CC BY
106
УДК 615.015.1
ФЕНОМЕН СНИЖЕНИЯ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ KLEBSIELLA PNEUMONIAE К ГЕНТАМИЦИНУ ПОД ВЛИЯНИЕМ АНТИОКСИДАНТОВ
© Мирошниченко А.Г., Брюханов В.М., Бутакова Л.Ю., Госсен И.Е., Перфильев В.Ю., Смирнов П.В.
Кафедра фармакологии, кафедра микробиологии с вирусологией Алтайского государственного медицинского университета, Барнаул
E-mail: ag@asmu.ru
Проведено исследование влияния антиоксидантов (восстановленный глутатион, N-ацетилцистеин, аскорбиновая кислота, метилэтилпиридинол) в концентрациях 0,5, 1, 2 и 4 мМ на чувствительность штаммов Klebsiella pneumoniae к гентамицину при инкубации в условиях минеральной питательной среды М9 в течение 24 часов. Установлено, что все изучаемые антиоксиданты снижают чувствительность бактерий к действию гентамицина. Выраженность пробактери-альных свойств антиоксидантов прямо зависит от их концентрации в инкубационной среде. Полученные данные необходимо учитывать при использовании антиоксидантов в комплексном лечении больных с инфекционными заболеваниями, вызванными Klebsiella pneumoniae.
Ключевые слова: гентамицин, глутатион, аскорбиновая кислота, N-ацетилцистеин, метилэтилпиридинол, Klebsiella pneumoniae.
THE PHENOMENON OF DECREASE IN SENSITIVITY OF KLEBSIELLA PNEUMONIAE TO GENTAMICIN DUE TO ANTIOXIDANTS Miroshnichenko A. G., Bryukhanov V.M., Butakova L. Yu., Gossen I.E., Perfilev V. Yu., Smirnov P. V.
Department of Pharmacology, Department of Microbiology and Virology of Altai State Medical University, Barnaul The effect of antioxidants (the reduced glutathione, N-acetylcysteine, ascorbic acid, and methylethylpyridinol) in the concentrations of 0.5, 1, 2, and 4 mM on the sensitivity of Klebsiella pneumoniae to gentamicin in the incubation in mineral M9 medium within 24 hours has been studied. It has been determined that the studied antioxidants reduce the sensitivity of bacteria to gentamicin. The evident antibacterial properties of antioxidants directly depend on their concentration in the incubation medium. These data must be considered in the use of antioxidants in managing patients with infectious diseases caused by Klebsiella pneumoniae. Keywords: gentamicin, glutathione, ascorbic acid, N-acetylcysteine, methylethylpyridinol, Klebsiella pneumoniae.
Распространение заболеваний, вызываемых резистентными к действию химиотерапевтических средств бактериями, обусловливает неэффективность эмпирической антибактериальной фармакотерапии [9], поэтому требует совершенствования способов лечения соответствующих больных, а также вызывает необходимость изучения факторов формирования антибиотикорези-стентности и методов ее преодоления.
Одними из широко применяемых в настоящее время антибиотиков являются аминогликозиды, входящие в перечень препаратов первого ряда при сепсисе и других инфекционных заболеваниях [3, 5]. Аминогликозиды, наряду с карбапе-немами и ингибиторозащищенными цефалоспо-ринами, относятся к препаратам, применяемым для лечения инфекционных заболеваний, вызванных Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter spp., а также представителями семейства Enterobacteri-aceae [11]. Механизм действия аминогликозидов связан с необратимым угнетением синтеза белка на уровне 30 S-субъединицы рибосом у чувствительных микроорганизмов. В отличие от других ингибиторов синтеза белка аминогликозидные антибиотики оказывают не бактериостатическое,
а бактерицидное действие [9, 12]. Нерациональное использование аминогликозидов на протяжении более чем полувека привело к широкому распространению резистентных штаммов, затрудняющему проведение эффективной фармакотерапии с использованием этого класса антибиотиков. В Российской Федерации уровень резистентности к аминогликозидам (прежде всего, к гентамицину) превышает таковой по сравнению с большинством развитых стран [8, 10].
В настоящей работе изучались штаммы Klebsiella pneumoniae - бактерии семейства Enter-obacteriaceae, являющейся одним из ведущих возбудителей нозокомиальных инфекций (от 2 до 20%). В России K. pneumoniae третий по частоте грамотрицательный возбудитель нозокомиальных инфекций. В ряде стационаров клебсиелла - превалирующий возбудитель (от 24,5 до 43,6%) [1, 4]. В связи с этим проблема распространения устойчивости Klebsiella pneumoniae к антибактериальным средствам, в частности, к аминоглико-зидам, остается актуальной.
Учитывая универсальную роль усиления процессов свободнорадикального окисления в патогенезе различных заболеваний, в т.ч. инфекцион-
ных, в качестве вспомогательной терапии больным с бактериальными инфекциями могут назначаться антиоксиданты. При этом в традиционную химиотерапевтическую схему «макроорганизм -антимикробное средство - микроорганизм» включается дополнительное лекарственное вещество, влияние которого на микроорганизм-возбудитель в подавляющем большинстве случаев не учитывается. В связи с этим определенный интерес представляет собой работа M. Goswami, в которой демонстрируется приобретение устойчивости Escherichia coli к стрептомицину под действием антиоксидантов - восстановленного глу-татиона и аскорбиновой кислоты [13].
Целью настоящего исследования явилась сравнительная оценка влияния некоторых антиоксидантов (глутатион, N-ацетилцистеин, аскорбиновая кислота, метилэтилпиридинол) на чувствительность Klebsiella pneumoniae к гентамици-
ну.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Работа выполнена на трех штаммах Klebsiella pneumoniae, депонированных на кафедре микробиологии с вирусологией Алтайского государственного медицинского университета: 1) контрольный штамм ATCC 13883 (далее - штамм № 1); штамм, полученный из мокроты больного 55 лет, страдающего хронической обструктивной болезнью легких (далее - штамм № 2); штамм, полученный из цервикального канала пациентки 26 лет, обратившейся в клинику для обследования (далее - штамм № 3). Идентификация микроорганизмов проводилась при помощи системы «EN-TEROtest 16» (Erba Lachema s.r.o., Чехия) с использованием планшетного фотометра Multiskan-Ascent (Thermo Fisher Scientific Inc., Финляндия) и программного обеспечения «Микроб-Автомат». Из указанных штаммов готовили суточные культуры инкубацией на скошенном агаре при 35°С, которые использовали для приготовления иноку-лятов - бактериальных суспензий в 0,9% растворе хлорида натрия с оптической плотностью 1,0 по Мак-Фарланду. Перед инокуляцией методом разведения определяли минимальную подавляющую концентрацию гентамицина (МПК).
Для инкубации готовили смесь на основе минеральной питательной среды M9. В среду добавлялись изучаемые антиоксиданты (восстановленный глутатион, аскорбиновая кислота, N-ацетилцистеин, метилэтилпиридинол) до конечных концентраций 0,25, 0,5, 1, 2 и 4 мМ, а также гентамицина сульфат до сублетальной концентрации, составляющей 50% ранее определенной
МПК для каждого штамма в заданных условиях инкубации.
После инокуляции бактериальной суспензии смесь инкубировали в воздушном термостате при 35°С в течение 24 часов. Для оценки развития штаммов использовали аппарат для определения оптической плотности бактериальных взвесей Densi-la-meter (Erba Lachema s.r.o., Чехия). Полученные данные сравнивали с данными контрольных инкубационных смесей, не содержащих антиоксиданты. Статистическую обработку результатов проводили с использованием непарамети-ческого критерия Манна-Уитни с помощью программы SigmaStat 3.5 (Systat Software, Inc., США), различия считали значимыми при P<0,05 (в таблицах уровень статистической значимости указан в верхнем индексе после значения) [6].
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Исходя из данных, представленных в табл. 1, можно сделать вывод о том, что восстановленный глутатион вызывает резкое снижение чувствительности всех изучаемых штаммов Klebsiella pneumoniae к гентамицину. Следует отметить, что степень выраженности данного эффекта прямопропорциональна концентрации антиоксиданта. Данная зависимость становится особенно заметна через 6 часов после начала инкубации для штаммов № 1 и № 2, а также через 12 часов для штамма № 3. Измерение через 24 часа указывает на противоположный эффект: с увеличением концентрации восстановленного глутатиона снижается плотность бактериальной биомассы. Такое кажущееся противоречие логично объясняется тем, что присутствие глутатиона ускоряет развитие штаммов, и, соответственно, достижение предела развития бактерий, обусловленного питательными возможностями инкубационной среды и накоплением токсических продуктов жизнедеятельности микроорганизмов. Поскольку, как было указано выше, пробактериальный эффект восстановленного глутатиона прямо зависит от его концентрации, становится ясным, что окончание стационарной фазы развития штаммов наступает тем раньше, чем больше концентрация антиоксиданта.
Полученные данные свидетельствуют о том, что восстановленный глутатион является мощным защитным фактором, препятствующим действию гентамицина в отношении Klebsiella pneumoniae. Учитывая тот факт, что глутатион является важнейшим компонентом антиоксидантой системы человека и в достаточно высоких концентрациях находится внутри клеток, цитолиз, неизбежно происходящий в организме в ус-
Таблица 1
Влияние восстановленного глутатиона на активность гентамицина в отношении Klebsiella pneumoniae
Концентрация антиоксиданта Оптическая плотность бактериально Me(23%;73%)P усл. ед. по Мак-с )й биомассы, >арланду
6 часов 12 часов 24 часа
Штамм № 1 контроль(n =10) 0,7(0,6;0,8) 4,7(4,7;4,8) 4,7(4,7;4,7)
0,25 мМ (n = 3) 4,2(4,1;4,2)0’002 З,0(З,0;З,0)0’002 5,0(4,9;5,0)0’001
0,5 мМ (n = 3) 4,2(4,1;4,З)0’002 З,0(З,0;З,1)0’002 5,1(5,1;5,1)0,001
1 мМ (n = 3) 4,З(4,4;4,З)0’002 З,0(З,0;З,0)0’002 5,0(5,0;5,1)0’001
2 мМ (n = 3) 4,6(4,6;4,7)0’002 З,1(З,1;З,1)0’002 5,1(5,1;5,1)0’001
4 мМ (n = 3) 4,6(4,6;4,8)0’002 З,0(З,0;З,0)0’002 5,0(5,0;5,1)0’001
Штамм № 2 контроль(n =10) 0,8(0,8;0,9) 4,8(4,8;4,9) 4,7(4,7;4,7)
0,25 мМ (n = 3) 1,З(1,4;1,З)0’002 4,9(4,9;З,0)0’023 4,9(4,8;4,9)0’001
0,5 мМ (n = 3) 1,7(1,7; 1,8)0002 4,9(4,9;З,0)0’089 4,9(4,8;4,9)0’001
1 мМ (n = 3) 1,6(1,6; 1,7)0 002 4,8(4,8;4,9)1’000 4,8(4,8;4,9)0’001
2 мМ (n = 3) 2,3(2,3;2,3)0’002 4,8(4,8;4,8)0’688 4,8(4,8;4,8)0’003
4 мМ (n = 3) 3,2(3,1;3,3)0’002 4,6(4,6;4,7)0011 4,7(4,6;4,7)0’217
Штамм № 3 контроль(n =10) 0,1(0,1;0,2) 1,2(1,2;1,4) 4,9(4,7;5,0)
0,25 мМ (n = 3) 0,2(0,2;0,2)0’082 3,6(3,3;3,8)0’003 4,7(4,7;4,7)0’016
0,5 мМ (n = 3) 0,2(0,2;0,2)0’021 4,1(4,1;4,2)0’003 4,7(4,7;4,7)0’036
1 мМ (n = 3) 0,2(0,2;0,3)°’°10 4,3(4,0;4,9)0’003 4,7(4,6;4,7)0’024
2 мМ (n = 3) 0,4(0,3;0,3)0’002 4,7(4,6;4,9)0’003 4,6(4,5;4,7)0’015
4 мМ (n = 3) 0,З(0,З;0,6)0’002 4,З(4,4;4,7)0’003 4,5(4,4;4,5)0’015
Таблица 2
Влияние N-ацетилцистеина на активность гентамицина в отношении Klebsiella pneumoniae
Концентрация антиоксиданта Оптическая плотность бактериально Me(23%;73%)P усл. ед. по Мак-с ай рл б лна ио нд ма у с с ы
6 часов 12 часов 24 часа
Штамм № 1 контроль(n =10) 0,7(0,6;0,8) 4,7(4,7;4,8) 4,7(4,7;4,7)
0,25 мМ (n = 3) 0,9(0,8;0,9)0’070 4,7(4,7;4,7)0’947 4,7(4,7;4,8)0’123
0,5 мМ (n = 3) 1,0(1,0; 1,1)0019 4,7(4,7;4,7)0’342 4,7(4,7;4,7)0’344
1 мМ (n = 3) 1,2(1,1;1,2)0’016 4,7(4,6;4,7)0’118 4,7(4,7;4,7)0’826
2 мМ (n = 3) 1,6(1,З;1,6)0’004 4,7(4,7;4,8)1’000 4,7(4,7;4,7)0’826
4 мМ (n = 3) 2,6(2,З;2,6)0’002 4,6(4,6;4,7)0047 4,6(4,6;4,6)0’038
Штамм № 2 контроль(n =10) 0,8(0,8;0,9) 4,8(4,8;4,9) 4,7(4,7;4,7)
0,25 мМ (n = 3) 1,0(1,0; 1,0)0012 4,8(4,8;4,8)0’470 4,8(4,7;4,8)0123
0,5 мМ (n = 3) 1,1(1,0; 1,1)0 003 4,8(4,8;4,8)0’209 4,8(4,7;4,8)0013
1 мМ (n = 3) 1,2(1,1;1,2)0’002 4,8(4,8;4,8)0’470 4,8(4,8;4,8)0’003
2 мМ (n = 3) 1,3(1,3;1,3)0’002 4,8(4,8;4,8)0’470 4,7(4,7;4,7)0’792
4 мМ (n = 3) 1,8(1,8; 1,9)0 002 4,8(4,7;4,8)0’297 4,7(4,7;4,7)0’792
Штамм № 3 контроль(n =10) 0,1(0,1;0,2) 1,2(1,2;1,4) 4,9(4,7;З,0)
0,25 мМ (n = 3) 0,0(0,0;0,1)0’098 1,4(1,2;1,З)0292 4,9(4,7;4,9)0’433
0,5 мМ (n = 3) 0,1(0,1;0,1)0’443 1,6(1,З;1,8)0’003 4,8(4,7;4,9)0’238
1 мМ (n = 3) 0,1(0,1;0,1)0’769 1,9(1,8;1,9)0’002 4,7(4,6;4,8)0046
2 мМ (n = 3) 0,1(0,0;0,1)0’223 2,4(2,2;2,4)0’003 4,6(4,6;4,7)0013
4 мМ (n = 3) 0,2(0,2;0,2)0’021 3,9(3,8;4,1)0’003 4,З(4,4;4,З)0’004
ловиях инфекционного процесса, может спо- Особый интерес представляет собой срав-
собствовать снижению чувствительности нение описанных выше данных с данными от-
Klebsiella pneumoniae к гентамицину и, воз- носительно влияния N-ацетилцистеина на раз-
можно, к другим аминогликозидам [13]. витие изучаемых штаммов (табл. 2). Являясь
структурным аналогом глутатиона, N-ацетилцистеин также является носителем сульфгидрильной группы, наличием которой объясняются его антиоксидантные свойства. Однако в отличие от глутатиона N-ацетилцистеин применяется в качестве му-колитического лекарственного средства при заболеваниях органов дыхания, сопровождающихся повышенной вязкостью мокроты с присоединением гнойной инфекции (острый и хронический бронхит, пневмония, бронхоэктазия, муковисцидоз и т.д.).
Из табл. 2 видно, что N-ацетилцистеин уменьшает чувствительность изучаемых штаммов к гентамицину. С 12 до 24 часов эксперимента для штаммов № 1 и № 2 оптическая плотность бактериальной биомассы в инкубационных смесях, содержащих
N-ацетилцистеин, выравнивается с контрольными значениями. Для штамма № 3 к 24 часу также наблюдается аналогичное выравнивание для смесей с низкими (0,25 и 0,5 мМ) концентрациями антиоксиданта, а при более высоких концентрациях - значимое снижение оптической плотности по сравнению с контролем. Из этого следует, что N-ацетилцистеин по сравнению с восстановленным глутатионом оказывает аналогичное, но менее выраженное действие. Говоря о возможном клиническом значении описанных явлений, помимо прямого уменьшения чувствительности Klebsiella pneumoniae к гентамицину под влиянием
N-ацетилцистеина, следует упомянуть о том, что последний, попадая в организм, может являться предшественником синтеза глутатиона [2], пробактериальные эффекты которого описаны выше.
Похожий профиль влияния отмечается и для аскорбиновой кислоты (табл. 3). Через 6 часов после начала инкубации для штаммов № 1 и № 2 прослеживается статистически значимое пробактериальное действие антиоксиданта, выраженность которого прямопропорциональна его концентрации. Для штамма № 3 отмечается аналогичный, но более поздний эффект (через 12 часов), что, по-видимому, связано с более высокой концентрацией антибиотика в инкубационной среде. Через 24 часа наблюдается описанный выше эффект снижения оптической плотности, степень которого определяется интенсивностью развития бактериальной культуры.
В табл. 4 представлены результаты изучения влияния метилэтилпиридинола на чувствительность Klebsiella pneumoniae к гента-мицину. Следует отметить, что нами были ранее доказаны антибактериальные свойства указанного антиоксиданта в отношении исследуемого микроорганизма [7]. Однако при совместном применении метилэтилпиридинола и гентамицина наблюдается не потенцирование,
а, напротив, уменьшение активности антибиотика. Причем степень снижения чувствитель-
Таблица 3
Влияние аскорбиновой кислоты на активность гентамицина в отношении Klebsiella pneumoniae
Концентрация антиоксиданта Оптическая плотность бактериальной биомассы, Me(23%;73%)P усл. ед. по Maк-Фaрлaндy
6 часов 12 часов 24 часа
Штамм № 1 контроль (n = 10) 0,7(0,6;0,8) 4,7(4,7;4,8) 4,7(4,7;4,7)
0,23 мM (n = 3) 1,2(0,9;1,2)°’°3° 4,6(4,6;4,7)0’04/ 4,6(4,3;4,7)0’313
0,3 мM (n = 3) 1,2(1,1;1,2)°-018 4,6(4,6;4,6)0’02/ 4,6(4,6;4,6)0’141
1 мM (n = 3) 1,6(1,2;1,6)0011 4,3(4,3;4,6)0’011 4,6(4,6;4,6)0’030
2 мM (n = 3) 1,9(1,6;1,9)0’004 4,3(4,3;4,6)0’004 4,7(4,6;4,7)0’303
4 мM (n = 3) 2,3(2,O;2,4)0’002 4,4(4,4;4,3)0’002 4,3(4,3;4,3)0’001
Штамм № 2 контроль (n = 10) 0,8(0,8;0,9) 4,S(4,S;4,9) 4,7(4,7;4,7)
0,23 мM (n = 3) O,8(O,7;O,9)0’400 4,S(4,7;3,0)O’S4/ 4,7(4,7;4,S)0’344
0,3 мM (n = 3) 0,9(0,9;0,9)O’1S4 4,S(4,S;4,S)0’6SS 4,7(4,6;4,7)0’1SS
1 мM (n = 3) O,9(O,8;O,9)0’600 4,S(4,S;4,9)0’'43 4,6(4,6;4,7)0’26S
2 мM (n = 3) 1,1(1,O;1,1)0003 4,7(4,7;4,7)0’02' 4,7(4,7;4,7f6'S
4 мM (n = 3) 1,3(1,3;1,3)0’002 4,7(4,7;4,7)0’010 4,6(4,6;4,7)0’036
Штамм № 3 контроль (n = 10) 0,1(0,1;0,2) 1,2(1,2;1,4) 4,9(4,7;3,0)
0,23 мM (n = 3) 0,1(0,1;0,1)0’443 1,4(1,3;1,S)0106 4,9(4,S;3,1)0’664
0,3 мM (n = 3) O,1(O,O;O,1)0’310 1,6(1,4;1,S)0016 3,0(4,9;3,1)0’430
1 мM (n = 3) 0,1(0,1;0,1)0’ssy 2,O(1,9;2,O)0’003 4,9(4,7;4,9)0,44S
2 мM (n = 3) 0,1(0,1;0,1)0’769 2,6(2,4;2,S)0’003 4,S(4,S;4,9)0’332
4 мM (n = 3) O,2(O,2;O,2)0’021 3,4(3,4;3,7)0’003 4,3(4,3;4,6)0’004
Таблица 4
Влияние метилэтилпиридинола на активность гентамицина в отношении Klebsiella pneumoniae
Концентрация антиоксиданта Оптическая плотность бактериально Me(25%;75%)P усл. ед. по Ma^c ай рл б а ио дн ома у ас с ы
6 часов 12 часов 24 часа
Штамм № 1 контроль(n =10) Q,7(Q,6;Q,S) 4,7(4,7;4,S) 4,7(4,7;4,7)
0,25 мM (n = 5) 1,3(1,2;1,3)Q’Q16 4,6(4,6;4,6)0’010 4,6(4,6;4,6)0’008
0,5 мM (n = 5) 2,2(2,0;2,2)Q’QQ2 4,6(4,6;4,7)0’060 4,6(4,6;4,7)013S
1 мM (n = 5) 3,5(3,3;3,5)Q’QQ2 4,6(4,5;4,6)0021 4,7(4,6;4,7)0’305
2 мM (n = 5) 4,1(4,1 ;4,1)QQQ2 4,6(4,6;4,6)0027 4,7(4,7;4,7)0’S26
4 мM (n = 5) 4,0(4,0;4,0)Q’QQ2 4,5(4,4;4,5)0’002 4,4(4,4;4,5)0’001
Штамм № 2 контроль(n =10) Q,S(Q,S;Q,9) 4,S(4,S;4,9) 4,7(4,7;4,7)
0,25 мM (n = 5) 1,0(0,9; 1,1)0 021 4,7(4,7;4,7)0’027 4,7(4,6;4,7)0’217
0,5 мM (n = 5) 1,5(1,4;1,5)0’002 4,7(4,6;4,7)0’070 4,6(4,6;4,7)0’048
1 мM (n = 5) 2,1(2,0;2,2)0’002 4,6(4,6;4,6)0’002 4,6(4,5;4,6)0’001
2 мM (n = 5) 3,6(3,5;3,7)0’002 4,5(4,5;4,6)0’003 4,5(4,5;4,5)<0’001
4 мM (n = 5) 4,0(4,0;4,0)°’°°2 4,5(4,4;4,5)0’002 4,5(4,4;4,5)<0’001
Штамм № 3 контроль(n =1Q) 0,1(0,1;0,2) 1,2(1,2;1,4) 4,9(4,7;5,0)
0,25 мM (n = 5) 0,1(0,0;0,1)Q’225 1,S(1,6; 1,S)0 004 5,0(4,9;5,4)0’491
0,5 мM (n = 5) 0,1(0,1;0,2)°’497 2,5(2,2;2,S)0’003 5,0(4,9;5,2)0’384
1 мM (n = 5) 0,2(0,2;0,2)0’021 4,0(3,S;4,3)0’003 4,7(4,5;4,7)0’024
2 мM (n = 5) 0,6(0,6;0,6)Q’QQ2 4,3(4,3;4,4)0’003 4,3(4,3;4,4)0’002
4 мM (n = 5) 1,S(1,S; 1,S)0 002 4,1(4,1;4,2)0’002 4,2(4,1;4,3)0’004
ности всех исследуемых штаммов к гентами-цину под действием метилэтилпиридинола значительно выше по сравнению с другими антиоксидантами.
Возможным механизмом снижения чувствительности изучаемых штаммов к гентами-цину под действием тиоловых антиоксидантов (глутатион, N-ацетилцистеин) может быть биотрансформация антибактериального средства при участии глутатион-8-трансферазы, в результате которой в бактериальных клетках образуются конъюгаты антиоксидантов и гентамицина [15, 17]. Данный механизм подтверждается на примере бактерий Mycobacterium smegmatis, которые синтезируют аналог глута-тиона микотиол, и микотиол-дефицитные штаммы микроорганизма проявляют гиперчувствительность к антибактериальным средствам [16]. Рассмотренные механизмы могут быть справедливы для глутатиона и N-ацетилцистеина, однако не применимы к аскорбиновой кислоте и метилэтилпиридино-лу. Общим механизмом может быть изменение окислительно-восстановительного потенциала бактериальной трансляционной машины, обеспечивающей синтез белка и являющейся первичной мишенью действия гентамицина. В подтверждение имеются некоторые исследования, демонстрирующие изменение синтеза белка под действием веществ, влияющих на
процессы свободнорадикального окисления [14, 18].
Таким образом, вещества, обладающие ан-тиоксидантным действием, способны снижать чувствительность Klebsiella pneumoniae к ген-тамицину. Степень выраженности эффекта прямопропорциональна концентрации антиоксиданта.
ЛИТЕРАТУРА
1. Галкин Д.В. Карбапенемы через 20 лет после открытия: современные микробиологические и клинические аспекты // Клин. Микробиол. Антимикроб. Химиотер. - 2007. - Т. 9, № 2. -С. 133-152
2. Деньгин В.В. Перспективные направления клинического применения N-ацетилцистеина // Фарматека. - 2008. - № 4. - С. 48-52.
3. Зайцев А.А. Аминогликозиды с позиций современной практики лечения инфекций дыхательных путей // Лечащий врач. - 2009. - № 9. -С. 18-25
4. Ильина В.Н. К вопросу резистентности Klebsiella pneumoniae у детей раннего возраста с врожденными пороками сердца // Патология кровообращения и кардиохирургия. - 2012. -№ 1. - С. 57-60.
5. Краснов М.В. Сепсис у детей раннего возраста: современные критерии диагноза и принципы лечения // Практическая медицина. - 2010. -№ 40. - С. 28-39.
6. Лакин Г.Ф. Биометрия: Учеб. пособие для биол. спец. вузов / Г.Ф. Лакин - 4-е изд., пере-раб. и доп. - М.: Высш. шк., 1990 - 352 с.
7. Мирошниченко А.Г. Антибактериальная активность метилэтилпиридинола // Медицинский академический журнал. Приложение. - 2012. -С. 329-330.
8. Рачина С.А. Анализ амбулаторного потребления антимикробных препаратов для системного применения в различных регионах РФ // Клин. Микробиол. Антимикроб. Химиотер. - 2008. -Т. 10, № 1. - С. 59-69
9. Решедько Г.К. Аминогликозиды: перспективы клинического использования в стационарах России // Клин. Микробиол. Антимикроб. Хи-миотер. - 2008. - Т. 10, № 3. - С. 260-269
10. Решедько Г.К. Механизмы резистентности к аминогликозидам у нозокомиальных грамотри-цательных бактерий в России: результаты многоцентрового исследования // Клин. Микробиол. Антимикроб. Химиотер. - 2001. - Т. 3, № 2. - С. 111-125.
11. Решедько Г.К. Резистентность к антибиотикам грамотрицательных возбудителей нозокомиальных инфекций в ОРИТ многопрофильных стационаров России // Клин. Микробиол. Антимикроб. Химиотер. - 2008. - Т. 10, № 2. -С. 163-179
12. Решедько Г.К., Хайкина Е.В. Группа аминогли-козидов. Практическое руководство по анти-инфекционной химиотерапии / Под ред. Л.С. Страчунского, Ю.Б. Белоусова, С.И. Козлова. - М., 2007. - 494 с.
13. Goswami M. Effects of glutathione and ascorbic acid on streptomycin sensitivity of Es-cherichia coli // Antimicrobial agents and chemo-therapy. -2007. - Vol. 51, N 3. - P. 1119-1122.
14. Kosowera N.S. Glutathione VIII. The effect of glutathione disulfide on initiation of protein synthesis // Biochim. Biophys. Acta. - 1961. -Vol. 49. - P. 235-236.
15. Piccolomini R. Glutathione transferase in bacteria: subunit composition and antigenic characterization // J. Gen. Microbiol. - 1989. - Vol. 135. -P. 3119-3125.
16. Rawat M. Mycothiol-deficient Mycobacterium smegmatis mutants are hypersensitive to alkylating agents, free radicals, and antibiotics // Antimicrob. Agents Chemother. - 2002. - Vol. 46. - P. 33483355.
17. Vuilleumie, S. Bacterial glutathione S-transferases: what are they good for? // J. Bacteriol. - 1997. -Vol. 179. - P. 1431-1441.
18. Zehavi-Willner T. Glutathione V. The effect of the thiol-oxidizing agent diamide on initiation and translation in rabbit reticulocytes // Biochim. Bio-phys. Acta. - 1971. - Vol. 228. - P. 245-251.
