CC BY
21SCIENTIFIC ELECTRONIC JOURNAL INNOVA № 4 (9) 2017
ФАРМАКОЛОГИЧЕСКАЯ КОРРЕКЦИЯ НАРУШЕНИЙ, ВЫЗВАННЫХ РАЗВИТИЕМ ОКСИДАНТНОГО СТРЕССА В УСЛОВИЯХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ОСТРОГО ДЕСТРУКТИВНОГО ПАНКРЕАТИТА НА ФОНЕ ХРОНИЧЕСКОЙ АЛКОГОЛЬНОЙ ИНТОКСИКАЦИИ
PHARMACOLOGICAL CORRECTION OF VIOLATIONS,CAUSED BY THE DEVELOPMENT OF OXIDANT STRESS IN THE CONDITIONS OF EXPERIMENTAL ACUTE DESTRUCTIVE PANCREATITIS ON THE BACKGROUND CHRONIC ALCOHOL INTOXICATION
| Долгарева С.А., Сиделева Е.Н., | Dolgareva S.A., Sideleva E.N., Bushmina O.N.
Бушмина О.Н.
| Курский государственный медицинский | Kursk State Medical University
университет
E-mail: DolgarevaSA@kursksmu.net
Резюме
В условиях хронического эксперимента на крысах, авторами производилось моделирование острого панкреатита и метаболических расстройств, которые сопровождают данное состояние. Предпринимались попытки коррекции нарушений, вызванных оксидантным стрессом. Выявлено, что препараты с гепатопротекторными, иммуномодулирующими и антиоксидантными свойствами купируют нарушения метаболизма и развития окислительного стресса в эритроцитах животных.
Ключевые слова: эксперимент, панкреатит, фармакологическая коррекция, алкогольная интоксикация, оксидантный стресс, антиоксиданты, гепатопротекторы, иммуномодуляторы
Библиографическая ссылка на статью
Долгарева С.А., Сиделева Е.Н.,
Бушмина О.Н. Фармакологическая коррекция нарушений, вызванных развитием оксидантного стресса в условиях экспериментального острого деструктивного панкреатита на фоне хронической алкогольной интоксикации // Innova. - 2017. -
№4 (9) -С. 28-30.
DOI: 10.21626/innova/2017.4/05
Эритроциты принимают участие в обеспечении стабильности и регуляции кислотно-основного состояния и водно-солевого обмена, определяют реологические свойствa крови,
участвуют в процессах, связанных с поддержанием гомеостаза на уровне организма [1]. Нарушения иммунного гомеостаза и оксидантный стресс лежат в основе патогенеза
SCIENTIFIC ELECTRONIC JOURNAL INNOVA № 4 (9) 2017
сердечно-сосудистой патологии, выделительной и половой систем, заболеваний легких и желудочно-кишечного тракта, печени, поджелудочной железы [5, 7, 9, 10].
Цель работы - изучение развития оксидантного стресса при экспериментальном остром деструктивном панкреатите на фоне алкогольной интоксикации и коррекция при помощи фармакологических препаратов.
Материал и методы исследования.
Исследования проведены на 84 здоровых половозрелых крысах Вистар массой 150-200 г. Все исследования проводили в одно и то же время суток с 8 до 12 ч., содержание и забой лабораторных животных проводили с соблюдением принципов, изложенных в Конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других целей (г. Страсбург, Франция, 1986), и согласно правилам лабораторной практики РФ (приказ МЗ РФ № 267 от 19.06.2003 г.).
Кратковременную алкогольную
интоксикацию (АИ) проводили путем принудительного введения 20% раствор этанола через 24 часа в течение 5 дней в дозе 2,92 г/кг, а так же проводили хроническое введение этанола в той же дозе в течение 30 дней (ХАИ-30).
При кратковременном введении этанола экспериментальный острый деструктивный панкреатит (ЭОДП) вызывали в первые сутки интоксикации перевязкой протока правой и левой долей поджелудочной железы, с последующей 3х-кратной стимуляцией прозерином в дозе 0,2 мг/кг через 60 мин. При ХАИ-30 ЭОДП моделировали на 25 сутки после длительного введения этанола.
Экспериментальных животных делили на 7 групп по 12 особей в каждой: 1-я группа (контрольная) - здоровые крысы; 2-я - АИ; 3-я группа - ЭОДП и АИ; 4-я группа ХАИ-30; 5-я группа ЭОДП и ХАИ-30; 6-я группа ЭОДП и ХАИ-30 и введение гепона (5 мг/кг, внутрь, через 24 часа, №14), гипоксена (750 мг/кг, внутрь в 1%
крахмальной суспензии, № 14) и фосфоглива (800 мг/кг, внутрь в 1% крахмальной суспензии, № 14); 7-я группа ЭОДП и ХАИ-30 и дополнительное введение глутоксима (20 мг/кг, внутримышечно, через 24 часа, № 5), мексидола (50 мг/кг внутрибрюшинно, через 24 часа, № 5) и гептрала (760 мг/кг, внутрибрюшинно, через 24 часа, № 5). Забой крыс осуществляли через 24 часа после последнего введения этанола.
Под наркозом путем внутрисердечной инъекции забирали кровь у крыс. Из гепаринизированной крови получали плазму путем центрифугирования в течение 5 мин при 400д. Подсчет общего количества эритроцитов и содержания гемоглобина проводили по общепринятым методикам.
Интенсивность процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) [2] оценивали по содержанию в плазме крови и эритроцитах ацилгидроперекисей (АГП) и малонового диальдегида (МДА) [8], а так же общую антиокислительную активность (ОАА), активности супероксиддисмутазы (СОД) [6], каталазы [6] и уровень стабильных метаболитов оксида азота (СМoN) [3].
Статистическая обработка результатов исследования проводилась путем вычисления средних арифметических, стандартных ошибок и ошибок средних. Существенность различий средних величин оценивали по критерию Стьюдента [4].
Результаты и обсуждение. У животных с 5-кратным введением этанола выявлено только увеличение содержания АГП. У крыс с ЭОДП на фоне 5-дневной АИ наблюдалось повышение содержания МДА и АГП, снижение уровня СМNo и активности СОД. ХАИ-30 выявило повышение МДА, АГП, активности каталазы, снижение СОД и уровня СМNo. У крыс с ЭОДП при ХАИ-30 наблюдалось в большей степени повышение продуктов ПОЛ и СОД, снижение уровня СМNo (таблица 1).
Таблица 1. Состояние перекисного окисления липидов, факторов антиоксидантной защиты, уровень стабильных метаболитов оксида азота при экспериментальном остром деструктивном панкреатите на
фоне хронической алкогольной интоксикации в течении 30 дней (M+m)
№ группы 1 2 3 4 5
Показа- Еди- Контроль АИ ЭОДП + ХАИ ЭОДП +
тели ницы 5 дней АИ 5 дней 30 дней ХАИ
изме- 30 дней
рения
МДА мкмоль/л 2,6±0,14 2,6±0,14 3,0±0,08*12 3,4±0,18*12 3,9±0,07*1Д4
АГП усл. ед. 0,2±0,05 0,34±0,02*1 0,51±0,04*12 0,5±0,04*12 0,62±0,03*1'3'4
ОАА % 40,3±1,1 38,4±2,1 37,4±1,9 41,1 ±0,65 37,9±0,7*14
СОД усл. д./мл 9,0±0,4 10,2±0,5 7,7±0,5*12 8,2±0,41*12 6,1±0,4*1Д4
Каталаза мкат/л 11,3±0,6 12,6±1,7 10,1 ±1,1 13,5±0,6*1 9,2±0,7*1'2'4
CMno мкмоль/л 6,8±0,3 6,39±0,31 4,3±0,2*12 3,2±0,2*12 3,8±0,5*13
SCIENTIFIC ELECTRONIC JOURNAL INNOVA № 4 (9) 2017
У лабораторных животных 6 группы при ЭОДП в условиях ХАИ-30 применение сочетания гипоксена, гепона и фосфоглива нормализовало показатели ОАА, активность каталазы, корригировало, но не до показателей интактных крыс, концентрацию АГП, СМNo, активность СОД.
Совместное введение мексидола, глутоксима и гептрала у лабораторных животных 7 группы так же при ЭОДП в условиях ХАИ-30 повышало ОАА и активность каталазы, нормализовало уровень АГП, СМNo, активность СОД, корригировало содержание МДА (таблица 2).
Таблица 2. Коррекция уровня стабильных метаболитов оксида азота, состояния перекисного окисления липидов и факторов антиоксидантной защиты при экспериментальном остром деструктивном панкреатите на фоне 30- дневного введения этанола (M+m)
№ гру /ппы 1 5 6 7
Показатели Единицы измерения Контроль ЭОДП + ХАИ 30 дней ЭОДП + ХАИ 30 дней
Гепон+ гипоксен+ фосфоглив Глутоксим+ мексидол+ гептрал
МДА мкмоль/л 2,2±0,3 3,9±0,07*1 3,8±0,2*1 2,6±0,11*1-3
АГП усл. ед. 0,2±0,05 0,6±0,03*1 0,43±0,08*12 0,2±0,007*23
ОАА % 40,3±1,1 37,9±0,7*1 42,8±1,2*2 44,3±1,3*1-3
СОД усл. д.1мл 9,0±0,4 6,1±0,4*1 8,1±0,3*12 9,2±0,3*23
Каталаза мкат/л 11,3±0,6 9,2±0,7*1 11,2±0,6*2 13,8±0,7*1-3
СМ,ю мкмоль/л 6,8±0,3 3,8±0,5*1 4,6±0,24*12 7,1 ±0,6*23
Выводы. Препараты с
гепатопротекторными, иммуномодулирующими и антиоксидантными свойствами оказывают выраженный корригирующий эффект в частичном купировании нарушений метаболизма и развития окислительного стресса в эритроцитах.
Литература
1. Бушмина О.Н., Долгарева С.А., Локтионов
A.Л., Конопля А.И. Метаболические нарушения в условиях экспериментального острого деструктивного панкреатита и воздействия этанола // Системный анализ и управление в биомедицинских системах. 2015. - Т. 14. -№ 3.- С. 396-403.
2. Галактионова Л.П., Молчанов А.В., Ельчанинова С.А., Варшавский Б.Я. Состояние перекисного окисления липидов у больных с язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки // Клинич. лаб. диагностика. - 1998. - № 6. - С. 10-14.
3. Голиков П.П., Николаева Н.Ю., Картавенко
B.И., Мусселиус С.Г., Олейникова О.Н. Генерация оксида азота лейкоцитами периферической крови в норме и при патологии. // Патол. физиология и эксперим. терапия. - 2003. - № 4. - С. 11-13.
4. Гублер Е.В., Генкин А.А. Применение непараметрических критериев статистики в
медико-биологических исследованиях. - Л.: Медицина, 19l3. - 103 с.
5. Конопля А.И., Лазаренко В.А., Локтионов А.Л. Взаимосвязь иммунометаболических и эритроцитарных нарушений с этиологией острого панкреатита. - Курск: Изд-во ГБОУ ВПО КГМУ Минздрава России, 2013. - 162 с.
6. Костюк В.А., Потапов А.Н., Ковалева Ж.В. Простой и чувствительный метод определения супероксиддисмутазы, основанный на реакции окисления кверцетина II Вопр. мед. химии. - 1990. - № 2. - С. 88-91.
7. Луцкий М.А., Есауленко И.Э., Земсков А.М. (2011) Окислительный стресс при цереброваскулярных заболеваниях и инсульте, ОАО Издательство «Медицина», М., 2011. - 23l с.
8. Стальная И.Д., Гаришвили Т.Г. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты II Современные методы в биохимии I Под ред. В.Н. Ореховича. - М.: Медицина, 19ll. - С. 66-68.
9. Lushchak V.I. Comp Biochem Physiol C Toxicol Pharmacol. 2011.- 153(2), 175-190. DOI:10.1016/j.cbpc.2010.10.004
10. Wang Z., Lee J., Zhang Y. Scand. Cardiovasc. J., 2011. - 45, 54-61.
