CC BY
67
вирование карт пациентов; использование расширенного справочника «Стандарты на этапах оказания квалифицированной и специализированной медицинской помощи» (показания и противопоказания к проведению операций, оптимальные и максимальные сроки проведения операций, рекомендации и противопоказания к проведению определенных типов операций).
При поступлении больного определяется тяжесть состояния обожженного, площадь, локализация и глубина ожоговых ран, наличие термоингаляционного поражения, отравления продуктами горения. Для определения площади ожоговых ран используется электронная скица - визуальное представление тела человека в двух проекциях, каждая область которого детализирована от 10 до 100%. При указании врачом локализации ожога, процента поражения этой области и возраста больного автоматически вычисляется общая площадь поражения у пострадавшего. Электронная скица позволяет получить более точные данные об общей площади термического поражения вследствие более эффективного учета анатомических особенностей тела. Заполненная скица (рис.2) сохраняется в базе данных. Применение электронной скицы продемонстрировало повышение точности оценки площади поражения в сравнении с традиционными расчетами врачей. С целью прогнозирования гнойно-септических осложнений у детей с термической травмой, выполняется автоматический расчет индекса риска инфекционных осложнений (ИРИО).
Содомль | Отмереть |
Рис.2. Электронная скица.
На основании данных о тяжести состояния пострадавшего, площади и глубины поражения кожных покровов, ИРИО и других показателей активизируется схема обследования и лечения индивидуально для каждого пациента. Автоматически (по формулам) производится расчёт противошоковой терапии в зависимости от возраста, площади поражения, массы тела. Адекватная противошоковая инфузионная терапия способствовала улучшению общего состояния обожженных и нормализации гемодина-мических показателей в ранние сроки после получения ожоговой травмы. Информация, содержащая в листе «Назначения», является источником данных для формирования заявок на лабораторные и диагностические исследования, медикаментозных назначений, физиотерапевтического лечения. ЭИБ обеспечивает оперативный просмотр всей назначенной и полученной (по часам) терапии. Для среднего медицинского персонала, выполняющего основную массу лечебно-диагностических процедур, автоматизированная история болезни является первичным документом, позволяющим сформировать ряд рабочих документов, на основании которых проводится лечебная работа: лист назначений, заявки на проведение лечебно-диагностических процедур и т.д.
Ввод данных организован в диалоговом режиме с использованием многочисленных классификаторов, но при возможности текстовых записей для отражения особенностей клинических проявлений заболеваний и характера оперативных вмешательств. Такой подход позволяет снизить объем работы по ведению записей и назначений, контролировать их выполнение, следить за причинами отсрочек в выполнении назначений (консультаций, обследований), не ограничивая врача в его индивидуальном представлении клинической картины у пациента. Система преду-
сматривает графическое представление всех требующих монито-рирования показателей (температура, пульс, артериальное давление и др.) и фотографических рядов в процессе лечения, что позволяет врачу объективно контролировать динамику состояния и эффективность этапных лечебных мероприятий.
ЭИБ обеспечивает информационную поддержку для заведующего, лечащего врача, дежурного врача, среднего медицинского персонала ожогового отделения. Массивы информации организованы в виде реляционной базы данных (БД), поддерживаемой средствами MS SQL Server 2000. Прикладные программы создания БД частично реализованы с использованием СУБД Access. Прикладные программы интерфейса и формирования справочной и отчетной документации реализованы на Visual Basic 6.0 для Windows 2000. Система реализована в сетевом варианте с выбором архитектуры локальной вычислительной сети и средств реализации «тонкого» клиента как варианта, снижающего требования к мощностям компьютеров пользователей. Как следствие применения ЭИБ - улучшение исходов оперативных вмешательств и самой термической травмы.
Ведение детей при термических поражениях кожного покрова с применением электронной истории болезни, обеспечивает стандартизацию всех стадий лечебно-диагностического процесса, более точную оценку площади поражения по электронной скице, определение наличия шока на основе компьютерного анализа введенных клинических данных, своевременную оценку риска развития инфекционных осложнений, объективный расчет объема инфузионной терапии, совершенствование наблюдения больного в динамике (включая визуальную сравнительную оценку изменений раневой поверхности на основе анализа фотографического ряда), уменьшение трудоемкости и ускорение ведения истории болезни в соответствии с протоколами, автоматическое формирование графиков различных мониторируемых показателей, оперативное получение статистических данных. При этом идет сокращение длительности инфузионной и антибактериальной терапии, инфекционных осложнений, сроков восстановления утраченного кожного покрова, срока пребывания реанимационном отделении и времени нахождения на стационарном лечении.
УДК 615.84.007
ФИБОНАЧЧИЕВ ПАТТЕРН В МОРФОЛОГИИ ЖИВЫХ И ПЕРЕЖИВАЮЩИХ ТРОМБОЦИТОВ ТРОМБОКОНТТЕНТРАТОВ
В.Н. КИДАЛОВ, А. А. ХАДАРЦЕВ, А.В. ЧЕЧЕТКИН, В.Е. КУЛИКОВ,
Н.И. СЯСИН*
Материал посвящен царящей в крови гармонии разнообразных процессов на основе «золотой» пропорции [1,618..(Ф или Phi),
0,618__, 0,382...], числовые характеристики которой проявляются
в соотношениях между числами рядов Фибоначчи и Люка. Такие гармонические связи обнаружены в важнейших параметрах сердечной деятельности, в регуляции функций клеток крови, в ряде ее функциональных и морфологических паттернов. Посредством паттернов осуществляется оценка реального состояния крови, ведется поиск и контролируется ее приспособленность к изменяющимся условиям. Оперируя кодами ряда Фибоначчи, паттерны крови обеспечивают синергию в работе ключевых систем организма. Формирование паттернов «золотых» пропорций ограничивает разброс возможных комбинаций составных элементов или процессов в живой популяции клеток, включая тромбоциты, а их Фибоначчиевый n-шаговый план (Фп) может играть роль оптимального n-шагового плана поиска локального минимума затрат свободной энергии тромбоцитарной системы за п шагов[9].
Тромбоцит является фрагментом цитоплазмы - мегакарио-цитов - крупных полиплоидных костномозговых клеток, возникающих посредством эндомитоза, за 3-5 циклов удвоения хромосом без разделения клетки. Мегакариоцит образует длинные отростки, от которых отщепляются цитоплазматические фрагменты, попадающие затем в кровь. После выхода из костного мозга ~ 1/3 тромбоцитов постепенно стареет, секвестрируется в селезенке и удаляется фагоцитами, а оставшиеся две трети циркулируют в кровотоке 5-9 суток, в среднем, ~8 суток. В 1 литре
* Санкт-Петербург,.Тула
нормальной крови насчитывается 180-400 млрд. тромбоцитов, которые находятся в плазме во взвешенном состоянии, благодаря наличию отрицательного заряда.
Таблица 1
Основные методы исследования тромбоцитов
Электронно- микроскопический метод Исследование формы и ультраструктуры клетки
Дорогостоящий, требует специальных реактивов, фиксирующих (свертывающих) белки клетки. Исследование затратно по времени, и малопригодно для целей клиники
Метод проточной микроспектрофо-тометрии Относительно дешевый, позволяет проводить популяционную оценку большого числа клетокя во взвеси, может использоваться для быстрой характеристики тромбоцитарной популяции с помощью моноклональных антител
Является косвенным методом в отношении оценки размеров и ряда других параметров клеток, не позволяет проводить детальный анализ конфигурации тромбоцитов
Микроскопический светооптический и люминесцентный (электроннооптический) метод исследования Позволяет наблюдать за состоянием отдельных клеток, изменениями их конфигурации при активации тромбоцитов в реальном масштабе времени, при старении тромбоцитов и развитии деструктивных процессов. Позволяет оценивать функциональные и цитохимические особенности отдельных клеток и их популяций. Менее трудоемок, чем электронно-микроскопический метод. При наличии специального программного обеспечения позволяет получать статистически надежные характеристики
Требует спецподготовки, более время- и трудозатратен, чем метод проточной цитоспектрофото-метрии, требует спецоснащения микроскопов для получения контрастного изображения. Для оценки спектра аутофлуоресценции клетки необходимы специальные спектрофотометрические насадки к микроскопу
Фагоцитарная активность тромбоцитов и их трофическая функция в отношении эндотелиальных клеток, образующих внутреннюю поверхность кровеносных сосудов описана в [1, 13]. Хотя в тромбоцитах нет ядер, в них идут все биохимические процессы (клеточное дыхание, синтез белка, обмен углеводов и жиров и др.). Функция тромбоцитов — останавливать кровотечение; они могут распластываться, агрегировать (слипаться), обеспечивая начало образования кровяного сгустка, а после его формирования — ретракцию.
Особенности гистограмм распределения тромбоцитов. МРУ — средний объем тромбоцитов — растет: с 8,6-8,9 фл у детей 1—3 лет до 9,3—10,6 фл, у людей >70 лет. Внутренняя структура тромбоцита по А. Шапиро [15] состоит из 4 зон: периферийная зона, золево-гелевая зона, органеллы и клеточная мембрана. На электроно-граммах просвечивающих электронных микроскопов и при световой микроскопии в тромбоцитах обычно анализируются две части - гиалоплазма (гиаломер) и грануло-мер, последний расположен в центре клетки, он обуслав-ливет большую толщину пластинки (при ее распластывании на стекле) в центре, чем по краям. Альфа-гранулы грануломера округлые, окружены мембраной, содержат тромбоцитарные факторы свертывания крови, гранулы гликогена, обеспечивающие запас энергии в клетке (вытянутые палочковидные, не окружены мембраной). В грануломере определяют также органеллы и митохондрии. Гиаломер расположен на периферии тромбоцита, при активации клетки распространяется на его отростки и почти не содержит гранул и органелл. Образование псевдоподий и сохранение овальной формы тромбоцита обеспечивается пучками микротрубочек и микрофила-ментов, состоящих из сократительных белков [5, 6].
Химический состав тромбоцитов сложен. В этих клетках содержится фибриноген, а также сократительный белок тромбастенин, сходный с мышечным сократительным белком актомиозином. Они оба богаты аденил-нуклеотидами, гликогеном, серотонином, гистамином. В гранулах содержится III фактор свертывания, а на поверхности клетки адсорбированы У, VII, VIII, IX, X, XI и XIII факторы свертывания. В митохондриях тромбоцитов имеется небольшое количество РНК и ДНК.
Соединения железа и меди обеспечивают процессы клеточного дыхания. Кальций в тромбоцитах образует липидно-кальциевый комплекс. Клеточный кальций участвует в формировании сгустков крови, в их ретракции (совместно с холинплазмалогеном, этанолплазмалогеном и гликопротеидами). В тромбоцитах есть полисахариды, гистидин, много ферментов: р-глюкуронидазы и кислой фосфатазы, цито-хромоксидазы и дегидрогеназы и др. [5, 6,14].
При световой микроскопии клеточной тромбоцитарной взвеси, в неокрашенных и нефиксированных клетках можно наблюдать периферическую светлую и темную центральную части. Обычная гармоничная форма тромбоцита только что эксфузиро-ванной крови - двояковыпуклый диск или сфера. Изменения тромбоцитов коррелируют с состоянием свертывающей и проти-восвертывающей подсистем крови. В потоке крови тромбоциты держатся во взвешенном состоянии, т.к. имеют отрицательный поверхностный потенциал. В зависимости от условий их заряд может меняться: уменьшается при росте уровня глобулинов, несущих отрицательный заряд, фибриногена (почти лишенного заряда) или при сдвиге кислотно-щелочного равновесия в кислую сторону. При этом тромбоциты осаждаются, склеиваются и разрушаются, освобождая биоактивные вещества, часть из них участвуют в процессе свертывания крови - ускорители превращения протромбина в тромбин, фибриногена в фибрин, ингибитор гепарина - антигепариновый фактор и др.[12].
Тромбоциты по времени циркуляции в крови делят на субпопуляции юных, зрелых и старых клеток. Молодые тромбоциты находятся в нижней части сгустка фибрина, будучи активными остепроводниками. Рост числа юных форм бывает при усилении регенерации костного мозга. Омоложение тромбоцитарной популяции, или сдвиг тромбоцитарной формулы влево, - при усилении регенерации костного мозга — при гемолитических кризах, посттрансфузионных осложнениях, лейкозах, после кровопотери, спленэктомии и др. Сдвиг тромбоцитарной формулы вправо при росте числа старых тромбоцитов обнаруживается у онкобольных. При тромбоцитопении в крови имеются формы раздражения. Число старых и дегенеративных тромбоцитов увеличено при наследственных и симптоматических тромбастениях, циррозах печени, при отравлениях циклическими углеводородами.
Потеря тромбоцитами округлой (сфероидальной или дис-коидной) формы является свидетельством их активации. При этом появляются моно- и биполярно вытянутые клетки, либо пластинки распластываются и прилипают (адгезия) к поверхностям или к поврежденной сосудистой стенке. На периферии клет-
Таблица 2
Морфологические особенности фиксированных и окрашенных и нефиксированных и неокрашенных тромбоцитов
Фор- мы тром- боци- тов Морфологические особенности
окрашенных и подвергшихся фиксации тромбоцитов по литературным данным: [3, 4, 8, 17, 18, 19,,20, 23, 12,171 неокрашенных и не фиксированных тромбоцитов ТК (собственные данные)
Тромбоцитограмма
§ Округлые контуры, большей, чем зрелые тромбоциты величины (2,5-5 мкм), базофилия гиаломера, нежная необильная азурофильная зернистость грануло-мера. Доля в популяции - 4,1±0,13% Сферические или округлые с нерезкими контурами ~3 мкм. Характерна маяая оптическая плотность клеток и слабая интенсивность аутофлуоресценции в УФ-свете. Число незрелых форм в ТК - 3-5% от общего числа тромбоцитов
Старые Имеют пылевидную зернистость. «Морщинистые клетки») грануломер - плотный, иногда занимает весь тромбоцит цвета - фиолетового, светло-розового, располагается по периферии пластинки. 0 клеток 0,5-2,5 мкм, редко <5,6 мкм. При электронной микроскопии наряду с обильной грануляцией много вакуолей. Доля в популяции - 4,1±0,21% Клетки ТК формы, отличной от сферы и овала. Темная зона клетки - грануломер - занимает большую ее часть, хорошо флуоресцирует в УФ-лучах, наблюдается «зазубренность» и ретракция клеток, уменьшение 0 до 1,3-2,4 мкм (~2 мкм)
СО и ат а § Й § Эти формы без зернистости (гиалиновые, голубые пластинки) или имеют темнофиолетовую зернистость в виде комков или мелких осколков (пылинок). Сюда относятся и пластинки с выраженными вакуолями. Величина клеток различна. В среднем доля в популяции - 1,1 ±0,14% Клетки ТК светлые, очень слабо люми-несцируют в УФ-лучах. Зона грануло-мера минимальна («пылевидный грануломер»). По всей площади клетки иногда наблюдаются крупные вакуоли
формы раздраже- ния Полиморфные пластинки, мелкие или в виде гигантских хвостатых, колбасовидных клеток, цепочек. Формам раздражения свойственны большие размеры, вплоть до 7-12 мкм. Редкие клетки в ТК до 7 мкм (с эритроцит) и гигантских с лейкоцит (до 12 мкм). Средний размер ~8 мкм. Характерны длинные отростки (хвостатые пластинки), клетки в форме колбасы, крючка.
Зрелые (нормотромбоци-ты) Круглой или овальной формы с ровными контурами 02-4 мкм, чаще размеры от 1,5 до 3-4 мкм (до 92% в популяции), в среднем, 2-2,5 мкм (в 3-3,5 раза меньше большего диаметра эритроцитов здорового человека). Гиаломер клеток имеет бледно-голубую или сиреневую окраску, центральная зона клетки (грануломер) азурофильна с красно-фиолетовой зернистостью (после окраски по Романовскому - Гимзе или Нохту), можно различить 5-20 азурофильных гранул. Доля в популяции - 88,2±0,19%. Клетки ТК округлые или овальные, средний диаметр 2 мкм, (до 89% в популяции). Гиаломер нормотромбоци-тов средневысокой оптической плотности, характерен гомогенный гиаломер. При большом увеличении различаются существенно отличающиеся по оптической плотности гранулы, с выраженной люминесценцией в УФ-свете, иногда в гиалоплазме визуализируются отдельные вакуоли.
ки возникают выпячивания и выросты, с помощью которых кровяные пластинки, соединяясь друг с другом, агрегируют [12].
При активации размер поперечного сечения начинающего распластываться на стекле тромбоцита уменьшается с 3-2 мкм до
0,5 мкм. Начало активации тромбоцита проявляется в распластывании и появлении по периферии до 10 участков выпячивания и западения, которые при виде сверху напоминают зазубрины. Активация тромбоцита может сопровождаться освобождением из его эндогенных гранул АДФ, серотонина и катехоламинов, усиливающих их агрегирование и активацию тромбоцитов. Распластывающиеся тромбоциты могут перемещаться по поверхностям на небольшие расстояния [5,14]. Такие активированные тромбоциты через несколько часов погибают. При лабораторном исследовании клеток надо помнить, что способность прилипания тромбоцитов к стеклу связана с выбросом клейкого фибронекти-на и может снижаться из-за приема антибиотиков и гормональных препаратов, при воздействии высоких температур.
Для получения информации о процентном соотношении в крови или в тромбоконцентрате (ТК) различных форм тромбоцитов подсчитывают тромбоцитограмму, которая зависит от возраста, функционального состояния кроветворения, наличия патологических процессов в организме. Одновременно оцениваются микроскопические и микроморфометрические показатели в мазках, которые в процессе приготовления проходят этапы фиксации, импрегнации или различной окраски. Применение методов приготовления препаратов имеет недостатки (табл. 1). Общим для разных методов недостатком является использование спиртовых или альдегидных фиксаторов и красок, обезвоживающих клетку, угнетают ее метаболизм, вызывают дисфункцию мембранных белков и ретракцию ряда компартментов клетки, парализуют обменные процессы.
Химическая обработка препаратов может вести к искажениям морфологических и функциональных параметров, свойственных тромбоцитам в живом или в переживающем состоянии.
Цель исследования - оценка с помощью световой и люминесцентной микроскопии морфологии тромбоцитов, анализ соотношений (включая соотношения ряда чисел Фибоначчи) площадей грануломера и гиаломера, других морфологических особенностей живых и переживающих тромбоцитов ТК, полученного от здоровых доноров тромбоцитов по [17].
Материалы и методы. Для оценки состояния клеток использовали электронно-оптическую систему для микроскопии и спектрофотометрии, структурного анализа исследуемых объектов (приоритет 2003 г.) и инвертированный люминесцентный микроскоп. Использование для оценки клеток УФ-излучателя позволило увеличить предельную разрешающую способность микроскопии, т.е. понизить предельное разрешение. Сравнивали морфологические особенности тромбоцитов, описываемые при анализе окрашенных мазков (данные др. авторов и собственные наблюдения), а также переживающие тромбоцитов ТК, не подвергавшиеся химической фиксации и окраски спиртовыми красками. Проанализировано 350 файлов микрофотосъемки указанных препаратов. При исследовании контролировали изменения формы клеток, подразделяя их на зрелые, юные, старые, дегенеративные и формы раздражения. Сравнение площадей основных клеточных образований, окрашенных стандартно тромбоцитов, стеклянных мазков и площадей нефиксированных и неокрашенных тромбоцитов вели по файлам микрофотосъемки. Исходя из паттернов «золотой» пропорции и чисел ряда Фибоначчи в неживых и живых системах, включая организм человека и систему крови [9, 14], вели анализ (с использованием денситометрии) степени сходства соотношений площадей грануломера и гиаломера с «золотой» пропорцией и числами ряда Фибоначчи. [1113]. Для статистической оценки результатов применяли непараметрические критерии и и Q [7].
Результаты. По имеющимся литературным сведениям [6, 16] около 60% сухого веса тромбоцитов составляют белки, а их соотношение, как можно заметить, с другими веществами приближается к числу Фидия (1,618...=Ф). Анализ литературных источников показывает, что фибоначчиевы числа представлены в паттерне колебания содержания липидов (13—21% от сухого веса клетки - 13 и 21 - числа ряда Фибоначчи). Общее число тромбоцитов колеблется в оптимуме нижней и верхней границы нормы для крови здоровых людей (200х103 клеток/мкл - 320х103 кле-ток/мкл, в среднем - 250х103 клеток/мкл) с соотношением между
крайними величинами близким к числу Фидия (1,62). У больных принято существенно расширять допустимые границы изменений числа тромбоцитов - от 400х103 клеток/мкл крови до 80х103 клеток/мкл (соотношение кратно 5). В крайнем пределе эти границы простирают до минимума 50х103 клеток/мкл, т.е. до уровня, когда начинаются профузные кровотечения (соотношение кратно 8). Вместе с тем, при морфологической оценке тромбоцито-грамм в окрашенных мазках, размеров тромбоцитов, и при установлении причин появления в крови пластинок различной конфигурации, опубликованных разными авторам, фибоначчиев паттерн в морфологической структуре тромбоцитов практически не выявляется. Это связано с ретракцией клеток при фиксации, с изменениями их морфологических характеристик под влиянием окраски. В литературе разброс нормативов при окраске мазков крови очень высок. Тромбоцитограмма в норме имеет вид: юные
- 4%, зрелые - 81%, старые - 5%, формы раздражения - 3%, дегенеративные - 2%, вакуолизированные - 5%. Число юных форм колеблется в пределах 0-0,8 %, зрелых - 90,3-95,1%, старых - 2,2-5,6%, дегенеративных - 0,01-0,2%, форм раздражения
- 0,8-2,3%. Усредненные данные и наша оценка тромбоцитов в ТК здоровых доноров см. в табл 2.
■ # Ш Ш 4 Ш
4" йй® С® ®
Рис. 2. Денситометрические группы тромбоцитов ТК Темные ряды - ден-ситометрическая обработка фото тромбоцитов, светлые ряды - графическое отражение процентного соотношения площадей клетки и грануломера
Таблица 3
Распределение тромбоцитов по размерам с учетом Фибоначчиева паттерна цифр (квантитативная тромбоцитограмма) при контроле ТК
Литературные данные Наши предложения и наблюдения
Распределение тромбоцитов в окрашенных мазках по размеру Распределение пластинок в ТК: среднее арифметическое (размах, мкм) Содержание в исследованных ТК, % (средние значения, размах), Величины крайних отклонений от полного соответствия цифрам ряда Фибоначчи (выделено жирным)
Мегатромбоциты (>6-10 мкм). 8,0(5,5-8,49 и более) единичные, редко (0,1-1,2) (8-13) В норме соответствие не наблюдается
Макропластинки (3,5-5 мкм) ,4) (3, 13,1 (11 - 16) а) по размерам (5 мкм) - 30-8% б) по числу (13-16-22%
Средне большие (3-4 мкм)) 3,00 (2,50 - 3,49) 21,2 (17 - 25) а) по размерам (3 мкм) -16,7- 16,3% б) по числу 2-19%
Нормотромбоциты (2 - 3) 2,00 (1,50 - 2.49) 61,0 (52 - 70) а) по размерам (2 мкм) 25-24.5% б) по числу (62-16- 13%
Микропластинки-(0 1—1,5 мкм) 1, 00 (0,30 - 1,49) 8) £ 1 СЛ а) по размерам (1 мкм) 70^9% б) по числу (5%)-43,4 -51%
Денситометрическая оценка площади и плотности грану-ломера тромбоцитов ТК позволила разделить их по алгоритму чисел Фибоначчи (8, 13, 21, 34, 55) на пять групп (рис. 2). Площадь (в %) грануломера, по отношению ко всей площади клетки от 0 до 8: 1 - 9-3; 2 - 24-21; 3 - 22-34; 4 - 35-55; 5 - и более. В препаратах крови тромбоциты существенно разделяются по размерам. Для морфологической оценки популяции тромбоцитов удобно следующее разделение пластинок ТК на группы (табл.3.)
Для клинической практики и для оценки активности клеток ТК целесообразно среди зрелых тромбоцитов выделять неактивированные и активированные клетки. Активация тромбоцитов связана с важнейшим свойством внутреннего содержимого живой клетки - с его самоорганизацией [5]. Активированные пластинки непосредственно участвуют в гемостазе, способствуют заживлению тканей за счет фактора роста, усиливающего пролиферацию других клеток. В ТК они могут иметь пойкилоцитные конфигурации и обладают повышенной адгезивностью, за счет выростов гиалоплазмы по типу псевдоподий [2]. В мазках крови здоровых и больных людей, в ТК встречаются тромбоциты на разных стадиях активации (рис.3, табл.4). В ТК для оценки степени активации тромбоцитов с позиций фибоначчиевого паттерна важно учитывать морфологические особенности клеток.
Рис. 3. Изменение конфигурации тромбоцитов при их активации. Ув. 900.
In vivo важную роль в активации тромбоцитов играет коллаген. Тромбоциты распластываются, приклеиваются к коллагену, а это обуславливает прилипание в сосуде одного тромбоцита к другому, образование растущей компактной тромбоцитарной гемостатической пробки. Рост числа приклеивающихся друг к другу тромбоцитов и фибринового сгустка останавливается выделением простациклина и плазменного антитромбина из пластинок, находящихся на границе с поврежденными клетками.
Таблица 4
Moрфoлoгические oco6eHHocra неактивирoванныx и активирoванныx TpoM-бoцитoв в ТК
Морфологические особенности и процент клеток в популяции ТК Фотосхема различных конфигураций зрелых тромбоцитов в TK
Неактивированные Дискоидные тромбоциты: а) дискоциты (58,1±5,8-%) (р<0,05), б) овалоциты 14,5+0,30%) в) дискоэхиноци-ты до20,8±5,8-109/л (р<0,05) 2 • • • * * ^ • Ф
Активированные ПолиморфНЫЕ КЛЕТКИ: а) ланцетовидные и биполярные 2,20±0,06%; б) с выростами гиалоплазмы (отростчатые) 21,2±3,5% А*
В крови и в ТК тромбоциты человека могут находиться на разных стадиях активации: дискоидная форма - свидетельство отсутствия активации тромбоцита, начальная стадия активации тромбоцитов - появление единичных псевдоподий, выраженная активация - тромбоцит, выпустивший много псевдоподий и уплощившийся при прикреплении к твердой поверхности. За значения средней нормы активации тромбоцитов ТК примем цифровые значения ряда чисел Фибоначчи, а именно: 5, 8 и 13.
Это относится лишь к правильно приготовленным препаратам. При соприкосновении с чужеродной поверхностью волоконца гиаломера, переплетаясь между собой, способны образовывать на периферии тромбоцита отростки различной величины. Подобные неспецифические изменения формы и адгезионно-агрегационной функции тромбоцитов можно наблюдать при приготовлении из ТК на стекле толстых мазков. Чем тоньше будут мазки, тем менее выражены изменения тромбоцитов по сравнению с их нахождением во взвешенном состоянии в плазме крови. При этом явления кристаллизации не успевают проявить-
ся, тромбоциты оказываются покрытыми тонкой фацией жидкой части ТК. В толстом же мазке (или в тезиографической капле ТК), наоборот, идет растянутая по времени кристаллизация, что является причиной фрактальной укладки тромбоцитов в препарате, и их частичной неспецифической активации (рис. 4).
Спектрофотометрический анализ аутофлуоресценции тромбоцитов на практике оказывается более трудным, чем исследование других клеточных элементов крови. Это обусловлено невысокими отличиями в оптической плотности тромбоцитов от оптической плотности плазмы крови (жидкой среды тромбокон-центрата), а также сложностью юстировки оптических каналов исследовательских установок для получения контрастных изображений. Несмотря на это, в мазках из ТК обнаруживается достоверное преобладание сферообразных клеток, имеющих хорошо регистрируемой голубой люминесценцией, поэтому при использовании чувствительных микроскопов-спектрофотометров исследования тромбоцитов становятся доступными, малотрудоемкими, то есть весьма перспективными и многообещающими.
Рис. 4. Фрактальная укладка тромбоцитов в тезиографическом препарате
TK (световая микроскопия, малое и среднее увеличение)
Вы^ды. Морфологическая и функциональная оценка состояния тромбоцитов в препаратах крови и TK требует применения современного оборудования; это могут быть люминесцентная и морфологическая оценка тромбоцитов с помощью оптоэлектронных систем, анализирующих форму, денситометриче-ские и люминесцентные характеристики. При оценке тромбо-цитограмм и активности тромбоцитов TK доноров можно ориентироваться на нормативы, связанные с золотой пропорцией и фибоначчиевыми паттернами.
Литература
1. Афонькин. С.Ю. Гемофилия. / http://nature.web.ru/db/msg.html?mid=1165452&s.
2. Берковский А. Л. и др. Пособие по изучению адгезивно-агрегационной функции тромбоцитов .-М.: РЕНАМ, 2007.- 27 с.
3.Бриллиант М.Д., Воробьев А.И. // Проблемы гематологии и переливания крови.- 1972.- №1.- С.7-11.
4. Вакуленко А. Показатели периферической крови здорового человека
/ http://www.google.com/search?q=cache:m7zvLPTgh2QJ.
З. Васильев ЮМ. Елетка как архитектурное чудо. Ч. 1. Живые нити // Сорос. Образоват. Ж.-1996.- № 2.- С. 36-43.
6.Вашкинель В.К., Петров МН. Ультраструктура и функция тромбоцита.- Л.: Наука, 1982.- 88 с.
7. Гублер Е.В., Генкин А.А. Применение непараметрических критериев статистики в медико-биологических исследованиях.- Л., 1973.- 147 с.
8. Зубаиров ДМ. // Сорос. Образов. Ж.- 1997.- №3.- С. 46.
9. Игнатьев В.В. / В сб. Измерительные и информационные технологии в охране здоровья. METPОMEД - 2007.: Tр.
Междун. научн. конф.- СПб.: Изд-во Политехн., ун-та, 2007.- С. 86-87.
10. Игнатович Г. П. и др. Инновационная деятельность в ВС РФ: Tр. Всеарм. научно-практ. конф.- СПб., 2007.- С. 281.
11. Кидалов В. / В кн. Гармония и дисгармония в медицине.- СПб:НИИ СП им И.И.Джанелидзе.- Вып.3.- 2004.- С. 102.
12. Awadhiya R.P. et al. // Res. Vet. Sci.- Vol.29.- P.- 120.
13. Savi P., Herbert J.-M. // Medical Research reviews.-1996.- Vol. 16, № 2.- P. 1З9-179.
14. Shapiro Ату D. // Treatment of Hemophilia Monograph Series, №19. World Federation of Hemophilia: 1999.
1З. http://www.orc.ru/~bgab/medicine/n/hemostasis.html
16. http://molgachev.net.ru/hirurg/10.htm
17. Правила заготовки, переработки, хранения и обеспечения безопасности донорской крови и ее компонентов/ Национальный стандарт РФ - ГОСТ РМ.: Стандартинформ. 200З
