CC BY
218
УДК 616-002.78:611-018.74:577.12
ЭНДОТЕЛИЙЗАВИСИМАЯ ВАЗОДИЛАТАЦИЯ И УРОВНИ
Фолиевой кислоты и гомоцистеина у больных
подагрой
Д.В. Пицко, В.М. Пырочкин
Кафедра госпитальной терапии УО «Гродненский государственный медицинский университет»
Проведено определение параметров вазомоторной функции эндотелия, уровня гомоцистеина, мочевой кислоты и фолиевой кислоты у больных подагрой. У больных подагрой выявлено нарушение эндотелийзависимой вазо-дилатации. В сравнении с контрольной группой (40,58±2,8%), у больных подагрой выявлено достоверно значительное уменьшение максимальной объемной скорости кровенаполнения (11,3±1,65%) (p<0,001). При изучении биохимических показателей в плазме крови выявлено по сравнению с контрольной группой (8,99±1,2 мкмоль/л), достоверное увеличение уровня гомоцистеина у больных подагрой (15,78±1,5) (p<0,001). Содержание фолиевой кислоты у больных подагрой (6,15±0,27 мкмоль/л) было достоверно ниже, чем в контрольной группе (19,3±3,8) (p<0,001) . Нарушение эндотелийзависимой вазодилатации, повышение уровня гомоцистеина и сниженный уровень фолатов в плазме крови является неблагоприятным фактором возникновения сердечно-сосудистых заболеваний.
Ключевые слова: подагра, мочевая кислота, оксидативный стресс, гомоцистеин, фолиевая кислота, эндоте-лийзависимая вазодилатация, эндотелиальная дисфункция
Parameters of endothelium vasomotorfunction, total plasma homocysteine, folic and uric acid levels have been examined in patients with gout. Impairment of endothelium-dependent dilation has been revealed in gouty patients. Relative acceleration in peak bloodflow velocity has been found to be reduced in them (11,3±1,7 vs. 40,6±2,8 % in control subjects, p< 0,001), while obtained total plasma homocysteine to be increased significantly as compared to unaffected persons (15,8±1,5 vs. 9,0±1,2 мmol/L, p< 0,001). Estimation of folic acid has elicited significant decline in patents with gout (6,2±0,3 vs. 19,3±3,8 мmol/L, p<0,001). Flow-mediated vasodilation, raised plasma homocysteine as well as decreasedfolic acid are riskfactors of cardiovascular diseases development.
Key word: gout, uric acid, oxidative stress, homocysteine, folic acid, flow-dependent vasodilatation, endothelial dysfunction
Введение
За последние десятилетия в экономически развитых стран, в том числе и Беларуси, в связи с улучшением уровня жизни возросло число больных подагрой. Подагра - это не только заболевание суставов и гиперурикемия. Нарушение пуринового обмена сказывается на функции многих органов и систем, в том числе и сердечно-сосудистой. У больных подагрой наблюдается более высокая частота смертности в сравнении с общей популяцией, особенно при наличии цереброкардиоваскулярных заболеваний [15, 32]. Проведенные многочисленные исследования показали, что наличие такого заболевания, как подагра, является фактором риска развития сердечно-сосудистой патологии у пациентов. Согласно данным Фрэмингемского исследования, у 60% больных подагрой обнаружено поражение коронарных сосудов сердца [3]. Артериальная гипертензия, по различным данным, присутствует у 25-50% больных с подагрой, не зависит от длительности болезни. Исследование Gutmann, показало, что основная причина смерти больных подагрой - это сердечно-сосудистые катастрофы [16]. По данным Ильиных Е. В. (институт ревматологии РАМН), систолическое артери-
альное давление (САД) > 140 мм рт. ст. имеется у 68,9% пациентов, страдающих подагрой [1]. Janssens в своих исследованиях выявил, что у больных подагрой без предшествовавших кардиоваскулярных нарушений, в сравнении с контролем, наблюдалась повышенная частота артериальной гипертензии (39% против 14% у контрольной группы) [19]. Krishnan E. и соавторы в исследовании MRFIT (Multiple Risk Factor Intervention Trial) показали, что среди больных подагрическим артритом без наличия коронарной болезни сердца в анамнезе имеется значительная положительная корреляция с последующим острым инфарктом миокарда (ОИМ) [21]. Повышение уровня мочевой кислоты на каждый мг/дл повышает риск инфаркта миокарда на 4%. Подагра была оценена как фактор риска ОИМ с коэффициентом 1,3. После проведения корреляции между всеми факторами, Krishnan сделал вывод, что подагрический артрит является фактором риска ОИМ независимо от ги-перурикемии [21] .
Большинство исследователей связывали повышенный уровень сердечно-сосудистой заболеваемости у больных подагрой с гиперурикемией -повышенным содержанием мочевой кислоты и ее
негативными эффектами. Мочевая кислота, реагируя с пероксинитритом, приводит к формированию стабильного донора оксида азота, способствуя ва-зодилатации, и уменьшает оксидативное поражение, вызванное пероксинитритом [31]. Однако с другой стороны, мочевая кислота способствует оксидации липопротеинов низкой плотности in vitro, что является ключевым этапом в прогрессировании атеросклероза [30]. Мочевая кислота стимулирует адгезию гранулоцитов к эндотелию и образованию пероксидных и супероксидных радикалов [7, 13]. Ксантиноксидаза - критический фермент, участвующий в распаде пуринов до мочевой кислоты, является главным источником супероксид-ных радикалов [38]. По влиянию мочевой кислоты на сердечно-сосудистую систему нет однозначной точки зрения, вопрос на сегодняшний день дискутируется. Поэтому был проведен ряд немногочисленных исследований по поиску новых возможных сердечно-сосудистых факторов риска у больных подагрой, поскольку лишь влиянием имеющихся факторов риска у больных подагрой нельзя было объяснить столь высокую заболеваемость и смертность от сердечно-сосудистых инцидентов. К так называемым «новым» факторам риска недавно стали относить дисфункцию эндотелия и гипергомо-цистеинемию, которые у больных подагрой мало-изучены.
Эндотелиальная дисфункция включает в себя такие патологические состояния, как снижение эндотелийзависимого расширения сосудов, нарушение антикоагулянтных и противовоспалительных свойств эндотелия, регуляцию им роста и структуры сосудистой стенки, включая дисрегуля-цию процессов ее ремоделирования [14, 28]. Одним из факторов, приводящих к дисфункции эндотелия, является гомоцистеин [26]. Известен целый ряд неблагоприятных биологических эффектов гипергомоцистеинемии. Гомоцистеин вызывает повреждение эндотелия и эндотелиальную дисфункцию, увеличение пролиферации гладкомышечных клеток сосудов, стресс эндоплазматического рети-кулума, приводящий к нарушению биосинтеза холестерина и вызывающий апоптоз эндотелиальных клеток, протромботическое действие [4, 37]. Высокий уровень гомоцистеина приводит к дисфункции эндотелия и является предиктором смертности от сердечно-сосудистых заболеваний [29]. Nygard показал, что смертность при уровне гомоцистеина свыше 15 мкмоль/л составила 24,7%, в то время как при уровне меньше 9 мкмоль/л - 3,6% [29]. Повышенный уровень гомоцистеина коррелирует с повышенным риском болезни коронарных артерий, инфаркта миокарда, окклюзии периферических сосудов [17, 22, 35].
Данные об уровне гомоцистеина у больных подагрой противоречивы. Tsutsumi Z., Moriwaki Y. установили, что у японцев, страдающих подагрой, уровень гомоцистеина не был повышен [33]. С дру-
гой стороны, исследования, проведенные Istok R, Kovalancik M. в Европе, Cheng T.T., Lai H.M. в Тайване, показали, что у больных подагрой был повышен уровень гомоцистеина [18,10]. Cheng T. T. и соавторы из института клинических медицинских исследований (Тайвань) выявили, что у больных подагрой уровень гомоцистеина в плазме крови значительно больше (12,0±3,19 мкмоль/л), чем в контрольной группе (9,96±4,68 мкмоль/л) [10].
Целью нашей работы было изучение показателей эндотелийзависимой вазодилатации плечевой артерии, уровня гомоцистеина, мочевой и фолиевой кислоты у больных подагрой.
Материал и методы
В амбулаторных условиях было обследовано 60 больных подагрой (все мужчины; средний возраст 45.15±1.27 года). Критериями исключения из исследования являлись клинические проявления ишемической болезни сердца (ИБС), наличие артериальной гипертензии и сосудистых заболеваний, наличие хронических заболеваний. Длительность заболевания составила от 0,5 до 15 лет (в среднем 6,5±2,1 года). Контрольную группу составили 30 практически здоровых лиц с нормальным артериальным давлением, без отягощенной наследственности по ИБС.
Параметры вазомоторной функции эндотелия определялись реографическим методом. Исследование эндотелийзависимой реакции плечевой артерии (ПА) в ответ на пробу с реактивной гиперемией (РГ) осуществляли методом реовазографии с помощью аппаратно-програмного комплекса «Им-пекард» [2]. В качестве информативной реографи-ческой величины оценивалось изменение максимальной скорости кровотока (Adz/dt) показатель вазомоторной функции (ВФ) эндотелия, вызванное реактивной гиперемией [2]. За 40-50 мин до проведения пробы больной принимает 25 мг ортофена (с учетом противопоказаний) для блокады про-стациклин-зависимой активности эндотелия. Измеряется уровень артериального давления. Затем в компрессионную манжетку нагнетается воздух до уровня, превышающего систолическое артериальное давление на 50 мм рт. ст. Продолжительность компрессии составляет 5 мин. Через 1 минуту после декомпрессии повторно вводится и анализируется реовазографический сигнал. Вычисляется относительное изменение максимальной объемной скорости кровенаполнения Adz/dt по формуле:
Adz/dt = (dz/dt1 -dz/dtHo,) .100% dz/dtHCX.
где dz/dt , dz/dt - максимальная объемная ско-
^ исх.’ 1
рость кровенаполнения в состоянии покоя и через минуту после декомпрессии, соответственно [2].
Диагностические заключения строились следующим образом:
• при A(dz/dt) / dz/dt >12% - ВФ эндотелия не нарушена;
• при A(dz/dt) / dz/dt = (-2^12) % - умеренно выраженное нарушение
• при A(dz/dt) / dz/dt < (-2^-15)% - выраженное нарушение
• A(dz/dt) / dz/dt < -15% - резко выраженное нарушение ВФ
В образцах крови определяли уровень гомоци-стеина, фолиевой кислоты и мочевой кислоты. Гомоцистеин определяли SBD-F реагентом (ammonium-7-fluorobenzo-2-oxa- 1,3-diazole-4-sulfonate) методом ВЭЖХ (высокоэффективной жидкостной хроматографии). Уровень фолиевой кислоты определяли методом FPIA (Fluorescence Polarization Immunoassay) на аппарате AXYM-system (Axis-Shield, Dundee, UK).
Анализ результатов проводился с применением пакета статистических программ Microsoft Excel 2003 и STATISTICA 6.0. Использовались методы сравнения двух независимых выборок, метод вычисления коэффициента корреляции (r) для выявления корреляционных связей между различными показателями. Достоверность различий определяли с помощью парного и непарного t-критерия Стьюдента для параметрических переменных. Для непараметрических порядковых вариант применялись критерии Манна-Уитни и Вилкоксона.
Результаты и обсуждение
В сравнении с контрольной группой, где показатель Adz/dt составил 40,58± 2,8%, у больных подагрой выявлено достоверно значительное уменьшение показателя Adz/dt (11,3±1,65%) (p<0,001). Из обследованных больных подагрой у 22 (36,7%) наблюдалась нормальная вазомоторная функция эндотелия, у 38 (63,3%) больных отмечалось нарушение вазомоторной функции эндотелия:
1. Умеренное - 23 (38,3%) больных
2. Выраженное - 12 (20,0%) больных
3. Резко выраженное - 3 (5,0%) больных
При изучении биохимических показателей в
плазме крови выявлено по сравнению с контрольной группой (8,99±1,2 мкмоль/л) достоверное увеличение уровня гомоцистеина у больных подагрой (15,78±1,5) (p<0,001). Содержание фолиевой кислоты у больных подагрой (6,15±0,27 мкмоль/л) было достоверно ниже, чем в контрольной группе (19,3±3,8) (p<0,001).
Не выявлено достоверной корреляции между уровнем гомоцистеина и уровнем мочевой кислоты (р=0,26),что указывает на то, что он является фактором риска независимо от уровня мочевой кислоты. C другой стороны, Malinov et al. выявили, что мочевая кислота является предиктором концентрации гомоцистеина [24]. Coull и соавторы в своих исследованиях выявили положительную взаимосвязь между уровнем мочевой кислоты и го-моцистеина у больных с поражением коронарных артерий [11]. Они считали это следствием реновас-кулярного атеросклероза и осложнения системно-
го заболевания сосудов. Однако в нашем исследовании принимали участие больные без наличия сердечно-сосудистой патологии. В вышеуказанных исследованиях корреляция между уровнем гомо-цистеина и мочевой кислотой наблюдалась уже при поражении сосудов, в том числе реноваскулярных, что могло повлиять на экскрецию мочевой кислоты. Нами не выявлено достоверной корреляции между уровнем мочевой кислоты и параметрами эндотелийзависимой дилатации (p=0,24). Наличие дисфункции эндотелия у больных подагрой подтверждено и другими авторами [1].Однако связи между потокозависимой вазодилатацией (ПЗВД) и другими кардиоваскулярными факторами риска, в том числе уровнями липопротеинов низкой плотности, мочевой кислоты Ильиных не выявила (p>0,05) [1]. С другой стороны, Kato M, Hisatome I. провели исследование эндотелийзависимой ди-латации у пациентов с гиперурикемией. У больных гиперуриемией отмечалось ухудшение потокозависимой вазодилатации (4.0±0.7%) в сравнении с контролем (6.4±0.8%) [20].
Следовательно, можно сказать, что механизм развития эндотелиальной дисфункции у больных подагрой недостаточно ясен, не может быть объяснен лишь влиянием гиперурикемии и требует дальнейшего изучения. Повреждение эндотелия, возможно, обуславливается также активностью ксан-тиноксидазы [7]. Известно, что эндотелий играет главную роль в поддержании сосудистого тонуса через синтез и высвобождение оксида азота (NO), который является вазодилататором [36]. Образующийся под влиянием ксантиноксидазы супероксид-анион оказывает тормозящее действие на сосудистый NO [6]. NO оказывает сильное сосудорасширяющее действие, опосредует эффекты эндотелий-зависимых вазодилататоров (ацетилхолина и бра-дикинина), тормозит сужение сосудов эндотели-ном-I [25, 27, 34]. Оксипуринол, ингибитор ксан-тиноксидазы, существенно улучшал нарушеную эндотелийзависимую вазадилатацию у лиц с высоким уровнем продуцируемого ксантиноксидазой супероксида [9]. Применение оксипуринола у пациентов с поражением коронарных сосудов сердца улучшало эндотелиальную функцию [5]. Препарат аллопуринол, который больные подагрой принимают в качестве патогенетической терапии, обладает вазопротективным действием [8, 12]. Однако, тем не менее, несмотря на патогенетическую терапию, у этих больных сохраняется высокий риск сердечно-сосудистых заболеваний, в сравнении с общей популяцией. Таким образом, одного только аллопуринола, который блокирует ксан-тиноксидазу и уменьшает выработку мочевой кислоты, недостаточно для защиты эндотелия, так как имеются еще другие механизмы нарушения функции эндотелия, на которые аллопуринол не может повлиять.
Повышение гомоцистеина у больных подагрой является одним из звеньев, приводящих к эндотелиальной дисфункции, и механизмы, приводящие к этому, требуют углубленного исследования. Пуриновые метаболиты участвуют в промежуточных путях синтеза гомоцистеина через образование S-аденозилметионина и S-аденозилгомоцистеина [26].
Кроме генетически обусловленных причин, связанных с полиморфизмом гена метилентетрагид-рофолатредуктазы, к увеличению уровня гомоци-стеина приводят дефицит фолиевой кислоты, витаминов В6 и B12 [23]. Обмен фолатов у больных подагрой малоизучен и также требует углубленного исследования. Наши данные показали, что у больных подагрой имеется дефицит фолиевой кислоты в организме, что может привести к гиперго-моцистеинемии, которая вносит весомый вклад в развитие эндотелиальной дисфункции.
Выводы
Таким образом, проведенные исследования показали, что у больных с подагрой имеются дополнительные факторы риска развития сердечно-сосудистых заболеваний, такие как увеличение уровня гомоцистеина, нарушение эндотелийзависимой вазодилатации, по данным пробы с реактивной гиперемией, пониженный уровень фолатов. Учитывая повышенный риск развития заболеваний сердечно-сосудистой системы у больных подагрой, необходимо у таких больных оценивать показатель суммарного кардиоваскулярного риска и проводить целенаправленную профилактику кардиоваскулярной патологии с необходимостью коррекции уровня гомоцистеина, фолатов и дисфункции эндотелия.
Литература
1. Ильиных, Е. В. Факторы риска развития кардиоваскулярных заболеваний у больных подагрой: автореф. дис. канд. мед. наук: 14.00.39 / Е. В. Ильиных; Рос. мед. ун-т. - М., 2006. - 21 с.
2. Полонецкий, Л.З. Исследование вазомоторной функции эндотелия плечевой артерии с использованием импедансной технологии у больных атеросклерозом. / Л.З. Полонецкий [et al.] // Медицинская панорама. - 2005. - № 7. - С. 40-43.
3. Abbott, R. D. Gout and coronary heart disease: the Framingham Study. / R.D. Abbott [et al.] // J Clin Epidemiol. - 1988. - Vol. 41(3) - P. 237-242.
4. Austin, R.C. Role of hyperhomocysteinemia in endothelial dysfunction and atherotrombotic disease. / R.C. Austin, S.R. Lentz, G.H. Werstuck // Cell Death Differ. - 2004. -Vol.11. - P. 56-64.
5. Baldus, S. Oxypurinol improves coronary and peripheral endothelial function in patients with coronary artery disease. / S. Baldus [et al.] // Free Radic Biol Med. - 2005. - Vol. 39(9) - P. 1184- 1190.
6. Berry, C. E. Xanthine oxidoreductase and cardiovascular disease: molecular mechanisms and pathophysiological implications. / C. E. Berry, J. M. Hare // J Physiol -2004. - Vol. 555(3) - P. 589-606.
7. Boogaerts, M.A. Mechanisms of vascular damage in gout and oxalosis: crystal induced, granulocyte mediated, endothelial injury. / M.A. Boogaerts, D.E. Hammerschmidt // Thromb Haemost. - 1983. - Vol. 50 -P. 576-580.
8. Cappola, T.P. Allopurinol improves myocardial efficiency in patients with idiopathic dilated cardiomyopathy. / T. P. Cappola [et al.] // Circulation -2001. -Vol.104 - P. 2407-2411.
9. Cardillo, C. Xanthine Oxidase Inhibition With Oxypurinol Improves Endothelial Vasodilator Function in Hypercholesterolemic but Not in Hypertensive Patients. / C. Cardillo [et al.] // Hypertension 1997. -Vol. 30(1) - P. 57-63.
10. Cheng, T.T. Elevated serum homocysteine levels for gouty patients. / T.T. Cheng [et al.] // Clin. Rheumatol. - 2005. - Vol. 24(2). - P 103-106.
11. Coull, B.M. Elevated plasma homocyst(e)ine concentration as a possible independent risk factor for stroke. / B. M. Coull [et al.] // Stroke
- 1990. - Vol. 21 - P. 572-576.
12. Doehner, W. Effects of Xanthine Oxidase Inhibition With Allopurinol on Endothelial Function and Peripheral Blood Flow in Hyperuricemic Patients With Chronic Heart Failure. / W. Doehner [et al.] // Circulation - 2002. - Vol.105 - P2619.
13. Falasca, G.F. Superoxide anion production and phagocytosis of crystals by cultured endothelial cells. / G.F. Falasca [et al.] // Arthritis Rheum. - 1993. - Vol.36 - P105-116.
14. Faraci, F.M. Heistad D.D. Regulation of the cerebral circulation: role of endothelium and potassium channels. / F.M. Faraci, D. D. Heistad // Physiol Rev -1998. - Vol.78(1) - P. 5397.
15. Fessel, F. J. High uric acid as an indicator of cardiovascular disease. Independence from obesity. / F. J. Fessel // Am J Med - 1980. -Vol.68 - P401- 404.
16. Gutman, A.B. Views on the pathgenesis and management of primary gout. / A.B. Gutman // J. Bone Joint Surg. -1972. -Vol. 54A - P. 357-372.
17. Hopkins, P. Higher plasma homocysteine and increased susceptibility to adverse effects of low folate in early familial coronary artery disease. / P. Hopkins [et al.] //Arterioscler Thromb Vasc Biol -1995.
- Vol.15 - P1314-1320.
18. Istok, R. Total plasma homocysteine in patients with gout. / R. Istok, M. Kovalancik, J. Rovensky // J. Rheumatol. - 1999. - Vol. 26(9). -P. 2068-2069.
19. Janssens, H.J. Gout, just a nasty event or a cardiovascular signal? A study from primary care. / H.J. Janssens [et al.] // Family Practice -2003. - Vol.20. - P413-416.
20. Kato, M. Status of endothelial dependent vasodilation in patients with hyperuricemia. /M. Kato, I. Hisatome, Y. Tomikura // Am J Cardiol. -2005. - Vol. 96(11). - P. 1576-1578.
21. Krishnan, E. Gout and the risk of acute myocardial infarction. / E. Krishnan [et al.] // Arthritis Rheum. - 2006. - Vol. 54 - P. 2688-2696.
22. Landgren, F. Plasma homocysteine in acute myocardial infarction: homocysteine-lowering effect of folic acid. / F. Landgren // J Int Med -1995. - Vol.237 - P381-388.
23. Lussier-Cacan, S. Plasma total homocysteine in healthy subjects: sex-specific relation with biological traits. / S. Lussier-Cacan [et al.] // Am. J. Clin. Nutr. - 1996. - Vol.64 - P587-593.
24. Malinow, M.R. Role of blood pressure, uric acid, and hemorheological parameters on plasma homocysteine concentration. / M. R. Malinow [et al.] // Atherosclerosis - 1995. - Vol.114 - P. 175-183.
25. Marin, J. Role of vascular nitric oxide in physiological and pathological conditions. / J. Marin, M. A. Rodriges-Martines // Pharmacol Ther - 1997. - Vol.76 - P111-134.
26. Miguel, A. Roles of homocysteine in cell metabolism. Old and new functions. / A. Miguel [et al.] // Eur. J. Biochem. - 2001. - Vol.268 -P.3871- 3882.
27. Moncada, S. Nitric oxide: physiology, pharmacology and pathophysiology. / S. Moncada [et al.] // Pharmacol Rev - 1991. - Vol.43
- P.109-142.
28. Panza, J.A. Role of endothelium-derived nitric oxide in the abnormal endothelium-dependentvascular relaxation of patients with essential hypertension. / J.A. Panza [et al.] // Circulation -1993. - Vol. 87.- P1468-1474.
29. Plasma homocysteine level and mortality in patients with coronary heart disease /O. Nygard [et al.] // N. Engl. J. Med. - 1997. - Vol. 1337. -P. 230-236.
30. Schlotte, V. Effect of uric acid and chemical analogues on oxidation of human low density lipoprotein in vitro. / V. Schlotte [et al.] / / Free Rad Biol Med. -1998.-Vol.25. - P839-847.
31. Skinner, K.A. Nitrosation of uric acid by peroxynitrite. Formation of a vasoactive nitric oxide donor. / K.A. Skinner [et al.] // J Biol Chem. -1998. - Vol.273 - P. 24491-24497.
32. Tomita, M. Does hyperuricemia affect mortality? A prospective cohort study of Japanese male workers. / M. Tomita [et al.] // J. Epidemiol
- 2000. - Vol.10. - P403-409.
33. Tsutsumi, Z. Total plasma homocysteine is not increased in Japanese patients with gout. / Z. Tsutsumi [et al.] // J Rheumatol. -2002. -Vol. 29(8) - P1805-1806.
34. Umans, J. G. Nitric oxide in the regulation of blood flow and arterial pressure / J. G. Umans, R. Levi // Ann Rev Physiol - 1995. -Vol.57 - P. 771-790.
35. Van den Berg, M. Hyperhomocysteinaemia and endothelial dysfunction in young patients with peripheral arterial occlusive disease. / M. Van den Berg [et al.] // Eur J Clin Invest -1995. -Vol.25 - P176- 181.
36. Webb, D.J. The pharmacology of human blood vessels in vivo. / D.J. Webb // J Vasc Res. -1995. - Vol.32. - P2-15.
37. Zhang, C. Homocysteine induces programmed cell death in human vascular endothelial cell throw activation of the unfoulded protein response / C. Zhang [et al.] // J. Biol. Chem. -2001. - Vol.276. - P. 35867-35874.
38. Zweier, J.L. Measurement of endothelial cell free radical generation: evidence for a central mechanism of free radical injury in postischemic tissues. / J.L. Zweier [et al.] // Proc Natl Acad Sci USA. -1988. - Vol.85. - P. 4046-4050.
Поступила 25.11.08
