CC BY
13
FUNCTIONAL ACTIVITY OF THROMBOCYTES IN CALVES OF YAROSLAVSKY BREED
DURING THE DAIRY NUTRITION PHASE
Vorobyeva N.V., Medvedev I.N.
Summary
The hemostatic properties of platelets in calves can change as they grow. Of interest is the level of their activity in the phase of dairy nutrition in different breeds of cattle. The purpose of the work is to evaluate the dynamics of platelet activity in dairy calves of the Yaroslavl breed. The work was carried out on 43 calves of the milk supply phase of the Yaroslavl breed, which were obtained from healthy cows by 2-3 calving. Animals in the work were examined on the 11, 15, 20, 25 and 30 days of ontogenesis. The study used biochemical, hematological and statistical methods for conducting scientific research. During examination, an increase in platelet aggregation with all applied inducers was found in dairy calves. The content of discoid platelets in their blood during the observation tended to decrease. The level of platelets experienced activation during the second phase of early ontogenesis increased by 15.1 %. The blood content of calves of small aggregates, as well as medium and large aggregates, increased significantly during the observation period. The changes found in calves of the Yaroslavl breed were largely based on an increase in the level of synthesis in thromboxane blood plates. This effect was ensured in them by enhancing the enzymatic activity of cyclooxygenase and thromboxane synthetase in them. An increase in the content of adenosine phosphates in the blood plates and an increase in their secretion also played a significant role in this. The severity of the actin and myosin content in inactive platelets of animals of the Yaroslavl breed increased during the milk feeding phase by 11,7 % and 12,9 %, respectively. They also found an increase in the additional generation of actin and myosin in the process of platelet aggregation by 9,2 % and 13,7 %, respectively. The results of the study say that for dairy calves of the Yaroslavl breed, an increase in platelet aggregation and secretion activity is characteristic. This forms the necessary conditions for the realization of microcirculation in them. The increase in intra-vascular platelet activity in them regulates the metabolic processes in their body and ensure reliable preservation of homeostasis in them.
DOI 10.31588/2413-4201-1883-241-1-53-57 УДК 611.018.5
ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ ИНТРАВАСКУЛЯРНЫХ СВОЙСТВ
ТРОМБОЦИТОВ ТЕЛЯТ ГОЛШТИНСКОЙ ПОРОДЫ В ТЕЧЕНИЕ ФАЗЫ
МОЛОЧНОГО ПИТАНИЯ
Воробьева Н.В.1,2 - к.б.н., доцент, Медведев И.Н.2 - д.б.н., профессор
1ФГБОУ ВО «Юго-Западный государственный университет»
2ФГБНУ «Федеральный научный центр животноводства - ВИЖ имени академика
Л.К. Эрнста»
Ключевые слова: телята, фаза молочного питания, голштинская порода, тромбоциты, агрегация, секреция
Кеуwords: calves, milk phase, holstein breed, platelets, aggregation, secretion
Состояние теленка весьма значи- [8]. Установлено, что функциональные па-
тельно зависит от активности процессов раметры тромбоцитов способны испыты-
гемоциркуляции в его капиллярах [4]. вать динамику на фоне роста и развития, в
Большое значение в этом процессе при- условиях старения [2] в случае появления
надлежит активности тромбоцитов, разли- многих дисфункций, на фоне развития раз-
чающейся у разных видов млекопитающих личной патологии и при проведении оздо-
ровительных воздействий [5, 6].
До сих пор активность тромбоцитов у телят и коров оптимального функционального статуса изучена недостаточно [7]. Это не дает возможности составить о ней целостное представление и формирует потребность в проведении исследований в этом направлении. При этом можно считать, что именно с уровнем функциональных свойств тромбоцитов весьма существенно связана активность у них капиллярного кровотока, интенсивность функционирования морфологических структур их организма [9, 10].
По причине наличия генетических и физиологических особенностей отдельных пород крупного рогатого скота [1] вызывает большой научный интерес выяснение уровня активности тромбоцитов у молодняка высокопродуктивной по надоям молока голштинской породы в том числе на протяжении фазы молочного питания.
Цель работы, выяснить изменения активности тромбоцитов у телят голштин-ской породы оптимального функционального статуса в течение фазы молочного питания.
Материал и методы исследований. Работа выполнена в полном соответствии с нормами этики определенными Европейской конвенцией о защите позвоночных животных, используемых в экспериментальных и иных научных целях (была принята в Страсбурге 18 марта 1986 года и полностью была одобрена в Страсбурге 15 июня 2006 года) и поддержана локальным комитетом по этике Всероссийского НИИ физиологии, биохимии и кормления животных (протокол № 11 от 17 января 2018 г.).
Исследование проведено на 48 телятах чистокровных по голштинской породе, которые были получены от здоровых коров после нормально протекавшей стильности. Все телята осматривались и обследовались за фазу молочного питания 5 раз: 11, 15, 20, 25 и 30 сутки онтогенеза.
Всем животным проводилась непрямая оценка активности синтеза тром-боксана в тромбоцитах и косвенно определялся уровень ферментативных свойств в них циклооксигеназы и тромбоксансинте-
тазы. Это осуществлено при помощи 3 переносных проб на фотоэлектроколоримет-ре.
В кровяных пластинках телят выявили уровень содержания аденозинтри-фосфата (АТФ) и аденозиндифосфат (АДФ), степень их секреции под действием на тромбоциты коллагена [3].
Интраваскулярную активность тромбоцитов регистрировали при применении фазово-контрастной насадки к световому микроскопу [8]. Статестическая обработка данных проводилась при помощи прграмм MicrosoftExcel. Данные считались достоверными, при значениях р<0,05.
Результаты исследований. Содержание дискоцитов в крови включенных в исследование телят на протяжении фазы молочного питания испытывало тенденцию к росту. Это сопровождалось у них снижением уровня суммы активных разновидностей тромбоцитов на 20,0 %.
Количества свободно движущихся в крови мелких, а также средних и крупных агрегатов тромбоцитов также испытывали на протяжении наблюдения понижение.
Можно думать, что в основе удлинения времени развития агрегации тромбоцитов у телят, находящихся в фазе молочного питания голштинской породы лежит найденные в работе снижение синтеза в тромбоцитах тромбоксанана. На это указывало снижение агрегации тромбоцитов в простой просьбе переноса (за 30 суток онтогенеза 21,4±0,12 %). Это имело в своей основе у наблюдаемых телят понижение уровня активности обоих энзимов реализующих его синтез - циклооксигеназы и тромбоксансинтетазы.
Об активности первого фермента судили по уменьшению степени восстановления АТ в ходе проведения коллаген-аспириновый пробы, которая составляла в конце исследования 67,0±0,12 %. Это сопровождалось понижением степени восстановления АТ в коллаген-имидазольной пробе, что позволяло опосредованно выяснить понижение уровня активности тром-боксансинтетазы в тромбоцитах телят (к 30 суткам до 30,5±0,07 %) (Табл. 1).
Небольшое количество в тромбоцитах телят АТФ и АДФ в ходе второй фазы
их раннего онтогенеза несколько уменьшалось, достигая к возрасту 30 суток 4,82±0,007 и 2,80±0,003 мкмоль/109 тромбоцитов. Выраженность их секреции из
плотных гранул тромбоцитов в течение наблюдения снижалась на 17,1 и 12,3 %, достигая к концу наблюдения 21,0±0,10 и 28,4±0,08 %.
Таблица 1 - Тромбоцитарные показатели у телят голштинской породы в течение фазы молочного питания
Учитываемые Телята голштинской породы, п=42, M±m
показатели 11 15 20 25 30
сутки сутки сутки сутки сутки
Восстановление агре- 73,8±0,16 73,0±0,14 71,2±0,09 69,5±0,15 67,0±0,12
гации тромбоцитов p<0,05
при проведении КАП, %
Восстановление агре- 35,1±0,10 34,5±0,09 33,2±0,08 32,6±0,05 30,5±0,07
гации тромбоцитов p<0,05
при проведении КИП, %
Агрегация тромбоци- 25,6±0,05 25,0±0,07 24,2±0,10 23,5±0,09 21,4±0,12
тов в простой пробе p<0,01
переноса, %
Содержание АТФ в 5,26±0,016 5,19±0,014 5,02±0,012 4,90±0,009 4,82±0,007
тромбоцитах до p<0,05
начала секреции, мкмоль/109 тр.
Содержание АДФ в 3,14±0,004 3,10±0,008 3,02±0,006 2,94±0,005 2,80±0,003
тромбоцитах до p<0,05
начала секреции, мкмоль/109тр.
Уровень секреции АТФ,% 24,6±0,10 24,0±0,07 23,2±0,11 22,3±0,14 21,0±0,10 p<0,01
Уровень секреции АДФ,% 31,9±0,12 31,3±0,13 30,2±0,08 29,6±0,16 28,4±0,08 p<0,05
Количество дискоци- 85,0±0,12 85,4±0,18 86,2±0,19 86,8±0,26 87,5±0,21
тов, %
Сумма активных 15,0±0,14 14,6±0,12 13,8±0,10 13,2±0,13
тромбоцитарных форм, % 12,5±0,11 p<0,05
Количество малых 2,4±0,03 2,3±0,06 2,3±0,02 2,2±0,04 2,0±0,05
тромбоцитарных аг- p<0,05 p<0,05
регатов, на 100 свободных тромбоцитов
Количество средних 0,07±0,018 0,06±,014 0,06±0,020 0,05±0,016 0,05±0,019
и больших тромбоци- p<0,05 p<0,01 p<0,01
тарных агрегатов, на 100 свободных тромбоцитов
Примечание: p — достоверность динамики регистрируемых показателей по отношению к 11 суточному возрасту.
Заключение. Телятам голштинской породы в течение фазы молочного питания свойственно в высокой степени функциональное совершенство тромбоцитов. Уровень их активности обеспечивает физиологически весьма выгодные условия гемо-циркуляции в капиллярах. В основе этого у этих животных лежит небольшая активность тромбоцитов in vivo. Ослабление ее у телят голштинской породы в течение фазы молочного питания создаёт у них условия для оптимума капиллярной перфузии и активного метаболизма во всех тканях и внутренних органах. Это особенно важно для интенсивного роста, развития и обеспечения основ их высокой продуктивности в будущем.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Попов, Н.А. Аллелофонд голштинской породы и его использование для совершенствования молочности крупного рогатого скота Российской Федерации / Н.А. Попов [и др.] // Молочное и мясное скотоводство. - 2018. - № 4. - С. 14-20.
2. Глаголева Т.И. Физиологические особенности спонтанной агрегации эритроцитов у телят молозивного питания / Глаголева Т.И. // Международный вестник ветеринарии. - 2016. - № 4. - С. 80-83.
3. Ермолаева, Т.А. Программа кли-нико-лабораторного обследования больных тромбоцитопатиями / Т.А. Ермолаева [и др.]. - СПб., 1992. - 25 с.
4. Завалишина, С.Ю. Гемостатиче-ская активность сосудистой стенки у ново-
рожденных телят / С.Ю. Завалишина // Доклады Российской академии сельскохозяйственных наук. - 2012. - № 1. - С. 37-39.
5. Завалишина, С.Ю. Тромбоцитар-ная активность у новорожденных телят при железодефицитной анемии / С.Ю. За-валишина // Ветеринария. - 2012. - № 2. -С. 51-52.
6. Завалишина, С.Ю. Контроль сосудистой стенки над индуцированной агрегацией тромбоцитов у новорожденных телят в условиях дефицита железа / С.Ю. Завалишина, Т.И. Глаголева // Ветеринарная практика. - 2013. - № 2. - С. 40.
7. Завалишина, С.Ю. Сосудисто-тромбоцитарные взаимодействия у стельных коров / С.Ю. Завалишина // Фундаментальные исследования. - 2015. - № 2(2). - С. 267-271.
8. Шитикова, А.С. Тромбоцитарный гемостаз / А.С. Шитикова. - СПб.: Изд-во «СПб. ГМУ», 2000. - 227 с.
9. Zavalishina, S.Y. Diagnostical Appreciation of Physiological Reaction of Intra-vascular Thrombocytes Activity of Two-Years-Old Mice to Regular Physical Loads / S.Y. Zavalishina [et all.] // Biomedical and Pharmacology Journal. - 2017. - Т.10. - № 1. - С. 129-136.
10. Glagoleva, T. I. Aggregative Activity of Basic Regular Blood Elements and Vascular Disaggregating Control over It in Calves of Milk-vegetable Nutrition / T.I. Glagoleva, S.Yu. Zavalishina // Annual Research & Review in Biology. - 2017. - № 12(6). - P. 1-7.
ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ ИНТРАВАСКУЛЯРНЫХ СВОЙСТВ ТРОМБОЦИТОВ ТЕЛЯТ ГОЛШТИНСКОЙ ПОРОДЫ ФАЗЫ МОЛОЧНОГО ПИТАНИЯ
Воробьева Н.В., Медведев И.Н.
Резюме
Есть основания считать, что у крупного рогатого скота разных пород существуют различия по уровню тромбоцитарной активности. Работа выполнена на 48 телятах-молочников чистокровных по голштинской породе. В ходе исследования были применены биохимические, гематологические и статистические методы исследования. В течение наблюдения в крови телят количество дискоцитов несколько повышалось. Общее количество активных тромбоцитов у них за фазу молочного питания понизилось на 20,0 %, а уровни циркулирующих в крови тромбоцитарных агрегатов малых и больших размеров уменьшалось на 20,0 % и на 40,0 %, соответственно. Это сопровождалось ослаблением синтеза в их тромбоцитах тромбоксана, понижением в количества аденозинфосфата и ослаблением его секреции. Для
голштинских телят в фазу молочного питания характерно высокое функциональное совершенство гемостатических свойств тромбоцитов. Это обеспечивает у них физиологически весьма выгодные условия для протекания микроциркуляции в тканях. Что обеспечивается некоторым ослаблением активности механизмов, обеспечивающих тромбоцитарные процессы агрегации и секреции. Невысокая внутрисосудистая активность тромбоцитов у телят голштинской породы в течение фазы молочного питания формирует оптимум перфузии и метаболизма во всех их тканях, что крайне важно для быстрого роста, развития и создания основ для будущей высокой продуктивности этой породы крупного рогатого скота.
PHYSIOLOGICAL PARAMETERS OF INTRAVASCULAR PROPERTIES OF PLATELETS OF HOLSTEIN CALVES DURING THE PHASE OF MILK FEEDING
Vorobyeva N.V., Medvedev I.N.
Summary
There is reason to believe that in cattle of different breeds, there are differences in the level of platelet activity. The work was performed on 48 purebred milkman calves in Holstein breed. During the study, biochemical, hematological and statistical research methods were applied. During observation in the blood of calves, the number of discocytes increased slightly. The total number of active platelets for them during the phase of milk supply decreased by 20.0%, and the levels of platelet aggregates circulating in the blood of small and large sizes decreased by 20.0% and 40.0%, respectively. This was accompanied by a weakening of the synthesis of thromboxane in their platelets, a decrease in the amount of adenosine phosphate in them, and a weakening of its secretion. It is clear that Holstein calves in the phase of milk nutrition are characterized by a high functional perfection of the hemostatic properties of platelets. This provides them with physiologically very favorable conditions for microcirculation in their tissues. This is ensured in them by a certain weakening of the activity of mechanisms providing platelet aggregation and secretion processes. It is clear that the low intravascular activity of platelets in calves of the Holstein breed during the milk feeding phase forms the optimum of perfusion and metabolism in all their tissues, which is extremely important for the rapid growth, development and creation of the foundations for the future high productivity of this breed of cattle.
