CC BY
49
УДК 612.353:613.63
Т.К. Ядыкина, А.Г. Жукова, Е.В. Уланова, Н.В. Кизиченко, Д.А. Щербакова, М.С. Бугаева
ФУНКЦИОНАЛЬНО-МЕТАБОЛИЧЕСКИЙ ОТВЕТ ГЕПАТОБИЛИАРНОЙ СИСТЕМЫ НА ФТОРИСТУЮ ИНТОКСИКАЦИЮ (ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ)
Научно-исследовательский институт комплексных проблем гигиены и профессиональных заболеваний
СО РАМН (Новокузнецк)
На экспериментальной модели фтористой интоксикации оценивали показатели функционального состояния печени.. Показано, что избыточное поступление фторидов приводит, к выраженной гипоальбунемии и гипопротеинемии, достоверному повышению активности, аминотрансфераз, щелочной фосфатазы, развитию дислипидемии. Ключевые слова: фтористая интоксикация, печень, гомеостаз
FUNCTIONAL AND METABOLIC RESPONSE OF HEPATOBILIARY SYSTEM ON FLUORIC INTOXICATION (EXPERIMENTAL RESEARCHES)
T.K. Yadykina, A.G. Zhukova, E.V. Ulanova, N.V. Kizichenko, D.A. Shcherbakova,
M.S. Bugayeva
Research Institute for Complex Problems of Hygiene and Occupational Diseases SB RAMS,
Novokuznetsk
We estimated, the indices of functional liver condition at an experimental model of fluoric intoxication. It is shown that excessive fluoride receipt leads to expressed, hypoalbunemia and hypoproteinemia, to reliable increase in the activity of aminotransferases, alkaline phosphatase, to dyslipidemia development. Key words: fluoric intoxication, liver, homeostasis
Пристальное внимание к различным аспектам биогенного влияния фтора на организм обусловлено широким распространением этого галогена в природе, его исключительной реактивностью и способностью включаться в метаболические процессы. Токсическое действие повышенных доз фтора и его соединений проявляется торможением синтеза белка, изменением активности ферментов, нарушением липидного профиля, снижением неспецифической резистентности организма [1, 6]. Поэтому алиментарный избыток фтора рассматривается как хроническая фтористая интоксикация, занимающая ведущее место среди профессиональных и производственно обусловленных заболеваний работников алюминиевой промышленности.
Известно, что соединения фтора политропно влияют на различные органы и системы. Ведущими являются повреждения печени, поскольку она представляет собой центральный орган химического гомеостаза, осуществляющий детоксикацию организма. Информация по вопросам гепатоток-сичности фтора малочисленна и неоднозначна, поскольку механизмы его действия многогранны и порой непредсказуемы [7, 14].
С молекулярной точки зрения, фторид натрия полиэффектен, и его воздействие на организм приводит к определенным сдвигам жестких показателей гомеостаза на системном уровне, в основе которых лежат биохимические нарушения [6, 7]. Вместе с тем ранние метаболические нарушения при фтористой интоксикации остаются недостаточно изученными и не диагностируются как патологические, что диктует необходимость поиска ранних биохимических маркеров, свидетельству-
ющих о первичных признаках развития болезни. В связи с этим целью исследования явилось экспериментальное изучение функционального состояния печени в условиях экспериментальной фтористой интоксикации.
МЕТОДИКА
Эксперименты проведены на белых лабораторных нелинейных крысах-самцах массой 200 — 250 г, разделенных на 2 группы: интактную и группу животных с фтористой интоксикацией, которую моделировали пассивным хроническим запаиванием в течение 9 недель фторидом натрия в дозе 10 мг/л (соответствует суточной дозе 3,5 мг/кг массы тела). Животные содержались в стандартных условиях вивария, без ограничения потребления воды, на обычном пищевом рационе, согласно нормативам Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых в экспериментальных и других научных целях (Совет Европы, Страсбург, 2004), а также в соответствии с международными правилами «Guide for the Care and Use of Laboratory Animals».
Забор крови осуществляли из хвостовой вены через 2, 4, 6 суток и через 3, 6, 9 недель затравки, в которой стандартными методами определяли показатели, характеризующие функциональное состояние печени: активность аланинаминотрансферазы (АЛТ), аспартатаминотрансферазы (АСТ), щелочной фосфатазы (ЩФ), у-глутамилтранспептидазы (у-ГТ), глюкозы; содержание общего белка, альбумина, мочевины. Учитывая большое значение печени в синтезе и метаболических превращениях липидов, спектрофотометрически в сыворотке крови измеря-
ли уровень общего холестерина (ХС), триглицери-дов (ТГ), ХС ЛПНП, ЛПОНП и ЛПВП (липопротеины низкой, очень низкой и высокой плотности)
Данные обрабатывались методом математической статистики с помощью пакета программ «Статистика 6.0».
РЕЗУЛЬТАТЫ
При хронических заболеваниях печени отчетливо проявляется снижение уровня альбуминов, в отличие от острой интоксикации, при которой одновременная регенерация гепатоцитов выравнивает эту убыль [15]. В наших экспериментах снижение уровня альбуминов в 1,3 раза по сравнению с контрольными значениями, на фоне сохранения содержания общего белка, наблюдалось уже в течение первых 4-х суток фтористой интоксикации. Выраженные гипоальбунемия и гипопротеинемия отмечались с увеличением времени экспозиции до 3-х недель. Так, в сыворотке крови опытной группы содержание общего белка снизилось в 1,3 раза по сравнению с таковыми показателями на 1-й неделе эксперимента. В дальнейшем происходит включение долговременных компенсаторно-приспособительных механизмов, направленных на нормализацию процесса биосинтеза белка, и тенденция к восстановлению белково-синтетической функции печени. Уровень альбуминов к 9-й неделе достоверно превысил контрольные значения (табл. 1). С 6-й по 9-ю неделю интоксикации также отмечалась тенденция к повышению уровня общего белка до физиологических значений.
На фоне сниженного уровня альбумина в сыворотке крови, период полураспада которого составляет 20 дней (3-я неделя эксперимента), и выраженной гипопротеинемии отмечалось достоверное повышение показателей мочевины. В течение первых 4-х суток фтористой интоксикации уровень мочевины находился в пределах контрольных значений, с тенденцией к дальнейшему повышению. Нарушение детоксикационной функции печени привело к резкому падению уровня мочевины на 6-й неделе эксперимента по сравнению с показателями 3-й недели, когда уровень мочевины был почти в 2 раза выше, что связано с замедлением ее синтеза вследствие повреждения паренхимы
печени. Таким образом, на 3-й неделе затравки показатель мочевины превысил значения контроля почти в 1,5 раза, что сопряжено с достоверным снижением уровня белка в этот же период и свидетельствует об усилении метаболизма азота.
В основе патогенеза фтористой интоксикации лежит угнетение ферментативной активности вследствие образования химических связей иона фтора с активными центрами ферментов, а также изменение проницаемости клеточных мембран, приводящее к нарушению биоэнергетики и развитию патологических процессов в других органах и системах [1, 10].
Высокоспецифичным маркером повреждения печени является определение активности амино-трансфераз, играющих центральную роль в обмене белков и взаимосвязи с обменом углеводов. Избирательная тканевая специализация позволяет считать их маркерными ферментами: АЛТ — для печени, АСТ — для миокарда. Они относятся к индикаторным ферментам, активность которых повышается при повреждении ткани за счет гибели, разрушения клеток и выхода фермента в циркулирующую кровь. АЛТ содержится преимущественно в цитоплазме гепатоцитов, и активность ее повышается преимущественно при хронических заболеваниях печени. АСТ локализуется в митохондриях и цитоплазме, также является маркером острых и хронических заболеваний печени, острой сердечной недостаточности [4].
Введение фторида натрия в течение 1-й недели сопровождалось статистически достоверным снижением активности АЛТ (табл. 2). Дальнейшая аккумуляция фтора в организме животных сопровождалась различной степенью выраженности изменений ферментативной активности печени. Так, на 3-й неделе затравки наблюдалось увеличение активности АЛТ в 1,2 раза по сравнению с показателями контроля, что в полтора раза превысило соответствующий показатель 1-й недели эксперимента. На 6-й неделе фтористой интоксикации отмечалось достоверное падение активности АЛТ, по сравнению с контрольными значениями. К 9-й неделе активность АЛТ вновь превысила значения контроля в 1,7 раза, что свидетельствует о выраженном гепатотоксическом эффекте повышенных
Таблица 1
Показатели белкового статуса плазмы крови у крыс в динамике фтористой интоксикации
Показатель Группа животных Срок затравки
4 суток 6 суток 3 недели 6 недель 9 недель
Общий белок, г/л опыт 77,0 ± 2,58 82,2 ± 2,80 67,1 ± 2,13* 70,6 ± 2,02 71,6 ± 3,04
контроль 74,7 ± 4,32 78,3 ± 2,04 74,1 ± 2,72 74,5 ± 3,27 75,7 ± 1,74
Альбумин, г/л опыт 29,7 ± 3,05 36,0 ± 2,10 28,3 ± 1,24** 31,5 ± 0,66* 40,1 ± 1,91*
контроль 32,6 ± 1,78 33,6 ± 1,10 33,2 ± 1,34 34,9 ± 1,22 34,6 ± 1,26
Мочевина, ммоль/л опыт 5,9 ± 0,30 5,5 ± 0,44 7,2 ± 0,82* 4,4 ± 0,24 5,8 ± 0,32
контроль 5,8 ± 0,53 5,1 ± 0,31 5,3 ± 0,24 5,2 ± 0,35 5,7 ± 0,33
Примечание: * - р < 0,05; ** - р < 0,01 - достоверное различие по сравнению с контрольной группой животных.
доз фтора на организм, но не на функциональное нарушение печени в целом [7, 12]. Это подтверждалось и динамикой уровня АСТ: в течение 1-й недели уровень ее недостоверно менялся, к 3-й неделе регистрировалась тенденция к понижению активности. Повышение показателей АЛТ на 3-й неделе при неизменной активности АСТ в данный период интоксикации свидетельствует не столько о поражении гепатоцитов, сколько о доминировании анаболических процессов. Снижаясь к 6 неделе запаивания, активность АСТ резко повысилась на 9-й неделе эксперимента, превысив соответствующие показатели контроля в 1,3 раза. Согласно литературным данным, такое повышение активности АСТ и АЛТ происходит при повреждении гепатоцитов, однако рост этот неспецифический и в большей степени характеризует динамику процесса, чем его нозологическую принадлежность [15]. Значительное увеличение уровня трансаминаз наблюдается при острых гепатитах, а также хронических токсических поражениях гепатобилиарной системы.
Диагностически ценным является не только определение активности АЛТ и АСТ, но и их соотношение (коэффициент де Ритиса). Коэффициент де Ритиса поступательно снижался, начиная с 3-й недели фтористой интоксикации, достигнув к 9-й неделе 2,3 (3,8 — в контрольной группе). Соотношение трансаминаз обеспечивает важнейшую гомеостатическую константу — уровень глюкозы и белка, является маркером работы митохондрий и углеводного обмена на стадии усиленного глю-конеогенеза. Отклонение коэффициента означает изменение направленности метаболических процессов с преобладанием анаболических реакций для поддержания оптимального уровня глюкозы в плазме крови. Так, в течение первых 4-х суток фтористой интоксикации уровень глюкозы находился в пределах контрольных значений. На 1-й неделе эксперимента наблюдалась тенденция к снижению уровня глюкозы с 6,8 ± 0,49 ммоль/л в контроле до 6,41 ± 0,29 ммоль/л в опыте, с последующим повышением на 3-й неделе эксперимента. К 6-й неделе ее уровень достоверно снизился до
5,3 ± 0,15 ммоль/л, а к 9-й-неделе приблизился к показателям контроля и составил 6,9 ± 0,37 ммоль/л, что свидетельствует о тенденции к восстановлению уровня глюкозы в организме.
Таким образом, изменение активности АЛТ и АСТ направлено на поддержание системы энергообеспечения и, прежде всего, уровня его основного энергетического субстрата — глюкозы. При относительном сохранении ее содержания на физиологическом уровне в течение 1-й недели, и с тенденцией к повышению на 3-й, наблюдается достоверное снижение альбумина на 3-й неделе фтористой интоксикации на фоне достоверно возросшего уровня мочевины. Данный факт свидетельствует об интенсивном переаминировании, которое обеспечивается ферментами АСТ и АЛТ.
Печени принадлежит ведущая роль в метаболизме и детоксикации химических веществ, способных оказывать токсическое действие на другие органы и ткани организма. Изменение активности у-ГТ свидетельствует о важной роли системы детоксикации в поддержании гомеоста-за организма. у-ГТ локализована в мембранах и цитоплазме, отличается высокой активностью при гепатобилиарных заболеваниях и токсических поражениях печени, особенно при печеночном холе-стазе [4, 11], что подтверждают полученные нами экспериментальные данные. Повышение уровня у-ГТ на 3-й неделе эксперимента до 7,6 ± 0,38 Е/л (в контроле 6,1 ± 0,38 Е/л) сопровождалось сниженной активностью АСТ, увеличение уровня которой на 9-й неделе фтористой интоксикации сочеталось со снижением ферментативной активности у-ГТ до 4,37 ± 0,24 Е/л.
Дальнейшие биохимические исследования подтвердили факт патологических изменений в печени. Реактивные изменения в эпителии желчевы-водящих путей и плазматических мембран гепато-цитов, степень холестатического действия веществ оценивают на основании активности ЩФ. Фермент присутствует в форме отдельных изоферментов в плазматических мембранах гепатоцитов, эпителии стенки желчных протоков и имеет отношение к
Таблица 2
Показатели ферментативной активности сыворотки крови у крыс в динамике фтористой интоксикации
Показатель Группа животных Срок затравки
4 суток 6 суток 3 недели 6 недель 9 недель
АСТ, ммоль/(ч.л) опыт 161,7 ± 5,62 156,3 ± 7,9 156,4 ± 3,45 139,6 ± 5,31** 195,4 ± 14,1*
контроль 168,8 ± 10,08 166,9 ± 8,47 166,9 ± 5,09 167,5 ± 8,55 162,7 ± 4,12
АЛТ, ммоль/(ч.л) опыт 51,6 ± 4,71 39,2 ± 1,61* 55,1 ± 2,58* 36,3 ± 2,52** 72,1 ± 6,13**
контроль 45,5 ± 5,04 47,2 ± 2,59 46,05 ± 2,83 47,2 ± 2,69 49,2 ± 3,94
Коэф. де Ритиса опыт 3,2 ± 0,304 3,9 ± 0,183 2,9 ± 0,14** 4,3 ± 0,30* 2,7 ± 0,26
контроль 3,9 ± 0,527 3,6 ± 0,356 3,6 ± 0,10 3,5 ± 0,10 3,6 ± 0,37
ЩФ, Е/л опыт 522,1 ± 44,4 416,8 ± 46,9 538,3 ± 35,4 503,2 ± 52,9 605,6 ± 60,5*
контроль 471,1 ± 34,6 476,3 ± 27,7 476,9 ± 16,6 460,0 ± 31,5 453,2 ± 25,8
Примечание: * - р < 0,05; ** - р < 0,01 - достоверное различие по сравнению с контрольной группой животных.
активному транспорту фосфатов [4]. В динамике активности ЩФ отмечались незначительные колебания показателей ЩФ вплоть до 9-й недели. На 9-й неделе активность ЩФ резко повысилась, в 1,6 раза превысив контрольные значения, что свидетельствует о выраженном токсическом холестазе. Рост фосфатазной активности сыворотки крови согласуется с гистологической картиной холеста-за, сопровождающегося затрудненной секрецией ЩФ в желчные ходы, при усилении ее выброса ее в кровоток.
Полученные результаты изучения основных показателей функционального состояния печени сопоставимы с изменениями функциональных показателей в подостром эксперименте и подтверждают действие фторида натрия на клеточную проницаемость гепатоцитов экспериментальных животных.
Печень является центральным звеном в метаболизме липидов [5, 13]. Изменение липидного профиля сыворотки крови крыс с фтористой интоксикацией начало проявляться еще на ранних сроках экспозиции фторидом натрия. Так, уже на 4-е сутки отмечалось почти двукратное увеличение уровня холестерина ЛПНП и полуторакратное повышение концентрации холестерина, что свидетельствует об их активном участии в системе энергообеспечения в период острой фазы адаптации. Повышение уровня ТГ в сыворотке крови на начальных этапах затравки свидетельствует об активации транспортных форм жирных кислот, которые также служат важным источником энергии.
К концу 1-й недели в сыворотке крови экспериментальных животных наблюдалась тенденция к повышению уровня холестерина ЛПОНП, общего холестерина, ТГ, почти в 2 раза увеличился показатель холестерина ЛПНП на фоне сниженного содержания холестерина ЛПВП (табл. 3). С увеличением времени экспозиции до 3-х недель уровень холестерина ЛПВП оставался при этом практически неизменным при достоверном
полуторократном снижении концентрации ТГ и холестерина ЛПОНП. Проатерогенный характер дислипидемии, определяемый суммарной фракцией холестерина ЛПОНП и холестерина ЛПНП, усугублялся за счет резкого двукратного увеличения содержания холестерина ЛПНП в сыворотке крови опытных животных. Таким образом, влияние стрессирующего фактора в виде токсического действия избытка фторид-иона сопровождается стресс-реакцией, характеризующейся совокупностью неспецифических эффектов, и, в том числе, нарушением метаболизма липидов.
На 6-й неделе фтористой интоксикации в липидном профиле сыворотки крови крыс усугублялось развитие дислипидемии. При сохранении на уровне контроля показателей холестерина происходило дальнейшее уменьшение концентрации ХС ЛПВП на фоне увеличения концентрации холестерина ЛПНП в 1,7 раза. После кратковременного достоверного снижения содержания уровня ТГ и холестерина ЛПОНП на 3-й неделе эксперимента отмечалась тенденция к их увеличению в 1,2 и 1,3 раза соответственно на 6-й неделе фтористой интоксикации. Очевидно, что в конце 6-й недели происходит срыв компенсаторных механизмов, что является инициальным фактором перехода предболезни в заболевание, которое по мере продолжения затравки трансформируется в хроническую форму и может способствовать развитию жировой инфильтрации и нарушению основных функций печени [9].
Развившаяся гиперлипидемия может быть отнесена к разряду транспортных и связана с усилением липолиза в жировой ткани, повышенным синтезом ТГ и холестерина в ткани печени. В качестве одних из причин дислипидемии выделяются стрессорное изменение структурной и функциональной организации печени, а также нарушение процесса утилизации холестерина из организма. В условиях длительной дислипи-демии липорегуляторные функции гепатоцитов
Показатель Группа животных Срок затравки
4 суток 6 суток 3 недели 6 недель 9 недель
ХС, ммоль/л опыт 1,71 ± 0,11 1,69 ± 0,09* 1,32 ± 0,06 1,27 ± 0,04 1,25 ± 0,07
контроль 1,49 ± 0,13 1,41 ± 0,07 1,21 ± 0,04 1,19 ± 0,04 1,22 ± 0,06
ХС ЛПВП, ммоль/л опыт 0,53 ± 0,08 0,54 ± 0,06 0,50 ± 0,03 0,44 ± 0,02*** 0,48 ± 0,06**
контроль 0,6 ± 0,06 0,61 ± 0,08 0,63 ± 0,07 0,67 ± 0,04 0,77 ± 0,07
ХС ЛПОНП, ммоль/л опыт 0,36 ± 0,06 0,30 ± 0,02 0,19 ± 0,01*** 0,35 ± 0,04 0,31 ± 0,03
контроль 0,3 ± 0,04 0,28 ± 0,03 0,29 ± 0,02 0,30 ± 0,04 0,27 ± 0,02
ХС ЛПНП, ммоль/л опыт 1,03 ± 0,16* 0,79 ± 0,10 0,58 ± 0,09* 0,37 ± 0,05* 0,46 ± 0,03***
контроль 0,59 ± 0,09 0,55 ± 0,13 0,26 ± 0,05 0,22 ± 0,04 0,21 ± 0,05
ТГ, ммоль/л опыт 0,79 ± 0,14 0,67 ± 0,05 0,44 ± 0,03** 0,82 ± 0,09 0,68 ± 0,06
контроль 0,66 ± 0,08 0,62 ± 0,07 0,64 ± 0,04 0,67 ± 0,08 0,55 ± 0,04
Примечание: * - р < 0,05; ** - р < 0,01; *** - р < 0,001 - достоверное различие по сравнению с контрольной группой животных.
Таблица 3
Показатели липидного профиля сыворотки крови крыс в динамике фтористой интоксикации
нарушаются или блокируются, что приводит к повышению концентрации холестерина за счет атерогенных фракций липопротеидов [13]. Стрес-сирующее воздействие химических факторов вызывает сдвиги в липопротеидном спектре, проявляющиеся в достоверном снижении уровня холестерина ЛПВП на фоне нарастания холестерина суммарной фракции ЛПНП и ЛПОНП сыворотки крови к 9-й неделе эксперимента. Баланс между уровнем атерогенных и антиатерогенных липидов выражается коэффициентом атерогенности, который неизменно повышался в течение 6 недель эксперимента с 1,5 до 2,5 раза по сравнению с контролем. Степень снижения содержания ХС ЛПВП в крови отражает тяжесть повреждения печени и может являться одним из маркеров начальных стадий ее проявления.
Таким образом, результаты экспериментального исследования свидетельствуют о чрезвычайно высокой реакционной способности фтора, направленной, прежде всего, на мембранные структуры гепатоцитов. А потому, поражение печени может служить признаком развития флюороза уже на начальном этапе интоксикации, что диктует необходимость раннего применения гепатопротекторов лицам, находящимся в постоянном контакте с соединениями фтора.
ЛИТЕРАТУРА
1. Богданов Н.А., Гембицкий Е.В. Производственный флюороз. — Л. : Медицина, 1975. — С. 49-52.
2. Бударина Л.А., Кудаева И.В. К вопросу о ранних нарушениях регуляции липидного обмена у пожарных // Сиб. консилиум. — 2007. — № 7 (62). — С. 165—166.
3. Буеверов А.О. Оксидативный стресс и его роль в повреждении печени // Рос. журн. гастро-энтерол., гепатол., колопроктол. — 2002. — № 4. — С. 21—25.
4. Бышевский А.Ш., Галян С.Л., Терсенов О.А. Биохимические сдвиги и их оценка в диагностике патологических состояний. — М. : Мед. книга, 2002. - 320 с.
5. Власов В.Н. Показатели обмена липидов как критерии химической опасности // Мед. труда и пром. экология. - 2007. - № 2. - С. 29-34.
6. Гайдаш А.А., Цуканов В.В. Влияние терапевтических доз фтора и цеолитового энтеросорбента на ультраструктуру печени // Гепатология. -2005. - № 5. - С. 24-28.
7. Жовтяк Е.П. и др. Клинико-рентгенологи-ческая диагностика и классификация профессионального флюороза // Мед. труда и пром. экология. - 2000. - № 3. - С. 17-20.
8. Мищенко А.В. Механизмы повреждения клетки при фтористой интоксикации // Вест. проблем биологии и медицины. - 1999. - С. 36-39.
9. Никитин Ю.П., Курилович С.А., Дави-дин Г.С. Печень и липидный обмен. - Новосибирск : Наука, 1985. - 191 с.
10. Разумов В.В. Флюороз как проявление преждевременного старения и атавистического остеогенеза. - Новокузнецк, 2003. - 120 с.
11. Рыжов В.М. и др. Гепатобилиарная система у работающих с гепаторопными химическими веществами // Мед. труда и пром. экология. -2004. - № 8. - С. 41-44.
12. Улитовский С.П. Проблемы флюоризиции и флюороза // Пародонтология. - 2004. - № 1 (30). - С. 52-54.
13. Ушатикова О.Н. Молекулярные механизмы атерогенных дислипидемий у шахтеров : дис. ... канд. биол. наук. - М., 2003. - 135 с.
14. Шалина Т.И., Васильева Л.С. Общие вопросы токсического действия фтора // Сибирский медицинский журнал. - 2009. - № 5. - С. 5-9.
15. Шулутко Б.И. Болезни печени и почек. -СПб. : Издательство СПб. сан.-гиг. мединститута, 1993. - 480 с.
Сведения об авторах
Ядыкина Татьяна Константиновна - научный сотрудник лаборатории популяционной генетики НИИ КПГПЗ СО РАМН (654041, Кемеровская обл., г. Новокузнецк, ул. Кутузова, 23; тел.: 8 (3843) 79-69-79; е-таИ: fiskaf@mail.ru) Жукова Анна Геннадьевна - д.б.н., профессор, ведущий научный сотрудник лаборатории экспериментальных гигиенических исследований НИИ КПГПЗ СО РАМН
Уланова Евгения Викторовна - к.б.н., с.н.с. лаборатории экспериментальных гигиенических исследований НИИ КПГПЗ СО РАМН
Кизиченко Наталья Викторовна - к.б.н., с.н.с. лаборатории экспериментальных гигиенических исследований НИИ КПГПЗ СО РАМН
Щербакова Дарья Александровна - аспирант лаборатории экспериментальных гигиенических исследований НИИ КПГПЗ СО РАМН
Бугаева Мария Сергеевна - аспирант лаборатории экспериментальных гигиенических исследований НИИ КПГПЗ СО РАМН
