CC BY
35
Литература
1..Витамины и минералы в современной клинической медицине. Возможности лечебных и профилактических технологий / Под ред. О.А. Громова, А.С. Памазовой.- М., 2003.
2.Пат. 2005105159/15 Россия. Глазные капли «Цитарин» репаративного и антиглаукомного действия / Жилякова Е.Т и др. // Опубл. 20.03.2007.
3.Ярцев Г.И. и др. Таурин (фармакологические и противолучевые свойства).- М., 1975.
4.GilliesM. et al. // Arch. Ophthal.- 1998.- Vol.16, №1.-P. 90.
5.LeskeM. et al. // Ophthalmol. 1999.-Vol. 106, N 1.- P. 35.
УДК: 616.36-005.4:616.34-005.4]-092.9:615.03
ФАРМАКОКОРРЕКЦИЯ ИШЕМИЧЕСКОГО ПОРАЖЕНИЯ ПЕЧЕНИ И КИШЕЧНИКА В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
А.Л. АЛЬЯНОВ, А.Б. ГОРПИНИЧ, А.Н. МАТЮХИН, И.Л. ПРИВАЛОВА, А.П. СИМОНЕНКОВ*
Тканевая гипоксия ведёт к дисфункции жизненно важных органов, моно- и полиорганной недостаточности и к смерти организма. Изучение патогенеза тканевой гипоксии и разработка новых методов её коррекции являются одной из фундаментальных и актуальных проблем биологии и медицины. Понимание патогенеза тканевой гипоксии и разработка новых эффективных методов её профилактики и лечения, позволяют улучшить результаты лечения различных заболеваний [8].
Цель - анализ коррекции серотонина адипинатом (СА) ишемического поражения печени и кишечника в эксперименте.
ИзвестнГ способностт серотонина повышать скорость кровотока, насыщение тканей кислородом, корригировать нарушенную функцию гладкой мускулатуры и тканевую гипоксию [8, 9]. Ишемическое поражение гепатоцитов при резекции печени, в условиях временного её выключения из кровообращения, путём пережатия печёночно-двенадцатиперстной связки (ПДС), является одним из ведущих факторов в механизме возникновения смертельных осложнений [1, 5]. Изучение коррекции ишемического поражения печени при её обескровливании выполнены на 10 беспородных собаках. У 6 особей пережатие ПДС на 30 минут сочеталось с введением СА по методике (патент РФ на изобретение №2134576). Перед и после пережатия ПДС в/в вводили 5 мг 1% раствора СА на 20 мл физраствора №01.
У 4 животных (контроль) пережатие ПДС на 30 минут не дополнялось введением лекарства. Животные выводились из опыта после 1-х суток. Материал для морфологического исследования брали из печени и обрабатывали по методике: гематоксилин и эозин. Это свидетельствует о том, что в контрольной группе животных (пережатие ПДС на 30 мин, без введения СА) при морфологическом исследовании печени определялась зернистая дистрофия, вакуольная дистрофия и коагуляционный некроз гепатоцитов с рексисом и лизисом ядер во всех зонах. В дистро-фичных гепатоцитах цитоплазма была представлена оксифиль-ными хлопьевидными массами, ядра увеличены, с резко просветлённым матриксом и маргинацией хроматина. Архитектоника паренхимы полностью нарушена. В группе животных, где пережатие ПДС на 30 мин сочеталось с введением СА, при морфологическом исследовании видимых нарушений структуры паренхимы и микроструктуры гепатоцитов не отмечено. Этот способ коррекции ишемического поражения печени при обескровливании позволяет продлить безопасные сроки окклюзии ПДС и предупредить массивные кровотечения при операции на печени.
Несмотря на значительные достижения хирургии, и интенсивной терапии, результаты лечения острой кишечной непроходимости (ОКН) нельзя признать удовлетворительными. Среди часто встречающихся острых хирургических заболеваний органов брюшной полости ОКН сопровождается летальностью, достигающей 15-25% [3, 7]. ОКН идет с ишемией, гипоксией и парезом кишечника. При этом вначале развиваются некробиоти-ческие процессы в стенке кишки, а затем тотальный некроз вовлечённого в патологический процесс участка, с последующей её перфорацией и развитием перитонита. Интраоперационное опре-
* 302038 г.Орёл, ул. Металлургов 27, кв. 160, Мединститут Орловского ГУ, Институт хирургии им. А.В.Вишневского РАМН, Курский ГМУ
деление жизнеспособности кишки является сложной задачей для хирурга. Сохраняются визуальные критерии оценки жизнеспособности: восстановление нормального цвета её стенки, пульсация питающих её сосудов, появление перистальтики.
Для коррекции ишемии кишки, после устранения оперативным путём причины непроходимости, используются способы, улучшающие микроциркуляторные и биоэнергетические процессы в кишечной стенке, путём постановки в брыжейку кишки микроирригатора, через который интраоперационно и в послеоперационном периоде вводятся лекарственные смеси [2]. Также проводится комплексная корригирующая терапия, направленная на борьбу с гемодинамическими и, особенно, микроциркулятор-ными расстройствами [6]. Исследование влияния СА на ишемические изменения тонкой кишки при ОКН для возможности определения ее жизнеспособности, коррекции ишемического поражения и предупреждения осложнений в послеоперационном периоде (некроз, перфорация, перитонит) выполнено на 57 половозрелых беспородных кошках, массой 2-3 кг. Для изучения возможности определения жизнеспособности кишечника при ОКН экспериментальному животному (кошке) под хлоралозным наркозом (0,08 г/кг) выполняли лапаротомию. Моделировали ОКН путём перевязки тонкой кишки матерчатыми полосами в двух местах, при расстоянии в 3-4 см между ними [10]. Спустя 1(3) часа срезали матерчатые полосы, сдавливающие участок кишки и выполняли электроэнтерографию, которую проводили с помощью электроэнцефалографа «Биоскрипт-1» (Б8Т-1) с дополнительными фильтрами для регистрации низкочастотных биопотенциалов ЖКТ. Затем в/в медленно вводили 0,1-0,2 мг/кг массы тела (1% раствора) СА, растворённого в 5,0 мл физраствора и в той же дозе вводили в брыжейку поражённой кишки. Повторяли электроэнтерографию (15 кошек).
Морфологические изменения кишечной стенки после ее ишемии в течение 1, 2 и 3 часов, а также влияние СА на ишемические изменения тонкой кишки при экспериментальной ОКН изучено у 42 особей. В это же время было выполнено термометрическое исследование, которое проводилось с помощью медицинского электронного термометра МТ 3001 (МгсгоШе). Измерение температуры выполнялось три раза: до моделирования экспериментальной непроходимости, перед устранением ОКН и через 1 час после её устранения. Длительность ОКН (час) см. в табл. 1.
Таблица 1
Распределение животных в зависимости от длительности ОКН
n Группа животных Длительность ОКН (час)
1 2 3
21 Контрольная (без введения СА) 7 б 8
21 Основная (с введением СА) 7 б 8
После устранения ОКН, экспериментально особи (кошке) в/в вводили 0,1-0,2 мг/кг массы тела 1% раствора СА, а затем, в той же дозе, лекарственный препарат вводили в брыжейку поражённой кишки. Материалом для морфологического исследования являлся участок ишемизированной кишки, который фиксировали в 10% растворе формалина, дегидротировали в спиртах возрастающей концентрации и заливали в парафин. Морфологические изменения исследовали на срезах толщиной 5-6 мкм, окрашенных гематоксилином и эозином. Гистологическую картину оценивали с помощью светового микроскопа «Ломо Микмед-2».
Проведенные нами исследования позволили разработать новый способ определения жизнеспособности тонкой кишки при острой кишечной непроходимости (удостоверение на рационализаторское предложение № 1747-07 от 02.02.07г., выданное Курским ГМУ). Ответная реакция на введение СА в виде увеличения амплитуды электроэнтерографической кривой < 20% будет указывать на необратимость изменений поражённой кишки, что подтверждается морфологическими исследованиями.
Таблица 2
Результаты электроэнтерографического исследования кишки при ОКН
n Длительность ОКН (час) А (mv) после устранения ОКН А (mv) после введения серотонина адипината Изменения амплитуды(%)
7 1 2,2 ± 0,12 4,1 ± 0,16 8б (p<0,001)
8 3 1,0 ± 0,05 1,2 ± 0,04 ,02 o' (p< 20
Таблица 3
Данные термометрии кишки при ОКН
Длит-ть ОКН час) Контрольная группа (без введения серотонина) Основная группа (с введением серотонина)
1-ое 2-ое 3-ое 1-ое 2-ое 3-ое
измерение измерение измерение измерение измерение измерение
1 35,6±0,05 34,5±0,06 34,8±0,05 35,6±0,06 34,5±0,07 35,2±0,07*
2 35,6±0,07 34,1±0,07 34,3±0,08 35,7±0,05 34,1±0,08 34,6±0,08**
3 35,5±0,04 33,2±0,09 33,3±0,1 35,6±0,06 33,3±0,08 33,7±0,09***
Примечание. * - р<0,01, ** - р<0,05, *** - р<0,02 между показателями в контрольной и основной группах в 3-м измерении.
Заключение морфологического исследования (табл. 2) после устранения ОКН через 1 час говорит о том, что в слизистой оболочке имеется паретическое расширение капилляров, их полнокровие, умеренное присутствие в криптах и ворсинах полиморфно-клеточных лейкоцитов. В подслизистой основе -явления отёка. В мышечной оболочке отмечается полнокровие капилляров. Между циркулярным и продольным слоями, в просвете сосудов, кровь с краевым стоянием нейтрофильных лейкоцитов. При морфологическом исследовании через 2 часа после устранения ОКН выявлено, что в слизистой оболочке определяется паретическое расширение капилляров с имбибицией окружающей сосуды ткани эритроцитами, в ворсинах большое количество нейтрофильных лейкоцитов. В подслизистой оболочке -умеренно выраженные явления отёка. В гладкомышечной оболочке выявляются очаговые и диффузные диапедезные кровоизлияния, в расширенных сосудах - краевое стояние нейтрофиль-ных лейкоцитов с выходом их за пределы сосудистой стенки с образованием очаговых лейкоцитарных воспалительных инфильтратов. Определяется зернистая дистрофия гладких миоци-тов. Эти изменения соответствуют стадии острых расстройств внутристеночной кишечной гемоциркуляции [4]. Морфологическое заключение после устранения ОКН через 3 часа говорит - в слизистой оболочке определяется паретическое расширение капилляров, в ворсинах - большое число нейтрофильных лейкоцитов, отмечается апикальный некроз (деструктивные изменения) ворсин. В сосудах подслизистой оболочки - лейкоцитарные стазы, явления очагового отёка, кровоизлияния. В гладкомышечной оболочке - полнокровие сосудов, очаговые кровоизлияния. Вены брыжейки расширены, в просвете их большое количество нейтрофильных сегментоядерных лейкоцитов с периваскулярной инфильтрацией. В жировой ткани брыжейки - отёк, очаговые кровоизлияния. Определяется зернистая и гидропическая дистрофия гладких миоцитов. Ответная реакция на введение СА в виде роста амплитуды электроэнтерографической кривой <20% указывает на необратимость изменений поражённой кишки, что подтверждается морфологически (срок ишемии кишки - 3 часа).
Также разработан способ коррекции ишемического поражения кишки при ОКН (патент РФ на изобретение №2314100), позволяющий обеспечить наибольшую эффективность коррекции ишемического поражения кишечника при ОКН путём сочетания в/в и внутрибрыжеечного введения СА для уменьшения патологических изменений кишки за счёт устранения гладкомышечной недостаточности микроциркуляторного русла, улучшения микроциркуляции и устранения тканевой гипоксии. Дополнительное) введение СА в брыжейку поражённой кишки будет увеличивать уровень СА в патологически изменённых тканях и усиливать эффект системного введения этого лекарственного препарата.
В группе животных, где устранение ОКН сочеталось с введением СА по предложенной нами методике, при морфологическом исследовании стенки тонкой кишки через 1 час ишемии, выявлено, что в капиллярах слизистой и подслизистой оболочек присутствует небольшое количество нейтрофильных лейкоцитов. Подслизистая оболочка без признаков отёка. Слои мышечной и серозной оболочек - без особенностей. Заключение морфологического исследования после устранения ОКН через 2 часа на фоне введения СА, говорит о том, что в слизистой и подслизи-стой оболочках определяется слабовыраженный отёк, в области крипт - полнокровные капилляры без кровоизлияний в окружающие сосуды ткани, в мышечной оболочке, в просвете сосудов, умеренное количество нейтрофильных лейкоцитов в виде краевого стояния, без выхода их за пределы сосудистой стенки. Деструктивных изменений не выявлено. Морфологическое за-
ключение после устранения ОКН через 3 часа, на фоне введения СА: ворсины слизистой оболочки с очаговым паретическим расширением капилляров, между криптами -мелкоочаговые диапедезные кровоизлияния. Подслизистая оболочка с явлениями отёка, в венулах - скопления нейтро-фильных лейкоцитов. В просвете капилляров мышечной оболочки - краевое стояние нейтрофильных лейкоцитов без проникновения в периваскулярное пространство. Вены брыжейки расширены, вдоль интимы - очаговые скопления нейтрофильных лейкоцитов с началом выхода за пределы сосудистой стенки. Деструктивных изменений нет.
При этом (табл. 3) отмечено снижение температуры в зависимости от сроков возникновения ОКН, наиболее выраженное - при ишемии кишечника в течение 3-х часов, что говорит о расстройствах внутристеночной кишечной гемоциркуляции. При введении СА после устранения 1-, 2-, 3-часовой экспериментальной ОКН, выявлен достоверный рост температуры исследуемого участка кишки. Эти изменения являются проявлением устранения гладкомышечной недостаточности, нормализации тонуса сосудов микроциркуляторного русла и улучшения микроциркуляции. Предложенный нами способ коррекции ишемического поражения кишечника при ОКН позволяет обеспечить ю эффективность коррекции ишемического поражения кишечника путём сочетания в/в и внутрибрыжеечного введения СА для уменьшения патологических изменений за счёт устранения гладкомышечной недостаточности микроциркуляторного русла, улучшения микроциркуляции и уменьшения тканевой гипоксии.
Литература
1. Антопольская Е.В. Коррекция ишемии печени при её резекции в условиях обескровливания: Автореф. дис.... канд. мед. наук.- Харьков, 1988.- 21 с.
2. Атаев С.Д., Абдуллаев М.Р. // Вест. хирургии им. И.И. Грекова.- 1993.- Т. 150, № 3-4.- С. 32-34.
3. Ерюхин И.А. и др. Кишечная непроходимость.- СПб.: «ПИТЕР», 1999.- 448 с.
4. Затолокин В.Д. и др. // Акт. вопр. хир. гастроэнтерол.: Тез. докл.- Курск, 1989.- С.79-81.
5. ЗайцевВ.Т. и др. // Клин. хир.-1990.- № 1.- С. 23-25.
6. Кригер А.Г. и др. // Хир.- 2001.- № 7.- С. 25-29.
7. Рыбачков В.В. и др. // Вест. хир. им. И.И. Грекова-2005.- Т. 164, № 1.- С. 25-28.
8. Симоненков А.П. и др. // Вестник РАМН.- 2004.- № 1.-С.46-48.
9. Фёдоров В.Д., Симоненков А.П. // Вест. хир. им. И.И. Грекова.- 1998.- Т. 157, № 3.- С.15-19.
10. Шалимов С.А. и др. Руководство по экспериментальной хирургии.- М.: Медицина, 1989.- 272 с.
УДК 615.83
БИОФИЗИЧЕСКИЕ ПРИНЦИПЫ ЭЛЕКТРОСТИМУЛЯЦИИ А.Н. ВОЛОБУЕВ, А.И. СИРОТА*
Электростимуляция возбудимых тканей широко применяется для лечебных и диагностических целей. При этом, возбудимая биоткань доводится до раздражения внешним источником напряжения, т.е. напряжение электростимуляции должно превышать критический уровень деполяризации (КУД) биоткани. При электростимуляции применяют импульсный и переменный токи низкой (НЧ) или низкочастотной части спектра звуковой (ЗЧ) частоты, причем модулированные по амплитуде. Электрическое раздражение ведется с помощью электродов, наложенных на тело
пациента. В основе действия электрического тока или поля Е на ткани организма при электростимуляции лежит изменение поляризации клеточных мембран при движении ионов в цитоплазме и межклеточном пространстве, изменение заряда на мембранах клеток вплоть до их возбуждения. При этом на мембране клетки возникают области гиперполяризации, где потенциал увеличен, и деполяризации, что приводит клетку в возбуждение, рис. 1.
* 443099, Самара, Чапаевская, 89, Самарский ГМУ, каф. медицинской и
биологической физики, тел.:(846)3360320
