CC BY
25
УДК 612.111.44:615.373.34 DOI: 10.17238/issn2542-1298.2017.5.2.21
ФОНОВЫЕ И БАВ-ВЫЗВАННЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ ФУНКЦИОНАЛЬНОГО СОСТОЯНИЯ ЭРИТРОЦИТОВ У ЖЕНЩИН КАК ИНДИКАТОРЫ УГРОЗЫ ПРЕЖДЕВРЕМЕННЫХ РОДОВ (часть 2)
В.И. Циркин*/**, А.Д. Ноздрачев***, К.Ю. Анисимов****, С.Л. Дмитриева*****, О.А. Братухина*****, С.В. Хлыбова******
*Казанский государственный медицинский университет (г. Казань) **Вятский государственный университет (г. Киров) ***Санкт-Петербургский государственный университет (Санкт-Петербург) ****Уральский государственный медицинский университет (г. Екатеринбург) *****Кировский областной клинический перинатальный центр (г. Киров) ******Кировский государственный медицинский университет (г. Киров)
Анализ данных о фоновом времени начала агглютинации (ВНА) эритроцитов у небеременных, беременных (три триместра), рожениц (I период родов) и женщин с угрозой преждевременных родов (УПР) показал, что значения ВНА зависят от этапа репродуктивного процесса и наличия УПР, если индуктором агглютинации являются фитогемагглютинины (ФГАг и ФГАф), содержащиеся в солевых экстрактах сухих семян гороха посевного (Pisum sativum L.) или фасоли обыкновенной (Phaseolus vulgaris L.). Если индуктором агглютинации являются сывороточные поликлональные антитела (СПА) или моноклональные антитела (МА), то значения фонового ВНАспа и фонового ВНАма не выявляют эту зависимость. Судя по изменению ВНА^„,, ВНА,,,,ВНА,,, или ВНА^,, под влиянием биологически активных веществ (БАВ),
СПА МА ФГАг ФГАф 4
характер ответа эритроцитов на них зависит от этапа репродуктивного процесса и/или наличия УПР. Так, при исследовании изменения ВНАспа, ВНАма, ВНАфГАг или ВНАфГАф под влиянием адреналина установлено, что при беременности эффективность активации бета-адренорецепторов эритроцитов (повышение ВНА под влиянием адреналина) возрастает и сохраняется высокой в родах, а эффективность активации альфа-адренорецепторов (снижение ВНА под влиянием адреналина) возрастает лишь перед срочными родами и при УПР. Ацетилхолин не влияет на ВНАСПА в I триместре, снижает его во II, повышает в III, но снижает в родах и при УПР. Окситоцин повышает ВНАспа в I триместре, не влияет на него во II и в III
Ответственный за переписку: Циркин Виктор Иванович, адрес: 420012, г. Казань, ул. Бутлерова, д. 49 / 610000, г. Киров, ул. Московская, д. 36; e-mail: tsirkin@list.ru
Для цитирования: Циркин В.И., Ноздрачев А.Д., Анисимов К.Ю., Дмитриева С.Л., Братухина О.А., Хлыбова С.В. Фоновые и БАВ-вызванные изменения функционального состояния эритроцитов у женщин как индикаторы угрозы преждевременных родов (часть 2) // Журн. мед.-биол. исследований. 2017. Т. 5, № 2. С. 21-36. DOI: 10.17238/issn2542-1298.2017.5.2.21
триместрах и при УПР, но повышает его у рожениц. Серотонин снижает ВНАма в I триместре, не влияет на него во II, снижает в III и в родах, не влияя при УПР Дидрогестерон и эстрадиол способны негеномно изменять фоновое и БАВ-модулируемое ВНА. В целом показана перспективность исследования агглюти-набельности эритроцитов для диагностики УПР и оценки вероятности перехода УПР в преждевременные роды.
Ключевые слова: функциональное состояние эритроцитов, индикаторы угрозы преждевременных родов, агглютинация эритроцитов, беременность, роды.
В части 1 обзора были проанализированы данные литературы, касающиеся изменения при беременности, в родах и при наличии угрозы преждевременных родов (УПР) таких свойств, как скорость оседания эритроцитов цитратной и гепаринизированной венозной крови (СОЭ и СОЭ ), а также осмотической
г V цит геп/7
резистентности эритроцитов к гипотонической среде, которую оценивают разными методами, используя различные показатели (ОРЭрдрм, ОРЭ37, ОРЭДВ, ОРЭДВ45). При этом сообщалось о фоновых значениях соответствующих показателей и влиянии на них адренергических средств - ацетилхолина (АХ), окситоцина, се-ротонина, дидрогестерона и эстрадиола. В части 2 обзора представлены сведения о фоновой [1-7] и БАВ-модулированной [1-9] агглютина-бельности эритроцитов, показателем которой является время начала агглютинации (ВНА).
Способность эритроцитов к агглютинации (агглютинабельность эритроцитов)
Оценка агглютинабельности эритроцитов широко используется при определении групп и Rh-принадлежности крови, а также при диагностике инфекционных заболеваний, однако в отношении изменения агглютинабельности эритроцитов у женщин, в т. ч. у беременных и рожениц, имеются лишь единичные исследования [10, 11]. В частности, М.Г. Василевский [10] установил, что у рожениц с группой крови А число неагглютинабельных эритроцитов (т. е. эритроцитов, которые не агглютинируют, несмотря на присутствие в среде цоликлона анти-А) составляет 2 % - это меньше, чем у беременных в III триместре (6,8 %); для женщин с группой крови В эти значения составили
соответственно 1,7 и 7,2 %, хотя максимум таких эритроцитов характерен для II триместра беременности (соответственно 14,2 и 18,3 %). Эти данные автор объяснил изменением уровня сорбирования метаболитов на поверхности эритроцитов, т. е. изменением числа оккупированных метаболитами антигенов. По данным K. Lange-Konior [11], при срочных родах (per vaginum, но не при плановом кесаревом сечении) в крови матери выявляется фактор, который блокирует способность фитогемаг-глютинина (ФГА), полученного из сухих семян гороха посевного (Pisum sativum L.), индуцировать агглютинацию эритроцитов у женщин с группой крови 0. Однако этот фактор не выявляется при преждевременных родах. Можно предположить, что выявленное снижение скорости фоновой агглютинации эритроцитов у рожениц [11] является следствием появления в крови факторов, тормозящих взаимодействие антител с антигенами. В частности, такими факторами могут быть глюкокортикоиды, т. к. 30- или 60-минутная инкубация изогемагглю-тинирующей сыворотки крови при 37 °С с гидрокортизоном (25 мг/мл) или преднизолоном (30 мг/мл) уменьшает способность этой сыворотки индуцировать агглютинацию эритроцитов у лиц с группами крови А или В [12]. Так, если исходно антитела анти-А и анти-В проявляли свой эффект при титре 1:16 - 1:32, то после инкубации с указанными веществами они вызывали агглютинацию лишь при титре 1:2 или 1:4 [12]. Аналогично указанные вещества уменьшали способность Rh-антител взаимодействовать с Rh-фактором [12]. По мнению Е.А. Зотикова и соавторов [12], глюкокортикои-
ды снижают способность антител связываться с соответствующими антигенами, т. е. «маскируют» антитела.
Важным методическим аспектом изучения агглютинабельности эритроцитов человека является вопрос об индукторе агглютинации эритроцитов, т. к. применение с этой целью сывороточных поликлональных антител (СПА) или моноклональных антител (МА) исключает из исследования людей с группой крови 0 или Rh-отрицательных людей. Поэтому после ряда работ, в которых в качестве индукторов агглютинации использовали СПА [1-4, 7] или МА (цоликлоны) [5-9], вследствие чего приходилось исключать лиц с группой крови 0 или с Rh-отрицательной кровью, стало ясно, что оптимальный вариант при изучении агглю-тинабельности эритроцитов - использование фитогемагглютининов (ФГА), которые вызывают агглютинацию эритроцитов независимо от их групповой принадлежности и наличия Rh-фактора, т. е. являются универсальными индукторами агглютинации. Среди них известен ФГА, полученный из сухих семян гороха посевного (Pisum sativum L), - ФГАг [11, 13, 14], а также ФГА из семян фасоли обыкновенной (Phaseolus vulgaris L.) - ФГАф [13, 15-17]. Их мы использовали при оценке фоновой и модулированной БАВ-агглютинабельности эритроцитов [6, 8, 18].
Следует отметить еще один методический аспект, касающийся количественного показателя, отражающего агглютинабельность эритроцитов. Обычно для этих целей используют титр разведения индуктора агглютинации, например в работе Е.А. Зотикова и соавторов [12]. Мы предложили оценивать агглютина-бельность эритроцитов по скорости агглютинации, фиксируя для этих целей ВНА, т. е. промежуток времени от момента взаимодействия индуктора агглютинации с эритроцитами до появления первых агглютинатов [1-9, 19-23]. Анализ этих работ представлен ниже.
Фоновая агглютинация эритроцитов венозной крови с учетом вида индуктора агглютинации. В нашей лаборатории было ис-
следовано ВНА эритроцитов у небеременных, беременных, рожениц (латентная фаза I периода родов) и женщин с УПР при отсутствии в среде биологически активных веществ (БАВ), т. е. фоновое ВНА. При этом в качестве индуктора агглютинации использовали изогемагглю-тинирующую сыворотку крови группы 0, т. е. СПА [1-4], либо применяли МА, в частности изосероклонТМ анти-D IgM, реже - анти-АВ [5, 6], либо солевой экстракт семян гороха (ФГАг) [6, 18] или семян фасоли (ФГАф) [6]. По понятным причинам, при индукции агглютинации с помощью СПА или МА мы вынуждены были исключить из исследования лиц с группой крови 0 или с Rh-отрицательной кровью. Этого, однако, не требовалось при индукции агглютинации с помощью ФГАг или ФГАф.
В этих исследованиях было установлено, что фоновые значения ВНА на протяжении беременности и в родах, а также при наличии УПР не меняются, если индукция агглютинации эритроцитов проводится с помощью СПА (анти-А, анти-В) или МА (в частности, анти-D), но они изменяются при индукции агглютинации эритроцитов с помощью ФГА. В частности, фоновое ВНА существенно возрастает (а значит, снижается скорость агглютинации эритроцитов) у рожениц (показано при использовании ФГАг и ФГАф) и женщин с УПР (при использовании ФГАф). Иначе говоря, характер этих изменений, особенно в отношении эритроцитов женщин с УПР, зависел от вида индуктора агглютинации. Так, при исследовании эритроцитов гепаринизированной венозной крови (в каждой группе - по 10 исследуемых) [1, 2] (№ 18А в таблице, см. с. 24) фоновое ВНАспа эритроцитов (т. е. ВНА при внесении эритроцитов в изогемагглютинирующую сыворотку в присутствии раствора Кребса) у небеременных женщин в фолликулярную фазу цикла со ставило (медиана) 18 с, в лютеиновую фазу - 15 с (различия между ними были статистически незначимы), у женщин в I, II и III триместрах беременности - соответственно 13, 13 и 12 с (различия с небеременными женщинами и между триместрами незначимы), а у рожениц (латентная
ПОКАЗАТЕЛИ, ОТРАЖАЮЩИЕ ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ ЭРИТРОЦИТОВ У ЖЕНЩИН1
Показатель Беременные (триместры) Роженицы Женщины с УПР Источник
I II Ш
18А. Фоновое ВНАспа, с 13,0 13,0 12,0 11 (как у беременных) Не иссл. [1-2]
18Б. Фоновое ВНАспа, с 13,0 13,0 12,0 11 (как у беременных) 10 (как у беременных и рожениц) [3]
18В. Фоновое ВНАспа, с 10,0 9,0 10,0 9,5 (как у беременных) 8,0 (как у беременных и рожениц) [4]
19А. Фоновое ВНАма, с 16,0 11,5 11,0 11,0 (как у беременных) 10,0 (как у беременных и рожениц) [5]
19Б. Фоновое ВНАма, с 17,0 11,0 13,5 14,5 (как у беременных) 11,0 (как у беременных и рожениц) [6]
19В. Фоновое ВНАма, с Не иссл. 18,0 Не иссл. 15,0 (как у беременных) 10,5 (как у беременных и рожениц) [7]
20. Фоновое ВНА™ . с ФГАг 34,5 73,0 70,0 (выше, чем в I триместре) 116,5 (выше, чем у беременных) 56 (ниже, чем у рожениц, и такое же, как у беременных) [6]
21. Фоновое ВНАФГАф, с 18,0 21,5 20,5 35, 0 (выше, чем у беременных) 27,5 (ниже, чем у рожениц, но выше, чем у беременных) [6]
22А. Влияние адреналина (10"10-10-5 г/мл) на ВНАспа — Ф (10-10 г/мл) Ф (10-10, 10-8, 10-7, 10-6 г/мл) Ф (10-10, 10-9, 10-8, 10-7, 10-6 г/мл) Не иссл. [1, 2]
22Б. Влияние адреналина (10-10-10-5 г/мл) на ВНАспа — Ф (10-10 г/мл) Ф (10-10, 10-8, 10-7, 10-6 г/мл) Ф (10-10, 10-9, 10-8, 10-7, 10-6 г/мл) Ф (10-10, 10-9, 10-8, 10-7, 10-6 г/мл) [3]
23А. Влияние адреналина (10-10-10-5 г/мл) на ВНАма — — — — — [7]
23Б. Влияние адреналина (10-10-10-5 г/мл) на ВНАма é (10-10, 10-9 г/мл) Ф (10-10, 10-7, 10-6 г/мл) — — Ф (10-5 г/мл) [8]
24. Влияние адреналина (10-10-10-5 г/мл) на ВНАФГАг é (10-10, 10-9 г/мл) — — Ф (10-8 г/мл) — [8]
'Начало таблицы (показатели № 1-17) представлено в части 1 обзора.
Окончание таблицы
Показатель Беременные (триместры) Роженицы Женщины с УПР Источник
I II Ш
25. Влияние адреналина (10-к>-10-5 г/мл) на ВНАФГАф Ф (10-9 г/мл) Ф (10-9, 10-7, 10-5 г/мл) Ф (10-10, 10-8, 10-7, 10-6 г/мл) Ф (10-7 г/мл) Ф (10-6 г/мл) [8]
26. Влияние ацетилхо-лина (10-10-10-6 г/мл) на внаспа — Ф (10-10 г/мл) Ф 10-9, 10-7, 10-6 г/мл) Ф (10-8, 10-7, 10-6 г/мл) Ф (10-8, 10-7, 10-6 г/мл) [3]
27. Влияние окситоцина (10-6-10-2 МЕ/мл) на внаспа Ф (10-3, 10-2 МЕ/мл) — — Ф (10-2 МЕ/мл) — [4]
28. Влияние серотонина (10-8-10-4 г/мл) на внама Ф (10-8, 10-7, 10-6 г/мл) — Ф (10-7, 10-4 г/мл) Ф (10-8, 10-7 г/мл) — [5]
29А. Влияние дидроге-стерона (10-9-10-6 г/мл) на внама — — — Ф (10-9 г/мл) — [7]
29Б. Влияние дидроге-стерона (10-9-10-6 г/мл) на внама — — — — Не иссл. [9]
30. Влияние дидроге-стерона (10-6 г/мл) на способность адреналина (10-10-10-5 г/мл) изменять ВНА МА. Не иссл. — — Ф (рост эффективности активации альфа1-АР) Ф (рост эффективности активации альфа1-АР) [7]
31А. Влияние эстрадио-ла (10-9-10-6 г/мл) на внама Не иссл. — — — — [7]
31Б. Влияние эстрадио-ла (10-9-10-6 г/мл) на внама — Ф (10-9 г/мл) Ф (10-9, 10-8 г/мл) Ф (10-6 г/мл) Не иссл. [9]
32. Влияние эстрадиола (10-6 г/мл) на способность адреналина (10-10-10-5 г/мл) изменять ВНА МА Не иссл. — — Ф (рост эффективности активации альфа1-АР) Ф (рост эффективности активации альфа1-АР) [7]
Примечание. Символы Ф,Ф или — означают, что исследуемое вещество соответственно повышает, снижает или не влияет на указанный показатель.
фаза I периода срочных родов) - 11 с, что статистически значимо ниже, чем в группе у небеременных, но не отличалось от показателей беременных. Таким образом, при физиологическом течении беременности фоновое ВНАспа эритроцитов существенно не меняется, но уменьшается (в сравнении с небеременными) в родах, т. е. скорость агглютинации в родах имеет тенденцию к росту.
Эти данные были подтверждены и в другой нашей работе [3] - при исследовании женщин с УПР. Фоновое ВНАспа у небеременных в фолликулярную и лютеиновую фазы цикла (№ 18Б в таблице), а также у беременных (I, II и III триместры), рожениц и женщин с УПР составило (медиана) соответственно 17, 14, 13, 13, 12, 11 и 10 с. При этом значения ВНАСПА эритроцитов у беременных, рожениц и женщин с УПР были статистически ниже, чем у небеременных женщин, а различия между показателями беременных, рожениц и женщин с УПР -незначимы. Умеренное снижение ВНАСПА, т. е. повышение фоновой скорости агглютинации эритроцитов, при беременности и в родах было объяснено [3] увеличением уровня фибриногена в крови, что установлено многими авторами [24]. Как известно, фибриноген повышает способность эритроцитов к спонтанной агрегации [25]. Аналогичные данные были получены О.М. Безмельцевой и соавторами [4]: фоновое ВНАСПА (медиана) эритроцитов у мужчин составило 10 с, у небеременных женщин (без учета фазы цикла) - 6 с, у женщин в I, II и III триместрах беременности - соответственно 10, 9 и 10 с, у рожениц - 9,5 с, а у женщин с УПР - 8 с. При этом все различия значений ВНА между небеременными, беременными, в т. ч. с УПР, и роженицами были статистически незначимы (№ 18В в таблице). Таким образом, применение СПА не позволило обнаружить различия между беременными (в т. ч. с УПР) и роженицами по фоновому ВНА.
При использовании в качестве индукторов агглютинации эритроцитов МА, в частности изосероклонаТМ анти-D, установлено [5-7], что и в этом случае фоновое ВНАМА эритроцитов
у женщин практически не зависит от этапа репродуктивного процесса и наличия УПР. Так, по данным О.М. Безмельцевой и соавторов [5], фоновое ВНАма у мужчин (доноров крови) составило 11 с, у женщин в I, II и III триместрах беременности - соответственно 16; 11,5 и 11 с, у рожениц - 11 с, а у женщин с УПР - 10 с; различия между группами были статистически незначимы (№ 19А в таблице). В аналогичных исследованиях А.В. Марьиной [6], при индукции агглютинации с помощью изосероклонаТМ анти-D фоновое ВНАМА эритроцитов (№ 19Б в таблице) у беременных женщин (I, II и III триместры), рожениц (латентная фаза I периода родов) и беременных с УПР (22-31 нед.) составило соответственно (медиана) 17; 11; 13,5; 14,5 и 11 с, а у мужчин - 10 с. При этом ВНАМА эритроцитов у женщин было выше, чем у мужчин (11-17 с против 10 с), однако у женщин ВНАМА не зависело от срока беременности, наличия родовой деятельности или УПР, т. к. различия между всеми группами женщин были статистически незначимы. В исследовании В.И. Циркина и соавторов [7] при индукции агглютинации с помощью изосероклонаТМ анти-D фоновое ВНАМА (№ 19В в таблице) беременных (II триместр), рожениц (латентная фаза I периода родов) и женщин с УПР (2436 нед.) составило соответственно 18; 15 и 10,5 с, а у мужчин - 10,5 с. При этом все различия между группами были статистически незначимы. Таким образом, применение МА (как и применение СПА) в качестве индуктора агглютинации не позволило обнаружить различия между роженицами и беременными, в т. ч. при наличии у них УПР.
При использовании в качестве индуктора агглютинации солевого экстракта гороха посевного (Pisum sativum L.) в соотношении субстрата и раствора Кребса 1:5 [6] фоновое ВНАфГАг эритроцитов у беременных женщин (I, II, III триместры), рожениц (латентная фаза I периода родов), женщин с УПР (22-31 нед.) и мужчин составило соответственно (медиана) 34,5; 73; 70; 116,5; 56 и 47 с (№ 20 в таблице). При этом у женщин во всех группах,
за исключением беременных в I триместре, ВНАЛТ,Д было статистически значимо больше,
ФГАг
чем у мужчин, а у женщин во II и в III триместрах беременности оно было больше, чем у женщин в I триместре; у рожениц ВНАфГАг было больше, чем у беременных (I, II и III триместры), соответственно на 238, 60 и 66 %, а у женщин с УПР было таким же, как у беременных без УПР (II и III триместры), но статистически значимо ниже, чем у рожениц (56 с против 116,5 с).
При использовании в качестве индуктора агглютинации солевого экстракта фасоли обыкновенной (Phaseolus vulgaris L.) в соотношении субстрата и раствора Кребса 1:50 [6] фоновое ВНАф эритроцитов у беременных женщин (I, II и III триместры), рожениц (латентная фаза I периода родов), женщин с УПР и мужчин составило соответственно (медиана) 18,0; 21,5; 20,5; 35,0; 27,5 и 14,0 с (№ 21 в таблице). При этом ВНАфГАф у женщин в I, II и III триместрах не отличалось от ВНАфГАф мужчин, а ВНАфГАф у рожениц (35 с) было статистически значимо выше, чем у женщин во II (на 63 %) и в III (на 71 %) триместрах; у женщин с УПР ВНАфГАф было статистически значимо выше, чем у женщин в III триместре (27,5 с против 20,5 с, т. е. на 34 %), но ниже, чем у рожениц (27,5 с против 35,0 с). Следует подчеркнуть, что выявленное в исследованиях А.В. Марьиной [6] повышение ВНАфгаг, ВНАфГАф у рожениц и ВНАфГАф у женщин с УПР в определенной степени согласуется с данными K. Lange-Konior [11] о появлении при срочных родах в крови фактора, ингиби-рующего способность эритроцитов к агглютинации, индуцируемую фГА из семян гороха посевного (Pisum sativum L.). Не исключено, что наличие такого фактора и вызывает повышение ВНА эритроцитов у рожениц и, частично, у женщин с УПР.
Таким образом, можно констатировать, что при беременности, в родах и при УПР аг-глютинабельность эритроцитов меняется, но это изменение выявляется лишь при использовании в качестве индукторов агглютинации
ФГАг и ФГАф и не обнаруживается при использовании СПА или МА. В частности, применение ФГА как индукторов агглютинации позволило обнаружить повышение фонового ВНА: во II и в III триместрах беременности по сравнению с I триместром (выявлено для ФГАг); у рожениц по сравнению с показателями беременных женщин - на 60-77 % (выявлено для ФГАг) и 60-66 % (для ФГАф); у женщин с УПР - на 34 % по сравнению с беременными без УПР (выявлено для ФГАф). Это указывает на возможность определения срока предстоящих родов при доношенной беременности и риска перехода УПР в преждевременные роды (ПР) по значению фонового ВНА эритроцитов при использовании ФГАф или ФГАг как индукторов агглютинации. При этом мы не исключаем, что в будущем будет найден такой индуктор агглютинации (из ФГА), который с вероятностью, близкой к 1, будет указывать на переход УПР в ПР или, наоборот, на то, что перехода УПР в ПР не произойдет.
БАВ-модулированная агглютинация эритроцитов венозной крови в зависимости от вида индуктора агглютинации. В нашей лаборатории был изучен характер изменения ВНА эритроцитов у небеременных, беременных, рожениц и женщин с УПР под влиянием адреналина [1-3, 8], ацетилхолина (АХ) [3], окситоцина [4], серотонина [5], водорастворимого гестагена дидрогестерона (дюфастон) [7, 9] и водорастворимого эстрадиола валерата (прогинова) [7, 9]. При этом в опытах с адреналином были применены 4 вида индукторов агглютинации: СПА [1-3], МА (анти-D) [6, 7], солевые экстракты семян гороха (ФГАг) и фасоли (ФГАф) [8]. При исследовании остальных веществ в качестве индуктора агглютинации эритроцитов женщин использовали СПА [3, 4] или МА (анти-D) [5, 7, 9].
Влияние адреналина на ВНАСШ. При индукции агглютинации эритроцитов гепарини-зированной венозной крови с помощью СПА (анти-А, анти-В) [1-3] у небеременных женщин в фолликулярную фазу цикла адреналин
в концентрациях 10-10, 10-9, 10-8, 10-7 и 10-6 г/мл статистически значимо и дозозависимо снижал ВНАспа эритроцитов до 86-72 % от контроля. У женщин в лютеиновую фазу цикла, а также в I триместре беременности адреналин ни в одной из исследованных концентраций (10-1010-6 г/мл) не влиял на ВНАспа. В то же время во II триместре беременности адреналин в концентрации 10-10 г/мл увеличивал ВНАспа, а в концентрациях 10-9, 10-8, 10-7, 10-6 г/мл - не изменял ВНАспа. В III триместре адреналин в концентрациях 10-10, 10-8, 10-7 и 10-6 г/мл статистически значимо увеличивал ВНА , у рожениц в концентрациях 10-10, 10-9, 10-8, 10-7 и 10-6 г/мл - снижал ВНАспа. Таким образом, при неосложненном течении беременности и родов характер реакции эритроцитов на адреналин, судя по ВНАспа, изменяется (№ 22А в таблице). Вероятнее всего, это связано с тем, что при беременности в эритроцитах возрастает эффективность активации бета2-адрено-рецепторов (бета2-АР), а в родах, наоборот, преимущественно возрастает эффективность активации альфа1-АР [1-3]. Такое заключение было сделано по результатам специально проведенных серий опытов, в которых изучалось влияние адреналина на ВНА эритроцитов мужчин при наличии в среде адреноблокато-ров [20-22]: установлено, что при активации бета2-АР ВНАспа возрастает, а при активации альфа1-АР - снижается.
Адренореактивность эритроцитов у женщин с УПР была оценена в другой нашей работе при использовании в качестве индуктора агглютинации СПА [3]. У женщин с УПР (в III триместре беременности), как и у рожениц, адреналин во всех исследуемых концентрациях (10-10-10-6 г/мл) статистически значимо снижал ВНАспа, в то время как у женщин без УПР (III триместр), что отмечалось и выше, адреналин в концентрациях 10-10, 10-8, 10-7 и 10-6 г/мл статистически значимо увеличивал ВНАспа (№ 22Б в таблице). Это означает, что при УПР, как и при срочных родах, снижается эффективность активации бета2-АР и возрастает эффективность активации альфа1-АР. Таким образом,
наличие этих изменений при УПР указывает на процессы, которые при определенных условиях могут привести к переходу УПР в ПР.
Влияние адреналина на ВНАШ. Оценка адренореактивности эритроцитов, основанная на исследовании влияния адреналина на агглютинацию эритроцитов, индуцируемую МА, в частности изосероклоном™ анти^ ^М, была проведена в двух наших работах [7, 8]. В одной из них [7] (№ 23А в таблице) адреналин (10-10—10-5 г/мл) не влиял на ВНАма у беременных (все триместры), рожениц (латентная фаза I периода родов) и женщин с УПР (II триместр), но снижал ВНАМА у мужчин - доноров крови (в концентрациях 10-10 и 10-9 г/мл). Однако в другом исследовании [8] адреналин статистически значимо повышал ВНАМА эритроцитов в I триместре (в концентрациях 10-10 и 10-9 г/мл) и во II триместре (10-10, 10-7 и 10-6 г/мл), не влиял на ВНАМА эритроцитов в III триместре, у рожениц и мужчин, но в концентрации 10-5 г/мл статистически значимо снижал ВНАМА у женщин с УПР (№ 23Б в таблице). Таким образом, полного совпадения с данными, полученными при индукции агглютинации с помощью СПА, в обеих работах с использованием МА [7, 8] не получено, хотя их результаты, особенно А.В. Марьиной [8], подтверждают направленность изменений адрено-реактивности эритроцитов при беременности, в т. ч. при наличии УПР.
Влияние адреналина на ВНАфга. Исследование адренореактивности эритроцитов венозной гепаринизированной крови в условиях агглютинации эритроцитов, индуцируемой ФГА из семян гороха (ФГАг) или фасоли (ФГАф), было проведено параллельно с исследованием, в котором агглютинацию индуцировали с помощью МА [8]. При индукции агглютинации эритроцитов с помощью ФГАг адреналин повышал ВНАФГАг эритроцитов у беременных в I триместре (в концентрациях 10-10 и 10-9 г/мл), не влиял на ВНАФГАг эритроцитов во II и в III триместрах, снижал ВНАФГАг у рожениц (10-8 г/мл) и не влиял на ВНАФГАг у женщин с УПР (№ 24 в таблице). Таким образом, эти
данные отличаются о тех, что выявлены при индукции агглютинации с помощью МА.
При индукции агглютинации эритроцитов с помощью ФГАф данные [8] в большей степени совпадали с изменениями адренореак-тивности, выявленными при индукции агглютинации с помощью СПА. Действительно, в этих опытах (№ 25 в таблице) адреналин повышал ВНАфГАф у беременных в I (в концентрации 10-9 г/мл), во II (10-9, 10-7 и 10-5 г/мл) и в III (10-10, 10-8, 10-7 и 10-6 г/мл) триместрах, но снижал ВНАфГАф у рожениц (10-7 г/мл) и женщин с УПР (10-6 г/мл). Все это подтверждает представление о том, что при беременности в эритроцитах (как и в миоцитах матки) повышается эффективность активации бета2-АР, в то время как накануне и во время срочных родов, а также при УПР возрастает эффективность активации альфа1-АР. В специально проведенной серии опытов с эритроцитами беременных (II триместр) женщин при использовании таких адреноблокаторов, как пропранолол, ате-нолол и ницерголин, было установлено [8], что на фоне ФГАф-агглютинации эритроцитов (как и при СПА-агглютинации) активация бета2-АР повышает ВНАфГАф эритроцитов, в то время как активация альфа1-АР снижает ВНАфГАф.
Итак, при использовании в качестве индуктора агглютинации ФГА результаты исследования адренореактивности [8] в целом совпадают с теми, что получены при оценке адренореактивности эритроцитов, агглютинация которых вызывалась с помощью СПА [1-3] или МА [7, 8]. Поэтому можно заключить, что при оценке адренореактивности эритроцитов применение ФГАф в качестве индуктора агглютинации может быть полезным для подтверждения наличия УПР, а использование ФГАг дает возможность оценить вероятность перехода УПР в ПР, т. к. при индукции агглютинации с помощью ФГАф адреналин снижает ВНАФГАф и у рожениц, и у женщин с УПР, а при индукции агглютинации с помощью ФГАг адреналин снижает ВНАФГАг у рожениц, но не влияет на ВНАФГАг у женщин с УПР. В будущем, вероятно, будет найден такой ФГА, который позволит более
точно характеризовать изменения адренореак-тивности эритроцитов, происходящие при беременности, срочных родах и УПР.
Влияние АХ на ВНА . При изучении механизма влияния АХ на ВНА в специальных опытах с эритроцитами гепаринизированной венозной крови мужчин, агглютинацию которых вызывали с помощью СПА, показано [23], что АХ снижает ВНАспа интактных эритроцитов. Это объясняется активацией М1- и М3-холинорецепторов (ХР), т. к. на фоне селективной блокады этих рецепторов АХ уже не снижал ВНАСПА. Более того, в таких условиях АХ, наоборот, повышал ВНАСПА. Не исключается, что повышение обусловлено активацией М2-ХР и М.-ХР [23]. При исследовании влияния АХ (10-10-6 г/мл) на ВНА у женщин (при индукции агглютинации с помощью СПА) было показано [3], что у небеременных женщин в фолликулярную фазу цикла АХ во всех исследуемых концентрациях статистически значимо снижает ВНАСПА эритроцитов (вероятно, как следствие доминирования эффективности активации М1-ХР и М^ХР), у небеременных женщин в лютеиновую фазу цикла и женщин в I триместре беременности АХ не влияет на ВНАСПА (возможно, вследствие уменьшения эффективности активации М1-ХР и М3-ХР). Во II триместре АХ снижал ВНАСПА (в концентрации 10-10 г/мл), а в III триместре (в концентрациях 10-9, 10-7 и 10-6 г/мл) - наоборот, повышал ВНАСПА (возможно, за счет роста эффективности активации М^ХР и М4-ХР), однако у рожениц (латентная фаза I периода срочных родов) и женщин с УПР (III триместр беременности) АХ (10-8, 10-7 и 10-6 г/мл) снижал ВНАСПА, что, вероятно, объясняется восстановлением эффективности активации М1-ХР и М^ХР (№ 26 в таблице). Таким образом, у женщин с УПР АХ не повышает ВНАСПА эритроцитов, как это имеет место у женщин без УПР (III триместр), а наоборот, как и у рожениц, снижает ВНАСПА. Эти данные позволяют говорить о перспективности оценки М-холинореактивности эритроцитов при диагностике УПР по АХ-зависимой агглютинации эритроцитов, вызванной СПА.
В настоящее время сведения о характере влияния АХ на ВНА эритроцитов беременных и рожающих женщин при индукции агглютинации с помощью цоликлонов (МА) или лектинов (ФГАг, ФГАф) отсутствуют. Однако в опытах с эритроцитами гепаринизированной венозной крови небеременных крыс (фаза метаэструса) удалось показать [26], что при агглютинации, вызываемой ФГАф, АХ повышает ВНАФГАф (10-10, 10-9 и 10-7 г/мл) соответственно до 122, 136 и 120 % от исходного уровня. При этом эстрадиола валерат (прогинова, 10-6 г/мл), активируя эстрогеновые мембранные рецепторы, блокирует данную способность АХ, а дидроге-стерон (дюфастон, 10-6 г/мл) не влияет на нее. Таким образом, полагаем, что для изучения М-холинореактивности эритроцитов человека методом АХ-зависимой агглютинации будут полезны ФГА, в т. ч. ФГА из семян фасоли.
Влияние окситоцина на ВНАСПА. В исследовании О.М. Безмельцевой и соавторов [4] (№ 27 в таблице) окситоцин статистически значимо повышал ВНАСПА (в концентрациях 10-3 и 10-2 МЕ/мл) у мужчин, а также у женщин в I триместре беременности, но не влиял на ВНАСПА эритроцитов у женщин во II и в Ш триместрах беременности, в т. ч. при наличии у них УПР В то же время окситоцин повышал ВНАСПА у рожениц (в концентрации 10-2 МЕ/мл), но не влиял на ВНАСПА у лактирующих женщин. Таким образом, изучение окситоцинореактивно-сти эритроцитов позволяет использовать этот показатель для оценки вероятности перехода УПР в ПР. Не исключаем, что для этих целей можно использовать ФГАф. Действительно, в опытах с эритроцитами гепаринизирован-ной венозной крови мужчин при индукции агглютинации солевым экстрактом фасоли (ФГАф) показано [27], что на интактных эритроцитах окситоцин статистически значимо не влияет на ВНАФГАф, в то время как на фоне блокады окситоциновых рецепторов атози-баном (трактоцилом, 10-6 г/мл) окситоцин в концентрации 10-3 МЕ/мл статистически значимо снижает ВНАФГАф. С одной стороны, эти данные подтверждают, что ФГАф можно ис-
пользовать для оценки реакции эритроцитов на окситоцин, а с другой - они указывают на наличие двух разновидностей окситоциновых рецепторов (ОР) в эритроцитах мужчин (и, вероятно, женщин) - атозибанчувствительных и атозибаннечувствительных. В условиях индукции агглютинации с помощью ФГАф активация атозибанчувствительных ОР повышает ВНАфГАф, а активация атозибаннечувствительных - наоборот, снижает ВНАфГАф. В этих исследованиях также установлено, что водорастворимый гестаген дидрогестерон (дюфастон) за счет активации мембранных рецепторов прогестерона увеличивает эффективность активации атозибанчувствительных ОР, т. к. на фоне дюфастона окситоцин (10-5 МЕ/мл) статистически значимо повышает ВНАфГАф эритроцитов у мужчин. Таким образом, мы не исключаем возможность применения ФГАф для оценки изменения окситоцинореактивности эритроцитов у беременных женщин и рожениц.
Влияние серотонина на ВНАШ. О.М. Без-мельцева и соавторы [5] исследовали ВНА эритроцитов гепаринизированной венозной крови женщин и мужчин, используя в качестве индуктора агглютинации МА (изосероклон™ анти-D IgM). Они установили (№ 28 в таблице), что серотонин статистически значимо снижает ВНАма эритроцитов у женщин в I триместре (в концентрациях 10-8, 10-7 и 10-6 г/мл), не влияет на ВНАма эритроцитов у женщин во II триместре и вновь статистически значимо снижает ВНАма у женщин в III триместре (10-7 и 10-4 г/мл) и в латентную фазу I периода родов (10-8 и 10-7 г/мл), но не влияет на ВНАма эритроцитов у женщин с УПР. У мужчин серото-нин снижал ВНАма (10-4 г/мл). Таким образом, оценка серотонинореактивности эритроцитов позволяет использовать данный показатель (как и оценку окситоцинореактивности) для определения вероятности перехода УПР в ПР. Не исключаем, что для этих целей можно использовать ФГАф. Однако результаты опытов с эритроцитами гепаринизированной венозной крови мужчин, агглютинацию которых вызывали ФГАф, пока не дали убедительного доказатель-
ства такой перспективы [27]. Действительно, эти опыты лишь подтвердили, что эритроциты мужчин обладают низкой чувствительностью к серотонину, т. к. ни в одной из исследуемых концентраций (10-8-10-4 г/мл) серотонин не вызывал статистически значимого изменения ВНА^,, а
ФГАф'
дидрогестерон (10-6 г/мл) не изменял реакцию эритроцитов на серотонин.
Влияние дидрогестерона (дюфастон) на ВНАШ. Установлено (№ 29А в таблице) [7], что водорастворимый гестаген дидрогестерон (10-9 -10-6 г/мл) в условиях агглютинации, вызываемой МА (изосероклоном™ анти-D IgM), не влияет на ВНАма эритроцитов у мужчин и беременных женщин, в т. ч. при УПР, но снижает ВНАма у рожениц (10-9 г/мл). Это косвенно говорит об изменении при срочных родах эффективности активации ассоциированных с G-белком мембранных рецепторов прогестерона (mPRa, mPRß, mPRy), о наличии которых сообщается в литературе [28], а также о целесообразности изучения реакции эритроцитов на дидрогестерон для оценки вероятности перехода УПР в ПР. Однако А.В. Вырво и
A.В. Марьина [9] при использовании в качестве индуктора агглютинации МА (изосероклона™ анти-D IgM) показали (№ 29Б в таблице), что дидрогестерон (дюфастон, 10-9-10-6 г/мл) не влияет на ВНАма эритроцитов беременных женщин (I, II и III триместры), рожениц и мужчин. Иначе говоря, в этой работе не удалось выявить статистически значимого снижения ВНАма эритроцитов у рожениц под влиянием дидрогестерона, как это было выявлено
B.И. Циркиным и соавторами [7].
Влияние эстрадиола валерата (прогино-ва) на ВНАша. Показано (№ 31А в таблице) [7], что эстрадиола валерат (прогинова, 10-910-6 г/мл) не влияет на ВНАма эритроцитов у мужчин, беременных женщин, в т. ч. при УПР, и у рожениц. Это означает, что активация ассоциированных с G-белком мембранных рецепторов эстрогенов типа mERa, описанных в литературе [29], не изменяет ВНАма. Однако в другой работе нашей лаборатории [9] выявлено (№ 31Б в таблице), что эстрадиола валерат
(прогинова) не влияет на ВНАМД эритроцитов у мужчин и беременных женщин (I триместр), но повышает ВНАма во II триместре (10-9 г/мл) и снижает ВНА в Ш триместре (10-9, 10-8 г/мл) и у рожениц (10-6г/мл). Таким образом, в этой работе удалось продемонстрировать, что эритроциты беременных женщин содержат мембранные рецепторы эстрогенов типа mERa, активация которых влияет на агглютинабельность эритроцитов.
Влияние дидрогестерона (дюфастон) и эстрадиола валерата (прогинова) на эффективность активации АР эритроцитов, определяемую по ВНАма. Показано [7], что дидрогестерон (дюфастон, 10-6 г/мл) и эстрадиола валерат (прогинова, 10-6 г/мл) не влияют на способность адреналина изменять ВНАМД у беременных женщин (II и III триместры), но повышают способность адреналина снижать ВНАМД эритроцитов у рожениц и женщин с УПР (№ 30 и 32 в таблице). Это указывает на то, что дидрогестерон и эстрадиол, активируя соответствующие мембранные рецепторы, повышают эффективность активации альфа1-ДР. В то же время у мужчин оба гормона снижали эффективность активации альфа1-ДР [7].
Обобщая полученные в нашей лаборатории результаты исследования влияния дидрогесте-рона и эстрадиола валерата на агглютинабель-ность эритроцитов, в частности на ВНАМД [7, 9], отметим их неоднозначность, что указывает на необходимость проведения дополнительных исследований. В то же время можно утверждать, что изучение эстрогенореактивности эритроцитов может быть полезным для диагностики УПР, а изучение их прогестеронореактивности - для оценки вероятности перехода УПР в ПР. Полагаем, что для этих целей можно использовать ФГАф. Однако первые исследования, проведенные с эритроцитами гепаринизированной венозной крови небеременных (на разных фазах цикла) крыс, агглютинацию которых вызывали ФГДф, не выявили влияние дидрогестерона и эстрадиола валерата на ВНАФГДф эритроцитов крыс и на их адренореактивность [30], поэтому нужны дополнительные исследования относительно возможности применения лектинов для
оценки эстрогено- и прогестеронореактивности эритроцитов.
В целом представленные данные говорят о перспективности применения лектинов, в т. ч. ФГАф, для характеристики состояния БАВ-реактивности эритроцитов, что может быть использовано с целью оценки точного срока наступления родов при доношенной беременности и риска перехода УПР в ПР, а также для выбора тактики терапии при УПР.
***
В части 3 обзора будут обобщены данные литературы, касающиеся функционального состояния эритроцитов у беременных женщин, рожениц и женщин с УПР, а также будет сделана попытка классифицировать все анализируемые 32 показателя с позиций возможности их использования для диагностики УПР и оценки вероятности перехода УПР в ПР.
Список литературы
1. Володченко А.И., Циркин В.И., Хлыбова С.В., Дмитриева С.Л. Адренореактивность эритроцитов, определяемая по их адренозависимой агглютинации, у женщин на различных этапах репродуктивного процесса // Вят. мед. вестн. 2013. № 1. С. 25-31.
2. Володченко А.И., Циркин В.И., Хлыбова С.В., Дмитриева С.Л. Изменение скорости адренозависимой агглютинации эритроцитов у женщин на различных этапах репродуктивного процесса // Рос. вестн. акушера-гинеколога. 2013. Т. 13, № 6. С. 10-15.
3. Циркин В.И., Володченко А.И., Хлыбова С.В., Дмитриева С.Л., Братухина О.А. Адрено- и М-холинореактивность эритроцитов женщин на протяжении репродуктивного процесса // Вестн. Сев. (Арктич.) федер. ун-та. Сер.: Мед.-биол. науки. 2014. № 2. С. 78-90.
4. Безмельцева О.М., Махнева А.И., Шушканова Е.Г., Циркин В.И., Черепанова Т.В., Дмитриева С.Л., Попова В.С., Хлыбова С.В., КостяевА.А. Влияние окситоцина на скорость агглютинации эритроцитов человека, индуцированной изогемагглютинирующей сывороткой // Мед. альм. 2014. № 5(35). С. 71-74.
5. Безмельцева О.М., Циркин В.И., Дмитриева С.Л., Братухина О.А., Черепанова Т.В., Костяев А.А. Влияние серотонина на скорость агглютинации эритроцитов, индуцированной анти-D IgM-реагентом, у беременных женщин, рожениц и женщин с угрозой преждевременных родов // Мед. альм. 2015. № 4(39). С. 55-58.
6. Марьина А.В. Время начала агглютинации эритроцитов человека, индуцированной изосероклоном™ анти-D IgM и фитогемагглютининами фасоли и гороха // Вопросы фундаментальной и прикладной физиологии в исследованиях студентов вузов: материалы VII Всерос. молодеж. науч. конф. Киров, 2015. С. 95-99.
7. Циркин В.И., Бышева М.В., Чистякова Л.В., Дмитриева С.Л., Черепанова Т.В., Братухина О.А., Костяев А.А., Марьина А.В. Влияние прогестерона и эстрогена на скорость агглютинации и адренореактивность эритроцитов беременных женщин и рожениц // Мед. альм. 2015. № 4(39). С. 52-55.
8. Марьина А.В. Время начала агглютинации эритроцитов человека в присутствии адреналина, адреноблокаторов и в зависимости от индукторов агглютинации // Вопросы фундаментальной и прикладной физиологии в исследованиях студентов вузов: материалы VIII Всерос. молодеж. науч. конф. Киров, 2016. С. 123-128.
9. Вырво А.В., Марьина А.В. Влияние эстрогена и прогестерона на скорость агглютинации эритроцитов человека, индуцированной анти-D ^М-реагентом // Вопросы фундаментальной и прикладной физиологии в исследованиях студентов вузов: материалы VIII Всерос. молодеж. науч. конф. Киров, 2016. С. 41-46.
10. Василевский М.Г. Влияние беременности на серологические свойства эритроцитов // Акушерство и гинекология. 1983. № 12. С. 36-38.
11. Lange-Konior K. Activity of Agglutinin Inhibitor of the Kujavian Pea (Pisum sativum L.) in Mothers' Blood and Umbilical Cord Blood Considering the Course of Pregnancy and Delivery // Ann. Acad. Med. Stetin. 1999. Vol. 45. P. 41-54.
12. Зотиков Е.А., Манишкина Р.П., Файнштейн Ф.Е., Хорошко Н.Д., Фриновская И.В. Об ингибирующем действии кортикостероидых гормонов, эпсилон-аминокапроновой кислоты и мочевины на агглютинирующую активность антител // Докл. АН СССР. 1969. Т. 185, № 5. С. 1161-1163.
13. Потапов М.И. Гемагглютинирующие свойства (фитагглютинины) экстрактов из семян семейства бобовых (сообщение I) // Судеб.-мед. экспертиза. 1961. № 3. С. 20-26.
14. Baumann C.M., Strosberg A.D., Rüdiger H. Purification and Characterization of a Mannose/Glucose-Specific Lectin from Vicia cracca // Eur. J. Biochem. 1982. Vol. 122, № 1. P. 105-110.
15. Dupuis G., Leclair B. Studies on Phaseolus vulgaris Phytohemagglutinin. Structural Requirements for Simple Sugars to Inhibit the Agglutination of Human Group A Erythrocytes // FEBS Lett. 1982. Vol. 144, № 1. P. 29-32.
16. Kamemura K., Furuichi Y., Umekawa H., Takahashi T. Purification and Characterization of Novel Lectins from Great Northern Bean, Phaseolus vulgaris L. // Biochim. Biophys. Acta. 1993. Vol. 1158, № 2. Р. 181-188.
17. Антонюк В.А. Роль лектинов как биологически активных веществ в фармацевтических препаратах // Фармакокинетика и фармакодинамика. 2014. № 1. С. 14-20.
18. Махнева А.И., Безмельцева О.М., Мойсеенко Н.А., Циркин В.И., Дмитриева С.Л., Попова В.С., Черепанова Т.В., Хлыбова С.В. Влияние адреналина на скорость агглютинации эритроцитов человека, вызванную фитогемагглютинином // Мед. альм. 2014. № 5(35). С. 77-80.
19. Циркин В.И., Громова М.А., Колчина Д.А., Михайлова В.И., Плясунова Я.К. Оценка адренореактивности эритроцитов, основанная на способности адреналина повышать скорость агглютинации эритроцитов // Фундам. исследования. 2008. № 7. С. 59-60.
20. Володченко А.И., Циркин В.И., Костяев А.А. Механизм влияния адреналина на скорость агглютинации эритроцитов человека // Яросл. пед. вестн. 2012. Т. 3, № 2. С. 80-85.
21. Циркин В.И., Ноздрачев А.Д., Володченко А.И. Механизм повышения скорости агглютинации эритроцитов человека под влиянием адреналина и его связь с эриптозом // Докл. Акад. наук. 2013. Т. 451, № 4. С. 464-467.
22. Володченко А.И., Циркин В.И., Костяев А.А. Механизм изменения скорости агглютинации эритроцитов человека под влиянием адреналина // Физиология человека. 2014. Т. 40, № 2. С. 67-74.
23. Циркин В.И., Володченко А.И., КостяевА.А. Механизм влияния ацетилхолина на скорость агглютинации эритроцитов человека // Вестн. Сев. (Арктич.) федер. ун-та. Сер.: Мед.-биол. науки. 2013. № 1. С. 77-90.
24. deMoerloose P., Casini A., Neerman-ArbezM. Congenital Fibrinogen Disorders: An Update // Semin. Thromb. Hemost. 2013. Vol. 39, № 6. Р. 585-595.
25. Brenner B. Haemostatic Changes in Pregnancy // Thromb. Res. 2004. Vol. 114, № 5-6. P. 409-414.
26. Ситникова Е.Ю., Харина В.А., Марьина А.В. Влияние ацетилхолина, прогестерона и эстрогена на скорость агглютинации эритроцитов небеременных крыс, индуцируемой фитогемагглютинином // Вопросы фундаментальной и прикладной физиологии в исследованиях студентов вузов: материалы VIII Всерос. молодеж. науч. конф. Киров, 2016. С. 169-173.
27. Безмельцева О.М., Марьина А.В. Влияние прогестерона на способность серотонина и окситоцина изменять скорость агглютинации эритроцитов мужчин, индуцированную фитогемагглютинином фасоли. Эффект атозибана // Вопросы фундаментальной и прикладной физиологии в исследованиях студентов вузов: материалы VIII Всерос. молодеж. науч. конф. Киров, 2016. С. 20-25.
28. WetendorfM., DeMayo F.J. Progesterone Receptor Signaling in the Initiation of Pregnancy and Preservation of a Healthy Uterus // Int. J. Dev. Biol. 2014. Vol. 58, № 2-4. Р. 95-106.
29. Prabhushankar R., Krueger C., Manrique C. Membrane Estrogen Receptors: Their Role in Blood Pressure Regulation and Cardiovascular Disease // Curr. Hypertens. Rep. 2014. Vol. 16, № 1. Art. № 408.
30. Чистякова Л.В., Бышева М.В., Марьина А.В. Влияние адреналина, прогестерона и эстрогена на скорость агглютинации эритроцитов, индуцируемой фитогемагглютинином, у небеременных крыс // Вопросы фундаментальной и прикладной физиологии в исследованиях студентов вузов: материалы VIII Всерос. молодеж. науч. конф. Киров, 2016. С. 196-200.
References
1. Volodchenko A.I., Tsirkin VI., Khlybova S.V., Dmitrieva S.L. Adrenoreaktivnost' eritrotsitov, opredelyaemaya po ikh adrenozavisimoy agglyutinatsii, u zhenshchin na razlichnykh etapakh reproduktivnogo protsessa [Adrenoreactivity of Woman Erythrocytes at Various Stages of the Reproductive Process Defined by Their Adrenaline-Dependent Agglutination]. Vyatskiy meditsinskiy vestnik, 2013, no. 1, pp. 25-31.
2. Volodchenko A.I., Tsirkin V.I., Khlybova S.V, Dmitrieva S.L. Izmenenie skorosti adrenozavisimoy agglyutinatsii eritrotsitov u zhenshchin na razlichnykh etapakh reproduktivnogo protsessa [Changes in the Rate of Adrenaline-Dependent Agglutination in the Red Blood Cells of Women at Various Stages of the Reproductive Process]. Rossiyskiy vestnik akushera-ginekologa, 2013, vol. 13, no. 6, pp. 10-15.
3. Tsirkin V.I., Volodchenko A.I., Khlybova S.V, Dmitrieva S.L., Bratukhina O.A. Adreno- i M-kholinoreaktivnost' eritrotsitov zhenshchin na protyazhenii reproduktivnogo protsessa [Adreno- and M-Cholinergic Reactivity of Erythrocytes in Women Throughout Their Reproductive Process]. Vestnik Severnogo (Arkticheskogo) federal'nogo universiteta. Ser.: Mediko-biologicheskie nauki, 2014, no. 2, pp. 78-90.
4. Bezmel'tseva O.M., Makhneva A.I., Shushkanova E.G., Tsirkin VI., Cherepanova T.V, Dmitrieva S.L., Popova VS., Khlybova S.V., Kostyaev A.A. Vliyanie oksitotsina na skorost' agglyutinatsii eritrotsitov cheloveka, indutsirovannoy izogemagglyutiniruyushchey syvorotkoy [Influence of Oxytocin on the Rate of Agglutination of Human Erythrocytes Induced by Isohemagglutinating Serum]. Meditsinskiy al'manakh, 2014, no. 5, pp. 71-74.
5. Bezmel'tseva O.M., Tsirkin VI., Dmitrieva S.L., Bratukhina O.A., Cherepanova T.V, Kostyaev A.A. Vliyanie serotonina na skorost' agglyutinatsii eritrotsitov, indutsirovannoy anti-D IgM-reagentom, u beremennykh zhenshchin, rozhenits i zhenshchin s ugrozoy prezhdevremennykh rodov [Influence of Serotonin on the Rate of Agglutination of Erythrocytes Induced by Anti-D IgM-Reagent in the Case of Pregnant Women, Birthing Mothers and Women Having the Danger of Premature Delivery]. Meditsinskiy al'manakh, 2015, no. 4, pp. 55-58.
6. Mar'ina A.V Vremya nachala agglyutinatsii eritrotsitov cheloveka, indutsirovannoy izoseroklonom™ anti-D IgM i fitogemagglyutininami fasoli i gorokha [The Start Time of Human Erythrocyte Agglutination Induced by Isoseroclone™ - Anti-D IgM and Phytohemagglutinin of Beans and Peas]. Voprosy fundamental'noy i prikladnoy fiziologii v issledovaniyakh studentov vuzov: materialy VII Vseros. molodezh. nauch. konf. [Issues of Fundamental and Applied Physiology in the Research of University Students: Proc. 7th All-Russ. Youth Sci. Conf.]. Kirov, 2015, pp. 95-99.
7. Tsirkin V.I., Bysheva M.V., Chistyakova L.V, Dmitrieva S.L., Cherepanova T.V., Bratukhina O.A., Kostyaev A.A., Mar'ina A.V. Vliyanie progesterona i estrogena na skorost' agglyutinatsii i adrenoreaktivnost' eritrotsitov beremennykh zhenshchin i rozhenits [Influence of Progesterone and Estrogen on the Rate of Agglutination and Adrenal Reactivity of Erythrocytes of Pregnant and Birthing Women]. Meditsinskiy al'manakh, 2015, no. 4, pp. 52-55.
8. Mar'ina A.V. Vremya nachala agglyutinatsii eritrotsitov cheloveka v prisutstvii adrenalina, adrenoblokatorov i v zavisimosti ot induktorov agglyutinatsii [The Start Time of Human Erythrocyte Agglutination in the Presence of Adrenaline, Adrenoblockers and Depending on Agglutination Inducers]. Voprosyfundamental'noy i prikladnoyfiziologii v issledovaniyakh studentov vuzov: materialy VIII Vseros. molodezh. nauch. konf. [Issues of Fundamental and Applied Physiology in the Research of University Students: Proc. 8th All-Russ. Youth Sci. Conf.]. Kirov, 2016, pp. 123-128.
9. Vyrvo A.V., Mar'ina A.V Vliyanie estrogena i progesterona na skorost' agglyutinatsii eritrotsitov cheloveka, indutsirovannoy anti-D IgM-reagentom [Effect of Estrogen and Progesterone on the Rate of Human Erythrocyte Agglutination Induced by Anti-D IgM-Reagent]. Voprosy fundamental'noy i prikladnoy fiziologii v issledovaniyakh studentov vuzov: materialy VIII Vseros. molodezh. nauch. konf. [Issues of Fundamental and Applied Physiology in the Research of University Students: Proc. 8th All-Russ. Youth Sci. Conf.]. Kirov, 2016, pp. 41-46.
10. Vasilevskiy M.G. Vliyanie beremennosti na serologicheskie svoystva eritrotsitov [The Effect of Pregnancy on the Serological Properties of Erythrocytes]. Akusherstvo i ginekologiya, 1983, no. 12, pp. 36-38.
11. Lange-Konior K. Activity of Agglutinin Inhibitor of the Kujavian Pea (Pisum sativum L.) in Mothers' Blood and Umbilical Cord Blood Considering the Course of Pregnancy and Delivery. Ann. Acad. Med. Stetin., 1999, vol. 45, pp. 41-54.
12. Zotikov E.A., Manishkina R.P., Faynshteyn F.E., Khoroshko N.D., Frinovskaya I.V Ob ingibiruyushchem deystvii kortikosteroidykh gormonov, epsilon-aminokapronovoy kisloty i mocheviny na agglyutiniruyushchuyu aktivnost' antitel [On the Inhibitory Effect of Corticosteroid Hormones, Epsilon-Aminocaproic Acid and Urea on the Agglutinating Activity of Antibodies]. Doklady AN SSSR, 1969, vol. 185, no. 5, pp. 1161-1163.
13. Potapov M.I. Gemagglyutiniruyushchie svoystva (fitagglyutininy) ekstraktov iz semyan semeystva bobovykh (soobshchenie I) [Hemagglutinizing Properties (Phytagglutinins) of Extracts from Seeds of the Legume Family (Report I)]. Sudebno-meditsinskaya ekspertiza, 1961, no. 3, pp. 20-26.
14. Baumann C.M., Strosberg A.D., Rüdiger H. Purification and Characterization of a Mannose/Glucose-Specific Lectin from Vicia cracca. Eur. J. Biochem., 1982, vol. 122, no. 1, pp. 105-110.
15. Dupuis G., Leclair B. Studies on Phaseolus vulgaris Phytohemagglutinin. Structural Requirements for Simple Sugars to Inhibit the Agglutination of Human Group A Erythrocytes. FEBS Lett., 1982, vol. 144, no. 1, pp. 29-32.
16. Kamemura K., Furuichi Y., Umekawa H., Takahashi T. Purification and Characterization of Novel Lectins from Great Northern Bean, Phaseolus vulgaris L. Biochim. Biophys. Acta, 1993, vol. 1158, no. 2, pp. 181-188.
17. Antonyuk VA. Rol' lektinov kak biologicheski aktivnykh veshchestv v farmatsevticheskikh preparatakh [Role of Lectins as Biologically Active Substances in Pharmaceutical Preparations]. Farmakokinetika i farmakodinamika, 2014, no. 1, pp. 14-20.
18. Makhneva A.I., Bezmel'tseva O.M., Moyseenko N.A., Tsirkin VI., Dmitrieva S.L., Popova VS., Cherepanova T.V, Khlybova S.V Vliyanie adrenalina na skorost' agglyutinatsii eritrotsitov cheloveka, vyzvannuyu fitogemagglyutininom [Influence of Adrenalin on the Rate of Human Erythrocytes agglutination Induced by Phytohemagglutinin]. Meditsinskiy al'manakh, 2014, no. 5, pp. 77-80.
19. Tsirkin VI., Gromova M.A., Kolchina D.A., Mikhaylova V.I., Plyasunova Ya.K. Otsenka adrenoreaktivnosti eritrotsitov, osnovannaya na sposobnosti adrenalina povyshat' skorost' agglyutinatsii eritrotsitov [Evaluation of Erythrocytes Adrenergic Reactivity Based on Adrenalin's Ability to Increase the Rate of Erythrocyte Agglutination]. Fundamental'nye issledovaniya, 2008, no. 7, pp. 59-60.
20. Volodchenko A.I., Tsirkin V.I., Kostyaev A.A. Mekhanizm vliyaniya adrenalina na skorost' agglyutinatsii eritrotsitov cheloveka [The Mechanism of Adrenaline Influence on Speed of Agglutination of the Person's Erythrocytes]. Yaroslavskiypedagogicheskiy vestnik, 2012, vol. 2, no. 3, pp. 80-85.
21. Tsirkin V.I., Nozdrachev A.D., Volodchenko A.I. Mechanism of Increasing the Rate of Agglutination of Human Erythrocytes Under the Influence of Adrenaline and Its Relation to Eryptosis. Dokl. Biol. Sci., 2013, vol. 451, no. 1, pp. 199-202.
22. Volodchenko A.I., Tsirkin VI., Kostyaev A.A. The Mechanism of Change in the Rate of Agglutination of Human Erythrocytes Under the Influence of Adrenaline. Human Physiology, 2014, vol. 40, no. 2, pp. 171-178.
23. Tsirkin V.I., Volodchenko A.I., Kostyaev A.A. Mekhanizm vliyaniya atsetilkholina na skorost' agglyutinatsii eritrotsitov cheloveka [Mechanism of the Effect of Acetylcholine on the Rate of Hemagglutination in Humans]. Vestnik Severnogo (Arkticheskogo) federal'nogo universiteta. Ser.: Mediko-biologicheskie nauki, 2013, no. 1, pp. 77-90.
24. de Moerloose P., Casini A., Neerman-Arbez M. Congenital Fibrinogen Disorders: An Update. Semin. Thromb. Hemost, 2013, vol. 39, no. 6, pp. 585-595.
25. Brenner B. Haemostatic Changes in Pregnancy. Thromb. Res., 2004, vol. 114, no. 5-6, pp. 409-414.
26. Sitnikova E.Yu., Kharina V.A., Mar'ina A.V. Vliyanie atsetilkholina, progesterona i estrogena na skorost' agglyutinatsii eritrotsitov neberemennykh krys, indutsiruemoy fitogemagglyutininom [Influence of Acetylcholine, Progesterone and Estrogen on the Rate of Hemagglutination in Nonpregnant Rats Induced by Phytohemagglutinin]. Voprosy fundamental'noy i prikladnoy fiziologii v issledovaniyakh studentov vuzov: materialy VIII Vseros. molodezh. nauch. konf. [Issues of Fundamental and Applied Physiology in the Research of University Students: Proc. 8th All-Russ. Youth Sci. Conf.]. Kirov, 2016, pp. 169-173.
27. Bezmel'tseva O.M., Mar'ina A.V. Vliyanie progesterona na sposobnost' serotonina i oksitotsina izmenyat' skorost' agglyutinatsii eritrotsitov muzhchin, indutsirovannuyu fitogemagglyutininom fasoli. Effekt atozibana [The Effect of Progesterone on the Ability of Serotonin and Oxytocin to Change the Rate of Hemagglutination in Men Induced by Bean Phytohemagglutinin. The Effect of Atosiban]. Voprosy fundamental'noy i prikladnoy fiziologii v issledovaniyakh studentov vuzov: materialy VIII Vseros. molodezh. nauch. konf. [Issues of Fundamental and Applied Physiology in the Research of University Students: Proc. 8th All-Russ. Youth Sci. Conf.]. Kirov, 2016, pp. 20-25.
28. Wetendorf M., DeMayo F.J. Progesterone Receptor Signaling in the Initiation of Pregnancy and Preservation of a Healthy Uterus. Int. J. Dev. Biol., 2014, vol. 58, no. 2-4, pp. 95-106.
29. Prabhushankar R., Krueger C., Manrique C. Membrane Estrogen Receptors: Their Role in Blood Pressure Regulation and Cardiovascular Disease. Curr. Hypertens. Rep., 2014, vol. 16, no. 1. Art. no. 408.
30. Chistyakova L.V., Bysheva M.V, Mar'ina A.V Vliyanie adrenalina, progesterona i estrogena na skorost' agglyutinatsii eritrotsitov, indutsiruemoy fitogemagglyutininom, u neberemennykh krys [The Effect of Adrenaline, Progesterone and Estrogen on the Rate of Hemagglutination Induced by Phytohemagglutinin in Nonpregnant Rats]. Voprosy fundamental'noy i prikladnoy fiziologii v issledovaniyakh studentov vuzov: materialy VIII Vseros. molodezh. nauch. konf. [Issues of Fundamental and Applied Physiology in the Research of University Students: Proc. 8th All-Russ. Youth Sci. Conf.]. Kirov, 2016, pp. 196-200.
DOI: 10.17238/issn2542-1298.2017.5.2.21
Viktor I. Tsirkin */**, Aleksandr D. Nozdrachev***, Konstantin Yu. Anisimov****, Svetlana L. Dmitrieva*****, Ol'ga A. Bratukhina*****, Svetlana V. Khlybova******
*Kazan State Medical University (Kazan, Russian Federation) **Vyatka State University (Kirov, Russian Federation) ***Saint Petersburg State University (St. Petersburg, Russian Federation) ****Ural State Medical University (Yekaterinburg, Russian Federation) *****Kirov Regional Clinical Perinatal Centre (Kirov, Russian Federation) ******Kirov State Medical University (Kirov, Russian Federation)
BACKGROUND AND BAS-INDUCED CHANGES IN ERYTHROCYTE FUNCTIONAL STATE AS INDICATORS OF THE THREAT OF PRETERM LABOUR IN WOMEN (Part 2)
Having analysed the data on background erythrocyte agglutination start time (AST) in nonpregnant, pregnant (three trimesters), parturient (stage 1 of labour) women and those with threatened preterm labour (TPL), we found that AST values depend on the stage of the reproductive process and the existence of TPL, provided that agglutination is induced by phytohemagglutinins (PHA and PHAb) contained in salt extracts of dried pea (Pisum sativum L.) or common bean (Phaseolus vulgaris L.) seeds. If agglutination is induced by serum polyclonal antibodies (pAbs) or monoclonal antibodies (mAbs), the values of the background ASTpAbs and background ASTmAbs do not reveal this relationship. Judging by the changes in ASTpAbs, ASTmAbs AsTPHAp and ASTPHAb under the influence of biologically active substances (BAS), the erythrocyte respOnse to them depends on the stage of the reproductive process and/or existence of TPL. Thus, during the study of the changes in ASTpAbs, ASTmAbs ASTPHAp and ASTPHAb under the influence of adrenaline it was found that in pregnancy the efficiency of activation of erythrocyte beta-adrenergic receptors (AST increase under the influence of adrenaline) grows and remains high during labour, while the efficiency of activation of alpha-adrenergic receptors (AST reduction under the influence of adrenalin) increases just before term labour and at TPL. Acetylcholine does not affect ASTpAbs in the 1st trimester; decreases it in the 2nd trimester, increases it in the 3rd trimester, but reduces it in labour and at TPL. Oxytocin increases ASTpAbs in the 1st trimester, does not affect it in the 2nd and 3rd trimesters and at TPL, but increases it in parturient women. Serotonin reduces ASTmAbs in the 1st trimester, does not affect it in the 2nd trimester, decreases it in the 3rd trimester and in labour,5 and produces no effect on it at TPL. Dydrogesterone and estradiol are able to nongenomically change the background and BAS-modulated AST. In conclusion, the article shows the prospects of research into erythrocyte agglutinability to diagnose TPL and estimate the probability of transition of TPL to preterm labour.
Keywords: erythrocyte functional state, indicators of threatened preterm labour, hemagglutination, pregnancy, labour.
Поступила 03.10.2016 Received: 3 October 2016
Corresponding author: Viktor Tsirkin, address: ul. Butlerova 49, Kazan, 420012, Russian Federation / ul. Moskovskaya 36, Kirov, 610000, Russian Federation; e-mail: tsirkin@list.ru
For citation: Tsirkin VI., Nozdrachev A.D., Anisimov K.Yu., Dmitrieva S.L., Bratukhina O.A., Khlybova S.V Background and BAS-Induced Changes in Erythrocyte Functional State as Indicators of the Threat of Preterm Labour in Women (Part 2). Journal of Medical and Biological Research, 2017, vol. 5, no. 2, pp. 21-36. DOI: 10.17238/issn2542-1298.2017.5.2.21
