CC BY
8^ДВРЛЧ ДИАГНОСТИКА
фактор роста
и дифференцировки gdf-15
в сыворотке крови беременных женщин ПРИ ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЙ И осложненной тяжелым
гестозом беременности
А. С. Гончарова, А. А. Александрова, Л. В. Гутникова, П. В. Золотухин, Т. П. Шкурат;
НИИ биологии ЮФУ, г. Ростов-на-Дону
Тяжелый гестоз — одно из наиболее серьезных осложнений беременности — развивается после 20-й недели гестации и характеризуется гипертензией и протеинурией. Патофизиологические механизмы развития тяжелого гестоза на данный момент до конца не ясны, однако считается, что главным образом плацентарная ишемия, генерализованная дисфункция материнского эндотелия и нарушение проницаемости сосудистой стенки формируют клинические черты данного симптомокомплекса [2].
В значительном количестве работ показано, что для тяжелого гестоза характерен повышенный уровень окислительного стресса, ассоциированный с провоспалительным ци-токиновым профилем материнского организма. Белковая экспрессия фактора роста и дифференциров-ки-15 (growth/differentiation factor 15, GDF-15) [2, 3, 4], основным источником которого во время беременности является плацента [5, 7, 9], контролируется и окислительно-стрессор-ной сигнализацией, и провоспали-тельными цитокинами (экспрессия GDF-15 индуцируется интерлейки-ном 1р, фактором некроза опухоли a и рядом других провоспалитель-ных цитокинов, повышенные уровни которых также отмечаются при тяжелом гестозе) [2, 3]. Так как тяжелый гестоз, по данным большинства исследований, ассоциирован и с окислительным стрессом [1], и с повышенной экспрессией провос-палительных цитокинов, есть основания предполагать, что уровень GDF-15 в сыворотке крови беременных, страдающих тяжелым гестозом, будет значительно повышен,
№3 (45) • 2015
по сравнению со случаями физиологического течения гестации.
Литературные данные, затрагивающие этот вопрос, малочисленны, а существующие экспериментальные свидетельства противоречивы [3, 6].
В связи с вышеизложенным, целью данного исследования являлось изучение сывороточных уровней ООР-15 в сыворотке крови при физиологически протекающей беременности и беременности, осложненной тяжелым гестозом.
материалы и методы
ИССЛЕДОВАНИЯ
В исследовании приняли участие 45 женщин со сроком беременности 38—40 недель.
Обследуемые женщины были разбиты на группы в соответствии с диагнозом: женщины с физиологически протекающей беременностью (контрольная группа, п=37) и женщины с наличием клинических признаков тяжелого гестоза (п=8). Родоразрешение женщин обеих групп проводилось путем кесарева сечения. Образцы крови для исследования были получены на базе кафедры акушерства и гинекологии Ростовского государственного медицинского университета (г. Ростов-на-Дону).
От всех пациенток было получено информированное добровольное согласие на участие в исследовании. Исследования одобрены комитетом по биоэтике Южного федерального университета (протокол №1 от 29.09.2011 г.). Забор крови был проведен в утренние часы натощак с соблюдением установленных требований, до оперативного
вмешательства, с использованием вакуумного метода.
Сыворотку крови получали стандартным методом. До исследования сыворотку крови хранили в морозильной камере при температуре -80°С. Определение уровня GDF-15 в сыворотке крови проводили методом иммуноферментно-го анализа с использованием тест-системы GDF-15/MIC-1 Human ELISA (BioVendor R&D, Чехия) и автоматического иммуноферментного анализатора Alisei (Италия).
Статистическая обработка результатов проводилась в программе Statistica 6.1 с применением непараметрического критерия Манна — Уитни. Ошибка первого рода менее 5% считалась приемлемой. Данные приводятся в формате: медиана [25—75-й процентили].
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
В группе беременных с тяжелым гестозом концентрация GDF-15 в сыворотке крови составила 177850,5 [143064,0—238299,0] пг/мл, а в группе женщин с физиологически протекающей беременностью — 181212,0 [137814,0 —217578,0] пг/мл (рис. 1). Статистически значимых различий между исследуемыми группами обнаружено не было.
Так как дизайн исследования был рассчитан на проверку предположения о значительных изменениях циркулирующих концентраций GDF-15 при тяжелом гестозе, по результатам исследования нами были сделаны выводы о том, что, во-первых, для тяжелого гестоза нехарактерно резкое повышение
www.akvarel2002.ru
ДИАГНОСТИКА
главный
ffiVI
сывороточного уровня GDF-15 и, во-вторых, нарушение GDF-15 потенциально может являться малым этиологическим или патофизиологическим эффектом. Для проверки этого предположения в дальнейшем должны быть проведены исследования, построенные по принципу предварительной оценки биологически значимых отклонений уровня GDF-15 и, соответственно, расчета необходимого размера выборок для достижения достаточной чувствительности тестирования [8]. Наше предварительное исследование предоставляет данные, необходимые для расчета оценочной величины стандартного отклонения для такого дальнейшего исследования, особенно учитывая отсутствие литературных данных об уровнях GDF-15 при тяжелом ге-стозе по российской классификации осложнений беременности.
Полученные нами результаты и сделанные выводы согласуются с данными и выводами A. B. Marjono и соавторов (2003), не обнаруживших значимых отличий ни в плацентарных, ни в сывороточных уровнях GDF-15 при тяжелом гестозе (преэклампсии) относительно случаев физиологических беременностей (на сроках 37—40 недель и при аналогичных размерах выборок) [6].
С другой стороны, M. Sugulle и соавторы (2009 г.) обнаружили, что у беременных с тяжелым гестозом (преэклампсией) на сроке гестации 36—40 недель сывороточные уровни GDF-15 были статистически значимо выше, чем в контрольной группе (средние величины 127061 и 80319 пг/мл соответственно, р<0,001). На основании этих данных Sugulle и соавторы делают вывод о том, что
Рис. 1. Уровень ОйР-15 в сыворотке крови женщин с физиологически протекающей беременностью и беременностью, осложненной тяжелым гестозом. Средняя линия представляет медиану, планки погрешности — 25-й и 75-й процентили. Статистически значимых отличий между группами не выявлено.
повышенный уровень GDF-15 в крови матери вполне может быть связан с чрезмерной продукцией GDF-15 плацентой при тяжелом гестозе (преэклампсии), и GDF-15 может являться маркером плацентарного стресса [3].
выводы
В результате проведенных нами исследований разницы уровней GDF-15 между группами женщин с физиологически протекающей бременностью и беременностью, оложненной тяжелым гестозом, обнаружено не было. Мы не исключаем возможной роли GDF-15 в развитии
ЛИТЕРАТУРА
гестоза, однако полученные в ходе работы предварительные результаты не поддерживают гипотезу о вовлеченности нарушений белковой экспрессии этого фактора роста в качестве мажорного эффектора в патогенез тяжелого гестоза. Тем не менее, учитывая наличие значительных противоречий в результатах исследований различных авторов, необходимо дальнейшее изучение роли GDF-15 в развитии тяжелого гестоза, и для этого при изучении тяжелого гестоза в России могут быть использованы предварительные данные нашего исследования.
1. Гончарова А. С. и др. Исследование окислительного статуса женщин при физиологически протекающей беременности на разных этапах гестации // Валеология. — 2010. — №4. — С. 19—24.
2. Ago Т., Sadoshima J. GDF-15, a cardioprotective TGF-p-superfamily protein // Circulation Research. — 2006. — Vol. 98. — P. 294—297.
3. Sugulle M. et al. Circulating and placental growth-differentiation factor 15 in preeclampsia and in pregnancy complicated by diabetes mellitus // Hypertension. — 2009. — №7. — P. 106—112.
4. Derynck R., Zhang Y. E. Smad-dependent and Smad-independent pathways in TGF-beta family signaling // Nature. — 2003. — Vol. 425. — P. 577—584.
5. Keelan J. A. et al. Macrophage inhibitory cytokine-1 in fetal membranes and amniotic fluid from pregnancies with and without preterm labour and premature rupture of membranes // Molecular Human Reproduction. — 2003. — Vol. 9. — P. 535—540.
6. Marjono A. B. et al. Macrophage inhibitory cytokine-1 in gestational tissues and maternal serum in normal and preeclamptic pregnancy // Molecular Human Reproduction. — 2003. — Vol. 9. — P. 540—545.
7. Segerer S. E. et al. MIC-1 (a multifunctional modulator of dendritic cell phenotype and function) is produced by decidualstromal cells and trophoblasts // Human Reproduction. — 2012. — Vol. 27. — P. 200—209.
8. Zolotukhin P. et al. Oxidative status shifts in uterine cervical incompetence patients // Systems Biology in Reproductive Medicine. — 2013.
9. Moore A. G. et al. The transforming growth factor-b superfamily cytokine macrophage inhibitory cytokine-1 is present in high concentrations in the serum of pregnant women // The Journal of Clinical Endocrinology & Metabolism. — 2000. — Vol. 85. — P. 4781—4788.
