Фенотипы тучных клеток молочной железы и яичника беременных крольчих
•Г Калякина, аспирантка, Оренбургский ГАУ
Успешность работы по воспроизводству животных всецело зависит от знания структуры и понимания процессов, протекающих в органах репродуктивной системы самок. Структурнофункционально органы репродукции лабильны, реагируют на изменения гомеостаза и воздействие факторов внешней среды реорганизацией на молекулярном, клеточном и тканевом уровнях.
Регуляция деятельности яичника и молочной железы осуществляется на нейроэндокринном (ядра гипоталамуса, аденогипофиз, эпифиз, яичник, матка) и местном дистантном уровнях [1]. В морфо-функциональных микрорайонах органов регуляцию функций в ответ на изменение гомеостаза обеспечивают тучные клетки (ТК) посредством выработки биологически активных веществ (БАВ) [2, 3, 4].
Цель настоящего исследования: изучить характеристики популяций ТК в молочной железе и яичнике крольчих в период беременности и выявить закономерности в изменении их фенотипов в зависимости от функциональной активности структур микрорайонов.
Материал и методы. Объектом исследования служили молочные железы и яичники 17 беременных крольчих. Для гистологического исследования забирали пробы объемом 0,5 см3. Часть гистопроб фиксировали в жидком азоте. Изготовляли криостатные срезы толщиной 10—12 мкм и окрашивали по стандартной методике толуидино-вым синим.
Количественную информацию о тучноклеточных популяциях получали в ходе морфометрических исследований при использовании винтового окулярмикрометра МОВ—1—15 1350. В отдельном образце ткани измерения каждого показателя осуществляли не менее чем в 15 полях зрения каждого объекта.
Индекс фенотипа популяции (ИФП) тучных клеток определяли по формуле:
ИФП = Д/Н,
где Д — количество дегранулирующих тучных клеток;
Н — количество недегранулирующих тучных клеток.
Результаты и обсуждение. Выявлено, что популяции тучных клеток в молочной железе и яични-
* -* .
А Б *' В
Рис. 1 - Фенотипы ТК в молочной железе и яичнике беременных крольчих:
А - фенотип I (молочная железа); Б - фенотип II (яичник); В - фенотип III (яичник)
ке гетерогенны по фенотипу. В каждом органе в один и тот же функциональный период выявляется несколько типов клеток.
1. Клетки крупные, ядра темные, с высоким содержанием конденсированного хроматина, цитоплазма темная, не содержит гранул (рис. 1а).
2. Клетки средних размеров, ядра светлые, насыщенные деконденсированным хроматином, цитоплазма светлая, содержит гранулы, выход которых незначителен или еще не начался (рис. 1б).
3. Клетки мелкие, ядра содержат глыбки конденсированного хроматина, цитоплазма светлая, гранулы лежат в цитоплазме и рядом с клеткой (рис. 1в).
Во всех фенотипах диаметр ТК в молочной железе был больше диаметра ТК соответствующего фенотипа в яичнике. Разница в размерах составила 1,5—1,6 раза (табл. 1). Во всех тканевых микрорайонах исследуемых органов популяция тучных клеток была неоднородна и представлена двумя-тремя типами.
Процентное соотношение фенотипов показано в таблице 2.
Клетки первого типа характеризовались высокой синтетической активностью, в их цитоплазме регистрируется активизация белоксинтезиру-ющих систем, происходит накопление белков и БАВ. Этот тип клеток выявляли в молочной железе в междольковых соединительнотканных трабекулах, вокруг междольковых протоков, в жировых дольках, а в яичнике — под белочной оболочкой в зоне примордиальных фолликулов. Рядом с растущими фолликулами и желтым телом яичника, а также вблизи альвеол молочной железы клетки данного типа не обнаруживали.
Итак, тучные клетки первого фенотипа локализовались в тканевых микрорайонах, отвечающих за трофику и являющихся материалом для построения функционально зрелых структур органа.
В области формирующихся и сформированных железистых долек молочной железы, по периферии желтого тела и растущих фолликулов яичника отмечали локализацию тучных клеток третьего типа, которые уже вступили в фазу дегрануляции. Для этих клеток характерны ядерный белковый синтез (подготовка к следующему секреторному циклу) и выведение гранул. Активное действующее вещество вышедших в межклеточное пространство гранул воздействует на состояние гистогематического барьера стенок сосудов гемомикроциркуляторного русла, регулирует цикличность секреторного цикла в молочной железе, рост фолликулов и синтез гормонов — в яичнике. В междольковых соединительнотканных трабекулах и протоках молочной железы, а также в зоне примордиальных фолликулов яичника данного типа клеток не обнаружили.
Тучные клетки второго фенотипа наблюдали во всех тканевых микрорайонах органов и характеризовали как «переходный» между клетками первого и третьего типов.
Таким образом, тучные клетки образуют в молочной железе и яичнике крольчих гетерогенные и пластичные популяции, что согласуется с данными Н.А. Юриной, А.И. Радостиной (1990), Schwartz L. (1993). Их численность и состав как в целом, так и в отдельных участках органов регулируются на различных уровнях. Фенотипи-
1. Морфометрические показатели тучных клеток разных фенотипов в молочной железе
и яичнике беременных крольчих (мкм)
Показатель Фенотип ТК
I II III
молочная железа яичник молочная железа яичник молочная железа яичник
Диаметр клеток 8,682±0,023 5,824±0,017 6,763±0,019 4,187±0,041 4,763±0,019 3,097±0,034
Степень дегрануляции нет незначительная значительная
2. Соотношение фенотипов ТК молочной железы и яичника беременных крольчих
——— Показатель ИФП Фенотип ТК, %
Микрорайон — I II III
Молочная железа
Междольковые соединительнотканные трабекулы и протоки 0 58 42 0
Жировые дольки 0,23 53 28 19
Формирующиеся железистые дольки 1,71 11 26 63
Альвеолы сформированных железистых долек 3,76 0 21 79
Яичник
Примордиальные фолликулы 0,625 41 23 36
Растущие фолликулы 1,0 0 46 54
Желтое тело беременности 1,0 0 48 52
ческие признаки тучных клеток во многом зависят от фазы синтеза биологически активных веществ и от факторов микроокружения. Выявленная разница диаметров ТК фенотипов молочной железы и яичника (в 1,5—1,6 раза) в одинаковые функциональные периоды обусловлена, на наш взгляд, разными источниками происхождения ТК и структур исследуемых органов.
Фенотипическая пластичность ТК, очевидно, обеспечивает оптимальное осуществление локальными популяциями ТК специфических функций.
Литература
1. Metcalfe, D.D., Baram, D., and Mekori Y. Mast cells, Physiol Rev., 1997. V. 77. P. 1033-1079.
2. Языков, B.JI. Секреторные механизмы и секреторные продукты тучных клеток. Морфология, 1999. Т. 115. Вып. 2. С. 64—72.
3. Арташян, О.С. Роль системного подхода в изучении системы тучных клеток в живых организмах // Философия и наука: мат. 2-й межвуз. науч.-практ. конф. аспирантов и соискателей «Философия и наука». Екатеринбург. 2003. С. 3—5.
4. Craig, S.S., Irani, A.M., Metcalfe, D.D. and Schwartz, L.B. Ultrastructural localization of heparin to human mast cells of the MCTC and MCT types by labelling with antithrombin Ill-gold. Lab. Invest. 1993. V. 69. P. 552-561.
5. Юрина, H.A. Морфофункциональная гетерогенность и взаимодействие клеток соединительной ткани / Н.А. Юрина, А.И. Радостина. М.: Изд-во УДН, 1990.
6. Schwartz L. Heterogeneity of human mast cells. In: The Mast Cell in health and Disease. New York. Dekker. 1993. P. 219—236.