Научная статья на тему 'Флавоноиды козлобородника восточного'

Флавоноиды козлобородника восточного Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

CC BY
271
74
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
КОЗЛОБОРОДНИК ВОСТОЧНЫЙ / ФЛАВОНОИДЫ / МЕТОДИКА КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ / ВЫСОКОЭФФЕКТИВНАЯ ЖИДКОСТНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ / БУМАЖНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ / СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКИЙ МЕТОД / TRAGOPOGON ORIENTALIS / FLAVONOIDS / METHOD OF QUANTITATIVE ANALYSIS / HPLC / PAPER CHROMATOGRAPHY / SPECTROPHOTOMETRY

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Бубенчикова В. Н., Прохорова С. А.

Проведено качественное изучение флавоноидов травы козлобородника восточного методом бумажной хроматографии и высокоэффективной жидкостной хроматографии, установлено наличие рутина, виценина, ориентина, апигенина, лютеолина и кверцетина и определено их количественное содержание. Разработана методика количественного определения суммы флавоноидов методом спектрофотометрии на основе реакции с алюминия хлоридом.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Бубенчикова В. Н., Прохорова С. А.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

THE FLAVONOIDS OF TRAGOPOGON ORIENTALIS L

Flavonoids of the herb of Tragopogon orientalis L. (salsify) were stadied by means of paper chromatography and high performance liquid chromatography (HPLC). Routin, vitsenin, orientin, apigenin, luteolin and quercetin were found in it, their quantity determined. Principles of quantitative analysis of total flavonoids by spectrophotometry, based on reaction with aluminum chloride, were developed.

Текст научной работы на тему «Флавоноиды козлобородника восточного»

ВЕСТНИК НОВЫХ МЕДИЦИНСКИХ ТЕХНОЛОГИЙ - 2011- Т. XVIII, № 3- С. 272

Таким образом, предложенная нами принципиальная схема оценки здоровья курсантов военных образовательных учреждений позволит повысить эффективность подготовки военных специалистов, оптимизировать деятельность медицинских работников и вместе с тем, практически не требует временных и материальных затрат при ее реализации. Данная схема, с наибольшим успехом может быть использована среди контингента курсантов военных образовательных учреждений, военнослужащих по призыву, и, в определенной мере, среди других категорий учащейся молодежи.

Литература

1. Агаджанян, Н.А. Функциональные резервы организма и теория адаптации / Н.А. Агаджанян, Р.М. Баевский, А.П. Берсенева // Вестн. восстановит. медицины. - 2004.- № 3(9). - С. 4-11.

2. Анализ вариабельности сердечного ритма при использовании различных электрокардиографических систем (методические рекомендации) / Р.М. Баевский [и др.] // Вестн. аритмоло-гии.— 2001.- № 24.- С. 65-86.

3. Анохин, П.К. Очерки по физиологии функциональных систем / П.К. Анохин.- М.: Медицина, 1975.- 447 с.

4. Апанасенко, Г.Л. Оценка и укрепление индивидуального здоровья / Г. Л. Апанасенко // Гигиена и санитария. - 2004.- № 2.-С. 55-58.

5. Баевский, Р.М. Теоретические и прикладные аспекты оценки и прогнозирования функционального состояния организма при действии факторов длительного космического полета // Актовая речь на заседании ученого совета ГНЦ РФ.- М.: ИМБП РАН, 2005.- 20 с.

6. Баевский, Р.М. Оценка адаптационных возможностей организма и риск развития заболеваний / Р.М. Баевский, А.П. Берсенева.- М.: Медицина, 1997.- 236 с.

7. Булатецкий, С.В. Физиологические механизмы успешности профессиональной подготовки курсантов образовательных учреждений МВД России: дис. ... докт. медицин. наук / С.В. Булатецкий; Рязанск. гос. мед. универ.- Рязань, 2008.- 432 с.

8. Гудова, Т.Г. Социально-психологическое обоснование профессионального отбора абитуриентов, поступающих в военно-учебные заведения: дис. ... канд. психол. наук / Т.Г. Гудова.-М., 2004.- 155 с.

9. Методология и технология мониторинга индивидуального здоровья человека: отчет о НИР / рук. М.М. Лапкин; Рязан. гос. мед. универ. - Рязань, 2006. - 242 с. - № 04-06-53001а/Ц.

10. Сивакова, Н.Н. Использование методов донозоологи-ческой диагностики в оценке уровня здоровья человека / Н.Н. Сивакова // Теория и практика физической культуры.- 2002.- № 9.- С. 8-11.

11. Судаков, К. В. Общая теория функциональных систем / К.В. Судаков.- М.: Медицина, 1984.- 224 с.

12. Ушаков, И.Б. Системная концепция индивидуального здоровья с позиций практической медицины. Часть I. Теоретические аспекты. / И.Б. Ушаков, Р.А. Вартбаронов, В.М. Усов // Гигиена и санитария.- 2004.- № 2.- С. 61-68.

THE ESTIMATION OF THE STATE OF HEALTH OF CADETS OF MILITARY EDUCATIONAL INSTITUTIONS

R.M. VORONIN

Academy of Law and Management of RF Federal Service of Penalty Execution

The problem of estimating the state of individual health and the control of changes in its levels takes on more and more important urgency, especially for the persons subject to high psycho-emotional and physical duties, including the cadets of military educational institutions. On the basis of researches spent in the Academy of Law and Management of the RF Federal Service of Penalty Execution main principles of estimating the state of health of military educational institution cadets are defined.

Key words: a state of health, prenosological diagnostics, cadets.

УДК 623. 654: 547.7/8

ФЛАВОНОИДЫ КОЗЛОБОРОДНИКА ВОСТОЧНОГО

В.Н. БУБЕНЧИКОВА, С.А. ПРОХОРОВА*

Проведено качественное изучение флавоноидов травы козлобородника восточного методом бумажной хроматографии и высокоэффективной жидкостной хроматографии, установлено наличие рутина, виценина, ориентина, апигенина, лютеолина и кверцетина и определено их количественное содержание. Разработана методика количественного определения суммы флавоноидов методом спектро-фотометрии на основе реакции с алюминия хлоридом. Ключевые слова: козлобородник восточный, флавоноиды, методика количественного определения, высокоэффективная жидкостная хроматография, бумажная хроматография, спектрофотометрический метод.

Козлобородник восточный (Tragopogon orientalis L.), сем. Астровые (Asteraceae), в официнальной медицине не используется, но получил широкое применение в народной медицине в качестве противовоспалительного и ранозаживляющего средства. Фармакологическое действие обусловлено содержанием полисахаридов и флавоноидных соединений [4].

Цель исследования - изучение качественного и количественного состава флавоноидных соединений козлобородника восточного.

Материалы и методы исследования. Исследовалась надземная часть козлобородника восточного (сырье заготавливалось в 2008-2009 гг. в Курской области в период цветения растений).

Предварительно нами был изучен состав флавоноидов травы козлобородника восточного методом бумажной хроматографии с использованием систем растворителей: 15% раствор кислоты уксусной, н-бутанол - кислота уксусная - вода (4:1:2), бензол - этилацетат - кислота уксусная (50:50:1). Было установлено наличие 6 веществ флавоноидной природы. В ходе дальнейших исследований применяли метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) [1]. Траву козлобородника восточного измельчали до размера частиц, проходящих сквозь сито с диаметром отверстия 2 мм по ГОСТ 214-83. 5,0 сырья помещали в колбу объемом 200 мл, прибавляли 45 мл 70% спирта этилового и нагревали на водяной бане с обратным холодильником в течение 1 часа с момента закипания спирто-водной смеси. После охлаждения смесь фильтровали через бумажный фильтр в мерную колбу на 50 мл и доводили объем 70% спиртом этиловым до метки (исследуемый раствор).

Анализ проводили на высокоэффективном жидкостном хроматографе фирмы «GILSTON», модель 305, Франция; инжектор ручной, модель RHEODYNE 7125 USA с последующей компьютерной обработкой результатов исследования с помощью программы Мультихром для «Windows». В качестве неподвижной фазы была использована металлическая колонка размером 4,6x250 мм Kromasil С 18, размер частиц 5 микрон. В качестве подвижной фазы использована система метанол - вода - кислота фосфорная концентрированная (400:600:5). Анализ проводили при комнатной температуре. Скорость подачи элюэнта 0,8 мл/мин. Продолжительность анализа 80 мин. Детектирование проводилось с помощью УФ-детектора «GILSTON» UV/VIS модель 151, при длине волны 254 нм. Идентификацию разделенных веществ проводили путем сопоставления времен удерживания пиков, полученных на хроматограмме пробы, с временами удерживания стандартных растворов (РСО).

Результаты и их обсуждение. Методом внутренней нормализации определено относительное содержание отдельных веществ в исследуемом образце (см. табл.).

Таблица

Время удерживания и компонентный состав флавоноидов травы козлобородника восточного

Вещества Время удерживания, мин Концентрация, %

Рутин 8,36 5,93

Видении 5,91 4,15

Ориентин 16,41 1,24

Кверцетин 34,17 0,03

Апигенин 67,67 0,23

Лютеолин 18,93 1,04

* ГОУ ВПО Курский государственный медицинский университет, тел.: 8-919-218-15-30, e-mail: [email protected]

ВЕСТНИК НОВЫХ МЕДИЦИНСКИХ ТЕХНОЛОГИЙ - 2011- Т. ХУШ, № 3- С. 273

Количественное определение флавоноидов в траве козлобородника восточного проводили спектрофотометрическим методом. В основе метода анализа нами выбрана реакция взаимодействия флавоноидов с алюминия хлоридом в среде 70% спирта этилового [2].

Определение оптимальных условий экстракции суммы флавоноидов проводили на одном образце сырья. Проведенные нами исследования по изучению влияния степени измельченно-сти сырья на полноту экстракции флавоноидов показали, что максимальное извлечение флавоноидов из травы козлобородника восточного достигается при степени измельчения 2 мм с помощью спирта этилового 70% и нагревании на кипящей водяной бане в течение 45 мин.

Нами исследованы спектры поглощения спиртовых извлечений из травы козлобородника восточного с алюминия хлоридом. В результате установлено, что максимум поглощения спиртового раствора находится в области 395 нм. Данная область спектра достаточно удалена от спектров поглощения сопутствующих фенольных и других органических веществ, содержащихся в экстрактах из сырья. В качестве раствора сравнения мы использовали исходный раствор извлечения без алюминия хлорида, т.е. применяли дифференциальный вариант спектрофото-метрии, что позволяет исключить влияние на результаты анализа сопутствующих веществ, имеющих оптическую плотность в области максимума поглощения извлечений из сырья. При проведении анализа пробы подкисляли кислотой уксусной для переведения флавоноидов и сопутствующих им веществ в недиссо-циированную форму с целью улучшения воспроизводимости результатов.

Были также изучены оптимальные условия фотометрической реакции, количество спиртового извлечения, концентрация и объем алюминия хлорида. Максимальная оптическая плотность достигается при использовании 3 мл извлечения с 5 мл 5% раствора алюминия хлорида в 70% спирте этиловом.

Устойчивое окрашивание извлечений из растительного материала с хлоридом алюминия наступает через 60 минут.

На основании проведенных исследований разработана методика количественного определения суммы флавоноидов в траве козлобородника восточного.

Методика количественного определения. Аналитическую пробу сырья, измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито (ТУ 23.2.2068-89) с отверстиями диаметром 2 мм. Около 1,0 г (точная навеска) измельченного сырья, помещают в колбу со шлифом вместимостью 250 мл, прибавляют 100 мл этилового спирта 70% и взвешивают с погрешностью ±0,01 г. Колбу присоединяют к обратному холодильнику, нагревают на кипящей водяной бане в течение 45 минут, периодически встряхивая для смывания частиц сырья со стенок. Колбу с содержимым охлаждают до комнатной температуры, взвешивают и при необходимости доводят до первоначальной массы спиртом этиловым 70%. Извлечение фильтруют через бумажный фильтр, смоченный тем же спиртом, отбрасывая первые 10 мл фильтрата.

3 мл извлечения помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 5 мл 5% раствора алюминия хлорида в спирте этиловом 70% и через 10 мин 2 капли раствора кислоты уксусной. Объем раствора доводят тем же спиртом до метки и оставляют на 60 минут. Оптическую плотность полученного раствора измеряют на спектрофотометре СФ-2000 при длине волны 415 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.

В качестве раствора сравнения используют раствор, состоящий из 3 мл извлечения, 2 капли раствора кислоты уксусной и доведенный спиртом этиловым 70% до метки в мерной колбе вместимостью 25 мл [1].

Ввиду отсутствия выпуска стандартного образца цинарозида (глюкозида лютеолина), нами для проведения расчетов применен удельный показатель поглощения цинарозида с алюминия хлоридом в 95% этиловом спирте, который равен 345.

Содержание суммы флавоноидов в процентах в пересчете

на цинарозид вычисляют по формуле: X =_°х 100х 100х100_, где

345 XV х m х 4 х (100 - W)

Б - оптическая плотность испытуемого раствора; т - масса

навески сырья в граммах; V - количество извлечения в мл;

W - влажность сырья, %, 345 - удельный показатель поглощения

цинарозида с алюминия хлоридом в 96% этиловом спирте.

Предложенная методика использовалась при анализе 5 партий сырья. Результаты исследований обработаны

статистически согласно требованиям ГФ XI [3]. Ошибка единичного определения с 95% вероятностью не превышает ±4,52%. Содержание суммы флавоноидов в траве козлобородника восточного колеблется от 1,46 до 2,25%.

Выводы:

1. Изучен состав флавоноидов травы козлобородника восточного методом ВЭЖХ; обнаружены рутин, кверцетин, апигенин, лютеолин, виценин, ориентин.

2. Разработана методика количественного определения в траве козлобородника восточного суммы флавоноидов в пересчете на цинарозид спектрофотометрическим методом.

3. Установлено, что содержание суммы флавоноидов составляет 1,46-2,25%.

Литература

1. Бубенчиков, Р.А. Флавоноиды фиалки трёхцветной / Р. А. Бубенчиков, И.Л. Дроздова // Фармация. - 2004. - № 2. - 11-12.

2. Бубенчикова, В.Н. Разработка методики количественного определения флавоноидов в сырье козлобородника восточного / В.Н. Бубенчикова, С.А. Прохорова, О.С, Богатырева // Труды 74-й научной конференции КГМУ, «Университетская наука: теория, практика, инновации». В 2-х томах. Т. 2. - Курск, 2009. - С. 206-208.

3. Государственная фармакопея СССР: 11-е изд., доп. -Вып.1. Общие методы анализа /МЗ СССР. - М.: Медицина, 1987. - 336 с.

4. Губанов, И.А. Иллюстрированный определитель растений Средней России / И.А. Губанов, К.В. Киселева, В.С. Новиков и др. - М.: Ин-т технологических исследований, 2004. -Т.3. - С.499.

THE FLAVONOIDS OF TRAGOPOGON ORIENTALIS L.

V.N. BUBENCHIKOVA, S.A. PROKHOROVA Kursk State Medical University

Flavonoids of the herb of Tragopogon orientalis L. (salsify) were stadied by means of paper chromatography and high performance liquid chromatography (HPLC). Routin, vitsenin, orientin, api-genin, luteolin and quercetin were found in it, their quantity determined. Principles of quantitative analysis of total flavonoids by spec-trophotometry, based on reaction with aluminum chloride, were developed.

Key words: Tragopogon orientalis, flavonoids, method of quantitative analysis, HPLC, paper chromatography, spectrophotometry.

УДК 614.511.512

ЭФФЕКТИВНОСТЬ ДОПОЛНИТЕЛЬНОЙ ДИСПАНСЕРИЗАЦИИ РАБОТНИКОВ БЮДЖЕТНОЙ СФЕРЫ В РОСТОВСКОЙ ОБЛАСТИ

Т.Ю. БЫКОВСКАЯ*

В работе проанализирована эффективность дополнительной диспансеризации работников бюджетной сферы в Ростовской области. Выявлено, что в Ростовской области в 2009 г. практически здоровыми признаются 25,8% обследованных лиц, имеют риск развития заболевания - 11,6%, нуждаются в дополнительном обследовании и лечении в амбулаторных условиях - 46,1%, нуждаются в стационарном обследовании и лечении - 1%, нуждаются в высокотехнологичной медицинской помощи 0,03% работающих в бюджетных организациях граждан. Среди работающего населения стабильно отмечается высокая распространенность болезней системы кровообращения, патология глаз и заболевания эндокринной системы. Ключевые слова: Ростовская область, дополнительная диспансеризация, эффективность.

Наиболее острыми проблемами здоровья населения за последние десятилетия являются высокий уровень общей смертности, особенно среди мужчин трудоспособного возраста, низкий уровень рождаемости, отрицательный прирост населения. В настоящее время по показателю ожидаемой продолжительности жизни для мужчин Россия занимает 134 место в мире, для женщин - 100 место. В 2006 г. в Ростовской области стартовала реализация приоритетного Национального проекта «Здоровье». Одной из задач, поставленных приоритетным Национальным

Министерство здравоохранения Ростовской области, г.Ростов-на-Дону, Россия, 344029 г.Ростов-на-Дону, ул.Первой Конной армии, 33, (863)242-30-96, [email protected]

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.