CC BY
61
Таблица 2
Влияние гликоинувита, глипила и глибенкламида на содержание сахара в крови при аллоксановом диабете, ммоль/л
Препарат Исходный уровень сахара в крови Сахар в крови после введ. аллоксана День после введения препарата
10-й 20-й
Легкое течение
Физ.р-р, 1мл 4,1±0,5 11,3±0,7 x 10,б±0,8 100 10,2±0, 100
Гликоинувит, 100 мг/кг 10,9±1,1 9,3±0,б 87,7 ОС с 9 Г\ ОС 80,3
Глипил, 50 мг/кг 11,5±0,9x 8,9±0,8 83,9 7,2±0,7 x x 70,5
Глибенкламид, 5 мг/кг 10,2±0,9 x 8,1±0,9 7б,4 7,1±0,б х б9,б
Средне тяжелая форма
Физ.р-р, 1мл 4,3±0,8 21,9±0,8 x 20,б±0,9 100 18,9±1,4 100
Гликоинувит, 100 мг/кг 19,3±1,3 17,1±0,7 83 14,8±1,б 78,3
Глипил, 50 мг/кг 22,1±0,9 x 17,0±1,0 82,5 14,4±0,9 x 7б,2
Глибенкламид, 5 мг/кг 20,8±0,8 x 15,8±0,9х 7б,7 13,1±0,9 х 69,3
Примечание: х — значимость различий р<0,05.
дней после введения препаратов при легкой форме ал-локсанового диабета уровень сахара в крови снижается: после приема гликоинувита на 19,7%, глипила на 29,5%, глибенкламида на 30,4% по отношению к контрольному значению (10,2±0,9). У крыс со среднетяжелой формой диабета при приеме гликоинувита через 20 дней со-
держание сахара в крови снизилось на 21,7%; глипила на 23,8%; глибенкламида на 30,7% по отношению к контрольному (18,9±1,4) (табл. 2)
Следовательно, гликоину-вит обладает заметным гипо-гликемическим действием при экспериментальном аллокса-новом диабете.
Гипогликемическая активность гликоинувита обусловлена содержанием в ней большого количества полисахаридов, в том числе инулина (18%). Молекулы инулина способны сорбировать значительное количество пищевой глюкозы и препятствовать ее всасыванию в кровь, кроме того, стимулирует усвоение глюкозы без участия инсулина.
Таким образом, гликоинувит снижает уровень глюкозы в условиях экспериментальной гипергликемии. По своей биологической активности гликоинувит не уступает препаратам сравнения-глибенкламиду и глипилу. Всесторонное изучение фармакологических свойств гли-коинувита играет определенный практический интерес.
ЛИТЕРАТУРА
1. Аметов А.С., Овсянников К.В. Актуальные вопросы терапии сахарного диабета II типа // Международный журнал медицинской практики. — 2000. — № 12. — С. 40-43.
2. Анциферов М.Б. Лечение сахарного диабета: эффективность применения традиционных и новых антидиабетических препаратов: Дис... докт. мед. наук. — М., 1995. — 267 с.
3. Балаболкин М.И. Эндокринология. — М.: Медицина, 1998. — 470 с.
4. Демидова И.Ю. Лечение сахарного диабета 2 типа // Фарматека. — 2002. — № 5. — С. 3-8.
5. Экспериментальный сахарный диабет / Под. ред. В.Г. Баранова, И.М. Соколоверова, Э.Г. Галкарян и др. — Л.: Медицина, 1983. — 240 с.
6. Сборник методов клинических лабораторных исследований / Под. ред. А.Н. Юнусходжаева. — Ташкент, 2000. — Т.2. — 703 с.
7. American Diabetes Association. Economic consequences of diabetes mellitus in US in 1997 // Diabetes Care. — 1998. — V.21. — P. 296-309.
8. Lukens R.M. Alloxan diabetes // Physiol. Res. — 1948. — №
2. — P. 304.
Адрес для переписки: Узбекистан, г. Ташкент, Мирабадский район, ул. Айбека-45, Файзиева Зиёда Тураевна. Тел. раб. (8-371) 256-06-54; эл. адрес [email protected]
© ТОРОПОВА А.А., РАЗУВАЕВА Я.Г., ШАНТАНОВА Л.Н., АЖУНОВА Т.А., ЗАНДАНОВ А.О. — 2009
ФАРМАКОТЕРАПЕВТИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ РАСТИТЕЛЬНОГО СРЕДСТВА «ВЕНТРОФИТ»
ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ИНДОМЕТАЦИНОВОЙ ГАСТРОПАТИИ
А.А. Торопова, Я.Г. Разуваева, Л.Н. Шантанова, Т.А. Ажунова, А.О. Занданов (Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН, Улан-Удэ директор — д.б.н., профессор Л.Л. Убугунов Бурятский государственный университет, г. Улан-Удэ, ректор — чл.-корр РАО, профессор С.В. Калмыков)
Резюме. Установлено, что «Вентрофит» оказывает выраженное гастропротективное действие при гастропатии, индуцированной индометацином, препятствуя повреждению слизистой оболочки желудка, ингибируя процессы перекисного окисления липидов (ПОЛ) и повышая активность антиоксидантной системы организма.
Ключевые слова: гастропатия, перекисное окисление липидов, антиоксидантная система, растительное средство «Вентрофит».
PHARMACEUTIC EFFICIENCY OF THE VEGETABLE REMEDY «VENTROPHYT» IN EXPERIMENTAL INDOMETHACIN-INDUCED GASTROPATHY
A.A. Toropova, Ya.G. Razuvayeva, L.N. Shantanova, T.A. Azhunova, A.O. Zandanov (Institute of General and Experimental Bioilogy SD RAS, Buryat State University, Ulan-Ude)
Summary. It has been established that «Ventrophyt» has a marked gastroprotective effect in stomach damages induced by indomethacin, preventing the injury of the mucous coat of stomach, inhibiting the processes of lipid peroxidation and increasing the activity of the organisms antioxidant system.
Key words: gastropathy, lipid peroxidation, antioxidant system, vegetable remedy «Ventrophyt».
Нестероидные противовоспалительные препараты широко применяются для снятия болевого синдрома и
(НПВП) — одна из основных групп препаратов, которые воспаления при лечении артритов, артрозов и воспа-
0,7 г
0,6
0,5
0,4
0,3
0,2
0,1
Контрольная Опытная I Опытная II (индометацин + (индометацин+ (индомстацин+ вода) «Вентрофит») плантаглюцид)
I Толщина СОЖ, мм
Глубина эрозии, мм
Рис. 1. Влияние «Вентрофита» на морфометрические показатели слизистой оболочки желудка у белых крыс при остром индометаци-новом повреждении.
лительных системных заболеваний [6]. Одной из важнейших проблем, связанных с использованием НПВП, является их повреждающее действие на желудочнокишечный тракт (ЖКТ). Эрозивно-язвенные поражения желудка и двенадцатиперстной кишки обнаруживаются у 40% больных, длительно принимающих НПВП, и нередко осложняются кровотечением [9,15]. Это связано с тем, что при приеме внутрь НПВП вызывают дистрофические изменения эпителия, нарушают микроциркуляцию в поверхностных отделах слизистой оболочки и клеточное обновление эпителия [2].
В связи с этим актуальной проблемой является поиск средств, способных повышать резистентность ЖКТ к повреждающему действию НПВП. Особого внимания заслуживают средства природного происхождения, отличающиеся, как правило, широтой терапевтического действия, малой токсичностью и отсутствием побочных эффектов при их длительном применении. В соответствии с этим разработано комплексное растительное средство, условно названное «Вентрофит», представляющее собой сухой экстракт из сырья девяти видов лекарственных растений: Crataegus sanguinea Pall. (плоды); Inula helenium L. (корни); Calendula officinalis L. (соцветия); Hippophae rhamnoides L. (плоды); Glycyrrhiza uralensis Fisch. (корни); Rosa sp. (плоды); Plantago majorL. (листья); Gnaphalium uliginosum L. (трава); Coriandrum sativum L. (плоды). Ранее было установлено, что «Вентрофит» оказывает выраженное гастропротектив-ное действие при стресс-индуцированном повреждении желудка [13].
Целью данной работы явилось оценить фармакоте-рапевтическую эффективность растительного средства «Вентрофит» при экспериментальной гастропатии, индуцированной индометацином.
Материалы и методы
Эксперименты проведены на крысах линии "Мзіаг обоего пола массой 180-200 г. Модель острой язвы у животных воспроизводили однократным интрагастраль-ным введением индометацина в дозе 25 мг/кг, после 24 часовой пищевой депривации [8]. Крысам первой опытной группы внутрижелудочно вводили водный раствор «Вентрофита» в дозе 50 мг/кг в объеме 10 мл/кг профилактически в течение 5 дней (1 раз в сутки) до введения ульцерогенного агента, последнее введение осуществляли через 3 часа после его применения. В качестве препарата сравнения использовали плантаглюцид, представляющий собой сухой экстракт из листьев подорожника. Препарат сравнения применяли в дозе 300 мг/кг. Крысы контрольной группы получали эквиобъ-емное количество дистиллированной воды по аналогичной схеме. Через 24 часа после введения индометацина проводили
оценку гастропротективного действия испытуемого средства. Для этого определяли деструкции слизистой оболочки желудка (СОЖ), которые подразделяли на точечные кровоизлияния, эрозии и полосовидные язвы. Рассчитывали среднее количество каждого вида деструкций на 1 животное в группе. Для каждого вида повреждений подсчитывали индекс Паулса (ИП) [1]. Для проведения патоморфологических исследований материал фиксировали в 10 % нейтральном формалине, срезы окрашивали гематоксилин-эозином, азур-эозином, по ван Гизону, толуидиновым синим и основным коричневым [5]. На препаратах, окрашенных гематоксилин-эозином, с помощью компьютерной программы «Motic Images 2000» определяли толщину слизистой оболочки и глубину эрозии. Для оценки влияния «Вентрофита» на состояние антиоксидантной системы организма и интенсивность процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) в крови определяли активность каталазы [3] и супероксиддисмутазы (СОД) [12], содержание восстановленного глутатиона [14] и ТБК-активных продуктов [11].
Значимость различий между указанными параметрами среди экспериментальных групп оценивали с помощью непараметрического критерия Манна-Уитни. Различия считались существенными при р<0,05 [10].
Результаты и обсуждение
Результаты исследований показали, что через 24 часа после инъекции индометацина у всех животных контрольной группы наблюдалась выраженная гиперемия слизистой оболочки, а также наличие разного рода деструкций в виде точечных кровоизлияний, эрозий и полосовидных язв, индекс Паулса для которых составил 10,7; 2,7 и 3,7 соответственно (табл. 1). При патоморфологическом исследовании в СОЖ животных контрольной группы на фоне выраженных дистрофических изменений выявлялось значительное количество поверхностных и глубоких эрозий. Поверхностные эрозии характеризовались некрозом и отторжением поверхностного эпителия, глубокие эрозии проникали в собственную пластинку СОЖ. Дно таких эрозий было некротизировано, пропитано фибрином и инфильтрировано полиморфно-ядерными лейкоцитами. Морфометрический анализ микропрепаратов животных контрольной группы показал, что глубина таких эрозий в среднем была равна 0,54±0,034 мм, что составляло 87 % от толщины СОЖ (0,62±0,023) (рис.1). Окружающий эрозии покровно-ямочный и железистый эпителий был подвержен дистрофическим процессам: вакуолизация цитоплазмы клеток, пикноз ядер, расширение просвета желез. Отмечали нарушения микроциркуляции в виде диапедезных кровоизлияний и стаза эритроцитов в капиллярах а также диффузную инфильтрацию СОЖ полиморфноядерными лейкоцитами, лимфоцитами и плазмоцитами.
Данные, представленные в таблице 1, свидетельствуют, что превентивное курсовое введение «Вентрофита» в дозе 50 мг/кг оказывает выраженное гастропротек-тивное действие. Так, индекс Паулса для точечных кровоизлияний, эрозий и полосовидных язв у крыс, получавших «Вентрофит», был в 2,0; 8,7 в 7,4 раза меньше такового у животных контрольной группы.
Таблица 1
Влияние «Вентрофита» на выраженность повреждений слизистой оболочки желудка у белых крыс при остром индометациновом повреждении
Индекс Паулса Группы животных
Контрольная (индометацин + Н2О) (n=10) Опытная I (индометацин+ «Вентрофит») (n=9) Опытная II (индометацин+ плантаглюцид) (n=8)
Точечные кровоизлияния 10,7 3,8 5,8
Эрозии 2,7 0,31 0,52
Полосовидные язвы 3,7 0,5 107
Таблица 2
Влияние «Вентрофита» на показатели перекисного окисления липидов и состояние антиоксидантной системы белых крыс при остром индометациновом повреждении
Группы животных Показатели
Содержание Активность
ТБК- активные продукты, нмоль/мл Глутатион восстановленный, мкмоль/мл СОД, мкмоль/ мл Каталаза, мкат/л
Интактная (п=8) 4,9+0,22 354,2+25,81 21,1+1,00 12,5+0,71
Контрольная (индометацин + вода) (п=10) 8,7+0,35 248,8+11,03 4,7+0,52 7,0+0,52
Опытная группа I (индометацин + «Вентрофит») (п =9) 5,5+0,20* 340,6+18,55* 11,0+0,82* 10,9+0,15*
Опытная группа II (индометацин + плантаглюцид) (п=8) 6,3+0,19* 295,0+12,11* 9,3+0,56* 9,3+0,27*
Примечание:* — различия значимы по сравнению с показателями у животных контрольной группы при р<0,05; п- количество животных в группе.
На фоне курсового введения «Вентрофита» структурные изменения в СОЖ носили поверхностный характер и затрагивали, в основном, поверхностно-ямочный эпителий и апикальный слой собственной пластинки. Отмечали локальную воспалительную инфильтрацию СОЖ. Результаты морфометрических исследований показали, что на фоне введения «Вентрофита» репара-тивные процессы доминировали над дегенеративными, так средняя глубина эрозий на 78 % меньше такового показателя у животных контрольной группы (рис. 1). Введение плантаглюцида оказывало менее выраженное гастропротективное действие. Так, эрозии проникали в собственную пластинку слизистой желудка на 1/3, и их средний размер составлял 0,20±0,02 (рис. 1).
В настоящее время, многими авторами, экспериментально и клинически доказана ведущая роль активации процессов ПОЛ в развитии язвенных поражений слизистой желудка и двенадцатиперстной кишки [4,7].
Как следует из данных, приведенных в таблице 2, однократное введение токсической дозы индометаци-на сопровождалось индукцией процессов ПОЛ и снижением мощности системы антиоксидантной защиты организма, о чем свидетельствуют повышение содержа-
ния ТБК-активных продуктов в 2 раза, снижение уровня восстановленного глутатиона в 1,4 раза, а также уменьшение активности ключевых ферментов антиокис-лительной системы — каталазы и СОД соответственно на 44 и 78 % по сравнению с таковыми показателями у интактных животных.
Установлено, что курсовое профилактическое введение «Вентрофита» на фоне острого индометацинового повреждения желудка оказывало выраженное антиоксидантное действие, о чем свидетельствовало уменьшение концентрации МДА в сыворотке крови на 36 %, повышение активности СОД и каталазы в 2,0 и 1,5 раза соответственно, а также содержание восстановленного глу-татиона — на 37 % по сравнению с аналогичными показателями у крыс контрольной группы.
Таким образом, профилактическое введение белым крысам «Вентрофита» в экспериментальнотерапевтической дозе на фоне острого индометацино-вого повреждения оказывает выраженное фармакоте-рапевтическое действие: снижает выраженность дистрофических и некротических процессов в покровноямочном и железистом эпителии, а также препятствует развитию воспалительных процессов в стенке желудка. Молекулярно-клеточным механизмом гастропротек-тивного действия «Вентрофита» является ингибирование процессов свободно-радикального окисления, повышение потенциала эндогенной антиоксидантной системы организма. Следует отметить, что фармакоте-рапевтическое действие испытуемого фитоэкстракта сопоставимо, а по ряду параметров превосходит эффекты препарата сравнения — плантаглюцида.
В целом, полученные данные аргументируют целесообразность применения комплексного растительного средства «Вентрофит», обладающего антиоксидантным действием, в комплексной терапии и профилактике гастропатий, вызванных приемом НПВП.
ЛИТЕРАТУРА
1. Амосова Е.Н., Зуева Е.П., Разина Т.Г. и др. Поиск новых противоязвенных средств из растений Сибири и Дальнего Востока// Эксперим. и клин. фармакол. — 1998. — Т.61. — №6. — С. 31-35.
2. Жебрун А.Б., Лазебник Л.Б., Ткаченко С.Б. и др. Диагностика и лечение заболеваний ЖКТ ассоциированных с инфекцией Н.ру1оп. — М., 2006. — 350 с.
3. Королюк М.А., Иванова Л.И., Майорова И.Г., Токарев В.Е. Метод определения активности каталазы // Лаб.дело. — 1988. — №6. — С. 16-19.
4. Лелявина Т.И., Инешина Е.Г., Жигаев Г.Ф. и др. Перекисное окисление липидов и длительно незаживающие гастродуоденальные язвы// Сибирский медицинский журнал (Иркутск). — 2002. — Т.34. — №5. — С. 46-48.
5. Микроскопическая техника: Руководство / Под ред. Д.С. Саркисова, Ю.Л. Перова. — М., 1996. — 544 с.
6. Насонов Е.Л. Нестероидные противовоспалительные препараты. — М., 2000. — 142 с.
7. Пасечников В.Д., Котелевая С.М., Чуков С.З. Сложные вопросы этиологии язвенной болезни// Росс. журн. гастро-энтерол., гепатол. и колопроктол. — 1999. — Т.9. — №5 — С. 39-44.
8. Подвигина Т.Т., Багаева Т.Р., Филаретова Л.П., Пыхолов А.А. Влияние адреналэктомии на заживление эрозий слизистой оболочки желудка, вызванных индометацином, у крыс //
Бюлл. эксперим. биол. и мед. — 2003. — Т. 136. — №11. — С. 490-493.
9. Ребров А.П., Кашкина Е.И., Антонян А.А., Лякишева Р.В. НПВП-индуцированные гастродуоденальные кровотечения: риск развития и тактика ведения больных // Научнопрактическая ревматология. — 2008. — №2. — С. 13-15.
10. Сергиенко В.И., Бондарева И.Б. Математическая статистика в клинических исследованиях. — М., 2006. — 263 с.
11. Темирбулатов Р.А., Селезнев Е.И. Метод повышения интенсивности свободнорадикального окисления липидсодержащих компонентов крови и его диагностическое значение // Лаб. дело. — 1981. — №4. — С. 209-211.
12. Чевари С., Чаба И., Секкей Й. Роль супероксиддисмутазы в окислительных процессах клетки и метод определения ее в биологических материалах // Лаб. дело. — 1985. — №11. — С. 678-681.
13. Шантанова Л.Н., Разуваева Я.Г., Торопова А.А. Гастропротективное действие «Вентрофита» при стресс-индуцированном повреждении желудка // Сибирский медицинский журнал (Иркутск). — 2008. — №8. — С.
14. Anderson R.L., Linas S.L., Berns A.S., et al.Nonoleguric acute renal failure // N.Engl. J. Med. — 1977. — Vol.236. — P. 1134.
15. Waki S., Kinoshita Y, Fukui H., et al. Jntagastric distribution of nonsteroidal anti-inflammatory drun — related ulcers in patents without collagen diseases // J. Clin. Gastroenterol. — 2003. — Vol.25. — №4. — P. 592-607.
Адрес для переписки: Торопова Анюта Алексеевна, к.б.н., м.н.с.
Отдела биологически активных веществ ИОЭБ СО РАН; тел.: 8 (3012) 43-47-43. E-mail: [email protected]
