: S452-S456
24. Thamilselvan S, Khan SR, Menon M. Oxalate and calcium oxalate mediated free radical toxicity in renal epithelial cells: effect of antioxidants. Urol Res 2003; 31 (1): 3-9
25. Rashed T, Menon M, Thamilselvan S. Molecular mechanism of oxalate-induced free radical production and glutathione redox imbalance in renal epithelial cells: effect of antioxidants. Am J Nephrol 2004; 24 (5): 557-568
26. Green ML, Freel RW, Hatch M. Lipid peroxidation is not the underlying cause of renal injury in hyperoxaluric rats. Kidney Int 2005; 68 (6): 2629-2638
Поступила в редакцию 19.12.2007 г.
Принята в печать 19.02.2008 г.
