CC BY
63
рованных клона (в зависимости от используемой генной конструкции). При инфицировании клеток-мишеней вирусным препаратом величина этого показателя была в 4,5-6 раз меньше.
Интеграция и экспрессия генной конструкции pX-Ins в клетках сперматогенного эпителия в условиях in vivo была установлена практически у всех подопытных хрячков. Им-муногистохимический анализ после инъекции клеток-упа-ковщиц выявил наличие трансформированных клеток в 30 из 60 проанализированных срезов семенников. Число транс-
Таблица 2. Эффективность генетической трансформации клеток семенников хрячков in vivo генной конструкцией pX-Ins
Исследовано животных, п 3
Исследовано срезов, п 60
Эффективность трансформации семенных канальцев
Исследовано семенных канальцев, п 558
Число срезов с трансформированными семенными канальцами, п (%) 30 (50)
Число трансформированных канальцев, %:
минимальное на одном трансформированном срезе 0,29+0,°6
максимальное на одном трансформированной срезе 1,42+0,10
в среднем по группе ^ 0,39+0,11
Эффективность трансформации сперматогоний Число трансформированных сперматогоний, п 36
Среднее количество клеток в семенном канальце, п 40
Число семенных канальцев, п 558
Общее количество клеток, п 22320
Общая эффективность трансгенеза (отношение числа трансформированных сперматогоний к их общему числу во всех исследованных канальцах)
формированных клеток в одном семенном канальце варьировало от 1 до 5 (см. рисунок), а общее их количество на одном срезе достигало 8. При этом доля трансформированных канальцев варьировала от 0,29±0,06 до 1,42±0,10 % при общей эффективности трансгенеза 1,610-3 (табл. 2).
Выводы. Проведенные эксперименты показали возможность переноса рекомбинантной ДНК в клетки спер-
суммарные данные по группе (по 60 гистологическим срезам).
матогенного эпителия хряков посредством использования ретровирусных векторов. При использовании генных конструкций pX-RSVhgh и pX-ins осуществлена трансформация этих клеток-мишеней in vitro и in vivo. Наибольшая результативность трансгенеза установлена в варианте с генной конструкцией pX-ins в виде суспензии клеток-упа-ковщиц - от 4,1-10-4 (in vitro) до 1,610-3 (in vivo).
Литература.
1. Эрнст Л.К. Роль биологии в развитии животноводства в XXI веке //Достижения науки и техники АПК. - 2008. - №10. - С. 7-8.
2. Некоторые аспекты клеточной инженерии животных / Эрнст Л.К., Багиров В.А., Томгорова Е.К., Сингина Г.Н., Волкова Н.А., Зиновьева Н.А., Чаушев И.Н., Чаушева А.И. // Достижения науки и техники АПК. - 2008. - №12 - С. 39-42.
3. Генетическая трансформация сперматогониев кроликов in vivo / Новгородова И.П., Мормышев А.Н., Волкова Н.А., Зиновьева Н.А. // Биотехнология. - 2008. - №1. - с.24-28.
4. Культивирование и трансплантация сперматогоний типа А хряков / Савченкова И.П., Коржикова С.В., Костерева
Н.В., Эрнст Л.К. // Онтогенез. - 2006. - Т. 37. - № 4. - С. 292-300.
5. Spadafora C. Sperm cells and foreign DNA: a controversial relation. Bioassays. - 1998. - Р. 302-324.
6. Коржикова С.В. Выделение, характеристика и трансплантация сперматогоний типа А хряка: Автореф. дис...канд. биол. наук . - ВИЖ, Дубровицы, 2002. - 27 с.
EFFICIENCY OF THE USING THE RETROVIRAL VECTORS FOR OF THE RECOMBINANT DNA TRANSFERINTO THE SPERMATOGONIA OF PIGS N.S. Lozmanova, N.A.Volkova, V.A.Bagirov, N.A.Zinovieva, L.A. Volkova, L.K. Ernst
Summary. The efficiency testicular stem cells in vitro and in vivo using the retroviral vectors was investigated. The genetic transformation frequency of targeting cells was estimated at the level of 4,1 x 10-4 to 1,6 x 10-3.
Key words: retrovirus vectors, spermatogonia cells, pig.
УДК. 591.1:639.215
ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЕ СОСТОЯНИЕ ОРГАНИЗМА КАРПОВЫХ РЫБ ПЕРЕД ЗИМОВКОЙ
В.П. КУЛАЧЕНКО, доктор биологических наук, профессор
И.В. КУЛАЧЕНКО, кандидат биологических наук, доцент Белгородская ГСХА E-mail: bsau@belgtts.ru
Резюме. Изучено физиологическое состояние сеголетков чешуйчатого и зеркального карпов с учетом общей массы, упитанности, химического состава тела
и коэффициента физиологической устойчивости в условиях Белгородской области.
Ключевые слова: рыба, тело, состав, упитанность, устойчивость, зимовка.
Сегодня особое внимание уделяется развитию прудового рыбоводства, которое по принципу организации и средствам производства относится к сельскохозяйственному сектору экономики страны [1,2,3]. Основной вид потребляемой прудовой рыбы - карповые. Наиболее труд__ Достижения науки и техники АПК, №10-2010
ный период в жизни рыб - зимовка. В это время карповые не питаются и на них действует много неблагоприятных факторов. Накопленные за лето питательные вещества сеголетки расходуют в течение зимы. При нормальном ходе зимовки потери массы не должны превышать 14 %, сухого вещества - 20, протеина - 16, жира - 30 %. Значительное использование за зиму сухого вещества и протеина (в среднем 35 % и более), жира (60 % и более), потери массы (25 % и более) приводят не только к снижению выхода рыб после зимовки, но и к резкому уменьшению темпов роста, сопротивляемости заболеваниям и повышению отхода до 40.. .50 % на втором году жизни.
Цель наших исследований - оценить физиологическое состояние организма карповых рыб перед зимовкой. Для ее достижения изучали морфометрические показатели и химический состав тела сеголетков чешуйчатого и зеркального карпов, определяли индексы физиологической устойчивости рыбы.
Условия, материалы и методы. Для оценки физиологического состояния сеголетков карпа чешуйчатого (I группа) и зеркального (II группа) отбирали особей (самцов и самок) по случайной выборке в период облова выростных прудов племенного рыбопитомника «Шараповский» в 2007 г. В каждой группе определяли зоологическую длину (от рыла до начала хвостового плавника), общую массу, упитанность, химический состав тела и коэффициент физиологической устойчивости. При выполнении рыбоводно-биологических исследований применяли ихтиологические и химические методы. Полученные результаты обрабатывали статистическими и биометрическими методами с использованием компьютерных программ. Вычисляли среднюю величину, ее квадратическую ошибку, коэффициент вариации, критерии достоверности, коэффициенты корелляции и их достоверность, уравнение рег-рессиии первого и второго порядка.
Результаты и обсуждение. Зоологическая длина тела исследуемых рыб в I группе была равна 15,1 см, во II - 11,5 см, а общая масса соответственно 70,6 и 66 г (стандарт по общей массе 25.30 г). По литературным данным зимостойкие сеголетки карпа должны содержать воды не более 78 % [4]. В наших исследованиях величина этого показателя составляла 66,25.67,76 %. Размах индивидуальных колебаний находился в пределах от 62,34 до 72,42 % в I группе и от 66,12 до 68,19 % - во II группе (см. табл.).
Рекомендуемое содержание белка в теле сеголетков -12 %. Мы установили, что оно как и водно-белковый коэффициент были примерно одинаковыми 13,67 и 13,84 % и 4,85 и 4,89 соответственно.
Исход зимовки во многом определяется резервами накопленного жира. У сеголетков чешуйчатого карпа его содержание составляло 17,97 %, а у зеркального - 16,2 % и было выше рекомендуемого в 2,99.2,25 и 2,70.2,02 раза.
Коэффициент упитанности определяют на основании индивидуальных измерений и взвешиваний. У хорошо упитанных особей он превышает 2,5, а если величина этого показателя меньше 2,5 - рыба истощена. У изученных сеголетков чешуйчатого карпа коэффициент упитанности в среднем составлял 2,74, у зеркального - 3,00. При этом у зеркальные карпа наименьшая его величина была равна 2,62.
Соотношение самых важных химических веществ тела жира и белка у чешуйчатого карпа было выше, чем у зеркального - 1,31 против 1,17.
Физиологическая роль минеральных веществ в период зимовки сеголетков изучена недостаточно. Вместе с тем, имеются данные о том, что критическое содержание золы при гибели сеголетков составляет 4,2 % от живой массы [5].
Содержание кальция и фосфора в теле исследованных рыб находилось на уровне 0,51 и 0,40 %, а соотношение кальция к фосфору в I группе равнялось 1:1,25, а во II - 1:1,29.
Мы установили высокие коэффициенты корреляции между массой тела и содержанием жира (г=0,95, Р=0,99), массой тела и содержанием фосфора (г=0,94, Р=0,97), содержанием жира и фосфора (г=0,99, Р=0,997).
Высокий положительный коэффициент корреляции (г=0,71 ...0,95) с высокой степенью достоверности (Р=0,94...1,00) установлен для показателей массы тела и зоологической дины.
Корреляция отсутствовала или ее величина была менее 0,5 между массой тела и коэффициентом упитанности (г=от -0,26 до +0,45 с критерием достоверности 1,37.1,73 и вероятностью 0,81.0,89). Следовательно, определение только средней массы сеголетков не дает возможности прогнозировать вероятность их зимовки и сохранности.
Установлена высокая обратная зависимость между коэффициентом упитанности и зоологической длины тела (I группа - г=-0,69, р=0,993; II группа - г=-0,94, р=0,999).
На большой выборке сеголетков мы вывели уравнения регрессии, используя которые можно быстро и точно по длине тела определить массу и коэффициент упитанности:
у = 21,2х - 223,5,
где у - масса тела, г; х - длина тела, см;
у = 9,79 - 0,473х,
где у - коэффициент упитанности; х - длина тела, см.
Таблица. Химический состав тела карповых рыб
Показатели Карп чешуйчатый Карп зеркальный
Средняя штучная масса, г/гол. 70,6±4,58 66±2,84
С/,% 20,5 25,9
Жир, % 17,97±0,92 16,2±0,34
С/.% 16,2 11,44
Протеин, % 13,67±0,24 13,84±0,12
С/,% 5,59 4,78
Кальций, % 0,50±0,02 0,53±0,01
С/,% 12,2 10,01
Фосфор, % 0,40±0,01 0,41±0,01
С/,% 6,52 6,91
Жир : белок 1 ,31 1,17
Кальций: фосфор 1 ,25 1,29
Вода:белок 4,85 4,87
Выводы. Исследуемые виды рыб несущественно различались по содежанию в их теле протеина, жира, кальция и фосфора. Сеголетки и чешуйчатого, и зеркального карпов характеризовались высокими показателями качества. Содержание сухого вещества, протеина и жира в теле рыб вполне достаточно для обеспечения нормальной зимовки. Индекс физиологической устойчивости рыб высокий. У чешуйчатых карпов он равен - 7,46, а у зеркальных -6,54. Выведенные уравнения регрессии можно использовать для быстрого и точного определения массы и коэффициента упитанности по длине тела.
Литература.
1. Гордеев А. В. Состояние и перспективы развития рыбного хозяйства России. //Рыбное хозяйство. - 2005. - №4. - С. 3-8.
2. Бакунович А., Кулинцев В., Чайка В. Состояние и тенденции развития аквакультуры в мире и ее перспективы в России. // Межд. с/х журнал. - 2008. - №1. - С. 42-44.
Достижения науки и техники АПК, №10-2010 ______________________________________________________ 41
3. Серветник Г.Е. Стратегия развития рыбоводства в АПК // Достижения науки и техники АПК. - 2008. - № 10. - С. 40-42.
4. Анисимова И.М., Лавровский В.В. Ихтиология. - М., 1983. - 255 с.
5. Лав Р.М. Химическая биология рыб. - М.: Пищевая пром-ть. - 1976. - 349 с.
PHYSIOLOGICAL STATE OF CARPS’ FISH BEFORE WINTERING.
V.P.Kulachenko, I.V.Kulachenko
Summary. Physiological state of mirror and scales carps in Belgorod region were studied. Weight, well-fed, body’s chemical composition and physiological stability coefficient were taken into consideration.
Key words: fish, body, composition, stability, wintering.
УДК 638.123
ВЫЯВЛЕНИЕ И ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ЧИСТОПОРОДНЫХ ПЧЕЛ
Т.Т. ТОРМОСИНА, кандидатсельскохозяйственньхнаук Ярославская ГСХА
А.И. ПЕТРОВ, кандидат сельскохозяйственньх наук Департамент АПК администрации Тверской области М.К. ЧУГРЕЕВ, кандидат сельскохозяйственньх наук Поволжский НИИ производства и переработки мясомолочной продукции E-mail: zoo@timacad.ru
Резюме. Представлены результаты работы по улучшению чистопородных карпатских пчел. Всесторонняя оценка племенного материала позволила выявить различия между линиями карпатских пчел по морфологическим и хозяйственно полезным признакам. Изучен характер наследования морфологических признаков рабочих пчел, маток и трутней при межпородном скрещивании карпатских и кавказских пчел. Разработана концепция надежного оперативного метода биоморфологического контроля породности пчел.
Ключевые слова: чистопородные пчелы, племенная работа, морфологические признаки, хозяйственно полезные признаки, яйценоскость маток, зимовка пчел, весеннее развитие пчелиных семей, наследование, контрастные признаки, скрещивание пород пчел.
Племенная работа в пчеловодстве играет одну из ключевых ролей в интенсификации отрасли. Биологические особенности медоносных пчел вносят специфику в селекционную работу. Сегодня по ряду причин большинство местных аборигенных пород оказались метизированны-ми [2, 3, 6]. Особенно значительный вред приносит метизация пчел северных районов с продолжительными и холодными зимами южными породами. При бесконтрольном спаривании пчелиных маток и трутней возникает опасность повсеместной метизации, которая влечет за собой ухудшение биологических и хозяйственно полезных признаков. Во многих регионах наблюдается значительное сокращение числа пчелиных семей, их продуктивности, зимостойкости, устойчивости к болезням.
В этой обстановке следует ориентироваться на чистопородное разведение и создание сплошных массивов чистопородных пчел. Однако такая работа достаточно сложна и рассчитана на длительный период. Начинается она с выявления и оценки племенного материала, затем необходимо закрепить ценные качества в потомстве и далее осуществлять собственно чистопородное разведение. Племенной материал выявляют методом индивидуального отбора с проверкой маток по качеству потомства. При этом наибольшее внимание уделяют таким селективным
признакам как плодовитость маток, медопродуктивность и зимостойкость семей [4]. Успех в этой работе зависит от состояния изученности вопроса. Во-первых следует отчетливо понимать как правильно выбирать исходный перспективный племенной материал. Во-вторых, необходимо изучить характер наследования признаков рабочих пчел, маток и трутней и на основе этого разработать надежный оперативный метод биоморфологического контроля породности, доступный для широкого использования пчело-водами-селекционерами и практиками. В-третьих, нужен способ стабилизации ценной генетической основы в поколениях. Эти задачи в некоторой степени решаются в наших исследованиях.
Условия, материалы и методы. Экспериментальную часть работы проводили в рамках научных программ кафедры пчеловодства и кафедры разведения сельскохозяйственных животных РГАУ-МСХА им. К.А.Тимирязева на пасеке-испытательнице №21 пчелосовхоза «Кисловод-ский» Ставропольского края, на пасеке Литовского НИИ земледелия, на изолированном случном пункте, расположенном на Кушской косе Балтийского моря и на кафедре пчеловодства РГАУ-МСХА им. К.А.Тимирязева. Измерения экстерьерных признаков проводили с помощью микроскопов МБС-1 и МБС-9 на временных глицериновых препаратах по методике ГК. Гетце (1930) и В.В. Алпатова (1948). Определяли следующие экстерьерные признаки: длина хоботка, длина и ширина правого переднего крыла - длина 3-го и 4-го тергитов, ширина 3-го тергита, длина и ширина 3-го стернита, кубитальный индекс, тарзальный индекс, дискоидальное смещение, форма задней границы воскового зеркальца 5-го стернита.
Материалом для проведения исследований по выявлению и изучению племенного материала служили пчелиные семьи карпатской породы линий 77, 62 и 69 селекции кафедры пчеловодства РГАУ-МСХА им. К.А. Тимирязева и групп 159 и 50, выведенных в пчелосовхозе «Кисловодс-кий». Спаривание маток линий 77, 62 и 69 проводили на производящих их пасеках, расположенных на территории Закарпатской области Украины. Маток групп 159 и 50 спаривали на специально организованном случном пункте, расположенном в 20 км от пчелосовхоза «Кисловодский». Туда вывозили отцовские семьи с трутнями и нуклеусы с неплодными матками. Для сравнительного изучения карпатских пчел были созданы опытные группы по принципу семей-аналогов с учетом их массы, количества расплода и корма, возраста маток. Для изучения экстерьерных признаков от каждой семьи отбирали по 30 молодых нелетных пчел.
Хозяйственно полезные признаки (характер зимовки, весеннее развитие, способность семей наращивать большую массу пчел, сила семей, плодовитость маток, про__ Достижения науки и техники АПК, №10-2010
