CC BY
23
УДК: 619:615.28:615.9
ФАРМАКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА ПРЕПАРАТА «АКВАСЕПТО»
НА ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ
Тухтаманов А.В. - аспирант; Чередниченко Ю.В. - к.б.н.; Сунагатуллин Ф.А. - д.б.н.;
*Матросова Л.Е. - д.б.н.; **Ларина Ю.В. -к.б.н. Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности,
*Казанский инновационный университет имени В.Г. Тимирясова (ИЭУП), **Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана
Ключевые слова: белые крысы, препарат, фармако-токсикологическая оценка, серебро. Key words: white rats, medicine, pharmaco-toxicological assessment, silver.
Заболевания органов размножения, большую часть из которых занимает эндометрит, является распространенной патологией сельскохозяйственных животных, причиняемый огромный экономический ущерб животноводству [6]. Эндометрит - воспалительный процесс слизистой оболочки матки, вызванный активацией условно-патогенной микрофлоры на фоне снижения иммунитета при нарушении зоогигиенических и ветеринарно-санитарных условий в хозяйстве. Для лечения эндометрита животных используют антибиотики, гормоны и другие химические препараты. Однако их длительное применение способствует появлению атибиотикоустойчивых штаммов бактерий, а остаточные количества этих препаратов способны накапливаться в тканях животных и в животноводческой продукции, тем самым оказывая негативное влияние на здоровье человека [1].
Патогенные микроорганизмы, вызывающие инфекционные болезни и воспалительные процессы у животных, как правило, не способны вырабатывать лекарственную устойчивость к ионному и коллоидному серебру благодаря неспецифичности их действия на молекулярные мишени бактериальных клеток. Это выгодно отличает серебро от веществ, обладающих специфическими механизмами действия на определённые клеточные мишени [7]. В связи с этим, практический интерес вызывает разработка и внедрение препаратов на основе серебра для лечения эндометритов.
На основании проведенных ранее исследований препарата «Аквасепт» для лечения маститов коров [2], д.б.н., профессором Сунагатуллиным Ф.А. разработан новый препарат «Аквасепто», который планируется использовать в качестве терапевтического средства при лечении эндометритов. Данный препарат представляет собой катодную фракцию активированной воды (католита, «живой во-
ды») и коллоидного серебра.
Целью данного исследования явилась фармако-токсикологическая оценка нового препарата «Аквасепто».
Материалы и методы. Определение острой и хронической токсичности проводили по методу Высоцкого А.Э. и др.(2001) [3]. Токсикологическую оценку краткосрочного воздействия препарата «Аквасепто» проводили на 36 белых крысах, живой массой 180-200 г. Животные были разделены на 6 групп по 6 крыс в каждой. Опытным группам препарат задавали внутрижелудочно в дозах 0,5; 1,0; 2,0; 3,0 и 4,0 мл соответственно, 6 группа служила биологическим контролем и получала физиологический раствор в объеме 4 мл. Через 14 суток после введения препарата проводили диагностическое вскрытие животных и исследование гематологических и биохимических показателей крови.
Для оценки длительного воздействия препарата на организм животных были взяты 4 группы белых крыс обоего пола по 6 животных в каждой, масса которых составляла 80 -100 г. Опытным группам препарат задавали внутрижелудочно ежедневно в объеме 1; 2 и 3 мл соответственно в течение 30 суток, 4 группа была контрольной и получала физиологический раствор в объеме 3 мл. По окончанию опыта белых крыс подвергали эвтаназии для проведения диагностического вскрытия и исследования морфо-биохимических показателей крови.
Кумулятивные свойства препарата определяли по методу Lim R.K. et al. (1961) [8], с выявлением коэффициента кумуляции по формуле Кагана Ю.С., Станкевича В.В. (1964, 1970) [4;5]. Исследования проводили на 12 белых крысах обоего пола массой 200-220 г, разделенных на 2 группы (опытная, контрольная). Первоначальную ежедневную дозу, составляющую 1/10 от ЛД50 (в данном случае 1/10 часть от максимальной однократной до-
зы, установленной при определении острой токсичности, равной 4 мл) вводили первые 4 дня по 0,4 мл. Каждые последующие 4 сутки дозу повышали в 1,5 раза и так до конца эксперимента. Контрольная группа крыс получала по аналогичной схеме физиологический раствор. Продолжительность опыта составила 21 сутки. На протяжении всего исследования наблюдали за общим состоянием животных, двигательной активностью, потреблением корма и воды, состоянием шерстного покрова. После окончания опыта проводили диагностическое вскрытие животных.
Гематологические исследования крови проводили при помощи анализатора «EXPRESS PLUS», биохимические показатели крови определяли на анализаторе Microlab-300.
Полученные экспериментальные данные подвергали математической обработке методами вариационной статистики с применением критерия достоверности по Стъюден-ту на персональном компьютере с использованием программного пакета Microsoft Excel XP (2007).
Результаты исследований. При исследовании острой токсичности было установлено, что препарат в дозах 0,5; 1; 2 и 3 мл не оказывал токсического действия на опытные группы белых крыс. После введения «Аква-септо» в дозе 4 мл у животных отмечалась небольшая, быстро проходящая одышка, вялость и малоподвижность, которая продолжалась 50-60 мин. Других изменений со стороны клинического состояния и гибели животных не наблюдалось.
Диагностическое вскрытие белых крыс
(через14 суток) после введения препарата не выявило патологических изменений со стороны внутренних органов. У животных всех опытных групп показатели морфологического и биохимического состава крови находились в пределах физиологической нормы и не имели статистически достоверных отличий относительно группы физиологического контроля.
Исследование кумулятивных свойств препарата «Аквасепто» не выявило его отрицательного действия на организм белых крыс за исследуемый период. Состояние животных, как в опытной, так и в контрольной группе не отличалось от физиологической нормы: движения активные, координированные, пищевая возбудимость активная, шерстный покров блестящий, волос плотно удерживался в волосяных луковицах. При вскрытии белых крыс через 21 день после начала исследования в опытных и контрольных группах видимых патологоанатомических изменений не установлено. Поскольку максимально вводимая доза (4 мл) препарата не привела к гибели белых крыс, то определить ЛД50 не являлось возможным. В связи с этим коэффициент кумуляции в данном случае составил 5,14; что свидетельствует об отсутствии кумулятивного действия препарата «Аквасепто».
Воздействие препарата в течение 30 сут на организм белых крыс не повлияло на общее состояние, не оказывало отрицательного влияния на прирост живой массы. Признаков интоксикации и гибели животных не наблюдали. При диагностическом вскрытии белых крыс видимых патологических изменений во внутренних органах не обнаружили.
Таблица 1 - Морфо-биохимические показатели крови белых крыс при длительном воздействии
препарата «Аквасепто»
Показатель Группа
1 2 3 4
Лейкоциты, х 109/л 13,40±0,67 13,50±0,66 13,90±0,70 13,80±0,69
Лимфоциты, х 10 /л 10,60±0,53 11,10±0,56 11,20±0,56 11,10±0,56
Моноциты, х 109/л 0,40±0,02 0,40±0,02 0,40±0,02 0,40±0,02
Гранулоциты, х 10 /л 2,40±0,12 2,40±0,12 2,40±0,12 2,40±0,12
Эритроциты, х 10 /л 6,85±0,34 6,88±0,34 6,90±0,35 6,86±0,34
Гемоглобин, г/л 135,00±6,75 139,00±6,95 141,00±7,05 137,00±6,85
Глюкоза, ммоль/л 5,50±0,28 5,40±0,27 5,30±0,27 5,30±0,27
Холестерин, ммоль/л 1,70±0,09 1,75±0,09 1,80±0,09 1,72±0,09
Триглицериды, ммоль/л 1,00±0,05 1,04±0,05 1,06±0,05 1,05±0,05
АЛТ, Ед/л 41,60±2,08 39,80±1,99 38,80±1,94 38,80±1,94
АСТ, Ед/л 129,40±6,47 128,80±6,44 128,60±6,43 129,60±6,48
Холинэстераза, ммоль/ ч^л 0,88±0,04 0,86±0,04 0,84±0,04 0,85±0,04
Щелочная фосфатаза, ммоль/л 108,10±5,41 107,10±5,36 106,70±5,34 107,70±5,39
Общий белок, г/л 68,70±3,44 67,30±3,37 66,80±3,34 67,80±3,39
Результаты проведенных гематологических и биохимических исследований в сопоставлении с показателями крови группы биологического контроля представлены в таблице 1.
На основании полученных данных (таблица 1), можно заключить, что у лабораторных животных 1; 2 и 3 опытных групп все морфологические и биохимические показатели крови находились в пределах физиологической нормы и не имели достоверных отличий относительно 4 группы (биологического контроля).
Заключение. В результате проведенных исследований острой и хронической токсичности, а также кумулятивных свойств «Аквасепто» было установлено, что препарат не оказывает отрицательного воздействия на общее состояние, поведение, гематологические и биохимические показатели крови белых крыс. Полученные нами данные дают перспективу для безопасного применения препарата при лечении эндометритов у крупного рогатого скота в условиях животноводческих комплексов.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Артемов, А.В. Биоцидные свойства кластерного серебра и перспективы его использования в ветеринарии / А.В. Артемов // Санитария. - 2011. - №3. - С. 117-119.
2. Бурков П.В., Сунагатуллин Ф.А. Способ лечения коров, больных субклиническим маститом // Пат. 2414226 Российская Федерация; заявитель и патентообладатель ФГОУ ВПО «Уральская государственная академия ветеринарной медицины». - № 2009139587/15; заявл. 26.10.2009; опубл. 20.03.2011 г.
3. Высоцкий, А.Э. Методические указа-
ния по токсикологической оценке химических веществ и фармакологических препаратов, применяемых в ветеринарии / А.Э. Высоцкий, М.П. Кучинский, Б.Я Бирман и др. - Минск, 2001. - 153с.
4. Каган, Ю.С. Коэффициент кумуляции как количественный критерий / Ю.С. Каган,
B.В. Станкевич // Матер. докл. конф. «Актуальные вопросы гигиены труда, промышленной токсикологии и профессиональной патологии в нефтяной и нефтехимической промышленности». - Уфа, 1964. - С. 48-49.
5. Каган, Ю.С. Кумуляция. Критерии и методы ее оценки. Прогнозирование хронических интоксикаций / Ю.С. Каган // Сб. докл. «Принципы и методы установления предельно допустимых концентраций вредных веществ в воздухе производственных помещений». - М.: Медицина, 1970. - С. 49-50.
6. Коба, И.С. Распространение острых и хронических эндометритов у коров в сельскохозяйственных организациях краснодарского края / И.С. Коба, М.Б. Решетка, М.С. Дубови-кова // Вестник Алтайского государственного аграрного университета. - 2016. - №2 (136). -
C. 103-106.
7. Коптев, В.Ю. Влияние препарата Ар-гумистин® на приросты и уровень бактериальной контаминации организма бройлеров /
B.Ю. Коптев // Птицеводство. - 2015. - №5. -
C. 31-38
8. Lim, R.K. Method for the evaluation of cumulation and tolerans by the determination of acute and subchronic median effective doses / R.K. Lim, K G. Rink, H.G. Glass et al. // Arch. Intern. Pharm. Ther. - 1961. - V. 130. - Р. 336352.
ФАРМАКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА ПРЕПАРАТА «АКВАСЕПТО» НА ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ
Тухтаманов А.В., Чередниченко Ю.В., Сунагатуллин Ф.А., Матросова Л.Е., Ларина Ю.В.
Резюме
В статье представлена токсикологическая оценка нового фармакологического препарата «Аквасепто» на основе ионизированного серебра разработанного для терапии эндометритов крупного рогатого скота. Были проведены исследования клинического состояния, морфологических и биохимических показателей крови, а также патоморфологические исследования внутренних органов белых крыс. Анализируя полученные данные, было установлено, что препарат не обладает кумулятивными свойствами и абсолютно безвреден для лабораторных животных при остром и длительном применении. Это дает основание для дальнейшего исследования препарата в производственных опытах на сельскохозяйственных животных.
PHARMACO-TOXICOLOGICAL ASSESSMENT OF THE MEDICINE "AKVASEPTO"
ON LABORATORY ANIMALS
Tukhtamanov A.V., Cherednichenko YU.V., Matrosova L.E., Sunagatullin F.A., Larina YU.V.
Summary
Toxicological assessment of the new pharmacological medicine "Akvasepto" on the basis of the ionized silver of cattle developed for therapy of endometritis is presented in article. Researches of a clinical state, biochemical and morphological indicators of blood, and also patomorfological researches of internals of white rats have been conducted. Analyzing the obtained data, it has been established that medicine has no cumulative properties and is absolutely harmless to laboratory animals at acute and prolonged use. It gives the grounds for a further research of medicine in farm scale trial on live-stock animals.
