CC BY
36
4. Ивков В.Г., Берестовский Т.Н. Липидный бислой биологических мембран. — М.: Наука, 1982. — 224 с.
5. Старцев А. В., Стойлов Ю.Ю. Рецепт нуда: «лазерный лун в мыльной пЛЬнке». — М.: ФИЛН, препринт,
2003. - №2. -3 9 с.
6. MalovA. N., Shevchenko E. V., VaichasA.A. Integral-optical method for modeling biological membranes research //Fourth Asia -Pacific Conference: Fundamental
Problems of Opto- and Microelectronics. — Khabarovsk: DVGUPS, 2004. - P. 447-453.
© ЛЛПЕШИН П.В., САВЧЕНКО Л.Л., МОСКОВСКИХ М.Н. -
ФЕНОТИПИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ СОСТАВА ЛИМФОЦИТОВ КРОВИ И ЛИМФОУЗЛОВ У БОЛЬНЫХ НЕМЕЛКОКЛЕТОЧНЫМ РАКОМ ЛЕГКОГО
П. В. Лапешин, А.А. Савченко, М.Н. Московских (ГУ НИИ медицинских проблем Севера СО РАМ Н, директор - проф. В.Т. Манчук; Красноярская государственная медицинская академия, и.о. ректора —д.м.н., проф. В.И. Прохоренков, кафедра онкологии,
зав. — Ю.А. Дыхно)
Резюме. С целью исследования фенотипического состава лимфоцитов крови и лимфоузлов корня легкого обследованы больные адснокарциномой и плоскоклеточным раком (ПКР) легкого. Популяционный и субпопуля-ционный состав лимфоцитов оценивали с помощью метода непрямой иммунофлуоресценции. Обнаружено, что у больных ПКР и адснокарциномой выявляется значительное сходство изменений в популяционном и субпо-пуляционном составе лимфоцитов крови, которые выражаются в снижении концентрации Т-лимфоцитов и Т-хелперов/индукторов при повышении содержания В-лимфоцитов. Только у больных ПКР в периферической крови повышается содержание 1ЧК-клеток. У больных ПКР и адснокарциномой установлены особенности в фенотипическом статусе лимфоцитов в лимфоузлах корня легкого, которые выражаются в относительном повышении содержания Т-лимфоцитов и Т-хелперов/индукторов у больных адснокарциномой.
Ключевые слова. Немелкоклеточный рак легкого, плоскоклеточный, адснокарцинома, состав лимфоцитов, кровь, лимфоузел.
Среди онкологических заболеваний в России рак легкого находится на первом месте (24%). В ВосточноСибирском регионе рак легкого в структуре заболеваемости занимает больший удельный вес (26,5%) по сравнению с общероссийским показателем. При этом, в структуре смертности населения России от злокачественных новообразований в 2001 году рак легкого также занимал первое место и составлял 30,1 % |2].
С клинической точки зрения типы рака легкого различают по темпу роста и прогнозу [3,5]. Так плоскоклеточный рак (ПКР) растет относительно медленно, в меньшей степени склонен к раннему метастази-рованию, время удвоения опухоли составляет приблизительно 146 дней. Аденокарцинома развивается также сравнительно медленно, однако для нее присуща склонность к ранней гематогенной диссеминации, время необходимое для удвоения опухоли составляет в среднем 72 дней.
Рост опухоли сопровождается изменением активности функционального состояния иммунной системы. По современным представлениям, само развитие злокачественного процесса неразрывно связано с нарушениями в системе иммунологической зашиты |4,8,14]. В то же время, ряд исследователей предполагают, что опухоль дополнительно индуцирует иммуносупрессию, что, в частности, приводит к неэффективности противоопухолевой иммунотерапии [1,4]. В настоящее время значительный интерес вызывает иммунная функция лимфоузлов. Связано это с тем, что, с одной стороны, именно в лимфоидной ткани (в том числе и в лимфоузлах) осуществляется наработка специфических Т- и В-лцмфоцитов, осуществляющих
иммунный надзор, тогда как с другой стороны, внут-рилегочные лимфоузлы при раке легкого одними из первых подвергаются местазированию [6,11,13].
Таким образом, целью исследования явилось сравнительное изучение фенотипического состава лимфоцитов крови и лимфоузлов корня легкого у больных адснокарциномой и плоскоклеточным раком легкого.
Материалы и методы исследования На базе торакального отделения Красноярского краевого онкологического диспансера обследовано 90 больных в возрасте 30—55 лет, страдающих раком легкого. Всем больным выполнены расширенные лоб- и пульмонэктомии. Во время операции, при проведении широкой лимфодесекции, на исследование забирались лимфатические узлы корня легкого. В качестве контроля обследовано 106 здоровых мужчины аналогичного возраста, у которых была взята кровь для проведения иммунологических исследований.
Выделение обшей фракции лимфоцитов крови и лимфоузлов осуществляли по общепринятому методу в градиенте плотности фиколл-верографина с последующей очисткой от прилипающих клеток. Популяционный и субпопуляционный состав лимфоцитов оценивали с помощью метода непрямой иммунофлуо-рссцснции с использованием моноклональных антител CD3, CD4, CD8, CD16, Н LA-DR и CD72. Для дополнительной характеристики Т-клеточного звена иммунной системы вычисляли индексы иммунорегу-ляторный (CD4+/CD8+) и активации Т-лимфоцитов (Н LA-DR+/CD72+).
Для всех полученных данных определяли среднее арифметическое значение (М) и ошибку средней ариф-
мстичсской (ш). Проверку гипотезы о статистической достоверности величин исследуемых показателей несвязанных выборок проводили с помощью критерия Манна-Уитни. Исследование силы взаимосвязей осуществляли с помощью корреляционного анализа. Статистическую обработку результатов осуществляли с помощью пакета прикладных программ 8Р88 8.0.
Результаты и обсуждение При исследовании особенности фенотипического состава лимфоцитов крови у больных раком легкого обнаружено, что у больных ПКР и адснокарциномой изменение популяционного и субпопуляционного состава иммунокомпетентных клеток относительно контрольных показателей во многом совпадает (табл. 1). Так независимо от гистологии рака легкого, у больных в периферической крови повышается концентрация
лейкоцитов при понижении относительного содержания общих лимфоцитов, СОЗ+-КЛСТ0К и величины иммунорегуляторного индекса. Кроме того, у больных ПКР и адснокарциномой легкого относительно контрольных показателей снижается относительная и абсолютная концентрация С04+-лимфоцитов, но при повышении содержания СВ12+- и Н 1^Л-ВН+-;а1еТОК. Только у больных ПКР легкого относительно контрольного диапазона повышается процентное содержание С01 б+-лимфоцитов. В то же время, у больных с адснокарциномой легкого относительно показателей больных ПКР повышена абсолютная и относительная концентрация С08+-лимфоцитов, а также установлена тенденция к повышению величины индекса активации Т-лимфоцитов.
При сравнении фенотипического состава лимфоцитов лимфоузлов обнаружено, что у больных аденоТаблица 1
Особенности фенотипического состава лимфоцитов крови у больных адснокарциномой и плосколеточным раком
легкого (М ± т)
Показатели Средние величины показателей
Контроль п=106 Плоскоклеточныйрак п=56 Лденокарцинома п=34
Лейкоциты, (109/л) 6,40+0,16 7,89±0,55 РК0.01 7,78±0,47 РК0,001
Лимфоциты, (%) 38,5±0,8 31,4+1,9 РК0.001 32,9±2,8 РК0,01
Лимфоциты, (109/л) 2,27±0,06 2,41+0,15 2,34±0,19
СПЗ , (%) 66,6+0,6 58,1+2,0 РК0,01 59,6+2,1 Р1<о,о1
СЭЗ+, (109/л) 1,48±0,05 1,33+0,09 1,38±0,12
СЭ4\ (%) 41,5±0,8 32,9±1,6 РК0,001 32,6±1,7 РК0,001
С04", (109/л) 0,93±0,04 0,78±0,06 РК0.05 0,74+0,06 РК0,05
СЭ8\ (%) 26,6+0,7 26,3±1,3 29,4±1,3 Р2<0,05
СЭ8\ (1 09/л) 0,62+0,02 0,56±0,04 0,69±0,06 Р2<0,05
С016\ (%) 19,5±0,5 22,9+1,4 РК0,01 21,3+1,9
С016; (109/л) 0,47+0,02 0,55±0,05 0,51+0,06
СЭ72*, (%) 13,0+0,5 19,3+1,7 РК0,001 19,9+1,6 РК0,001
С072+, (1 09/л) 0,30+0,01 0,38±0,03 РК0/05 0,44±0,04 РК0,001
НЬ \-ГЖ\ (%) 15,8+0,5 23,2±1,4 РК0,001 23,8±1,5 РК0,001
ньл-эт (1 о9/л) 0,37±0,02 0,55±0,05 РК0,001 0,52±0,04 РК0,001
С04уС08+ 1,49+0,05 1,31 ±0,09 РК0,01 1,13+0,07 РК0,001
НЬА-0Я+/С072+ 1,23±0,05 1,16+0,09 1,50+0,17 0,1 >Р2>0,05
Примечание. Статистически достоверные различия: Р1 - с показателями контрольной группы; Рг - с показателями больных ПКР.
карциномой относительно показателей больных ПКР повышено процентное содержание СБЗ+- и С04'-кле-ток, но снижена величина индекса активации Т-лйм-фоцитов (рис. IV По осгальным исследуемым иммунологическим показателям различий не обнаружено.
□ ПКР В Аленокарцииома
□ ПКР В Аленокарцииома
Рис. 1. Процентная концентрация СПЗ*- (А.) и С1>4*-лимфоцитов (Б.) и величина индекса активации Т-лимфоцитов (В.) у больных аденокарциномой и ПКР
С помощью корреляционного анализа установлено, что взаимосвязи между величинами концентраций иммунокомнетентных клеток крови и лимфоузлов значительно различаются у больных ПКР и аденокарциномой. Причем, у больных ПКР данных взаимосвязей значительно больше, чем с аденокарципомой. Так у больных ПКР, найдена положи тельная корреляционная связь между уровнями процентного содержания СБЗ+- (г=0,70, Р<0,05) и С016+-лимфоцитов (г=0,63, Р<0,05) крови и лимфоузлов. У больных данной группы относительная концентрация С04'-клеток крови
также положительно коррелирует с содержанием СБЗ+- и С04+-лимфоцитов в лимфоузлах (г=0,71 и г=0,69, соответственно, Р<0,05). В тоже время, у больных ПКР относительное содержание С072+-лимфо-11И юн отрицательно коррелирует с уровнем СI)3 - и С08+-клеток в лимфоузлах (г=-0,85, Р<0,01 и г=-0,72, Р<0,05, соответственно). Величина иммунорегулятор-ного индекса крови у больных ПКР положительно взаимосвязана с концентрацией СБЗ+- и С04+-клеток лимфоузлов (г=0,64 и г=0,66, соответственно, Р<0,05). При этом, величина индекса активации Т-лимфоци-гов крови также положительно коррелируете содержанием С08+-лимфоузлов (г=0,79, Р<0,01).
У больных аденокарципомой регесгрируегся значительно меньше корреляционных связей между популяционным и субпопуляционным составом лимфоцитов крови и лимфоузлов. Так, у больных данной группы установлена положительная взаимосвязь между относительной концентрацией СБ 16+-лимфоцигов крови и величиной индекса активации Т-лимфоцитов (г=0,79, Р<0,05), а также отмечены отрицательные корреляционные связи процентного содержания НЬА-БК+-клегок крови с концентрацией С04+-лим-фоцигов и величиной иммунорегулягорного индекса (г=-0,82 и г=-0,73, соответственно, Р<0,05).
Сравнительный анализ фенотипического состава иммунокомнетентных клеток крови у больных ПКР и аденокарциномой отражает значительное сходство изменений в популяционном и субнонулнционном составе лимфоцитов у больных раком легкого относительно контрольных показателей. Так в обеих группах больных раком легкого, нри увеличении концентрации лейкоцитов, В-лимфоцигов и клеток, экспрессирующих НЬА-ОК-рецентор, снижается содержание общих лимфоцитов, Т-лимфоцитов, хелнерной фракции Т-лимфоцитов и, соответственно, регистрируется понижение величины иммунорегуля горного индекса. Необходимо отметить, что НЬА-ОК-рецентор экспрессируется на поверхности В-лимфоцигов и активированных Т-лимфоцитов [7,9,12]. Для оценки доли активированных Т-лимфоцитов в составе НЬА-БН'-клеток нами вычислялся индекс активации Т-лимфо-11И юн. С номошыо определения величины индекса активации Т-лимфоцитов установлено, что у больных раком легкого повышение концентрации обшей фракции НЬЛ-БЛ -клеток крови пропорционально связано с увеличением содержания В-лимфоци гов. Однако при этом, у больных аденокарципомой повышение величины индекса активации Т-лимфоцитов относительно показателя больных ПКР отражает увеличение доли активированных Т-клеток в крови но сравнению с больными ПКР. Кроме того, фено'типический статус иммунокомнетентных клеток крови больных аденокарциномой характеризуется повышенным содержанием фракции Т-сунрессоров/киллеров но сравнению с больными ПКР. В то же время, только у больных ПКР отмечено повышение относительной концентрации 1ЧК-лимфоци гов, т.е. популяции лимфоцитов, обладающей противоопухолевой активностью [15].
Анализ фено'типического статуса иммунокомнетентных клеток лимфоузлов у больных с различной гистологической структурой рака легкого позволил обна-
ружить относительное снижение концентрации Т-лимфоцитов и Т-хелнеров/индукторов, но при повышении величины индекса Т-активации у больных ПКР но сравнению с аналогичными показателями больных аденокарциномой. При этом у больных ПКР более выражена взаимосвязь фенотипического статуса лимфоцитов крови и лимфоузлов, чем у больных с железистым раком легкого. Причем установлено, что у больных ПКР содержание Т-лимфоцитов и Т-хелнеров/индук-горов в лимфоузлах положительно взаимосвязано с концентрацией данных типов клеток и величиной им-мунорегуля горного индекса крови. Также, у больных данной группы зарегесгрирована положительная взаимосвязь между уровнями относительной концентрации 1ЧК-клеток лимфоузлов и крови. Необходимо отметить положительную взаимосвязь между индексом активации Т-лимфоцитов крови и концентрацией Т-сунрес-соров/киллеров в лимфоузлах. Между тем, у больных ПКР выявлены конкурентные взаимоотношения между содержанием Т-лимфоцитов и Т-сунрессоров/кил-леров лимфоузлов и концентрацией В-лимфоцигов крови, проявляющиеся в виде отрицательных корреляционных связей между данными популяциями клеток.
В то же время, у больных с аденокарциномой легкого установлена положительная взаимосвязь между величиной индекса активации Т-лимфоци гов лимфоузлов и содержанием 1ЧК-клеток в периферической крови. У больных данной группы также отмечены конкурентные взаимосвязи между концентрацией клеток крови, экспрессирующих НЬА-ОК-рецентор, и содержанием Т-хелнеров/индукторов и значениями иммунорегулягорного индекса лимфоузлов.
Можно предположить, что взаимосвязи иммуно-комнетентных клеток крови и лимфоузлов определяются выраженностью специфических иммунных процессов. В случае активации противоопухолевого иммунитета в лимфоузлах (что может произойти, в частности, при мегасгазировании лимфоузлов) взаимосвязи между морфологическими статусами крови и лимфоузлов будут нарушаться. Известно, что при дополни тельной стимуляции иммунокомнегенгных клеток лимфоузлов значительно меняется морфологический состав [10].
Таким образом, при сравнительном исследовании особенности фено'типического статуса иммунокомнеген гных клеток крови и лимфоузлов у больных с различной гистологической структурой рака легкого обнаружено, что у больных ПКР и аденокарциномой выявляется значительное сходство изменений в популяционном и субнонуляционном составе лимфоцитов крови, которые выражаются в снижении концентрации Т-лимфоцигов и Т-хелнеров/индукторов при повышении содержания В-лимфоцигов. Только у больных ПКР в периферической крови повышается содержание 1ЧК-клеток. У больных ПКР и аденокарциномой установлены особенности в фенотипическом статусе лимфоцитов в лимфоузлах корня легкого, которые выражаются в относительном повышении содержания Т-лимфоцигов и Т-хелнеров/индукторов у больных аденокарциномой. При этом, у больных ПКР были более выраженные корреляционные связи между содержанием соответствующих типов иммуноком-пегенгных клеток крови и лимфоузлов, что позволяет предположить, что у данной группы менее выражена интенсивность иммунных процессов в лимфоузлах.
PECULIARITY OF BLOOD PHENOTYPIC COMPOSITION AND LYMPHATIC NODULES LYMPHOCYTES IN PATIENTS WITH ADENOCARCINOMA AND SQUAMOUS CELL
CARCINOMA OF LUNG
P.V. Lapeshin, A.A. Savchenkov, M.N. Moskovskich (Institute for Medical Problems of the North, Siberian Branch of Russian Academy of Medical Sciences, Krasnoyarsk State Medical Academy, Krasnoyarsk)
Patients with adenocarcinoma and squamous cell carcinoma of lung were examined to study the phenotypic composition of blood lymphocytes and lymphocytes from lung's root lymphatic nodules. Population and subpopulation lymphocytes composition was tested by indirect immunofluorescence method. Some similar changes in blood population and subpopulation lymphocytes composition were revealed in patients with adenocarcinoma and squamous cell carcinoma of lung. T-lymphocytes concentration and T-helpers\inductors relationship were decreased, B-lymphocytes concentration was elevated in both groups. NK-cells concentration in blood was elevated in patients with squamous cell carcinoma of lung only. T-lymphocytes number and T helpers\inductors index in lymphatic nodules of lung's root were relatively higher in patients with adenocarcinoma, than in patients with squamous cell carcinoma of lung.
ЛИТЕРАТУРА
1. Толовизнин М.В. // Иммунология. — 2001. — № 6. — С. 4-10.
2. Давыдов М.И., Аксель Е.М. Злокачественные новообразования в России и странах СНГ в 2001 г. — М.: РОНЦ, 2003. - 296 с.
3. Давыдов М.И., Полоцкий Б.Е. Рак легкого. — М.: Радикс, 1994. - 216 с.
4. Олейник Е.К., Олейник В.М., Бахлаев П.Е., Агеенко А.П. // Вопросы онкологии. — 2001. —Т. 47, № 4. — С. 436— 439.
5. Трахтенберг А.Х. Рак легкого. — М.: Медицина, 1987.— 304 с.
6. Чиссов В.И., Трахтенберг А.Х., Франк Г.А. и др. // Рос. онколог, журнал. - 2003. - № 2. — С. 4—10.
7. Bisset L.R., Lung Т. Kaelin М. etui. 11 Eur. J. Haematol. -2004. - Vol. 72, № 3. - P. 203-212.
8. Dorothee G., Echchakir //., Chansac Ble M. et al. // Oncogene. - 2003. - Vol. 22, № 46. - P. 7192-7198.
9. Foukas P.G., Tsilivakos V, Zacharatos P. et al. // Anticancer Res. - 2001. - \bl. 21, № 4A. - P. 26092615.
10. Lamontagne L., Page C., Larochette R., Magar R. 11 Viral Immunol. - 2003. - Vol. 16, JY« 3. - P. 395-406.
11. Medina-Franco II., Urist M.M. II Rev. Invest. Clin. —
2002. - Vol. 54,-JY« 3. - P. 204-208.
12. Nakamura II., IdirisA., Kato K, Kato H. // Oncol. Rep. -
2004. - Vol. 11, JY« 3. - P. 673-676.
13. WungL.X.. Chen B.G., PlautzG.E. US. Immunol. - 2002. -Vol. 169, JY« 6. - P. 3314-3320.
14. Wolf A.M., WolfD., Steurer M. et al. // Clinical Cancer Research. - 2003. - Vol. 9. - P. 606-612.
15. YangQ.. Hoktand M.E., Bryant J.L. etal. //Int. J. Cancer. -
2003. - Vol. 105, JY« 4. - P. 512-519.
© СЛКОВИЧ В.Л., ГРИНШТЕИН Ю.И., *БОБРОВСКИИ О.Л., *лндин л.в.
ДИАГНОСТИКА И ЛЕЧЕНИЕ ЭКССУДАТИВНОГО ПЕРИКАРДИТА У ОНКОЛОГИЧЕСКИХ БОЛЬНЫХ
*В.А. Сакович, Ю.И. Грипштейп, *О.А. Бобровский, *А.В. Аидин (Красноярская государственная медицинская академия, ректор —д.м.н., проф. В.И. Прохоренков; *краевая клиническая больница г. Красноярска, гл. врач —Б.П. Маштаков)
Резюме. Считается, что до 6% злокачественных новообразований различных локализаций дают метастазы в миокард и перикард, часто с развитием экссудативного сдавливающего перикардита. Современные малотравматичные видеоторакоскопические методы фенестрации перикарда позволяют значительно облегчить состояние больного, открывают новые возможности диагностики и дальнейшего специализированного лечения. Ключевые слова. Экссудативный перикардит, онкология, диагностика, лечение.
Злокачественные новообразования являются наиболее частой причиной тампонады сердца. Так, по данным обзора литературы в 1979 г. они являлись причиной тампонады сердца в 57,7% случаев. С другой стороны, тампонада сердца может быть первым проявлением злокачественной опухоли, а, значит, неотложные врачебные мероприятия по ликвидации сдавления сердца будут носить не только паллиативный, но и диагностический характер [1,6, 8].
Единственным мероприятием, позволяющим спасти жизнь при тампонаде сердца, является экстренная эвакуация жидкости из полости перикарда. Первое сообщение об эвакуации жидкости из полости перикарда при сдавлении сердца можно найти в трудах Галена (второй век нашей эры) — полость перикарда была освобождена после резекции грудины. Современные методы перикардиоцентеза описаны французским профессором анатомии Riolani в 1648г. и практически не изменились после их внедрения в клинику в конце восемнадцатого века Пс^аи! и Еаггсу.
Жидкость в полости перикарда после перикардиоцентеза может продолжать накапливаться, и тампонада сердца может рецидивировать в течении 24—48 часов. Быстрое накопление жидкости в перикарде обычно предотвращается катетеризацией сердечной сорочки после перикардиоцентеза [3, 7].
Постоянная катетеризация полости перикарда имеет свои недостатки, прежде всего гнойно-септического характера. Поэтому, широко обсуждаются показания к созданию плевроперикардиального свища. Считается, что эта операция довольно эффективна и хорошо переносится даже ослабленными онкологическими больными [3]. Но ЮЛ. Шевченко с соавт. (1999 г.) утверждают, что эффективной декомпрессии сердца можно достичь только после проведения радикального оперативного вмешательства — субтотальной резекции перикарда. Проведение резекции перикарда в меньшем объеме не обеспечивает достижения целей, ради которых предпринималось оперативное вмешательство. Огра-
ниченные резекции из внеплеврального доступа допустимы лишь для больных, тяжесть состояния которых не позволяет выполнить радикальное вмешательство, либо для больных, характер основного заболевания которых не позволяет надеяться на полное излечение (распространенность опухолевого процесса). Частичную же резекцию перикарда (фенестрацию) из чрезплев-рального доступа считают неоправданной [4].
Прогноз неопластической тампонады сердца очень тяжелый. В опубликованных наблюдениях описано выживание небольшого числа больных. Но экссудативный раковый перикардит не всегда является короткой терминальной фазой основного онкологического заболевания. Энергичные лечебные воздействия значительно уменьшают частоту смертельных исходов, обусловленных тампонадой сердца. Соответствующее лечение позволяет продлить жизнь больных до 12—16 месяцев [3].
Все вышеизложенное указывает на отсутствие системного подхода, прежде всего, к вопросам диагностики и тактики возможных хирургических вмешательств у данной очень тяжелой категории больных. К сожалению, до сих пор не определено, в каких специализированных учреждениях предпочтительнее заниматься этой патологией. По сути, термин «кардиоонкология» впервые появляется только в работах Б. В. Петровского (1988 г.) и привлекает пристальное внимание к роли кардиохирургической клиники в решении этой проблемы. Но до сих пор во многих клиниках больные с вторичным злокачественным поражением сердца и перикарда получают только симптоматическую терапию, которая не может не только продлить жизнь этих больных, но и сколько-нибудь существенно облегчить их состояние.
Целью нашей работы явилась разработка диагностического алгоритма, оценка клинической эффективности различных способов хирургического лечения экссудативного перикардита, а также апробация предложенного нами способа торакоскопической фенест-
