CC BY
50
333^*^ Аграрный вестник Урала №3 (82), 2011 г.^^Щ^
Ветеринария
9. Van den Bogaard A. E., Stobberingh E. E. Epidemiology of resistance to antibiotics. Links between animals and humans // Int. J. Antimicrob. Agents. 2000. Vol. 14. P. 327-335.
10. Кроссмайер А. Натуральные промоутеры роста - широкие возможности для всего мира // PigProgress. 2007. № 4. URL: http//www. mkorma.ru/science/4.
11. Анализ рынка кормовых антибиотиков. URL: http://www.ua.all-biz.info/research /mrview.phpid=789.
12. Животноводство без кормовых антибиотиков - реальная перспектива. URL: http://www.agroros-company.ru/library/article/nid=19.
13. Кормовые антибиотики: новое в производстве. URL: http://www.abercade.ru /research/industrynews/187.html.
физико-химические и биологические свойства препарата «пребиостим»
е. и. шурманова,
кандидат ветеринарных наук, доцент,
Н. г. КУРОЧКИНА,
кандидат ветеринарных наук, доцент,
А. н. СТУКОВ, аспирант,
А. В. ТИМКИН,
студент факультета ветеринарной медицины,
Уральская ГСХА
620075, г. Екатеринбург, ул. Карла Либкнехта, д. 42;
тел. (343) 371-33-63; e-mail: [email protected]
Ключевые слова: препараты из плаценты, токсичность, биологическая активность, коровы, задержание последа, послеродовые заболевания.
Keywords: preparation from a placenta, toxicity, biological activity, cows, retention placentae, postpartum diseases.
Перспективным направлением повышения эффективности профилактики и лечения заболеваний репродуктивной системы маточного поголовья крупного рогатого скота является использование иммунокорригирующей терапии. В связи с этим разработка и изучение новых препаратов природного происхождения, характеризующихся безвредностью и безопасностью в экологическом отношении, остается актуальной задачей ветеринарной науки.
В настоящее время интенсивно разрабатываются и испытываются новые препараты из плаценты, полученные с использованием современных технологий. Эти препараты обладают иммуномодулирующим действием за счет содержащихся в них низкомолекулярных пептидов, аминокислот, микроэлементов и других биологически активных веществ. При этом состав и свойства белков плаценты уникальны, что определяется особенностями развития и функционирования этого органа [1, 2].
Целью нашей работы было проведение комплексной оценки по физико-химическим и биологическим показателям экспериментальных серий препарата «Пребиостим», разработанного и запатентованного в Уральской ГСХА [3]. Экспериментальное изучение иммунотропных свойств «Пребиостима» показало, что препарат не обладает цитотоксическим действием, умеренно супрессирует индукцию первичного гуморального иммунного ответа, не влияет на экспрессию повышенной чувствительности замедленного типа, вызывает отчетливую активацию фагоцитоза ней-трофилов и стимуляцию их индуцированного оксидантного метаболизма. Препарат влияет преимущественно на фагоцитарное
звено неспецифического иммунитета [4].
Методика исследований.
После завершения технологического цикла производства «Пребиостима», каждую серию препарата подвергали контролю визуально, по показателю рН, на стерильность, безвредность и биологическую активность. Для этого от каждой серии отбирали 10 флаконов, из которых пять использовали для контрольной проверки, а пять хранили в архиве в течение срока годности препарата плюс два месяца.
Под серией считали количество препарата, полученного в процессе одновременного изготовления его в одних и тех же условиях, расфасованного во флаконы и получившего свой номер.
Визуальный контроль проводили для определения внешнего вида, цвета, наличия посторонних примесей, плесени. Флаконы встряхивали, переворачивали их вниз пробкой и просматривали в проходящем свете.
Стерильность препарата исследовали путем посева полученного препарата на питательные среды (МПА, МПБ, МППБ — на анаэробную микрофлору, среду Сабуро — на наличие спор грибов). Посевы проводили в стерильном боксе, используя стерильные пастеровские пипетки. Препарат вносился в пробирки со средами самотеком по несколько капель. Для получения достоверных результатов брали по две пробирки каждой среды. Среды с МПА, МПБ, МППБ выдерживались в термостате при температуре 37°С, а со средой Сабуро — при температуре 18°С в течение 10 суток.
Показатель рН исследовали на ионо-мере универсальном ЭВ-74. В лабораторный стакан объемом 100 мл наливали
препарат и после прогревания прибора проводили измерение рН при комнатной температуре 20°С.
Безвредность «Пребиостима» проверяли путем подкожного введения препарата
5 белым мышам (массой 18-20 г) по 0,5 мл и 2 кроликам (массой 1,5 кг) по 10 мл. За животными велось наблюдение в течение 10 суток, за это время они должны были остаться клинически здоровыми, не давать общей и местной аллергической реакции и не погибнуть.
Биологическую активность препарата определяли на инфантильных самках белых мышей (массой 10-12 г, возраст 28-30 дней). Набирали две группы — контрольную и опытную — по 7 мышей. Животным опытной группы перитонеально вводили по 1 мл препарата «Пребиостим» дважды с интервалом 48 часов. Мышей обеих групп содержали в одинаковых условиях, на одинаковом рационе в течение 72 часов, после этого усыпляли эфиром и вскрывали брюшную полость с целью извлечения матки с яйцепроводами и яичниками. Массу извлеченных органов определяли на весах «Sartorius» 121 S, с целью выявления разницы массы этих органов у мышей контрольной и опытной групп. Активным препарат считали, если средняя масса репродуктивных органов в опытной группе выше на 20 % по сравнению с животными контрольной группы.
Для изучения специфического действия «Пребиостима» было проведено экспериментально-клиническое исследование в ООО «Шиловское» Свердловской области на двух группах коров по 20 голов в каждой. Для профилактики послеродовых осложнений коровам за 10-14 дней до предполагаемых родов подкожно вводили
www.m-avu. narod. ru
43
^^-Аграрный вестник Урала №3 (82), 2011 г.- <
Ветеринария *%ф
таблица 1
характеристика экспериментальных серий препарата «пребиостим»
Показатель Требования проекта стандарта предприятия Значение показателей серии
4 5 6 7
Внешний вид Жидкость соломенножелтого цвета, с легкой опалесценцией, без посторонних примесей Соответ- ствует Соответ- ствует Соответ- ствует Соответ- ствует
Стерильность Стерильный Соответ- ствует Соответ- ствует Соответ- ствует Соответ- ствует
рН, ед. рН 00 1 к 8,0 7,9 7,9 7,6
Безвредность Безвредный Соответ- ствует Соответ- ствует Соответ- ствует Соответ- ствует
Активность, % Более 20 42,91 39,81 53,60 59,00
таблица 2
масса половых органов мышей после введения «пребиостима», г
Серия препарата Контрольная группа п=7 Опытная группа п=7 % к контролю
Серия 4 0,529±0,042 0,756±0,067* 142,91
Серия 5 0, 525±0,039 0,734±0,061* 139,81
Серия 6 0, 427±0,035 0,653±0,059* 153,06
Серия 7 0,1932±0,016 0,3064±0,029** 159,00
«Пребиостим» (серия 7) в дозе 20 мл, в первые сутки после родов инъекцию повторяли. Критериями оценки действия препарата на организм высокопродуктивных коров служили время отделения плодных оболочек, характер течения родов и послеродового периода.
Результаты исследований.
Характеристика физико-химических показателей полученных экспериментальных серий препарата (серии 4-7), а также результаты его исследования на стерильность, токсичность и активность представлены в таблице 1.
Данные таблицы показывают, что все полученные серии препарата отвечали по изученным параметрам требованиям стандарта предприятия. Анализ представленных результатов свидетельствует также
об удовлетворительной воспроизводимости технологического цикла получения препарата.
Результаты изучения биологической активности экспериментальных серий препарата «Пребиостим» приведены в таблице 2.
Полученные результаты показывают, что во всех группах мышей отмечено достоверное, по сравнению с контрольными группами, повышение массы половых органов. Увеличение массы половых органов мышей обусловлено содержанием стероидных гормонов в препарате.
Для препарата «Пребиостим» в качестве нормативного показателя было принято повышение массы половых органов мышей не менее чем на 20 % по сравнению с контрольной группой, при таких показателях серию препарата «Пребиостим» считали активной. В экспериментальных сериях препарата биологическая
* разность с контролем достоверна, р< 0,01 активность составляла от 39,81 до 59,00 %.
Экспериментально-клиническое исследование показало, что двукратное введение коровам препарата «Пребиостим» оказывало положительное влияние на течение родов и послеродового периода, что выражалось достоверном уменьшении сроков отделения последа (4,5 часа в опытной группе, 5,3 — в контрольной), в снижении в 3 раза уровня заболеваний родового и послеродового периода у опытных коров по сравнению с контрольными животными.
Выводы.
Оценка разработанной технологии получения препарата свидетельствует об удовлетворительной воспроизводимости технологических процессов и параметров полученного препарата по физико-химическим и биологическим показателям. Препарат «Пребиостим» эффективен для профилактики патологии родов и послеродового периода у высокопродуктивных коров.
Литература
1. Беляев В. И., Нежданов А. Г., Лободин К. А. Биологическая активность препаратов из плаценты // Ветеринария. 2002. № 5. С. 33-36.
2. Востроилова Г. А., Шабанов И. Е. Антиоксидантные свойства тканевых препаратов из плаценты, полученных методом криогенной сублимации // Свободные радикалы, антиоксиданты и здоровье животных : мат. междунар. науч.-практ. конференции. Воронеж, 2004. С. 334.
3. Патент РФ на изобретение №2325174. Способ лечения эндометритов у коров / А. Ф. Колчина, Л. И. Дроздова,
Е. И. Шурманова [и др.] Бюлл. изобретений. 2008. № 15.
4. Шурманова Е. И., Семенова Н. Н., Ильиных П. А. Экспериментальное изучение иммунотропных свойств пребиостима // Инновации молодых ученых — сельскому хозяйству России : сборник мат. всероссийской конф. молодых ученых и специалистов аграрных образовательных и научных учреждений. М. : Росинформагротех, 2006. С. 110-115.
44
www.m-avu. narod. т
