CC BY
8
алистов-ученых и практиков подготовлен и передан для рассмотрения в Минздравсоцразвития России проект приказа, регламентирующего деятельность специалистов-эпидемиологов ЛПУ. Принципиально новые моменты в данном документе, касающиеся развития службы, таковы:
• определена иерархическая структура службы эпидемиологов ЛПУ;
• врачу-эпидемиологу официально придан статус заместителя по профилактической работе руководителя ЛПУ;
• определена количественная характеристика потребностей в данных специалистах с учетом специфики и коечной емкости (количества посещений) ЛПУ;
• обоснована необходимость создания и определены функции эпидемиологических отделов в крупных ЛПУ;
• детально и четко сформулированы задачи и обязанности всех специалистов профилактического звена, работающих в ЛПУ;
• декларировано максимальное освобождение эпидемиологов ЛПУ от выполнения функций сугубо гигиенического, токсикологического, радиологического и экологического контроля.
Таким образом, служба госпитальных эпидемиологов сегодня - важнейшее звено в практическом решении проблемы профилактики ВБИ в ЛПУ и обеспечении эпидемиологической безопасности оказания медицинской помощи пациентам. Функционирование системы профилактики ВБИ и деятельность врачей-эпидемиологов ЛПУ в России требуют государственного регулирования и активной поддержки научно-общественных организаций. ш
Литература
1. Акимкин В.Г. Организационные основы и функциональные направления деятельности врача-эпидемиолога стационара: Лекция. - М.: Федеральный центр Госсанэпиднадзора Минздрава России, 2000. - 32 с.
2. Концепция профилактики внутрибольничных инфекций. - М.: Минздрав России, 1999. - 21 с.
3. Покровский В.И., Семина Н.А. Внутрибольнич-ные инфекции: проблемы и пути решения //
Эпидемиол. и инфекц. болезни. 2000. № 5. C. 12 - 14.
4. Профилактика внутрибольничных инфекций: Руководство для врачей / Под ред. Е.П. Ковалевой, Н.А. Семиной. - М.: Рарогь, 1993. -228 с.
5. Справочник госпитального эпидемиолога. - М.: Хризостом, 1999. - 336 с.
6. Частная эпидемиология: Руководство для врачей в 2-х томах. - М.: Интерсэн, 2002. - 648 с.
Эпидемиологическая ситуация по папилломавирусной инфекции в США*
Генитальный папилломавирус человека (ПВЧ) - одна из наиболее распространенных в США инфекций, передающихся половым путем (ИППП). По современным оценкам, ежегодно в стране первично инфицируется 6,2 миллиона человек [1]. Несмотря на бессимптомное течение и спонтанное выздоровление, персистирующий ПВЧ приводит к распространению генитальных папиллом у мужчин и женщин, может вызвать рак шейки матки, другие аногенитальные онкологические заболевания.
Известно около 100 типов ПВЧ, из которых более 40 вызывают различные заболевания половых органов [2]. Генитальные ПВЧ классифицированы согласно эпидемиологическим данным о риске развития рака шейки матки. ПВЧ с низкой канцерогенностью (типы 6 и 11) вызывают незначительные или доброкачественные изменения клеток, появление генитальных папиллом, а также рецидивирующий папилломатоз респираторного тракта. ПВЧ с высокой канцерогенностью (типы 16,
18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68, 69, 73 и 82) приводят как к незначительным, так и к выраженным предраковым изменениям эпителиальных клеток аногенитальной области [3 - 5]. В 99% случаев диагностированного рака шейки матки выявляются ПВЧ, при этом почти в 70% случаев - типов ПВЧ 16 и 18 [6, 7].
Инфицированность ПВЧ признана необходимым условием для развития рака шейки матки, однако только этого фактора недостаточно, так как у большинства женщин-носительниц типов ПВЧ с высокой канцерогенностью рак не развивается [3, 4].
ПВЧ вызывает и другие онкологические заболевания аногенитальной локализации (рак вульвы, влагалища, пениса и ануса) [8, 9, 10 - 14], но реже. Связь генитальных ПВЧ с онкологическими заболеваниями негенитальной локализации изучена несколько хуже, однако этиологическая роль ПВЧ в развитии рака полости рта и гортани подтверждена рядом исследований [15].
Выдержки из рекомендаций Консультативного совета по вакцинальной практике США (Advisory Committee on Immunization Practices (ACIP) USA), опубликованных в MMWR, № 56 - март, 2007 года.
Действующая в США программа по профилактике рака шейки матки, предусматривающая цитологические обследования для выявления предраковых изменений, привела к снижению заболеваемости и летальности от этой патологии.
ПВЧ относится к семейству PapШomaviridae и является безоболочечным вирусом с удвоенной цепочкой ДНК. Различные штаммы вируса были названы типами, а номера типов отражают порядок их открытия [16]. Типовая принадлежность ПВЧ определяется по последовательности нуклеотидов в определенных участках генома. Все ПВЧ содержат кольцевую ДНК размером 8 кб, заключенную в капсид, состоящий из большого и малого белков
и L2 соответственно). Очищенный белок L1 принимает форму пустого вирусного капсида, формируя вирусоподобную частицу. Помимо генов, кодирующих капсидные белки и L2), геном вируса содержит гены Е1, Е2, Е4, Е5, Е6 и Е7, отвечающие за транскрипцию, репликацию и интеграцию вируса в геном клетки хозяина. Способность типов ПВЧ с высокой канцерогенностью неограниченно размножаться и трансформироваться определяется наличием генов Е6 и Е7 в их геноме. Белки Е6 и Е7 являются основными онкобелками, так как обладают способностью вмешиваться в клеточный цикл, вызывать хромосомные аномалии и блокировать апоптоз [17].
ПВЧ инфицирует клетки базальной мембраны эпителия, а амплификация вируса происходит в дифференцированных эпителиальных клетках посредством клеточного механизма репликации. После инфицирования ПВЧ в норме не делящиеся дифференцированные эпителиальные клетки вступают в активную фазу клеточного цикла. В результате происходит утолщение измененного эпителия, иногда - экзофитное его разрастание. Вирус распространяется одновременно с «отшнуро-выванием» пораженных эпителиальных клеток. По мере прогрессирования неопластических изменений вирус интегрируется в хромосомы клетки-хозяина и начинается продукция вирионов. При этом ПВЧ хорошо защищен от клеток иммунной системы человека, так как располагается внутриклеточ-но [18]. Гуморальный и клеточный типы иммунного ответа были зарегистрированы, однако их соотношение не определено. Наиболее изученными типоспецифическими антителами являются антитела против эпитопов белка L1 капсида ПВЧ, формирующего вирусоподобные частицы. Гуморальный ответ развивается не у всех носителей ПВЧ. По данным исследований, лишь у 54 - 69% женщин, инфицированных ПВЧ типов 16, 6 или 18, выявлялись специфические антитела [19]. Среди первично инфицированных женщин сроки сероконверсии в среднем составили 8 месяцев [20, 21].
Генитальный ПВЧ передается преимущественно половым путем [2, 22]. По результатам многих исследований заболеваемости и распространенности ПВЧ основным фактором риска инфицирования был признан уровень сексуальной активности,
оцениваемый по количеству половых партнеров в течение жизни и в период, предшествующий инфицированию [23 - 30]. По данным одного из таких исследований, ПВЧ выявлялся в 14,3% случаев у женщин 18 - 25 лет, имевших в течение жизни одного полового партнера, в 22,3% - у женщин, имевших двух партнеров, и в 31,5% случаев - у женщин, имевших трех и более партнеров [29]. Случаи передачи ПВЧ при неполном генитальном контакте также известны (орально-генитальный, мануально-генитальный, генитально-генитальный контакт), однако инфицирование таким способом распространено в меньшей степени [22, 31, 32]. Дополнительными факторами риска для женщины являются рискованное половое поведение партнера, а также собственный иммунный статус [22, 33, 34]. Передача генитального ПВЧ неполовым путем, в частности вертикальным способом от матери к новорожденному, также возможна, но не вносит существенного вклада в общую заболеваемость [35, 36].
В рамках изучения эпидемиологии ПВЧ особый интерес представляют данные о половом поведении населения. Проведенное в 2002 году в США национальное исследование (National Survey of Family Growth) показало, что 24% американок ведут активную половую жизнь с 15-летнего возраста [37]. К 16 годам число сексуально активных девушек возрастает до 40%, а к 18 годам - до 70%. Среднее число сексуальных партнеров у девушек и женщин 15 - 19 лет и 20 - 24 лет составило 1,4 и 2,8 соответственно [38]. По результатам изучения поведенческого риска у молодежи (Youth Behavioral Risk Survey, 2005 г.) 3,7% школьниц в США становятся сексуально активными к 13 годам, причем среди них 5,7% - к 9-му классу и 20,2% - к 12-му классу имели четырех и более половых партнеров [39].
В большинстве случаев инфекция, вызванная ПВЧ, транзиторная и протекает бессимптомно. 70% случаев первичного инфицирования ПВЧ заканчивается выздоровлением в течение 1 года, около 90% - в течение 2-х лет [23, 40 - 42]. В среднем длительность заболевания составляет 8 месяцев [23, 41]. Персистирующая инфекция, вызванная типами с высокой канцерогенностью, является главным фактором риска развития предраковых изменений и собственно рака шейки матки [41, 43 - 46]. Риск хронизации и прогрессирова-ния папилломавирусной инфекции зависит от типа ПВЧ, при этом наиболее канцерогенный тип -ПВЧ-16 [47, 48]. К другим факторам риска развития рака шейки матки по эпидемиологическим данным относятся, в частности, курение, количество родов, пожилой возраст, иные ИППП, иммуносупрессия, длительное применение оральных контрацептивов [49 - 51]. Период развития рака шейки матки после инфицирования ПВЧ может составлять десятилетия. Многие аспекты проблемы ПВЧ до конца не изучены, в том числе роль и длительность приобретенного иммунитета.
В США не существует отдельной статистической службы по учету распространенности ПВЧ. Основные эпидемиологические данные получают из лечебных учреждений, таких как центры планирования семьи, венерологические центры и университетские поликлиники. Согласно этим данным, распространенность ПВЧ среди населения составляет от 14 до 90%, наиболее высокая - среди сексуально активных женщин до 25 лет, по мере увеличения возраста распространенность снижается [27, 28, 52 - 54]. По данным многоцентрового клинического исследования контингента сексуально активных американок, наибольшая инфицированность ПВЧ отмечается в возрастной группе 14 - 19 лет [55].
Среди сексуально активных женщин было проведено два репрезентативных популяционных исследования. В одном из них изучалась возрастная группа 18 - 25 лет, где распространенность ПВЧ составила 26,9% (тип 6 или 11 - 2,2%, тип 16 или 18 - 7,8%); в другом - возрастная группа от 14 до 59 лет (ПВЧ - 26,8%) [29, 56]. Наиболее высокая инфицированность ПВЧ была выявлена среди женщин 20 - 24 лет (44,8%). Распространенность типов 6, 11, 16 и 18 составила 1,3%, 0,1%, 1,5% и 0,8% соответственно.
Проблема кумулятивного риска папилломави-русной инфекции изучена не полностью. Обнаружение ДНК ПВЧ подтверждает наличие инфекции, однако такой способ диагностики не позволяет выявлять женщин, перенесших папилломавирус-ную инфекцию и самопроизвольно излечившихся от нее ранее. Расчет доли серопозитивных лиц на основании выявления специфических антител позволяет более точно оценить кумулятивный риск, однако даже в этом случае результаты будут неполными, так как у части инфицированных людей ПВЧ не вызывает продуцирования достаточного для выявления уровня антител. В репрезентативной выборке американок в возрасте 20 - 29 лет доля серопозитивных по ПВЧ-16 лиц составила 25% [57].
Изучение заболеваемости папилломавирусной инфекцией на основе выявления ДНК ПВЧ показало, что первичное инфицирование происходит вскоре после дефлорации. В проспективном исследовании, проведенном среди студенток колледжей в США, кумулятивный риск заболевания папил-ломавирусной инфекцией составил по истечении 24 месяцев после дефлорации 38,9%. При этом доля ПВЧ типа 16 среди остальных типов вируса оказалась наибольшей - 10,4%, тогда как ПВЧ типа 18 - 5,6% [22].
ПВЧ распространен также среди мужчин (по данным современных исследований - более 20%), причем показатели во многом зависят от локализации биоматериала и способа забора образца [58 - 62].
Как указывалось выше, клинически персис-тирующая папилломавирусная инфекция может приводить к развитию предраковых изменений
и онкологических заболеваний аногенитальной области, распространению аногенитальных папиллом, а также к рецидивирующему папилломатозу дыхательных путей.
Предраковые изменения и рак шейки матки
Наличие ПВЧ является необходимым, но недостаточным условием развития рака шейки матки. Типы ПВЧ 16 и 18 служат причиной плоскоклеточного рака в 68% случаев, а аденокарциномы -в 83% [7].
Данные о первичной заболеваемости раком шейки матки регулярно поступают и учитываются в специализированных регистрах, охватывающих примерно 96% населения страны (по данным на 2003 г.). Во многом благодаря внедрению в медицинскую практику Пап-теста с 1950 года заболеваемость раком шейки матки сократилась на 75%, а уровень летальности - на 70% [63, 64]. Снижение заболеваемости произошло в основном за счет плоскоклеточной карциномы, в то время как заболеваемость аденокарциномой практически не изменилась [65]. Диагностика аденокарцином затруднена в связи с их частой локализацией в эндоцервиксе. Частота случаев развития адено-карциномы составляет около 20% в общей заболеваемости раком шейки матки в США [66, 67]. В 2003 году она составила 8,1 на 100 тыс. женщин (средний возраст - 47 лет) [68].
Предраковые изменения, рак вульвы и влагалища
В 2003 году в Штатах было зарегистрировано 1070 случаев инвазивного рака влагалища (0,7 на 100 тыс. женщин возрастной группы патологии) и 391 летальный исход (0,2 на 100 тыс. заболевших) [68]. Средний возраст установления диагноза составил 69 лет.
ПВЧ выявляется примерно у половины больных плоскоклеточным раком вульвы, который является наиболее распространенным морфологическим вариантом такого рака. В 2003 году было зарегистрировано 3507 случаев инвазивного рака вульвы (возрастной показатель заболеваемости - 2,2 на 100 тыс. женщин) и 775 летальных исходов (0,4 на 100 тыс. заболевших) [68]. С 1973 по 2000 год заболеваемость раком вульвы in situ возросла на 400%, а инвазивным раком вульвы -на 20% [69].
Анальный рак
ПВЧ вызывает анальный плоскоклеточный рак в 90% случаев. Анальная интраэпителиаль-ная неоплазия является предраковым состоянием, однако динамика этих изменений (прогрес-сирование, регресс) изучена хуже, чем таковая при раке шейки матки [46]. Рак анального канала чаще встречается у женщин (2516 новых случаев в 2003 г. - 1,6 на 100 тыс. женщин), чем у мужчин (1617 новых случаев - 1,3 на 100 тыс. мужчин) [68]. За последние 30 лет заболеваемость раком анального канала в США возросла, особенно среди
мужчин [70]. Среди женщин в группу высокого риска входят пациентки с выраженными дисплазиями эпителия шейки матки, а также страдающие раком шейки матки или влагалища. Мужчины, вступавшие в половые контакты со здоровыми и ВИЧ-инфицированными мужчинами, также относятся к группе высокого риска заболевания раком анального канала [71]. На сегодняшний день рекомендации по цитологическому скринингу рака анального канала не разработаны.
Генитальные папилломы
Все аногенитальные папилломы (кондиломы) вызываются ПВЧ, среди них до 90% ассоциированы с типами вируса 6 и 11 [72]. В среднем период развития кондилом после инфицирования типами ПВЧ 6 или 11 составляет 2 - 3 месяца [73]. Однако кондиломы развиваются не у всех людей, инфицированных ПВЧ-6 или -11. Аногенитальные кондиломы возможно лечить, однако в 20 - 30% случаев они регрессируют самостоятельно. Рецидивы отмечаются в 30% случаев после лечения или спонтанного выздоровления [74]. Данные о заболеваемости аногенитальными кондиломами в стране не подлежат специальному учету, в связи с чем распространенность заболевания регистрируется по обращаемости к врачу и выявляется, по современным оценкам, у 1% сексуально активных подростков и взрослых [75, 25].
Рецидивирующий папилломатоз дыхательных путей
Типы ПВЧ с низкой канцерогенностью, в первую очередь - 6 и 11, в редких случаях вызывают рецидивирующий папилломатоз дыхательных путей (РПД) - заболевание, проявляющееся рецидивирующими папилломами верхних дыхательных путей, особенно гортани. В зависимости от возраста возникновения первичных проявлений выделяют РПД ювенильный и взрослых. Ювенильный РПД изучен более подробно. Первые его проявления возникают в возрасте до 18 лет, инфицирование происходит вертикальным путем от матери к ребенку инт-ранатально. Средний возраст установления диагноза - 4 года. По данным регистра ювенильного РПД за 1999 - 2003 годы, несмотря на различные варианты течения данного заболевания, оперативное удаление кондилом с целью восстановления проходимости дыхательных путей в среднем проводится до 13 раз в течение жизни [76] и заболеваемость возрастает. Показатель заболеваемости ювенильным РПД колеблется от 0,12 до 2,1 случая на 100 тыс. детей до 18 лет [77].
Лечение папилломавирусной инфекции
Лечения собственно папилломавирусной инфекции не проводится. Лечебные мероприятия направлены на устранение вызванных ПВЧ изменений. Так, лечение генитальных папиллом, предраковых состояний вульвы, влагалища, шейки матки - местное и заключается в удалении очагов дисплазии эпителия посредством таких методов, как криотерапия, электрокаустика, лазерная терапия, хирургическое удаление. Генитальные папилломы лечат с помощью местного применения фармакологических препаратов [78]. Согласно современным данным, соответствующая терапия позволяет вылечить проявления папилломавирусной инфекции, однако не дает возможности элиминировать вирус из организма.
Профилактика
Использование презервативов позволяет снизить риск инфицирования ПВЧ и развития осложнений инфекции (например, генитальных папиллом и рака шейки матки). Ряд проспективных исследований показал эффективность презервативов против папилломавирусной инфекции. Среди девушек-учащихся колледжей, недавно начавших половую жизнь, было отмечено снижение инфицированнос-ти ПВЧ на 70% при условии правильного и постоянного использования их партнерами презервативов [79]. Для сексуально активных людей мерой профилактики служат моногамные отношения с неинфицированным партнером.
Ни регулярные тесты на выявление ПВЧ, ни осведомленность партнеров не являются эффективными мерами профилактики папилломавирусной инфекции [78]. Распространенность рака шейки матки снизилась благодаря широкому внедрению в клиническую практику теста Папаниколау, который позволяет выявлять предраковые изменения в шейке матки на ранних стадиях. Тем не менее в течение 2007 года ожидается 11 100 случаев впервые выявленного рака шейки матки и 3700 случаев смерти от этого заболевания. В ряде стран, где скрининг рака шейки матки не является рутинной процедурой, заболевание занимает лидирующие позиции среди онкологической патологии у женщин.
В июне 2006 года в США лицензирована четырехвалентная вакцина против ПВЧ, рекомендованная для специфической профилактики ПВЧ у девочек и женщин в возрасте от 9 до 26 лет. Наряду со скринингом вакцина может способствовать резкому сокращению распространенности ПВЧ.
Литература
1. Weinstock H., Berman S., Cates W. Jr. Sexually transmitted diseases among American youth: incidence and prevalence estimates, 2000. Perspect Sex Reprod Health 2004;36:6-10.
2. Koutsky L.A., Kiviat N.B. Genital human papillomavirus. In: Holmes K.K., Sparling P.F., Mardh PA. et al, eds. Sexually transmitted diseases. New York, NY: McGraw-Hill; 1999:347-59.
3. NIH Consensus Statement. Cervical cancer. NIH Consens Statement 1996; 14:1-38.
4. World Health Organization. IARC monograph on the evaluation of carcinogenic risks to humans: human papillomaviruses. 1995. Lyons, France, IARC; 2000.
5. Munoz N., Bosch F.X., de Sanjose S., et al. Epidemiologic classification of human papillomavirus types associated with cervical cancer. N. Engl. J. Med. 2003;348:518-27.
6. Walboomers J.M., Jacobs M.V., Manos M.M., et al. Human papillomavirus is a necessary cause of invasive cervical cancer worldwide. J Pathol 1999;189:12-9.
7. Bosch F.X., de S.S.. Human papillomavirus and cervical cancer-burden 39. and assessment of causality. J Natl Cancer Inst Monogr 2003;31:3-13.
8. World Health Organization. HPV IARC monograph summary. Lancet Oncology 2005;6:204. 40.
9. Parkin D.M. The global health burden of infection-associated cancers in the year 2002. Int J Cancer 2006;118:3030-44.
10. Daling J.R., Weiss N.S., Klopfenstein L.L., Cochran L.E., Chow W.H., 41. Daifuku R. Correlates of homosexual behavior and the incidence of anal cancer. JAMA 1982;247:1988-90.
11. Daling J.R., Weiss N.S., Hislop T.G. et al. Sexual practices, sexually transmitted diseases, and the incidence of anal cancer. N Engl J Med 42. 1987;317:973-7.
12. Holly E.A., Whittemore A.S., Aston D.A., Ahn D.K., Nickoloff B.J., Kristiansen J.J. Anal cancer incidence: genital warts, anal fissure or fistula, 43. hemorrhoids, and smoking. J Natl Cancer Inst 1989;81:1726-31.
13. Koblin B.A., Hessol N.A., Zauber A.G. et al. Increased incidence of cancer among homosexual men, New York City and San Francisco, 1978-1990. 44. Am J Epidemiol 1996;144:916-23.
14. Ries L., Kosery C., Hankey B., Miller B., Clegg L., Edwards B. SEER Cancer Statistics Review 1973-1996. Bethesda, MD: National Cancer Institute; 45. 1999.
15. Kreimer A.R., Clifford G.M., Boyle P, Franceschi S. Human papillomavirus
types in head and neck squamous cell carcinomas worldwide: a systematic 46. review. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev 2005;14:467-75.
16. de Villiers E.M., Fauquet C., Broker T.R., Bernard H.U., zur H.H. Classification
of papillomaviruses. Virology 2004;324:17-27. 47.
17. Duensing S., Munger K. Mechanisms of genomic instability in human cancer: insights from studies with human papillomavirus oncoproteins. 48. Int J Cancer 2004;109:157-62.
18. Stanley M. Immune responses to human papillomavirus. Vaccine 2006;24:S16-S22. 49.
19. Carter J.J., Koutsky L.A., Hughes J.P., et al. Comparison of human papillomavirus types 16, 18, and 6 capsid antibody responses following incident infection. J Infect Dis 2000;181:1911-9. 50.
20. Ho G.Y., Studentsov Y.Y., Bierman R., Burk R.D. Natural history of human papillomavirus type 16 virus-like particle antibodies in young women. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev 2004;13:110-6.
21. Carter J.J., Koutsky L.A., Wipf G.C., et al. The natural history of human 51. papillomavirus type 16 capsid antibodies among a cohort of university women. J Infect Dis 1996;174:927-936. 52.
22. Winer R.L., Lee SK, Hughes J.P., Adam D.E., Kiviat N.B., Koutsky L.A. Genital human papillomavirus infection: incidence and risk factors in a cohort of female university students. Am J Epidemiol 2003;157:218-26. 53.
23. Ho G.Y., Bierman R., Beardsley L., Chang C.J., Burk R.D. Natural history of cervicovaginal papillomavirus infection in young women. N Engl J Med 1998;338:423-8. 54.
24. Moscicki A.B., Hills N., Shiboski S. et al. Risks for incident human papillomavirus infection and low-grade squamous intraepithelial lesion development in young females. JAMA 2001;285:2995-3002.
25. Koutsky L. Epidemiology of genital human papillomavirus infection. Am J 55. Med 1997;102:3-8.
26. Karlsson R., Jonsson M., Edlund K., et al. Lifetime number of partners as
the only independent risk factor for human papillomavirus infection: a 56. population-based study. Sex Transm Dis 1995;22:119-27.
27. Ley C., Bauer H.M., Reingold A, et al. Determinants of genital human papillomavirus infection in young women. J Natl Cancer Inst. 57. 1991;83:997-1003.
28. Peyton C.L., Gravitt P.E., Hunt W.C., et al. Determinants of genital human papillomavirus detection in a US population. J Infect Dis 58. 2001;183:1554-64.
29. Manhart L.E., Holmes K.K., Koutsky L.A., et al. Human papillomavirus infection among sexually active young women in the United States: 59. implications for developing a vaccination strategy. Sex Transm Dis 2006;33:502-8.
30. Trottier H., Franco E.L. The epidemiology of genital human papillomavirus 60. infection. Vaccine 2006;24:1-15.
31. Fairley C.K., Gay N.J., Forbes A., Abramson M., Garland S.M. Hand-genital transmission of genital warts? An analysis of prevalence data. Epidemiol 61. Infect 1995;115:169-76.
32. Marrazzo J.M., Stine K., Koutsky L.A. Genital human papillomavirus 62. infection in women who have sex with women: a review. Am J Obstet Gynecol 2000;183:770-4.
33. Sun X.W., Kuhn L., Ellerbrock T.V., Chiasson M.A., Bush T.J., Wright T.C. 63. Human papillomavirus infection in women infected with the human immunodeficiency virus. N Engl J Med 1997;337:1343-9.
34. Fairley C.K. Prevalence of HPV DNA in cervical specimens in women with 64. renal transplants: a comparison with dialysis-dependent patients and patients with renal impairment. Nephrology, Dialysis, Transplantation 1994;9:416-20. 65.
35. Watts D.H., Koutsky L.A., Holmes K.K., et al. Low risk of perinatal transmission of human papillomavirus: results from a prospective cohort study. Am J Obstet Gynecol 1998;178:365-73.
36. Geijersstam V., Eklund C., Wang Z., et al. A survey of seroprevalence of 66. human papillomavirus types 16, 18 and 33 among children. Int J Cancer 1999;80:489-93. 67.
37. Abma J.C., Martinez G.M., Mosher W.D., Dawson B.S.. Teenagers in the United States: sexual activity, contraceptive use, and childbearing, 2002.
Vital Health Stat 2004;24:1-48. 68.
38. Mosher W.D., Chandra A., Jones J. Sexual behavior and selected health measures: men and women 15-44 years of age, United States, 2002. Adv Data 2006;362:1-55.
Eaton D.K., Kann L., Kinchen S., et al. Youth risk behavior surveillance - United States, 2005. In: Surveillance Summaries, June 9, 2006. MMWR 2006;55(No. SS-5).
Franco E.L., Villa L.L., Sobrinho J.P., et al. Epidemiology of acquisition and clearance of cervical human papillomavirus infection in women from a high-risk area for cervical cancer. J Infect Dis 1999;180:1415-23. Molano M., Van den B.A., Plummer M., et al. Determinants of clearance of human papillomavirus infections in Colombian women with normal cytology: a population-based, 5-year follow-up study. Am J Epidemiol 2003;158:486-94.
Moscicki A.B., Shiboski S., Broering J., et al. The natural history of human papillomavirus infection as measured by repeated DNA testing in adolescent and young women. J Pediatr 1998;132:277-84. Ho G.Y., Burk R.D., Klein S., et al. Persistent genital human papillomavirus infection as a risk factor for persistent cervical dysplasia. J Natl Cancer Inst 1995;87:1365-71.
Hildesheim A., Schiffman M.H., Gravitt P.E., et al. Persistence of type-specific human papillomavirus infection among cytologically normal women. J Infect Dis 1994;169:235-40.
Schlecht N.F., Platt R.W., Duarte-Franco E., et al. Human papillomavirus infection and time to progression and regression of cervical intraepithelial neoplasia. J Natl Cancer Inst 2003;95:1336-43.
Schiffman M., Kjaer S.K. Natural history of anogenital human papillomavirus infection and neoplasia. J Natl Cancer Inst Monogr 2003;31:14-9.
Moscicki A.B., Schiffman M., Kjaer S., Villa L.L. Updating the natural history of HPV and anogenital cancer. Vaccine 2006;24:S42-S51. Wheeler C.M., Hunt W.C., Schiffman M., Castle PE. Human papillomavirus genotypes and the cumulative 2-year risk of cervical precancer. J Infect Dis 2006;194:1291-9.
Castellsague X., Munoz N. Cofactors in human papillomavirus carcinogenesis - role of parity, oral contraceptives, and tobacco smoking. J Natl Cancer Inst Monogr 2003;31:20-8.
Zelmanowicz A.M., Schiffman M., Herrero R., et al. Family history as a co-factor for adenocarcinoma and squamous cell carcinoma of the uterine cervix: results from two studies conducted in Costa Rica and the United States. Int J Cancer 2005;116:599-605.
Munoz N., Castellsague X., de Gonzalez A.B., Gissmann L. HPV in the etiology of human cancer. Vaccine 2006;24:S1-S10. Revzina N.V., Diclemente R.J. Prevalence and incidence of human papillomavirus infection in women in the USA: a systematic review. Int J STD AIDS 2005;16:528-37.
Burk R.D., Kelly P., Feldman J., et al. Declining prevalence of cervicovaginal human papillomavirus infection with age is independent of other risk factors. Sex Transm Dis 1996;23:333-41.
Wheeler C.M., Parmenter C.A., Hunt W.C., et al. Determinants of genital human papillomavirus infection among cytologically normal women attending the University of New Mexico student health center. Sex Transm Dis 1993;20:286-9.
Datta D.S., Koutsky L., Douglas J.M., et al. Sentinel surveillance for human papillomavirus among women in the United States, 2003--2004 [Abstract M0-306 ISSTDR]. Amsterdam; 2005-2006.
Dunne E.F., Unger E.R., Sternberg M., et al. Prevalence of HPV infection
among females in the US; National health and nutrition examination
survey (NHANES), 2003-2004. JAMA 2007;297:813-9.
Stone K.M., Karem K.L., Sternberg M.R., et al. Seroprevalence of human
papillomavirus type 16 infection in the United States. J Infect Dis
2002;186:1396-402.
Baldwin S.B., Wallace D.R., Papenfuss M.R., et al. Human papillomavirus infection in men attending a sexually transmitted disease clinic. J Infect Dis 2003;187:1064-70.
Hernandez B.Y., McDuffie K., Goodman M.T., et al. Comparison of physician- and self-collected genital specimens for detection of human papillomavirus in men. J Clin Microbiol 2006;44:513-7. Weaver B.A., Feng Q., Holmes K.K., et al. Evaluation of genital sites and sampling techniques for detection of human papillomavirus DNA in men. J Infect Dis 2004; 189:677-85.
Partridge J.M., Koutsky L.A. Genital human papillomavirus infection in men. Lancet Infect Dis 2006;6:21-31.
Dunne E.F., Nielson C.M., Stone K.M., Markowitz L.E., Giuliano A.R. Prevalence of HPV infection among men: a systematic review of the literature. J Infect Dis 2006;194:1044-57.
Saslow D., Runowicz C.D., Solomon D., et al. American Cancer Society guideline for the early detection of cervical neoplasia and cancer. CA Cancer J Clin 2002;52:342-62.
Schiffman M., Brinton L., Devesa S., Fraumeni J. Cervical cancer. In:
Schottenfeld D, Fraumeni J, eds. Cancer epidemiology and prevention.
New York, NY: Oxford University Press; 1996:1090-128.
Smith H.O., Tiffany M.F., Qualls C.R., Key C.R. The rising incidence of
adenocarcinoma relative to squamous cell carcinoma of the uterine cervix
in the United States - a 24-year population-based study. Gynecol Oncol
2000;78:97-105.
Hildesheim A., Berrington de G.A. Etiology and prevention of cervical adenocarcinomas. J Natl Cancer Inst 2006;98:292-3. Saraiya M., Ahmed F., Krishnan S., Richards T., Unger E., Lawson H.W. Cervical cancer incidence in a prevaccine era in the United States, 19982002. Obstet Gynecol 2007;109:360-70.
US Cancer Statistics Working Group. United States cancer statistics: 2003. Incidence and mortality. Atlanta, GA: US Department of Health and Human Services, CDC and the National Cancer Institute. 2005. Available at http://www.cdc.gov/uscs.
69. Judson P.L., Habermann E.B., Baxter N.N., Durham S.B., Virnig B.A. Trends in the Incidence of Invasive and In Situ Vulvar Carcinoma. Obstet Gynecol 2006;107:1018-22.
70. Johnson L.G., Madeleine M.M., Newcomer L.M., Schwartz S.M., Daling J.R. Anal cancer incidence and survival: the surveillance, epidemiology, and end results experience, 1973--2000. Cancer 2004;101:281-8.
71. Schottenfeld D., Winawer S. Cancers of the large intestine. In: Schottenfeld D, Fraumeni J, eds. Cancer epidemiology and prevention. New York, NY: Oxford University Press; 1996:813-40.
72. Greer C.E., Wheeler C.M., Ladner M.B., et al. Human papillomavirus (HPV) type distribution and serological response to HPV type 6 virus-like particles in patients with genital warts. J Clin Microbiol 1995;33:2058-63.
73. Winer R.L., Kiviat N.B., Hughes J.P., et al. Development and duration of human papillomavirus lesions, after initial infection. J Infect Dis 2005;191:731-8.
74. Chuang T.Y., Perry H.O., Kurland L.T., Ilstrup D.M. Condyloma acuminatum in Rochester, Minn., 1950-1978. I. Epidemiology and clinical features. Arch Dermatol 1984;120:469-75.
75. Insinga R.P., Dasbach E.J., Myers E.R. The health and economic burden of genital warts in a set of private health plans in the United States. Clin Infect Dis 2003;36:1397-403.
76. Reeves W.C., Ruparelia S.S., Swanson K.I., Derkay C.S., Marcus A., Unger ER. National registry for juvenile-onset recurrent respiratory papillomatosis. Arch Otolaryngol Head Neck Surg 2003;129:976-82.
77. Armstrong L.R., Preston E.J., Reichert M., et al. Incidence and prevalence of recurrent respiratory papillomatosis among children in Atlanta and Seattle. Clin Infect Dis 2000;31:107-9.
78. CDC. Sexually transmitted diseases treatment guidelines, 2002. MMWR 2002;51(No. RR-6).
79. Winer R.L., Hughes J.P., Feng Q., et al. Condom use and the risk of genital human papillomavirus infection in young women. N Engl J.
Некоторые характеристики процесса получения препаратов рестриктаз ЕеоШ, ВатН1, BglII, Рэ11, РтИ и использование рестриктаз РтП и PstI для изучения хромосомных ДНК из менингококков
И.Э. Борисова, В.А. Юркив
ФГУН «ЦНИИ эпидемиологии» Роспотребнадзора, Москва
Изучение характера гидролиза хромосомных ДНК из патогенных штаммов микроорганизмов с помощью рестрикционных эндонуклеаз имеет важное значение для эпидемиологического анализа патогенных бактерий. Поскольку менин-гококковая инфекция еще встречается в виде эпидемий в разных странах мира, изучение штаммов Neisseria meningitidis, осуществленное с помощью рестрикционного анализа хромосомных ДНК, позволит усовершенствовать эпидемиологический надзор за возбудителем менингококковой инфекции и профилактику менингококковой инфекции.
Специфические эндонуклеазы (рестриктазы) II класса применяются для картирования генома различных микроорганизмов, расшифровки первичной структуры ДНК, выделения индивидуальных генов и конструирования гибридных молекул.
Целью настоящего исследования стало описание некоторых характеристик методов очистки, предложенных для рестриктаз EcoRI, BamHI, BglII, PstI, PmiI [1, 2, 4], и использование рестриктаз PmiI и PstI для изучения хромосомных ДНК менингококков.
Материалы и методы
Для выделения специфических эндонуклеаз были использованы штаммы-продуценты Escherichia coli (K-12 1100 NM182), Bacillus amyloliquefaciens HI, Bacillus globigii, Providencia stuartii, Proteus mirabilis 1667. Хромосомные ДНК менингококков были выделены из клеток Neisseria meningitidis. Штаммы N. meningitidis (восемь штаммов) были выделены как возбудители менингококковой инфекции, один штамм не вызывал инфекции. Для очистки рестриктаз использовали коммерческие Р-11-фосфоцел-люлозу (Whatman, Великобритания), DE-52-целлюло-зу (Whatman, Великобритания), голубую сефарозу
(Pharmacia, Швеция) и некоторые широко употребляемые реактивы. Для тестирования препаратов рестриктаз была использована ДНК фага X.
Культивирование штаммов-продуцентов рестриктаз проводили методом глубинного культивирования с использованием отечественных питательных сред (бульона Хоттингера, мясопептонного бульона).
Выделение препаратов хромосомных ДНК из штаммов N. meningitidis осуществляли по модифицированному методу Мармура [9].
Обработку ДНК специфическими эндонукле-азами проводили в течение 1 - 3 часов в присутствии 1 - 10 единиц активности фермента на 0,5 - 5 мкг ДНК. Объем пробы составлял 20 -200 мкл. При гидролизе использовали инкубационные среды, предложенные Грином и соавт. [8], Боливаром и соавт. [6]. Электрофоретический анализ препаратов ДНК проводили в блоках 0,8 - 1,4%-ного агарозного геля на трисацетат-ном буфере [6].
Результаты и обсуждение
В ранее проведенных исследованиях Н.В. Цветковой и соавт. предложена схема очистки для рестриктаз EcoRI и BamHI [4]. Процесс очистки включал следующие этапы:
1) разрушение микробных клеток;
2) удаление нуклеиновых кислот 10%-ным раствором сульфата стрептомицина;
3) удаление балластных белков (двухступенчатое фракционирование сульфатом аммония);
4) ионообменная хроматография на Р-11-фосфо-целлюлозе (использование градиента NаСl);
5) концентрирование препаратов рестриктаз на DE-52-целлюлозе и против буфера с глицерином.
