CC BY-ND
20
14
ЗНиСО ДЕКАбРЬ №12 (249)
Победитель конкурса молодых ученых и специалистов Роспотребнадзора
ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ СМЕШАННЫХ ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ ОРГАНОВ УРОГЕНИТАЛЬНОГО ТРАКТА У БОЛЬНЫХ С РЕЦИДИВИРУЮЩИМ ГЕНИТАЛЬНЫМ ГЕРПЕСОМ ТЯЖЁЛОГО И СРЕДНЕТЯЖEЛОГО ТЕЧЕНИЯ
К.Д. Ермоленко, А.В. Закревская, Д.К. Ермоленко EPIDEMIOLOGICAL FEATURES OF MIXED VIRUS INFECTIONS OF UROGENITAL TRACT IN PATIENTS WITH SEVERE AND MODERATE RECURRENT GENITAL HERPES
K.D. Ermolenko, A.V. Zakrevskaja, D.K. Ermolenko ФБУН НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера, г. Санкт-Петербург Изучены эпидемиологические и клинические проявления сочетанной папилломавирусной инфекции и генитального герпеса, установлены наиболее распространенные филогенетические группы вирусов папилломы человека высокого и низкого онкогенного риска.
Ключевые слова: вирусы папилломы человека, рак шейки матки, генитальный герпес, эпидемиология. Studied epidemiology and clinical manifestations of HPV co-infection and genital herpes, installed the most common phylogenetic groups of human papilloma viruses of high and low risk. Keywords: human papillomavirus, cervical cancer, genital herpes, epidemiology.
XXI век по праву можно назвать веком вирусных инфекций. Среди патогенных для человека вирусов представители семейства НегреБутёае являются одними из наиболее значимых и распространенных. Клинические проявления, характерные для герпесвирусных инфекций (ГИ), чрезвычайно разнообразны. Среди них несомненную эпидемиологическую и социальную значимость имеет генитальный герпес (ГГ), вызываемый вирусами герпеса 1-го и 2-го типа (ВПГ 1/2). По данным Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), ежегодно регистрируются не менее 23 млн новых случаев ГГ. При этом носителями ВПГ 1 и ВПГ 2 в мире являются соответственно 65—92 % и 25—48 % населения [2]. Среди возбудителей инфекций, передающихся половым путём, необходимо отметить роль вирусов папилломы человека (ВПЧ). Распространенность папилломавирусной инфекции (ПВИ) варьирует от10—13 % в Западной Европе и Скандинавии, до 30—32 % в Африке и Южной Америке. В Российской Федерации ВПЧ поражено 22—31 % населения [3].
В зависимости от типа и филогенетической группы вирусов, с ПВИ может быть связано развитие различной патологии (табл. 1).
Важной особенностью ВПЧ является наличие доказанного онкогенного потенциала. Возбудитель обладает способностью опосредованно стимулировать митотическую активность клетки, блокировать систему ка-спаз и клеточного апоптоза, тем самым активируя пролиферацию инфицированных клеток и повышая вероятность опухолевой трансформации.
Исследования последних 20 лет позволили установить связь между ПВИ и развитием рака шейки матки (РШМ) и предраковых заболеваний этого органа, к которым относятся дисплазии разной степени выраженности. На сегодняшний день ежегодно регистрируется не менее 500 тыс. новых случаев РШМ, вызывающих до 60% злокачественных опухолей половых органов [4]. Основную долю больных, пораженных РШМ, составляют трудоспособные лица репродуктивного возраста, что говорит о высокой социально-экономической и де-
Заболевание Наиболее часто выявляемый тип ВПЧ Филогенетическая группа
Кожные поражения
Подошвенные бородавки 1, 2 а4
Вульгарные бородавки 2, 1 а4
Плоские бородавки 3, 10 а2
Бородавки Бютчера 7, 2 а4, а8
Болезнь Боуэна 2, 3, 4, 16 а2, а4
Бородавчатая эпидермодисплазия 2, 3, 5, 8, 9, 10, 12, 14, 15, 17 а2, а4, |31
Поражения слизистых оболочек
Остроконечные кондиломы 6, 11
Сквамозные опухоли шейки матки, влагалища, вульвы, ануса, полового члена:
Доброкачественные 6, 11, 13, 44, 74 а10
Злокачественные 16, 31, 52, 18 а5, а6, а7, а9
Орофарингеальный рак 16 а9
Респираторный папилломатоз 6, 11 а10
г-Ь
мографической значимости рассматриваемой патологии этой злокачественной опухоли.
Начиная с 2000 г. и по настоящее время в нашей стране отмечается подъем заболеваемости РШМ на 22,4 %. По данным за 2012 г., его частота составляет 10,8 на 100 тыс. женщин. Эпидемиологически наиболее неблагополучными регионами являются Северный Кавказ и г. Москва [1].
По частоте развития РШМ все типы ВПЧ разделены на группы высокого и низкого онкогенно-го риска (табл. 1).
Вероятность малигнизации инфицированных вирусом клеток значительно возрастает при нарушении механизмов иммунного контроля. Одним из факторов, изменяющим действие местного клеточного иммунитета, является ГГ. Так, отмечено, что рецидивирующий герпес тяжелого и сред-нетяжелого течения повышает вероятность развития РШМ в 2—4 раза [5]. Значительно чаще развиваются опухолевые процессы также у пациентов, инфицированных несколькими типами ВПЧ.
Проведенные ранее эпидемиологические исследования, посвященные распространенности сочетанной инфекции шейки матки, вызванной ВПЧ и ВПГ 1/2 у женщин детородного возраста, фрагментарны и в полной мере не отражают динамику изменений с течением времени.
Таблица 1. Патологические состояния, наиболее часто ассоциированные с различными типами и филогенетическими группами ВПЧ
ЦШШ №12 (249) ЗНиСО
i5
Таблица 2. Частота выявления различных филогенетических групп ВПЧ высокого онкогенного риска у пациентов с рецидивирующим генитальным герпесом
Тип и филогенетическая группа BПЧ 2002 год 2012 год
Количество больных % Количество больных %
BПЧ 6-го типа 3 3,5 5 5,8
BПЧ 11-го типа 1 1,2 3 3,5
Bm a 9 9 10,5 12 14,0
Bm a 7 6 7,0 10 11,6
Bm a 5 + a 6 2 2,3 6 7,0
Bm a7+ a9 2 2,3 4 4,7
Bm a5+a6+a7+a 9 0 0,0 4 4,7
Bm+BOT 23 26,7 42 48,8
Bœra 86 86
Таблица 3. Тяжесть клинических проявлений рецидива генитального герпеса в виде моноинфекции и в сочетании с папилломавирусной инфекцией
Клинические проявления BOT 1/2 BOT 1/2 + Bm
Симптомы интоксикации Слабость (дни) 4,3+0,74 4,7+0,81
Познабливание (дни) 2,0+0,16 1,9+0,62
Субъективная симптоматика Боли (дни) 3,3 + 0,16 2,2+0.64
Жжение (дни) 5,34+0,46 6,42+0,81
Зуд (дни) 6,19+0,38 6,34+0,22
Средняя площадь герпетических высыпаний (см) 0,74+0,09 0,66+0,12
Общая продолжительность рецидива (дни) 8,6+0,92 9,7+0,84
Цель данного исследования — изучение распространенности различных типов ВПЧ у женщин, страдающих рецидивирующим ГГ тяжелого и среднетяжелого течения, а также возможного влияния этих возбудителей на клинические проявления рецидива заболевания.
В работе были поставлены следующие задачи:
1) определить частоту выявления ВПЧ среди женщин детородного возраста с рецидивирующим генитальным герпесом;
2) установить распространённость ВПЧ на группы высокого онкогенного риска;
3) рассмотреть особенности клинических проявлений рецидива ГГ у пациентов с сочетанной ПВИ и без неё.
Материалы и методы. Методом случайной выборки были отобраны по 86 женщин в возрасте от 26 до 38 лет без нарушений менструального цикла, обратившихся в 2002 и 2012 гг. за медицинской помощью в связи с рецидивирующим ГГ средне-тяжелого и тяжелого течения (частота рецидиви-рования инфекционного процесса не реже одного раза в четыре месяца). Пациенты на момент осмотра не имели каких-либо явных клинических признаков ПВИ. Средний возраст составил 31,2 года. Диагностика заболевания осуществлялась на основании анамнестических данных, характерных клинических проявлений, кольпоскопического исследования и подтверждалась полимеразной цепной реакцией (2002 г.) и полимеразной цепной реакцией в режиме реального времени (2012 г.).
С помощью данной методики отслеживались основные группы ВПЧ, имеющие тропность к органам урогенитального тракта. Исследование со-скобов из цервикального канала, боковых сводов влагалища, уретры и вульвы проводилось в лаборатории иммунологии института им. Пастера.
Статистическая обработка результатов осуществлялась с помощью пакета программ SAS 9.0.
Результаты и обсуждение. В результате проведенных исследований (табл. 2) было установлено увеличение сочетанной ВПЧ и ВПГ 1/2 инфекции на 22,1 % за период с 2002 по 2012 гг. У пациентов, инфицированных обоими возбудителями, тяжелое течение ГГ наблюдалось достоверно чаще, чем у лиц, переносящих моноинфекцию.
Более того, отмечен рост частоты выявления ВПЧ всех филогенетических групп высокого онкогенного риска, особенно группы а7 и сочетания групп а5 и а6 (на 4,7 %), а также ВПЧ низкого онкогенного риска, 6-го и 11-го типов.
Особое значение имеет то, что почти у 5 % пациентов, обратившихся за помощью в 2012 г., имелось сочетание всех филогенетических групп BПЧ на фоне ГГ. B то же время у больных, обследованных в 2002 г., подобное сочетание выявлено не было.
При анализе клинических симптомов на момент обращения по поводу обострения ГГ не было выявлено достоверных различий у пациентов с сочетанной ПBИ и без нее (табл. 3). Однако было установлено, что у пациентов, инфицированных обоими возбудителями, тяжелое течение ГГ наблюдалось в два раза чаще, чем у лиц, переносящих моноинфекцию.
Полученные результаты согласуются с данными исследований, проводимых в Скандинавии (Nordic Joint) и Западной Европе (во Франции, в Испании и Италии) у жителей крупных мегаполисов. Зарубежные исследователи отмечают преобладание у женщин в возрасте до 50 лет представителей филогенетических групп a7 и a9. Отличительной чертой эпидемиологической ситуации в г. Санкт-Петербурге было значительное количество женщин, инфицированных двумя и более типами BПЧ (наиболее часто сочетание вирусов филогенетических групп a5 и a6, a7 и a9). У 5 % обследованных выявлялись возбудители сразу четырех филогенетических групп, что в европейских наблюдениях отмечалось в казуистических случаях.
Выводы. B настоящее время отмечается значительное увеличение (на 22,1 %) частоты папил-ломавирусной инфекции у женщин детородного возраста, страдающих рецидивирующей формой ГГ, в г. Санкт-Петербурге.
Среди данной группы пациентов отмечается значительная доля лиц (39,5 %), инфицированных BПЧ высокого онкогенного риска.
Наличие сочетанной ПBИ не оказывает влияния на клинические проявления рецидива ГГ, что обусловливает необходимость обязательного скрининга подобного контингента и на BПЧ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Злокачественные заболевания в России /Под ред. B^. Чис-сова, B.B. Старинского, EB. Петровой. 2012. М. ФГБУ им. П.А. Герцена. 260 с.
2. Bernstein D., Stokes-Riner A., Hook E. Epidemiology, clinical presentation and antibody response to primary infection with herpes simplex virus type 1 and type 2 in young women. Clin Infect Dis 2013; 56:344—51
16
ЗНиСО ДЕКАбРЬ №12 (249)
Carr J., Gyorfi T. Human papillomavirus. Epidemiology, transmission, and pathogenesis. Clin Lab Med 2000; 20:235. De Martel C., Ferlay J., Franceschi S. Global burden of cancers attributable to infections in 2008: a review and synthetic analysis. Lancet Oncol 2012; 13:607.
Hariri S., Unger E.R., Powell S.E., Bauer H.M., Bennett N.M., Bloch K.C., Niccolai L.M., Schafer S., Steinau M., Markowitz1 L.E. Human Papillomavirus Genotypes in High-Grade Cervical Lesions in the United States. J Infec Dis 2012; 206:1878.
Контактная информация:
Ермоленко Константин Дмитриевич,
тел.: 8 (812) 232-84-76,
е-mail: ermolenko.kd@yandex.ru.
Contact Information:
Ermolenko Konstantin, phone: 8 (812) 232-84-76, е-mail: ermolenko.kd@yandex.ru.
— V
Победитель конкурса молодых ученых и специалистов Роспотребнадзора
ДОКЛИНИЧЕСКИЕ ИСПЫТАНИЯ НИОСОМАЛЬНОЙ ФОРМЫ ОФЛОКСАЦИНА. ОЦЕНКА МОРФОЛОГИЧЕСКИХ ИЗМЕНЕНИЙ ОРГАНОВ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ БИОМОДЕЛЕЙ
Д.А. Ковалев, М.Е. Михайлова, Д.Г. Пономаренко, А.Н. Куличенко PRECLINICAL TRIAL OF NIOSOMAL FORMULATION OF OFLOXACIN. ANALYSIS OF THE ORGAN S MORPHOLOGY OF EXPERIMENTAL BIOMODELS
D.А. Kovalev, М.Е. Mikhailova, D.G. Ponomarenko, А-N. Kulichenko ФКУЗ Ставропольский противочумный институт Роспотребнадзора, г. Ставрополь Проведено сравнительное изучение влияния офлоксацина в свободной и ниосомальной формах на морфологию органов экспериментальных белых мышей. Установлено, что использование офлоксацина, включенного в ниосомы, приводит к выраженному снижению проявления негативных эффектов при антибиотикотерапии.
Ключевые слова: ниосомы, офлоксацин, микрокапсулирование.
Influence of free and niosomal forms of ofloxacin on the organ's morphology of experimental white mice is studied. Using of niosomal formulation of ofloxacin allows for significantly decrease negative effects of antibiotic therapy. Keywords: niosomes, ofloxacin, microcapsulation.
Наиболее перспективным и востребованным направлением в современной фармакологии является создание лекарственных форм, обеспечивающих адресную доставку активного начала к клеткам-мишеням организма. Исследования влияния микро- и наноматериалов, к которым можно отнести и ниосомы, на метаболические процессы организма человека, изучение механизмов их деградации представляются актуальными задачами современной биологии и медицины.
Фармакокинетика препарата в целом обусловлена физико-химическими свойствами лекарственного средства, а терапевтический эффект преимущественно зависит от уровня концентрации действующих веществ. Существующий постулат, выдвинутый П. Эрлихом в рамках концепции «о магической пуле», определяет необходимость максимального накопления препарата в очагах инфекции при минимально возможном уровне активности в тканях, не вовлеченных в очаг воспаления.
Необходимость разработки систем регулируемой доставки лекарственных средств, в особенности антибактериальных препаратов, обусловлено их явным преимуществом перед антибиотиками в стандартизированных лекарственных формах. Так, использование микрокапсулирования активной субстанции препарата будет обеспечивать постоянство концентрации и фармакокинетики лекарственного средства при низкой курсовой дозе препарата, что предупреждает негативные побочные реакции антибиотикотерапии.
Офлоксацин (левофлоксацин) — противоми-кробный препарат из группы фторхинолонов широкого спектра действия. Известно, что офлокса-цин эффективен в отношении преимущественно грамотрицательных и некоторых грамположитель-ных бактерий, продуцирующих бета-лактамазы и устойчивых к большинству антибиотиков и сульфаниламидам. Особую актуальность имеет применение офлоксацина для лечения сепсиса, туберкулеза и других опасных инфекционных болезней, в том числе связанных с внутриклеточной персистенцией возбудителей [1].
г-Ь
Разработка новой ниосомальной формы офлоксацина может позволить защитить действующее вещество от ферментативной деструкции при введении per os, снизить токсические эффекты при его применении за счет уменьшения дозировки препарата, а также обеспечить пролонгированное действие лекарственной субстанции в составе ниосом, которые могут играть роль резервуара, контролирующего высвобождение препарата в организме [2].
Цель работы — изучить влияние офлоксацина в свободной и ниосомальной формах на микроморфологию органов экспериментальных биомоделей.
В качестве средства иммобилизации офлок-сацина в работе были использованы ниосомы, включавшие сорбитан моностерат Span 60, холестерин, полиэтиленгликоль ПЭГ-4000 и дице-тилфосфат в молярном соотношении 7 : 4 : 0, 2 : 1. Ниосомальную форму офлоксацина получали методом обращено-фазовой отгонки, описанным ранее [2].
Для реализации указанной цели белым мышам пятикратно per os вводили свободный и включенный в ниосомы антибиотик (однократная доза составляла 0,16 мг офлоксацина). На 1, 4, 7, 14, 21 и 30-е сутки после последней дачи препарата производили умерщвление лабораторных животных хлороформированием по 10 особей из каждой группы и взятие органов с целью их гистологического исследования (печень, почки, сердце, селезенка, желудок, тонкий и толстый кишечник). Фиксацию кусочков органов осуществляли в 10 % нейтральном формалине с последующей заливкой в парафин. После приготовления гистологических срезов толщиной 5 мкм выполняли окраску гематоксилином Майера и эозином по общепринятой методике.
На 1 сутки после пятикратного введения препарата у животных, получавших свободный офлок-сацин, установлено избыточное кровенаполнение сосудов дольки печени, застойные явления с частичной сепарацией крови, балочная структура сохранена, гепатоциты в состоянии зернистой
