CC BY
38
УДК 615.322
http://dx.doi.org/10.26787/nydha-2686-6838-2020-22-3-72-76
ФИТОХИМИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ СУММЫ ОРГАНИЧЕСКИХ КИСЛОТ В ЛИСТЬЯХ КРЫЖОВНИКА ОТКЛОНЕННОГО
Санькова М.В., Нестерова О.В.
ФГАОУ ВО Первый МГМУ имени И.М. Сеченова (Сеченовский Университет), г. Москва, Российская Федерация
PHYTOCHEMICAL DETERMINATION OF THE ORGANIC ACIDS' AMOUNT IN THE GROSSULARIA RECLINATA LEAVES
Sankova M.V., Nesterova O.V.
First Moscow State Medical University named after I.M.Sechenov (Sechenov University),
Moscow, Russian Federation
Аннотация. Терапевтическая ценность растительного сырья определяется комплексом входящих в его состав биологически активных веществ. Лекарственные растения, содержащие органические кислоты, обладают противовоспалительным, противомикробным и противоязвенным действием и применяются для лечения и профилактики желудочно-кишечных заболеваний. В народной медицине при нарушении пищеварения издавна рекомендуют употреблять плоды крыжовника, что обусловлено содержанием в них большого количества органических кислот. Потенциальным источником новых лечебно-профилактических препаратов могут стать листья этого растения, которые являются более дешевым, более доступным и легко транспортируемым растительным сырьём. Установлено, что суммарное количество органических кислот в водном извлечении из листьев крыжовника отклоненного составляет в среднем 3,37±0,197%, что позволяет рассматривать это растительное сырьё как потенциальный источник органических кислот. Содержание органических кислот в листьях крыжовника превышает их количество в плодах в 1,76 раз. Полученные результаты доказывают целесообразность применения листьев крыжовника отклоненного (Grossularia reclinata (L.) Mill.) в фармации для создания новых препаратов для лечения и профилактики желудочно-кишечных заболеваний. Ключевые слова; листья крыжовника отклоненного, органические кислоты, титрометрический метод, индекс целесообразности использования листьев (ЦИЛ), применение в фармации.
Annotation. The therapeutic value of raw material is determined by the complex of included biologically active substances. Medicinal plants containing organic acids have anti-inflammatory, antimicrobial and antiulcer effects and are used for treatment and prevention of gastrointestinal diseases. In ethnoscience, Grossularia reclinata fruits have long been recommended in digestive disorders due to the large amount of organic acids. A potential source of new therapeutic and prophylactic drugs may be the leaves of this plant, which are cheaper, more affordable and easily transported raw material. It was established that the total amount of organic acids in the water extract from the Grossularia reclinata leaves is an average of 3.37±0.197%, which allows us to consider this raw material as a potential source of organic acids. The content of organic acids in Grossularia reclinata leaves exceeds their amount in fruits by 1.76 times. The obtained results proved the perspectivity of Grossularia reclinata leaves' application in pharmacy to create new drugs for the treatment and prevention of gastrointestinal diseases.
Keywords; Grossularia reclinata leaves, organic acids, ti-trometric method,, index of the rationality of using the leaves (index RUL), pharmaceutical application.
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК
REFERENCES
[1] Кьосев П. Лекарственные растения: самый полный справочник. - Litres, 2017.
[2] Полухина Т.С., Шамурадов Х. Количественное определение суммы органических кислот в траве тысячелистника мелкоцветкового ^chilea micrantha L.) // Open innovation. -2018. - С. 274-276.
[3] Филипцова Г. Г., Смолич И. И. Основы биохимии растений: Курс лекций / Мн.: БГУ, 2014. -136 с.
[4] Кузнецова М. Н., Кисличенко А.А. Определение органических кислот в капусте огородной сортов «Белоснежка», «Украинская осень», «Ярославна» // В сб. тезисов докладов XXI Междунар. науч.-практ. конф. студентов и молодых ученых «Актуальные проблемы современной медицины и фармации» - Минск : БГМУ, 2017. C. 1541.
[5] Ласый Е.С., Гречухина М.И., Мулляминова И.И., Сергалиева М.У., Цибизова А.А. Определение органических кислот в цветках дербенника прутовидного (Lythrum virgatum) // В сборнике: Молодежь, наука, медицина Материалы 63-й всероссийской межвузовской студенческой научной конференции с международным участием. 2017. С. 666-668.
[6] Кафьян А.Р. Фитохимическое изучение жома плодов крыжовника: Дис. канд. фармац. наук: 14.04.02. / М., - 2010.
[7] Санькова М.В., Нестерова О.В. Исторический опыт и перспективы использования крыжовника в медицине // Медико-фармацевтический журнал "Пульс". - 2019. - Т. 21. №7. - С. 54-60.
[8] Государственная фармакопея Российской Федерации XIII издания в 3 томах. Т.2 - М.: 2015. 1004 с.
[9] Аджиахметова С.Л., Андреева О.А., Оганесян Э.Т. Антиоксидантная активность экстрактов из листьев, плодов и стеблей крыжовника отклоненного (Grossularia reclimta (L.) Mill.) / Фундаментальные исследования. -2013. - №10(6).- С. 1297-1301.
[10] Чупахина Г.Н. Физиологические и биохимические методы анализа растений / Калининград, 2010. - 59 с.
[11] Исаева А.А. Анализ содержания органических кислот в сборе витаминов // В сб. тезисов докладов научной конференции аспирантов и студентов химико-технологического факультета. Тверь, 2017. С.15.
[12] Абдуллина С.Г., Агапова Н.М. Хазиев, Р.Ш., Си-дуллина С.А. Определение органических кислот в плодах рябины обыкновенной // Фармация. -2011.-№ 2.-С.17-19.
[13] Санькова М.В., Нестерова О.В. Индекс целесообразности использования листьев растений
[1] K'osev P. Lekarstvennye rasteniya: samyj polnyj spravochnik. - Litres, 2017.
[2] 2. Poluhina T.S., SHamuradov H. Kolichestvennoe opredelenie summy organicheskih kislot v trave tysyachelistnika melkocvetkovogo (Achilea micrantha L.) // Open innovation. - 2018. - S. 274276.
[3] Filipcova G. G., Smolich I. I. Osnovy biohimii ras-tenij: Kurs lekcij / Mn.: BGU, 2014. - 136 s.
[4] Kuznecova M. N., Kislichenko A.A. Opredelenie organicheskih kislot v kapuste ogorodnoj sortov «Belosnezhka», «Ukrainskaya osen'», «YAro-slavna» // V sb. tezisov dokladov XXI Mezhdunar. nauch.-prakt. konf. studentov i molodyh uchenyh «Aktual'nye problemy sovremennoj mediciny i farmacii» - Minsk : BGMU, 2017. C. 1541.
[5] Lasyj E.S., Grechuhina M.I., Mullyaminova I.I., Sergalieva M.U., Cibizova A.A. Opredelenie organicheskih kislot v cvetkah derbennika prutovid-nogo (Lythrum virgatum) //V sbornike: Mo-lodezh', nauka, medicina Materialy 63-j vse-rossijskoj mezhvuzovskoj studencheskoj nauch-noj konferencii s mezhdunarodnym uchastiem. 2017. S. 666-668.
[6] Kafyan A.R. Fitohimicheskoe izuchenie zhoma plodov kryzhovnika: Dis. kand. farmac. nauk: 14.04.02. / M., - 2010.
[7] Sankova M.V., Nesterova O.V. Istoricheskij opyt i perspektivy ispol'zovaniya kryzhovnika v medicine // Mediko-farmacevticheskij zhurnal "Pul's". - 2019. - T. 21. №7. - S. 54-60.
[8] Gosudarstvennaya farmakopeya Rossijskoj Feder-acii XIII izdaniya v 3 tomah. T.2 - M.: 2015. 1004 s.
[9] Adzhiahmetova S.L., Andreeva O.A., Oganesyan E.T. Antioksidantnaya aktivnost' ekstraktov iz list'ev, plodov i steblej kryzhovnika otklonennogo (Grossularia reclimta (L.) Mill.) / Fundamen-tal'nye issledovaniya. - 2013. - №10(6).- S. 12971301.
[10] CHupahina G.N. Fiziologicheskie i biohimicheskie metody analiza rastenij / Kaliningrad, 2010. - 59 s.
[11] Isaeva A.A. Analiz soderzhaniya organicheskih kislot v sbore vitaminov // V sb. tezisov dokladov nauchnoj konferencii aspirantov i studentov himiko-tekhnologicheskogo fakul'teta. Tver', 2017. S.15.
[12] Abdullina S.G., Agapova N.M. Haziev, R.SH., Sidullina S.A. Opredelenie organicheskih kislot v plodah ryabiny obyknovennoj // Farmaciya. -2011.-№ 2.-S.17-19.
[13] Sankova M.V., Nesterova O.V. Indeks cel-esoobraznosti ispol'zovaniya list'ev rastenij v sravnenii s ih plodami i ego znachenie v medicine. ZHurnal nauchnyh statej Zdorov'e i obrazovanie v XXI veke. - 2018. - T. 20. № 12. - S. 144-148.
в сравнении с их плодами и его значение в медицине. Журнал научных статей Здоровье и образование в XXI веке. - 2018. - Т. 20. № 12. - С. 144-148.
Актуальность. Терапевтическая ценность растительного сырья определяется комплексом входящих в его состав биологически активных веществ, оказывающих влияние на физиологические процессы организма [1]. Одной из таких важных групп соединений являются органические кислоты, проявляющие широкий диапазон биологической активности [2]. Эта растительная группа метаболитов ароматического или алифатического строения с одной или несколькими карбоксильными группами играют важную роль, прежде всего, в обмене веществ и пищеварении [3]. Являясь промежуточными продуктами оксидации углеводов, жиров и белков, они стимулируют выделение желудочного сока и желчи в желудочно-кишечном тракте и способствуют лучшему всасыванию питательных веществ, нормализуют перистальтику кишечника и создают благоприятные условия для жизнедеятельности полезных микроорганизмов кишечника [4]. Лекарственные растения, содержащие органические кислоты, обладают противовоспалительным, противомикробным и противоязвенным действием и применяются для лечения и профилактики желудочно-кишечных заболеваний [4, 5]. В народной медицине при нарушении пищеварения, язве желудка и двенадцатиперстной кишки издавна рекомендуют употреблять плоды крыжовника [6]. Это обусловлено содержанием в них большого количества клетчатки и органических кислот, общее количество которых достигает 1,9% [7]. Потенциальным источником новых лечебно-профилактических препаратов могут стать листья этого растения, которые являются более дешевым, более доступным и легко транспортируемым растительным сырьём с большим сроком хранения. Доказательство наличия в них органических кислот в большем количестве, чем в плодах делает целесообразным их использование в фармации. В связи с этим актуальным представляется изучение содержания этой группы биологически активных веществ в листьях крыжовника отклоненного (Grossularia reclinata (L.) Mill).
Цель исследования. Изучить качественное и количественное содержание суммы органических кислот в листьях крыжовника отклоненного (Grossularia reclinata (L.) Mill.) для оценки целесообразности их использования для создания новых лекарственных препаратов.
Материалы и методы исследования. Объектом нашего исследования послужили высушенные листья крыжовника отклоненного (Grossularia reclinata (L.) Mill.), собранные в Московской области в период с конца мая до середины июня 2018 года. Заготовительный процесс был направлен на сохранение в растительном сырье максимального количества биологически активных веществ [3]. Методы исследования соответствовали требованиям Государственной фармакопеи [8]. Для проведения качественного определения органических кислот из растительного сырья были приготовлены водное и спиртовое извлечения, так как было показано, что рекомендуемыми оптимальными экстрагентами для этих биологически активных веществ являются вода и 40% этиловый спирт [9, 10]. Наличие органических кислот в извлечениях определялось автоматическим высокоточным потен-циометрическим титратором АТП-02 с программным обеспечением фирмы Аквилон (программа Titrate5.0). Титратор представляет собой автоматическую поршневую бюретку, управляемую компьютером, и включает в себя преобразователь, имеющий три канала измерения: напряжения, температуры и объема. Канал измерения напряжения представляет собой встроенный рН-метр и аналого-цифровой преобразователь, преобразующие сигнал от электродной системы в стандартный цифровой код, подаваемый на микропроцессор.
Для количественного определения использовался метод прямого титрования раствором натрия гидроксида (0,01 моль/л), который проводили до нейтральной реакции, устанавливаемой с помощью индикатора - 1% спиртового раствора фенолфталеина. Содержание суммы органических кислот в пересчёте
на яблочную кислоту в абсолютно сухом сырье в процентах (Х) вычисляли по формуле:
V х0,0067х250х100х100
X =------------, где
тх10х(100 - Щ
V- объём раствора натрия гидроксида (0,01 моль/л), потраченного на титрование, миллилитры; 0,0067 - количество яблочной кислоты, которое соответствует 1 мл раствора натрия гидроксида (0,01 моль/л), граммы; т - масса растительного сырья, граммы; Ш- влажность лекарственного сырья или потеря в массе при высушивании растительного сырья, проценты.
Влажность (Щ лекарственного растительного сырья в процентах рассчитывали согласно формуле:
(m - mi) х100
m
, где
ш - масса до высушивания, граммы; Ш1 - масса после высушивания, граммы.
Статистическая обработка полученных данных проводилась с применением пакета статистических программ Мicrosoft Ехсе! 2010 и вычислением средней арифметической (М) и среднего квадратичного отклонения (s). Достоверность различий количественных переменных
анализировали с помощью критерия Сть-юдента. Различия определялись достоверными при р<0,05.
Результаты и обсуждение. Результаты исследования показателя влажности листьев крыжовника отклоненного представлены в таблице 1.
Таблица 1.
Определение влажности листьев крыжовника отклоненного
Измерение №1 Измерение №2 Измерение №3
m 10 г 10 г 10 г
mi 9,234 г 9,206 г 9,193 г
W,% 7,66 7,94 8,07
Влажность листьев крыжовника отклоненного колебалась от 7,66% до 8,07%, составляя в среднем 7,89±0,385%. Предложена норма этого показателя - не более 8,1%.
Определение рН извлечений из л
Результаты исследования рН извлечений из листьев крыжовника отклоненного автоматическим потенциометрическим титратором АТП-02 представлены в таблице 2.
Таблица 2. стьев крыжовника отклоненного
Водное извлечение 40% спиртовой экстракт
рн 5,439±0,149* 5,817±0,132
Примечание. * - различия достоверны между извлечениями, р<0,05
Представленные данные свидетельствуют о том, что и водное, и спиртовое извлечения имели слабокислую реакцию, что указывало на наличие в них свободных органических кислот. При этом отмечалось достоверное превалирование их содержания в водном извлечении из листьев крыжовника отклоненного, которое и
было выбрано для дальнейшего проведения количественной оценки суммы свободных органических кислот в пересчёте на яблочную кислоту в абсолютно сухом сырье. Титрование проводилось медленно, до появления розового окрашивания. Результаты данного исследования приведены в таблице 3.
Таблица 3.
№ Объем титранта, мл Содержание органических кислот, %
1 1,10 3,28
2 1,20 3,58
3 1,15 3,43
4 1,05 3,13
S 1,15 3,43
Суммарное количество органических кислот в пересчёте на яблочную кислоту в абсолютно сухом сырье в водном извлечении из листьев крыжовника отклоненного колебалось в пределах от 3,13 до 3,58%, составляя в среднем 3,37±0,197%. Полученные данные позволяют рассматривать это растительное сырьё как потенциальный источник органических кислот, сравнимый с такими традиционно признанными источниками, как плоды шиповника [11], плоды черноплодной рябины [12] и листья капусты [4].
Для сравнения количества органических кислот в плодах и листьях крыжовника отклоненного рассчитывался разработанный нами индекс целесообразности использования листьев (индекса ЦИЛ), который позволяет более наглядно сравнивать химический состав плодов и листьев растений и оценивать перспективность их применения в сравнении с традиционно применяемыми плодами [7]. Индекс ЦИЛ показывает во сколько раз количество конкретного вещества (X) в листьях отличается от его содержания в плодах (таблица 4).
Таблица 4.
Сравнительный анализ содержания суммы органических кислот в листьях кры-
Биологически активные вещества Средние значения содержания в плодах, % Средние значения содержания в листьях, % Индекс ЦИЛ
Органические кислоты 1,91±0,35 [6, 7] 3,37±0,197* 1,76
Индекс ЦИЛ показывает, что содержание органических кислот в листьях крыжовника отклоненного превышает его количество в плодах в 1,76 раза, что доказывает целесообразность применения листьев в качестве более доступного и дешёвого растительного сырья для создания новых препаратов для лечения и профилактики желудочно-кишечных заболеваний.
Заключение. Влажность листьев крыжовника отклоненного (Grossularia reclinata (L.) Mill.) составляла в среднем 7,89±0,385%. Предложена норма этого показателя — не более 8,1%. И водное, и спиртовое извлечения из листьев крыжовника отклоненного (Grossularia reclinata (L.) Mill.) содержат свободные органические кислоты, при этом
отмечается достоверное превалирование их содержания в водном извлечении. Суммарное количество органических кислот в водном извлечении из листьев крыжовника отклоненного составляет в среднем 3,37±0,197%, что позволяет рассматривать это растительное сырьё как потенциальный источник органических кислот. Индекс ЦИЛ показывает, что содержание органических кислот в листьях крыжовника превышает их количество в плодах в 1,76 раз. Полученные результаты доказывают целесообразность применения листьев крыжовника отклоненного (Grossularia reclinata (L.) Mill.) в фармации для создания новых препаратов для лечения и профилактики желудочно-кишечных заболеваний.
