CC BY
22
зультата (%), прогностичность отрицательного результата (%), чем изолированные ^Е и IgG4 антитела. Прогностичность отрицательного результата соотношения IgE/IgG4 была 90% от значения 1.
Авторы показали, что соотношение специфических IgE/IgG4 к яичному белку имеет важное значение для прогнозирования реакции на яйцо при проведении пищевой пробы.
O.P.
Энтеротоксигенная активность разных видов стафилококков, выделенных при атопическом дерматите у детей ( Часть 2)
Ф.С. Флуер, А.Ю. Максимушкин ФГБУ «НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи» Министерства здравоохранения России,
А.В. Кудрявцева, О.А. Морозова ГБОУ ВПО «Первый МГМУ им. И.М. Сеченова»
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Исследования SEA, SEB и TSST-1 у штаммов стафилококков, выделенных от детей с АтД, методом иммуноферментного анализа показало, что среди штаммов S. aureus SEA продуцировали 57% штаммов, SEB - 53% штаммов и TSST-1 -46% штаммов соответственно.
Из 26 исследованных штаммов S. aureus 11 штаммов (42%) продуцировали одновременно три токсина - SEA, SEB и TSST-1. Следует отметить, что АтД у детей, у которых были выделены эти штаммы, протекал в более тяжелой форме. Чем тяжелее протекало заболевание, тем чаще выявлялись штаммы стафилококков, продуцирующие сочетание этих энтеротоксинов (p<0,001). Полученные данные подтверждают мнение о том, что выделение штаммами S. aureus трех токсинов является важным условием для формирования тяжелых форм АтД. Аналогичные
результаты были получены ранее [11], они также показали связь между тяжестью течения АтД и продукцией токсинов штаммами S. aureus.
Исходя из этого можно сделать вывод о том, что продукция у штаммов S. aureus, выделенных с кожи у детей с АтД, трех токсинов одновременно может служить диагностическим критерием развития тяжелых форм АтД. Также в предыдущих работах было показано, что эрадикация штаммов стафилококков, продуцирующих эти SE, является необходимым условием эффективного лечения АтД [15].
Среди штаммов S. epidermidis SEA продуцировали 53% штаммов, SEB - 53% штаммов и TSST-1 - 20% штаммов. При исследовании штаммов S. haemolyticus было обнаружено, что SEA продуцировали 21% штаммов, SEB - 21% штаммов и TSST-1 - 14% штаммов (таблица 1). Нами было обнаружено, что из 8 исследованных штаммов
Таблица 1. Определение продукции SEA, SEb и TSST-1 методом иммуноферментного анализа у штаммов различных видов стафилококков, выделенных при АтД у детей
№ Виды стафилококков Количество штаммов Количество штаммов, продуцирующих токсины SEA ББВ TSST-1
1 S. aureus 26 15 (57%) 14 (53%) 12 (46%)
2 S. epidermidis 15 8 (53%) 8 (53%) 3 (20%)
3 S. haemolyticus 14 3 (21%) 3 (21%) 2 (14%)
S. warneri один штамм продуцировал стафилококковые энтеротоксины SEA, SEB и TSST-1, один штамм - токсины А и В и один штамм - токсин А. При исследовании штаммов S. hominis и S. caprae, выделенных у детей при АтД, SEA, SEB и TSST-1 обнаружены не были (см. таблицу 1). В связи с обнаружением продукции энтеротокси-нов штаммами коагулазоотрицательных стафилококков S. warneri и S. haemolyticus, выделенных с кожи больных АтД детей, сделан вывод о целесообразности проведения исследований энтеро-токсинообразования у этих видов стафилококков при АтД.
Нами была изучена энтеротоксигенная активность штаммов-продуцентов SEA, SEB и TSST-1 у детей с АтД в возрасте до 5 лет и от 5 до 15 лет.
При исследовании наличия SEA, SEB и TSST-1 у штаммов стафилококков разных видов, выделенных у больных детей в возрасте до 5 лет с АтД, нами было установлено, что штаммы S. aureus продуцировали SEA (81%), SEB (72%) и TSST-1
логических штаммов стафилококков, способных индуцировать АтД у детей. Обнаружение эпидемиологического штамма, содержащего указанные энтеротоксины у больных, находящихся в стационарах, должно рассматриваться эпидемиологами как важный сигнал к усилению комплекса противоэпидемических мероприятий, направленных на быструю элиминацию стафилококка. Эти данные также могут свидетельствовать о повышенном риске развития у пациента бактериемии или септического шока, что должно учитываться при разработке индивидуальной схемы лечения, контролирующего риск возникновения септических осложнений. Течение АтД у детей, у которых были выделены штаммы, продуцирующие 1 или 2 токсина, было менее тяжелое. Количество токсин-продуцирующих штаммов S. aureus составило 14,2% (n=2 из 14) и 64,2% (n=9 из 14) для детей со среднетяжелой и тяжелой формами АтД, соответственно; у трех детей токсины обнаружены не были (21,4%), таблица 2.
Таблица 2. Определение наличия SEA, SEb и TSST-1 у штаммов стафилококков разных видов, выделенных от больных детей в возрасте до 5 лет с АтД
Вид стафилококков
Количество исследованных штаммов
Количество штаммов, продуцирующих SEA SEB TSST-1
1 S. aureus 11 9 81% 8 72% 7 63%
2 S. epidermidis 6 3 50% 4 66% 1 16%
№
(63%). Следует отметить, что тяжелая форма АтД наблюдалась у тех детей, у которых были выделены штаммы, продуцирующие одновременно 3 токсина - SEA, SEB и TSST-1. Таким образом, проведенные исследования показали, что продукция штаммами стафилококковых энтероток-
При исследовании наличия SEA, SEB и TSST-1 у штаммов стафилококков разных видов, выделенных у больных детей в возрасте от 5 до 15 лет с АтД, нами установлено, что у детей старше 5 лет доля энтеротоксигенных штаммов S. aureus, продуцирующих SEA, SEB и TSST-1, составила 71%,
Таблица 3. Определение наличия SEA, SEb и TSST-1 у штаммов стафилококков разных видов, выделенных от больных детей в возрасте от 5 до 15 лет с АтД
Количество штаммов, продуцирующих
№ Вид стафилококков Количество исследо-
ванных штаммов SEA SEB TSST-1
1 S. aureus 7 5 71% 4 57% 4 57%
2 S. epidermidis 6 4 66 3 50% 1 16%
синов - SEA, SEB и TSST-1 - может быть дополнительным маркером идентификации эпидемио-
57% и 57% соответственно, что было ниже, чем у детей более раннего возраста (таблица 3).
18
Процент энтеротоксигенных штаммов S. epi-dermidis, продуцирующих SEA (50%), SEB (66%) и TSST-1 (16%) и S. haemolyticus, продуцирующих SEA (60%), SEB (60%) и TSST-1 (40%) у детей с АтД до 5 лет был выше, чем у детей старше 5 лет. Больший процент энтеротоксигенных штаммов можно объяснить, возможно, незрелостью защитной функции иммунной системы у детей с АтД в возрасте до 5 лет. Известно, что у маленьких детей продукция IgA находится в прямой зависимости от кишечной антигенной стимуляции. В кишечнике существует особая форма иммунологической защиты организма, представленной мукозальным барьером поверхности слизистой оболочки кишечника, одним из основных защитных факторов которой является IgA. Показано, что иммунологический барьер сохраняется за счет нормального функционирования мукозальной иммунной системы, представляющей важный элемент в общей иммунологической компетенции хозяина. Снижение антигенной стимуляции, возможно, связанно с уменьшением содержания Lactobacillus при дис-бактериозе кишечника у детей в возрасте до 5 лет [16] и временной более высокой кишечной проницаемостью у детей по сравнению со взрослыми, что приводит к снижению продукции IgA. В результате этого создаются условия для адгезии энтеротоксигенных штаммов стафилококков и другой патогенной флоры. Надо отметить, что колонизация штаммами стафилококков обусловлена не только возрастной неполноценностью мукозальной иммунной системы, но и неспособностью выработки необходимого количества IgA [8].
Нами показано, что один штамм из 8 исследованных штаммов S. warneri продуцировал SEA, SEB и TSST-1.
Штаммы S. hominis и S. caprae, выделенные при атопическом дерматите, не продуцировали SE и TSST-1.
Следует также отметить, что нами было показано ранее, что энтеротоксигенной активностью обладали только штаммы стафилококков, выделенные с пораженных участков кожи у больных АтД, в то время как штаммы стафилококков у больных с АтД, выделенные с непораженной кожи, не обладали способностью продуцировать SEA , SEB и TSST-1 [17].
Кроме того, нами были выделены штаммы стафилококков у некоторых детей с тяжелой формой АтД, однако они не обладали способностью продуцировать SEA , SEB и TSST-1. Возможно, что указанные штаммы стафилококков продуцировали другие типы SE, или АтД не был связан с наличием стафилококков. Исследование штаммов S. aureus, изолированных с различных областей поврежденной кожи у одних и тех же пациентов, показало наличие у них единых свойств продукции токсинов. При исследовании частоты выявления энтеротоксинпродуцирующих штаммов, выделенных у детей при АтД, среди стафилококков разных видов установлено, что чаще токсины продуцировали штаммы золотистого стафилококка, причем значительная часть исследованных штаммов продуцировали одновременно SEA, SEB и TSST-1.
Исходя из полученных результатов, можно было сделать вывод о необходимости тестирования КОС, выделенных при АтД, на их способность продуцировать энтеротоксины, чтобы правильно применять принципы наружной терапии.
Таким образом, нами впервые показано наличие энтеротоксинов у штаммов S. warneri и S. haemolyticus, выделенных при АтД у детей. Ранее сообщалось о продукции энтеротоксинов КОС S. epidermidis у детей [11]. Следует проводить дальнейшие исследования штаммов других КОС, выделенных при АтД, на наличие энтеро-токсинов.
Известно, что штаммы стафилококков, продуцирующие SEI и SEG, содержат кластер egc, который часто кодирует и энтеротоксиноподб-ные суперантигены SEM, SEN и SEO [18], а также SEU. SE, кодируемые egc, являются наиболее распространенными энтеротоксинами, однако количество нейтрализующих антител в сыворотке против этих токсинов ниже, чем в сыворотке против классических SEА-SED так как эти токсины продуцируются в гораздо меньших количествах. Было показано, что присутствие egc наблюдалось у 55% изолятов, выделенных из крови и носовой полости [19], и у 48% изолятов, выделенных от пациентов с АтД [20].
Влияние этих энтеротоксинов на течение АтД остается в настоящее время неизученным. Однако следует заметить, что при исследовании способности SEG стимулировать in vivo субпопуляции
АЛЛЕРГОЛОГИЯ и ИММУНОЛОГИЯ в ПЕДИАТРИИ, № 1 (32), март 2013 КЛИНИЧЕСКИЙ РАЗБОР/ CLINICAL DISCUSSION
мышиных Т-лимфоцитов была обнаружена ранняя, сильная и обширная стимуляция Vbeta 8.2 Т-лимфоцитов при сравнении с другим суперантигеном из подсемейства SEB. Причина такого сильного митогенетического потенциала этого энтеротоксина объясняется особенностью кристаллической структуры SEG. Было показано, что у SEG аффинность к Vbeta 8.2 в 40-100 раз выше, чем у остальных членов подсемейства SEB. Предполагается, что штаммы S. aureus, продуцирующие SEG, обладают улучшенным механизмом связывания с естественными лигандами, что может давать возможное преимущество бактериальным штаммам, продуцирующим SEG [21].
Выводы. Установлено наличие SE у КОС S. haemolyticus и S. warneri, выделенных при АтД у детей. Показано, что больший процент энтеро-токсигенных штаммов был обнаружен среди S. aureus, выделенных при АтД. Установлена зависимость интенсивности колонизации энте-ротоксигенными штаммами при АтД у детей от возраста. Более интенсивная колонизация энте-ротоксигенными штаммами стафилококков у детей с АтД наблюдалась у детей младшего возраста по сравнению с детьми старших возрастов. Показана необходимость тестирования КОС, выделенных от детей с АтД, на наличие SEA, SEB и TSST-1. ■
ЛИТЕРАТУРА
15.1de F., Matsubara T., Kaneko M. et al.
Staphylococcal enterotoxin specific IgE antibod-
ies in atopic dermatitis. // Pediatr. Int. 2004. 46: 337-341.
16. Флуер Ф.С., Прохоров В Я, Бродинова Н.С. и др. Мониторинг энтеротоксигенности Staphylococcus aureus при диагностике дисбакте-риозов кишечника у детей. // Педиатрия. -2008. - 87 (6). - С. 56-60.
17. Кудрявцева А.В., Флуер Ф.С., Балаболкин И.И. и др.. Зависимость тяжести течения атопиче-ского дерматита у детей от токсинпродуци-рующих свойств штаммов золотистого стафилококка. // Российский педиатрический журнал. - 2009. - № 3. - С. 31-37.
18.Jarraud S., Peyrat M. A., Lim A. et al. egc, A highly prevalent operon of enterotoxin gene, forms a putative nursery of superantigens in Staphylococcus aureus.//J. Immunol. 2001. 166:669-677.
19. Becker K., Friedrich A. W., Lubritz G. et al. Prevalence of genes encoding pyrogenic toxin superantigens and exfoliative toxins among strains of Staphylococcus aureus isolated from blood and nasal specimens. //J. Clin.. Microbiol. 2003.41:1434-1439.
20. Mempel M., Lina G., Hojka M. et al. High prevalence of superantigens associated with the egc locus in Staphylococcus aureus isolates from patients with atopic eczema. // Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 2003. 22:306-309.
21 .Fern6ndez M.M, Bhattacharya S. Superantigen natural affinity maturation revealed by the crystal structure of staphylococcal enterotoxin G and its binding to T-cell receptor Vbeta8.2. // Proteins. 2007, Jul. 1;68(1):389 -402.
Клинические проявления атопического дерматита у детей с первичным иммунодефицитом
Р.Ф. Хакимова, Г.Р. Камашева ГБОУ ВПО «Казанский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Ginical aspects of atopic dermatitis in children with primary immunodeficiency
R.F. Khakimova, G.R. Kamasheva
The analysis of clinical cases of a combination of atopic dermatitis and primary immunod-
eficiency is presented in article. It is emphasized that the diagnosis quite often is established late. The treatment and prognosis of these patients depends on option of defect of immune system.
-$--
