14. Van Oirschot J. T, Braschke Van Rijn P.A Vaccination of cattle against bovine viral diarrhea // Vet Microbiol.
- 1999. - Vol. 64. - P. 169-183.
15. Fetal protection against bovine viral diarrhea virus types 1 and 2 after the use of a modified-live virus vaccine/ W. Xue, D. Mattick, L. Smith [et al] // Can J Vet Res. - 2009. - № 73 (4). - P. 292-297.
-----------♦'-------------
УДК 619:636.5(571.52) С.А. Счисленко, Н.М. Ковальчук
ЭТИОЛОГИЧЕСКАЯ СТРУКТУРА ВОЗБУДИТЕЛЕЙ ОСТРЫХ КИШЕЧНЫХ ИНФЕКЦИЙ (ОКИ) ПТИЦ В ПТИЦЕВОДЧЕСКИХ ХОЗЯЙСТВАХ КРАСНОЯРСКОГО КРАЯ
В статье представлена этиологическая структура возбудителей желудочно-кишечных инфекций птиц на территории Красноярского края. Рассмотрены биологические и антигенные свойства данных возбудителей.
Ключевые слова: острые кишечные инфекции (ОКИ), антигенная структура, факторы патогенности.
S.A. Schislenko, N.M. Kovalchuk
ETIOLOGICAL STRUCTURE OF THE AGENTS OF ACUTE INTESTINAL VIRUS (AIV) OF POULTRY ON THE POULTRY-KEEPING FARMS IN KRASNOYARSK REGION
Etiological structure of the agents of poultry intestinal virus on the Krasnoyarsk region territory is given in the article. Biological features and antigenicity of the given agents are considered.
Key words: acute intestinal virus (AIV), antigenic structure, pathogenicity factors.
Введение. Установление закономерностей эволюции этиологической структуры и устойчивости возбудителей ОКИ к антибиотикам, антисептикам и дезинфектам служит основой для проведения рациональной антибиотико-антисептикотерапии и профилактики желудочно-кишечных болезней птиц, повышения эффективности химиотерапевтических, антисептических и дезинфекционных мероприятий, а также организации эпизоотологического надзора.
По многочисленным данным различных авторов, установлено, что неуклонно возрастает роль условно-патогенных микроорганизмов, в том числе энтеротоксигенных эшерихий, в возникновении неонатальной патологии у животных и птиц. В связи с этим болезни желудочно-кишечного тракта у птиц продолжают оставаться одной из наиболее актуальных проблем современной ветеринарии во всех регионах России. Во многих странах мира колибактериоз находится под пристальным вниманием ветеринарных и медицинских специалистов, а также Всемирной организации здравоохранения, так как важную роль в инфекционной патологии человека и животных стали играть эшерихии, вырабатывающие Шига-подобные токсины (веротоксины), в частности, серовар Е.ооН 0157:Н7, отличающийся высокой вирулентностью [1-3; 6].
В условиях промышленного птицеводства, когда на ограниченной территории содержится большое количество птицы, широкое распространение приобретают инфекционные заболевания, вызываемые энтеропатогенными бактериями. При этом эшерихиоз и сальмонеллёз наносят наиболее значимый экономический ущерб, складывающийся из снижения яйценоскости и привесов, гибели эмбрионов, цыплят и взрослой птицы, затрат на оздоровление хозяйства. При хронических, вялотекущих болезнях бактериальной этиологии отмечают неравномерный или низкий прирост массы бройлеров, повышенную чувствительность птицы к стрессам, снижение яйценоскости и выводимости цыплят, ухудшение биологических качеств эмбрионов, низкую конверсию корма, снижение эффективности поствакцинального противовирусного иммунитета [1].
В настоящее время на территории Красноярского края функционирует 10 птицеводческих хозяйств с общим поголовьем 7920000 птицы, из них 6 птицефабрик яичного направления. ОАО «Сибирская губерния» и ее филиалы птицефабрики «Березовская» и «Красноярская», а также ЗАО «Шушенская» и «Канская», -мясного направления, которые используют для комплектования родительского стада племенную птицу кросса «Isa F-», завозимую из Ленинградской области с птицефабрики ООО «Лебяжье». Птицефабрики ОАО «Заря», ОАО «Бархотовская», ЗАО «Боготольская», сельскохозяйственная артель «Налобинское» используют для разведения птицу кросса «Хайсекс коричневый» и «Хайсекс белый», завозимую из Голландии. ЗАО «Шушенская» разводит кросс «Ломан-Браун», завозимый из Кемеровской области, а ЗАО «Владимировская» использует кросс «Родонит-2», завозимый из ГППЗ «Свердловский».
Кроме этого, ОАО «Сибирская губерния» включает филиал птицефабрики «Енисейская», где выращивают индюшат кросса «BIG-6»; завоз суточных индюшат осуществляется из Польши и Франции. В 2008 году после длительного перерыва было сформировано свое родительское стадо.
По данным ветеринарной отчетности, на птицефабриках Красноярского края ведущее место занимают желудочно-кишечные заболевания, что является одним из серьезных моментов, сдерживающих максимальное проявление потенциальных резервов отрасли и основной причиной массовой гибели цыплят.
В связи с этим перед нами встала задача выявить этиологическую структуру возбудителей желудочно-кишечных инфекций птиц на территории Красноярского края, а также изучить их биологические и антигенные свойства, определить их антибиотикоустойчивость.
Материалы и методы исследований. Исследования проводили на кафедре эпизоотологии и паразитологии ФГОУ ВПО КрасГАУ, института ПБиВМ, а также в КГУ «Красноярская краевая ветеринарная лаборатория»; на базе ОАО птицефабрики «Заря» Емельяновского района, на ЗАО «Канская» Канского района, ЗАО «Владимирская» Назаровского района Красноярского края в 2006-2009 гг.
Проведено патологоанатомическое вскрытие боле 500 трупов цыплят, в биохимических реакциях исследовано 50 проб крови, серологических - 40. Полному бактериологическому исследованию были подвергнуты все биоматериалы, полученные от павших цыплят с применением современных методов выделения и идентификации условно-патогенной микрофлоры, включающих морфологические, культуральные, серологические, биохимические и биологические методы исследования, а также количественный метод анализа [4]. Для обнаружения факторов патогенности выделенные культуры изучали методом биопробы на белых мышах массой тела 15-18 г; гемолитическую активность тестировали на 5% кровяном МПА; антибиотико-устойчивость методом бумажных дисков.
Результаты исследований и их обсуждение. В обследованных птицеводческих хозяйствах желудочно-кишечные болезни охватывали до 50-90% поголовья цыплят в возрасте от 1 до 5 дней. Наиболее злокачественно болезни протекали в ОАО «Заря», ЗАО «Канская», ЗАО «Владимировская». Обычно заболевание проявлялось на протяжении всего года и характеризовалось определенными клиническими признаками: потеря аппетита, понос, учащенное дыхание, общая депрессия.
При патологоанатомическом вскрытии трупов павших цыплят обнаруживали, как правило, точечные кровоизлияния под эпикардом и эндокарде, клапанах сердца, инъекции сосудов головного мозга, красную гепатизацию легких, гиперемию слизистых оболочек тонкого и толстого кишечника, набухшие с кровоизлияниями лимфатические узлы. Иногда при обследовании находили изменения только в кишечнике, а иногда только внекишечные поражения.
При вскрытии отходов инкубации наиболее часто отмечались закупорки клоаки, подкожные отеки в области живота и бедер, гиперемия легких, почек, кожи, печени. У взрослой птицы наиболее часто наблюдались желточные перитониты, энтериты, клоациты.
При бактериологическом исследовании внутренних органов - красного костного мозга, стенки и содержимого тонкого и толстого отдела кишечника - выделены 263 культуры микроорганизмов. По морфологическим и культурально-биохимическим свойствам выделенные культуры отнесены к следующим видам: Klebsiella pneumonia, Escherihia coli, Proteus vulgaris, Proteus merabilis, Pseudomonas aeruginosa, Morganella morgani, Staphylococcus aureus и некоторым другим.
Из них наиболее важное этиологическое значение имели виды, отраженные на диаграмме (рис.): Escherichia coli - 64,8% Salmonella - 27,4, Klebsiella pneumonia - 5,7, Citrobacter froundi - 2,1, Staphylococcus aureus - 1,9%.
5,7% 2,1%
Уровень выделения бактерий
Патогенность выделенных культур микроорганизмов подтверждена на белых мышах массой 12-15 г путем внутрибрюшного заражения их суточной бульонной культурой, LD50 у разных штаммов сильно варьировала от 50 до 750 млн м.т. Результаты постановки биопробы представлены в таблице.
При определении патогенности выделенных культур наиболее патогенными оказались микроорганизмы вида Escherihia coli, Klebsiella pneumonia, Citrobacter froundi, Proteus vulgaris. Подопытные животные погибали в течение 6 ч после заражения в 26,6% случаев. Высокопатогенными оказались смешанные культуры кишечной палочки, синегнойной полочки и протея, которые вызывали гибель белых мышей через 12 ч после заражения. Это указывает на усиление патогенных свойств микробов в ассоциации.
Патогенность выделенных культур на белых мышах
Культура Количество зараженных мышей Гибель мышей через
6 ч 12 ч 24 ч 48 ч
Escherihia coli 5 - - З 2
Salmonella enteritidis 5 5 - - -
Proteus vulgaris 5 - 2 2 1
Klebsiella pneumonia 5 - - З 2
Citrobacter froundi 5 2 З - -
Escherihia coli + Proteus vulgaris + Pseudomonas aeruginosa 5 - 5 - -
Escherihia coli + Staphylococcus aureus 5 З 2 - -
Escherihia coli + Klebsiella pneumonia 5 5 З 1 -
Escherihia coli + Citrobacter froundi 5 5 - -
Всего 45 20 15 9 5
Большинство изучаемых штаммов бактерий, выделенных от цыплят, проявили высокую устойчивость к антибиотикам пенициллину, линкомицину и оказались слабочувствительны к тетрациклину, эритромицину и полимиксину и чувствительны к действию неомицина, мономицина и левомицетина. В связи с этим применение антибиотиков в большинстве случаев не только малоэффективно, но и экологически опасно, так как приводит к образованию антибиотикоустойчивых штаммов микроорганизмов и вызывает отрицательное побочное действие на организм и загрязняет птицеводческую продукцию [7; 13].
При серологической типизации полученных штаммов эшерихий установлено, что наиболее важное значение имеют девять серологических групп: О1, О2, О78, О55, О111, О25, О26, О125 и О128. По частоте встречаемости они располагаются так: о2 - 66,6%, О28 - 14,5, О1 - 11,6, О55 - 2,6, О9, О111, О141 - 1,3%. Основной источник возбудителя инфекции - больная и переболевшая птица, а способы передачи - предметы ухода, корм, вода. Возможен занос возбудителя дикими птицами и грызунами.
При бактериологическом исследовании трупов и отходов инкубации выделяются энтеропатогенные серотипы кишечной палочки 01, 02, 018, 078, 0111, 0115. Кроме этого, в 2009 году среди энтеропатогенных штаммов эшерихий выявлен серотип О157:Н7, который в настоящее время отнесен к энтерогемморагиче-ской группе диареегенных эшерихий.
Заключение. Этиологическая структура возбудителей острых кишечных инфекций у птиц в условиях птицеводческих хозяйств края представлена следующими видами бактерий: Escherichia coli - 64,8%, Salmonella - 27,4, Klebsiella pneumonia - 5,7, Citrobacter froundi - 2,1, Staphylococcus aureus - 1,9%.
Представители выделенной микрофлоры обладали высокой патогенностью, особенно при ассоциированном течении, что, вероятно, объясняется усилением вирулентных свойств при синергизме.
Антибиотикоустойчивость выделенных изолятов бактерий была высокой в отношении пенициллина, линкомицина, мономицина и левомицетина, поэтому применение антибиотиков может быть малоэффективно.
Антигенная вариабельность эшерихий, как наиболее часто встречаемых при ОКИ бактерий, представлена серотипами О1, О2, О78, О55, О111, О25, О26, О125 и О128, а также впервые выявлен энтерогем-морагический серотип О157:Н7, который может быть опасен для всех видов животных и человека.
Литература
1. Береснева Е.В., Малышева Л.А. Этиология смешанных инфекций птиц (сальмонеллёз - колибактери-оз) // Диагностика, профилактика и лечение при инфекционных болезнях сельскохозяйственных животных: сб. науч. тр. - Персиановский: ДонГАУ, 2000. - С. 66-68.
2. Береснева Е.В. Роль ассоциации энтеропатогенных бактерий и гельминтов в инфекционной патологии птиц: автореф. дис. ... канд. вет. наук. - Ставрополь, 2003. - 18 с.
3. Борисенкова А.Н. Система контроля бактериальных болезней птиц - основа эпизоотического благополучия птицехозяйства // Совершенствование методов профилактики птиц: мат-лы науч.-практ. конф.
- Новосибирск, 2001. - С. 46-49.
4. Методические указания по выделению и идентификации условно-патогенных энтеробактерий и саль-манелл при острых кишечных заболеваниях молодняка сельскохозяйственных животных / И.Н. Блохина [и др.]. - М., 1990. - 30 с.
5. Годовые отчеты КГБУ «Красноярская краевая ветбаклаборатория».
6. Джупина С.И. Колитоксикобактериоз - инфекция факторная // Ветеринария Сибири. - 2001. - № 5. -С. 14-17.
7. Донкова Н.В. Влияние энтеросорбции на цитоморфологические показатели внутренних органов цып-лят-бройлеров при лекарственном воздействии // Актуальные аспекты экологической, сравнительновидовой, возрастной и экспериментальной морфологии: мат-лы междунар. науч.-практ. конф. - Улан-Удэ, 2004. - С. 70-72.
8. Золотухин С.Н., Васильев Д.А., Каврук Л.С. Этиологическое значение морганелл в патологии сельскохозяйственных животных // Ветеринария. - 1999. - № 2. - С. 25-27.
9. Ковальчук Н.М. Актуальные аспекты эшерихиоза у сельскохозяйственных животных // Вестн. КрасГАУ.
- 2001. - № 7. - С. 59-62.
10. Ковальчук Н.М. Антигенная вариабильность и вирулентность эпизоотических штаммов эшерихий // Природные и интеллектуальные ресурсы Сибири (СИБРЕСУРС-7 - 2001): докл. 7-й Междунар. науч.-практ. конф. (Барнаул, 17-19 сент. 2001 г.). - Томск: Изд-во Том. ун-та, 2001. - Ч. 2. - С. 269-272.
11. Field M. Studies on enteropathogenic E.coli. - Am. J. Clin., Nurt., 1979. - Р. 189-196.
12. Cruchaga S., Echeita A., Usera M.A. Antimicrobial susceptibility of a selection of Salmonella strains of various origins isolated in Spain // Rev. Esp. Quimioter. - 1999. - Vol. 12. - P. 250.
13. Gomez-Lus R. Evolution of bacterial resistance to antibiotics during the last three decades // Int. Microbiol. -1998. - Vol. 1. - P. 279-284.
---------♦'-----------