CC BY
14
УДК 619:612.391:616-008:636.7.084.7 g. Д, ПЬЯНОВ
M. С. ГАЛИЦКАЯ C.B. ГАРАЩЕНКО Г.Г.СИДОРЕНКО
Институт ветеринарной медицины Омского государственного аграрного университета
ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ДОБАВОК ДЛЯ ЖИВОТНЫХ
Рассматриваются вопросы изучения влияния биологически акт юных добавок и кремнийор-ганического соединения циклосилола на специфические и неслецифические реакции организма собак при стресс-ситуациях.
В настоящее время, в связи с нарушением экологического баланса и уровня питания животных и человека, проблема стресса и адаптации является особенно актуальной. Для населения городов большое значение приобретает содержание и лечение домашних животных, которые часто подвергаются влиянию стресс-факторов, таких, как гиподинамия, недостаточное питание, болевые воздействия. С целью коррекции стресс-реакций применяют различные антистрессовые препараты адаптогеыного и симптоматического действия. В последние годы широкое применение в качестве антистрессоров нашли кремниевые препараты и биологически активные добавки к пище, такие, как адаптовит, лимфосан и другие. Однако механизм действия многих препаратов в различных стрессовых ситуациях ещё недостаточно изучен.
Целью наших исследований явилось — изучить влияние в сравнительном плане кремнийорганичес-кого соединения циклосилола и БАД — адаптовита и лимфосана на специфические и неспецифические реакции организма собак при различных стрессовых ситуациях.
Объектом исследований служили беспородные собаки, а моделирование стрессовых состояний осуществляли кратковременным (в течение часа) обездвиживанием, 3-х суточным непрерывным голоданием и болевым воздействием в течение 15 минут на животных. Показателями неспецифических реакций служили изменение сердечно-сосудистой системы, дыхания, некоторых гематологических показателей и при голодании дополнительно моторно-секретор-ных функций тонкого кишечника. Препарат вводили в организм в различных дозах в виде добавок в корм. Предварительно определяли оптимальные дозы препаратов, которые оказывали наиболее благоприятное влияние на физиологические функции и впоследствии использовали их как корректоры стресс-реакций. Такими дозами оказались: для циклосилола 0,02 мл/кг, адаптовита 0,003 мл/кг и лимфосана 0,1г/кг живой массы.
При изучении кормового стресса при полном голодании в качестве антистрессора использовали цикло-силол. По нашим данным, стадия тревоги при кормовом стрессе наступает через 24-36 часов голодной выдержки и длится до 48-60 часов, так как в эти отрезки времени наблюдалось заметное усиление изучаемых
показателей, по сравнению с 12 часами после кормления. Затем наступало снижение интенсивности вегетативных функций, что определялось нами как стадия резистентности. Изменения уровня большинства показателей при голодании на фоне скармливания циклосилола не претерпевали столь резких колебаний в различные часы голодной выдержки, как это отмечалось в контрольных опытах, и у голодных животных были ниже по сравнению с контролем. По данным электрокардиографии, через 12-48 часов голодания на фоне циклосилола наблюдалось незначительные колебания амплитуды зубцов ЭКГ, увеличивался интервал между зубцами и уменьшалась частота сердечных сокращений, понижалось пульсовое кровенаполнение. Через 60-72 часа голодания наблюдалось повышение амплитуды зубцов и частоты сердечных сокращений, увеличивались гематологические показатели: количество лейкоцитов, эритроцитов, вязкости крови и т.д., что может свидетельствовать о наступлении стадии тревоги! Таким образом, при голодании на фоне скармливания циклосилола стадия тревоги отодвинулась на 24-36 часов.
По данным гематологических показателей реакция тревоги наступила через 24-36 часов после начала голодания и длилась до 48-54 часов. В этот период изменились почта все гематологические показатели: уровень глюкозы повысилсяс 51,2г/лдо71,6г/л, количество эритроцитов увеличилось с 4,85 10г/лдо5,94 Юг/л, в то время как уровень гемоглобина, наоборот, снизился со 167,5 г/л до 136 г/л.
К 24 часу голодания у собак повысилось общее количество лейкоцитов с 9,45 10 г/л до 9,87 10 г/л. Вязкость крови незначительно понизилась с 5,89 до 5,75 пуаз.
Анализ лейкограмм показал, что количество сег-ментоядерных лейкоцитов увеличилось к 24 часу голодной выдержки с 39,3% до 49%, что составляет 22%, в то время как количество лимфоцитов уменьшилось с 35% до 29%. Отношение л.и.н./с.я.н. резко снизилось с 0,88 до 0,59, что характерно д\я стадии тревоги. Процент эозинофилов уменьшился с 6% до4%. Базофиль-ные клетки исчезли из поля зрения окрашенных мазков, а количество моноцитов уменьшилось с 7,3% до 4,5%. К 30 часу голодной выдержки резко выражен ядерный сдвиг влево за счет увеличения в крови как палочкоядерных, так и юных нейтрофилов, общее их количество составляет (25 ± 0,5) =25,5%. Отношение
Таблица
Изменение секреторной функции кишечника при иммобилизационном и болевом воздействиях и коррекции стресс-реакций при помощи БАД
Показатели Коррекция иммобили-зационного стресса при помощи адаптовита Коррекция иммобили-зационного стресса при помощи лимфосана Коррекция болевого стресса при помощи адаптовита Коррекция болевого стресса при помощи лимфосана
1 2 3 4 5 6 7
До стресса К 49,05±3,4 45,7±2,2 50,15±1,18 46,911,8
s S О 72,15±2,8 73,85±1,3 81,613,5 68,511,7
^ о s а С % 147*** 161"* 163*** 146"
После стресса К 31,63±4,5 30,25±2,8 22,711,6 2412,2
2 < О 53,18±2,7 53,07±2,6 67,5±3,2 52,1211
% 168** 175*** 298*** 217"*
До стресса к 38,75±2,3 40,4±2,8 38,4712 4612,1
s S ъ « О 65,3814,7 53,87±1,5 59,611,7 57,210.8
% 169*** 133" 155*** 123"
СП я о После стресса к 24,28±3 25,35±2,2 19,3211,6 22,3311,9
& с о 51,45±4,8 42,42*1,9 49,511,5 4411,8
% 212" 167*** 258*** 197*"
До к 910,36 7,35±0,87 7,610,9 7,810,7
X о 13,5810,55 12,48±0,5 12,910,8 12.310,4
а j % 150"* 170*" 169" 158"*
I § 15 Я После к 6,03±0,4 4,7±0,4 4,410,2 5.310,4
s аресса О 10,2±0,8 8,7±0,4 11,810,5 9,1810,6
% 170"* 185*" 269*" 170*"
До к 2,0310,15 1,86±0,14 1,8510,16 1,8410,01
S т стресса О 1,94±0,07 1,98±0,07 1,8310,04 2,17+0,07
i s % 95 108 98 119
i ® & o o После к 0,98±0,07 1,12±0,06 110,12 1,0210,07
стресса о 1,4610,07 1,5±0,06 1,3310,11 1,610,08
% 147" 134" 133" 158***
1 2 3 4 5 6 7
До к 7,5±0,09 7,4±0,02 7,610,16 7,7+0,16
pH стресса О 6,9810,17 7,2±0,05 6,610,04 7,210,08
% 93* 97 87"* 93*
После к 8,09±0,07 8,05±0,02 8,1110,05 8,1610,04
стресса о 7,68±0,06 7,9±0,05 7,410,16 7,910.09
% 95" 98" 91" 97*
К - контроль О-опыт
% - опыт к контролю в процентах * Р < 0,05; ** Р < 0,01 ; *** Р < 0,001
п.я.н./с.я.н. 25,5% / 38% = 0,67, тогда как в контроле этот коэффициент равен 0,3. Сдвиг влево говорит о неполноценности данной реакции, о нарушении гармоничности в функционировании эндокринных желез.
Стадия резистентности, по нашим данным, наступает к 60 часам голодной выдержки. К этому времени все основные гематологические показатели практически возвращаются к контрольным. Так, уровень глюкозы стал равен 49,6 г/л, количество эритроцитов понизилось с 5,94 10 г/л до 4,85 Юг/л, вязкость крови снизилась до 4,75 пуаз, а количество лейкоцитов незначительно повысилось с 9,4 10 г/л до 9,5 10 г/л.
При анализе лейкограмм мы выявили, что количество эозинофилов увеличилось по сравнению со стадией тревоги на 33%, так же количество лимфоцитов повысилось на 10%, в то время как количество сегментоядерных нейтрофилов уменьшилось с 49% до 40%, т.е. на 20%.
После кормления собак циклосилолом, появилась более сглаженная картина гематологических показателей: так, стадия тревоги отодвинулась на 12-24 часа, т.е. наступила через 48 часов после голодной выдержки. Об этом свидетельствуют изменения в лейкограм-ме; а эозинопения и лимфопения проявились менее
выраженными по сравнению с первой серией опытов, в то время как содержание гемоглобина увеличилось по сравнению с первой серией опытов на 23%.
Для коррекции иммобилизационного и болевого стрессов использовали лимфосан и адаптовит и основное внимание сосредоточили на секреторной и фер-ментообразовательной активности тонкого кишечника, так как этот вопрос является наименее изученным. Опыты проводили в хроническом эксперименте на оперированных животных с изолированным отрезком тонкой кишки поТири иТири Велла. Полученные данные представлены в таблице.
Как видно из таблицы, иммобилизация животных и болевое воздействие вызывали заметное торможение секреторной и ферментовыделительной функции тонкого кишечника у собак, что мы рассматриваем как стресс-реакции в ответ на экстремальные факторы.
При этом отделение кишечного сока снизилось при воздействии обоих факторов в среднем на 45,5%; амилазы - на 43,5%; активность протеазы - на 44,4% и липазы - на 35,0%. Различные стресс-факторы оказали не одинаковое влияние на ферментативную активность кишечного сока. Наибольшее торможение на образование ферментов оказало болевое воздействие по сравнению с иммобилизацией. Так, при болевом воздействии количество амилазы в кишечном соке снизилось на 52%, протеаз - 51% и липазы на 37,6%, в то время как при обездвиживании животных снижение ферментов составило: для амилазы - 34,8%, протеаз - 37,2% и липазы -34,2%. Как видно, наименьшую реактивность в наших опытах проявила липаза, так как снижение ее в ответ на стресс-факторы было наименьшим по сравнению с амилазой и протеазами, разница между ними составила 10-13%. В то же время снижение количества кишечного сока было практически одинаковым при воздействии иммобилизации или боли и составило 45 и 45,9% от исходного уровня (до воздействия стресса) соответственно.
Включение в корм собакам лимфосана и аданто-вита в оптимальных дозах проявило адаптогенное влияние на секрецию и ферментативную активность кишечного сока. Как видно из таблицы включение в корм БАД, как до воздействия стресс-фактора, так и после, значительно повышает ферментативную активность кишечного сока. Причем более эффективное действие препаратов проявляется на фоне стресс-реакции. Так, количество амилазы до воздействия стресса увеличивается под влиянием адаптовита на 47 и 63%, после иммобилизации на 68, а после болевого стресса на 198%. Лимфосан способствовал повышению количества амилазы: до иммобилизации на 61% по сравнению с контролем, а после иммобилизации на 75%; до болевого стресса на 46% и после - на 1 17%. Такая же закономерность проявляется в отношении протеаз и липазы. Как видно из полученных данных наиболее эффективное адаптогенное влияние на ферментативную активность кишечного сока оказал адаптовит.
Количество кишечного сока до действия стресс-факторов под влиянием указанных доз адаптовита и
лимфосана практически не изменяется по сравнению с контролем, в то время как на фоне стресса, когда наблюдается заметное снижение секреции, действие препаратов проявляется четко, увеличение количества сока составляет 33-58%. Однако существенной разницы изменения секреции в зависимости от вида препарата и характера стресс-фактора - не наблюдается.
Необходимо отметить еще один, на наш взгляд, не маловажный фактор. Если увеличение ферментативной активности под действием БАД на фоне стресс-реакции превышает контроль, до воздействия стресса, то по отношению к секреции снижается. Этот факт может свидетельствовать с одной стороны об избирательном влиянии БАД на ферментообразовательнуто функцию тонкого кишечника, а с другой - о не соответствии секреторного и ферментообразовательного процессов тонкого кишечника. На последнее также указывают некоторые авторы (Л.С. Фомина, 1951; Г.К. Шлыгин, 1967).
По результатам проведенных исследований можно сделать следующие выводы:
1. При полном 3-суточном голодании собак выявлены основные стадии стресса: стадия тревоги — по многим показателям проявляется через 24-48 часов голодания и стадия резистентности, длится от 48-54 до 72 часов голодания.
2. Включение в корм кремнийорганического соединения циклосилола проявило себя как адаптоген-ный препарат, отодвигающий стадию тревоги при кормовом стрессе, вызванном голоданием, от 6 до 24 часов для разных показателей физиологических функций и понижающий напряжение организма.
3. Обездвиживание животных в течение часа и болевое воздействие в течение 15 минуг вызывают торможение секреторной и ферментообразовательной функции тонкого кишечника у собак.
4. Включение в корм собакам лимфосана (0,1 г/кг) и адаптовита (0,003 мл/кг) проявило адаптогенное влияние на секрецию, ферментативную активность кишечного сока у собак, выраженное нормализацией этих показателей на фоне иммобилизационного и болевого стрессов.
Литература
1. Шлыгин Г.К. Ферменты кишечника в норме и патологии / Г.К. Шлыгин : — Киев, Медицина, 1967. - 217с.
2. ЕФомина Л.С. Проблемы биохимии / Л.С. Фомина: -М„ 1952. - 134 с.
ПЬЯНОВ Владимир Дмитриевич, доктор биологических наук, профессор, заведующий кафедрой нормальной и патологической физиологии. ГАЛИЦКАЯ Мария Сергеевна, аспирантка. ГАРАЩЕНКО Сергей Васильевич, кандидат биологических наук, ассистент.
СИДОРЕНКО Галина Григорьевна, старший преподаватель.
