11Известия Кабардино-Балкарского научного центра РАН № 3 (47) 2012
МЕДИЦИНА
УДК 616.-006.6:616-018
ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ РАСПРОСТРАНЕНИЯ ПАПИЛЛОМАВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ
У ЖЕНЩИН*
З.Ф. ХАРАЕВА, А.А. ШЕВЧЕНКО, О.А. СИЖАЖЕВА, М.М. ТЕКУЕВА, Н.И. САМОЙЛИК
ФГБОУ ВПО Кабардино-Балкарский государственный университет им. Х.М. Бербекова 360004, КБР, г. Нальчик, ул. Чернышевского, 173 E-mail: bsk@kbsu.ru
В статье представлены данные по особенностям распространения папилломавирусной инфекции у женщин репродуктивного возраста. Исследована частота выявления ВПЧ у клинически здоровых женщин, женщин с предраковыми и раковыми заболеваниями шейки матки. Выявлены особенности распространения различных типов ВПЧ в исследуемой популяции женщин
Ключевые слова: папилломавирусная инфекция, канцерогенез шейки матки.
В настоящее время заболеваемость инфекциями, передаваемыми половым путем, остается на высоком уровне, представляя серьезную угрозу для репродуктивного населения. Одной из наиболее распространенных половых инфекций является папилломавирусная (ПВИ). Согласно проведенным исследованиям распространенность ПВИ в популяции составляет от 60% до 87%. При этом, по данным Всемирной организации здравоохранения, за последнее десятилетие число инфицированных увеличилось в 10-15 раз.
Широкая распространенность, сложности диагностики, а также способность ПВИ инициировать не только доброкачественные, но и злокачественные процессы мочеполовых органов, ставит ПВИ в один ряд с наиболее социально опасными заболеваниями урогени-тальной системы [1, 2, 3, 4].
В 2008 году немецкий ученый Харальд цур Хаузен (Harald zur Hausen) получил нобелевскую премию в области медицины за открытие связи вируса папилломы человека (ВПЧ) с развитием рака шейки матки (РШМ) у женщин. Результаты многолетних исследований в крупнейших лабораториях мира подтвердили достоверность его открытия. Рак шейки матки занимает второе место по распространенности среди онкологических заболеваний в мире и первое место среди причин женской смертности от рака в развивающихся странах.
По данным Всемирной организации здравоохранения, в мире ежегодно регистрируется около 500000 новых случаев и более 250000 смертей от данного заболевания [4].
Наибольший интерес среди них вызывают 16-й, 18-й, 31-й, 33-й типы ВПЧ, регулярно обнаруживаемые при раке шейки матки и составляющие группу «высокого риска». Несмотря на высокую потенциальную опасность, вирусы папилломы человека являются условными патогенами. Действительно, папилломавирус достаточно часто (10-30%) выявляется у абсолютно здоровых женщин [5, 6]. Длительный период инфекции, развитие рака у небольшого числа инфицированных, моноклональность опухолей, содержащих интегрированные вирусные последовательности, дают основание предполагать, что вирусная ин-
* Работа выполнена в рамках федеральной целевой программы «Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России на 2007-2013 годы», государственный контракт № 11.519.11.2019.
ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ РАСПРОСТРАНЕНИЯ ПАПИЛЛОМАВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ У ЖЕНЩИН
фекция является необходимым, но не достаточным условием в развитии злокачественного новообразования [6, 7, 8].
Таким образом, носительство ВПЧ свидетельствует не о злокачественном процессе как таковом, а о многократно повышенном риске возникновения последнего. Факторы, модифицирующие патогенность ВПЧ и как следствие провоцирующие опухолевый рост у зараженных женщин, остаются неизвестными [8, 9].
Цель исследования: выявление особенностей эпидемиологического распространения ВПЧ-инфекции у клинически здоровых женщин, женщин с предраковыми и раковыми заболеваниями шейки матки (ШМ).
Материалы и методы
Было исследовано 155 клинически здоровых женщин в возрасте от 19 до 49 лет на наличие ВПЧ-инфекции разных типов. Во второй группе женщин с предраковыми состояниями шейки матки наблюдалось 75 женщин в возрасте от 24 до 45 лет, из них 25 с явлениями эктопии, 19 с лейкоплакией и 31 с явлениями дисплазии 1-й и 2-й степени. Обследовано 14 больных с дисплазией III степени и 10 с Cr. in situ ШМ. При такой форме поражено более 2/3 эпителиального пласта. Морфологически имелись значительные изменения клеток в виде нарушений взаимоотношений клеточного расположения, гигантские ги-перхромные ядер, появление патологических митозов. В исследование не включались больные, подвергнутые ранее любому виду противовирусной терапии, и пациентки, имеющие серьезные сопутствующие заболевания.
Расширенная кольпоскопия проводилась с помощью кольпоскопа «Leisegang» (Германия) при увеличении в 15 раз с целью выявления и конкретизации изменений эпителиального покрова шейки матки, для документирования кольпоскопических картин использовалась видеоприставка. При оценке кольпоскопических картин мы использовали международную терминологию кольпоскопических терминов, принятую в 1990 г. на Всемирном конгрессе по патологии шейки матки и кольпоскопии в Риме и обновленную Международной ассоциацией по патологии шейки матки и кольпоскопии в Барселоне в 2003 г. Цитологическое исследование мазков с экзо- и эндоцервикса проводилось по Папаниколау (Pap-smear-test).
Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) для определения ДНК вирусов группы ВПЧ 16, 18, 31, 33, 35, 45 проводился по следующей методике: соскоб эпителиальных клеток из цервикального канала и эктоцервикса отправлялся в лабораторию, где с помощью праймеров, позволяющих амплифицировать фрагмент ДНК всех серотипов вируса, отбирались образцы, в которых был выявлен HPV.
Реакцию амплификации проводили в объеме 25 мкл. В реакционную смесь последовательно вносили деионизованную воду до объема 2,5 мкл 10-кратного буфера для ПЦР (660 мМ трис-HCL, рН - 8,8; 166 мМ сульфата аммония, 0,1% твин - 20, 0,001% желатин, 30 мМ хлористого магния) по 250 мкМ каждого дНТФ, по 1 пМ праймеров и 0,8 акт. единиц Taq - полимеразы, 5 мкл раствора ДНК, 30 мкл минерального масла. Для положительного контроля вносили 1-5 пг ДНК HPV. Реакция проводилась в течение 35 циклов на ампли-фикаторе Biorad при 9400С - 30 с, 6000С - 20 с, 7200С - 30 с.
Продукты реакции анализировали методом электрофореза в 1,5% агарозном геле.
Статистическую обработку проводили стандартными методами.
Результаты и обсуждение
ВПЧ выявлен у 43 пациенток из 155 обследованных клинически здоровых женщин (27,7%). Обращает на себя внимание более высокая частота обнаружения ВПЧ высокого онкогенного риска (16, 18) - 23 женщины (14,8%) (табл. 1).
З.Ф. ХАРАЕВА, А.А. ШЕВЧЕНКО, О.А. СИЖАЖЕВА, М.М. ТЕКУЕВА, Н.И. САМОЙЛИК
Таблица 1.
Частота выявления ВПЧ-инфекции у клинически здоровых женщин
ДНК впч Выявлено абс. (%)
ВПЧ 16\18 23 (14,8)
ВПЧ 31\33 7 (4,5)
ВПЧ 35\45 3 (1,9)
Всего 43 (27,7)
Во второй группе женщин с предраковыми состояниями шейки матки наблюдалось 75 женщин в возрасте от 24 до 45 лет, из них 25 с явлениями эктопии, 19 с лекоплакией и 31 с явлениями дисплазии 1-й и 2-й степени (табл. 2).
Таблица 2.
Частота выявления ВПЧ-инфекции у женщин
с предраковыми заболеваниями шейки матки
ДНК впч Выявлено абс. (%)
впч 16\18 27 (36,0)
ВПЧ 31\33 12 (16,0)
ВПЧ 35\45 12 (16,0)
Всего 51 (68,0)
У 51 пациентки были выявлены различные типы ВПЧ (68% от общего количества женщин в этой группе). В 36,0% случаев (27 женщин) выявлены 16\18 типы ВПЧ. Цитологические изменения при кольпоскопии у женщин с ВПЧ высокого онкогенного риска (койлоцитарная атипия, наличие в мазках двухъядерных и многоядерных клеток, амфофи-лия цитоплазмы и пр.) были обнаружены у всех пациенток с папилломавирусной инфекцией (27 женщин).
Третья группа больных с раком шейки матки состояла из 24 женщин в возрасте от 37 до 51 года. Обследовано 14 больных с дисплазией III степени и 10 с Cr. in situ ШМ. Морфологически имелись значительные изменения клеток в виде нарушений взаимоотношений клеточного расположения, гигантские гиперхромные ядер, признаки появления патологических митозов.
Инфицированность ВПЧ выявлена в 96,8% случаев (у 23 женщин из 24). Преобладают высокоонкогенные типы - 16\18 (табл. 3).
Таблица 3.
Частота выявления ВПЧ-инфекции у женщин
с раковыми заболеваниями шейки матки
ДНК впч Выявлено абс. (%)
впч 16\18 22 (91,7)
ВПЧ 31\33 1 (4,1)
ВПЧ 35\45 -
Всего 23 (95,8)
Обнаружено, что процент женщин с ВПЧ-инфекцией в каждой группе значителен, повышение числа женщин, у которых выявляется вирус папилломы с предраковыми и раковыми заболеваниями шейки матки, подтверждает роль данных вирусов в этиологии тран-формации эпителия шейки матки.
По результатам проведенных нами эпидемиологических исследований наиболее распространенными типами ВПЧ являются 16-й и 18-й типы вируса папилломы.
ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ РАСПРОСТРАНЕНИЯ ПАПИЛЛОМАВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ У ЖЕНЩИН
ЛИТЕРАТУРА
1. Гайдуков С.Н., Атласов В.О., Измайлов Р.М. и др. Патология шейки матки и эндометрия. Учебное пособие. СПб.: Издание ГПМА, 2004. 44 с.
2. Дмитриев Г.А., Биткина О.А. Папилломавирусная инфекция. М.: Медицинская книга, 2006. 76 с.
3. Заболевания шейки матки, влагалища и вульвы (Клин. лекции) / Под ред. проф. В.Н. Прилепской. М.: МЕДпресс, 2000. 432 с.
4. Киселев В.И. Вирусы папилломы человека в развитии рака шейки матки. М.: Компания «Димитрейд График Групп», 2004. 180 с.
5. Лялина Л.В., Носков Ф.С., Жебрун А.Б. и др. Организация и проведение скрининга на наличие онкогенных вирусов папилломы человека в целях профилактики злокачественных новообразований органов репродуктивной системы. Методические рекомендации. СПб, 2005. 27 с.
6. Сафронникова Н.Р. Мерабишвили В.М. Профилактика вирусзависимых онкологических заболеваний. Диагностика и лечение папилломавирусной инфекции / Пособие для врачей. СПб., 2007. 34 с.
7. Bosch F.X., Lorinez A., Munos N., Meiyer C.J.L.M., Shacn K.V. The casual relationbe-tween papillomavirus and cervical cancer// Journal of clinical patology, 2002. Vol. 55. № 4. P. 244-265.
8. Duensibg S., Munger K. Mechanism of genomic instabily in human cancer: insight from studis with human papillomavirus oncoproteins // Int. J. Cancer, 2004. Vol. 109. № 2. P. 157-162.
THE EPIDEMIOLOGICAL FEATURES OF SPREADING OF PAPILLOMAVIRUS INFECTIONS OF WOMEN
Z.F. KHARAEVA, A.A. SHEVCHENKO, O.A. SIZHAZHEVA, M.M. TEKUEVA, N.I. SAMOYLIK
Kabardin-Balkar State University named after H.M. Berbekov 360004, Nalchik, 173, Chernyshevsky street E-mail: bsk@kbsu.ru
In this article the data on features of spreading the papillomavirus infection is presented. The frequency of revealing virus at clinically healthy women, women with precancer conditions and cancer diseases of a neck of a uterus is investigated. Features ofspreading of various types of viral infection in investigated population of women is revealed.
Key words: papillomavirus infection, cancer of uterus neck.
Работа поступила 28. 12. 2011 г.
