CC BY
42
А. С. БЕЛОУС, М. В. ПОКРОВСКИЙ, В. И. КОЧКАРОВ, Т. Г. ПОКРОВСКАЯ, Е. Б. АРТЮШКОВА, Е. Н. ПАШИН, М. В. БРУСНИК, Т. Н. ЧУЛЮКОВА, Ю. П. КЛЯВС, М. М. КОРНЕЕВ, Т. И. ЗЕЛЕНКОВА, В. А. МАЛЫХИН, Я. И. ЗАЛОЗНЫХ
ЭНДОТЕЛИО- И КАРДИОПРОТЕКТИВНЫЕ ЭФФЕКТЫ СМЕСИ
_
ГОМЕОПАТИЧЕСКИХ РАЗВЕДЕНИИ АФИННО ОЧИЩЕННЫХ ПОЛИКЛОНАЛЬНЫХ КРОЛИЧЬИХ АНТИТЕЛ К ЭНДОТЕЛИАЛЬНОЙ СИНТАЗЕ ОКСИДА АЗОТА (ЕМБ) С12, С30, С200 ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ МОДЕЛИРОВАНИИ Ь-МАМЕ-ИНДУЦИРОВАННОИ ЭНДОТЕЛИАЛЬНОЙ ДИСФУНКЦИИ
Кафедра фармакологии Курского государственного медицинского университета Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию
Одним из ведущих патогенетических механизмов развития сердечно-сосудистого континуума является эндотелиальная дисфункция (ЭД) [3, 5, 8, 15]. В норме эндотелий регулирует сосудистый тонус через освобождение ряда вазодилатирующих и вазоконстриктор-ных факторов и модулирует сократительную активность гладкомышечных клеток, а также регулирует гемостаз, высвобождая протромбогенные и антитромбогенные факторы, регулирует адгезию лейкоцитов, высвобождая стимуляторы адгезии, вырабатывает стимуляторы роста сосудов [3, 11, 13].
Эндотелиальная дисфункция характеризуется дисбалансом между факторами релаксации и констрикции, прокоагулянтными и антикоагулянтными субстанциями и между провоспалительными и антивоспалительными медиаторами [1, 4, 9, 12, 14].
Рабочей гипотезой механизма действия смеси гомеопатических разведений афинно очищенных поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота (еЫОБ) С12, С30, С200 является активация ими по «обратной связи» эндотелиальной ЫО-синтазы (еЫОБ) [2, 3, 6, 10, 12]. Фирма «Материа Медика» позиционирует препарат «импаза» как средство коррекции эректильной дисфункции. В то же время мы предполагаем, что гомеопатически протенцирован-ные антитела к ЫО-синтетазе могу быть эффективны при всех патологических состояниях сердечно-сосудистой системы, сопровождающихся эндотелиальной дисфункцией.
Целью настоящего исследования явилось изучение эндотелио- и кардиопротективных эффектов смеси гомеопатических разведений афинно очищенных поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной син-тазе оксида азота (еЫОБ) С12, С30, С200 на модели 1_-ЫАМЕ-индуцированного дефицита оксида азота.
Методика исследования
Моделирование дефицита оксида азота. Опыты проводились на белых крысах-самцах линии массой 250-300 г. М1-нитро-1_-аргинин метиловый эфир (1_-ЫАМЕ) вводился ежедневно, один раз в сутки, внутрибрюшинно, в дозе 25 мг/кг. На 7-й день от
начала эксперимента под наркозом (этаминал-на-трия 50 мг/кг) на первом этапе исследования вводили катетер в левую сонную артерию, на втором этапе исследования для регистрации показателей вводили иглу в полость левого желудочка через верхушку сердца. Болюсное введение фармакологических агентов осуществляли в правую бедренную вену. Показатели гемодинамики: систолическое артериальное давление (САД), диастолическое артериальное давление (ДАД), частоту сердечных сокращений (ЧСС), максимальную скорость сокращения (+dp/dt), максимальную скорость расслабления (-dp/dt) - измеряли непрерывно посредством датчика P213ID и компьютерной программы «Bioshell”. Функциональные пробы: внутривенное введение ацетилхолина (АХ) (40 мкг/кг) - эндотелийзависимая вазодилата-ция [12] (ЭЗВ) и нитропруссида натрия (НП) - эн-дотелийнезависимая вазодилатация (ЭНЗВ) [2] (30 мкг/кг). Для оценки функциональных возможностей миокарда у животных проводили нагрузочные пробы. На фоне введения блокатора eNOS - L-NAME животным в поилки добавлялась смесь гомеопатических разведений афинно очищенных антител к эндотелиальной NOS - С12, С30,С200 из расчета 1 таблетка на 100 мл воды со свободным доступом к питью, замена воды в поилках производилась 1 раз в сутки с количественным учетом выпитой жидкости (20±3 мл в среднем на одно животное).
Результаты исследования
Блокада NO-синтазы с помощью длительного, ежедневного, в течение 7 суток внутрибрюшинно-го введения L-NAME (N-нитроН-аргинин метиловый эфир в дозе 25 мг/кг) вызывала развитие артериальной гипертензии.
Одновременное введение L-NAME и смеси растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота - С12, С30, С200 («BD Transduction Labs», USA) добавлением в поилки со свободным доступом к питью не приводило к снижению показателей исходных значений АД (табл. 1).
УДК 615.256.4: 611-018.74
Таблица 1
Влияние смеси растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота - С12, С30, С200 на показатели артериального давления и частоты сердечных сокращений при моделировании Ь-МДМБ-индуцированного дефицита оксида азота
Группы животных САД, мм рт. ст. ДАД, мм рт. ст. ЧСС, уд. в мин
Интактные 137,7 ±3,7 101,9 ± 4,3 420,0 ± 9,0
Получавшие L-NAME (25 мг/кг) 190,3 ± 6,7* 145,0 ± 3,9* 428,0 ± 11
L-NAME (25 мг/кг) + смесь растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной NOS человека - C12, С30, С200 184,3±7,0 136,7±6,5 417,1±13,1
Примечание: * - р<0,05 в сравнении с группой интактных животных; ** - р<0,05 в сравнении с группой L-NAME.
Таблица 2
Влияние смеси растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека- С12, С30, С200 на эндотелийзависимые (ацетилхолин) и эндотелийнезависимые (нитропруссид) сосудистые реакции при моделировании Ь-МДМБ-индуцированной эндотелиальной дисфункции
Группы животных Фун- кцио- нальные пробы Прирост падения сосудистой реакции по СрАД (мм рт. ст.) Время сосудистой реакции (сек.) Площадь сосудистой реакции (усл. ед.) Отношение площадей сосудистой реакции АХ к НП
Интактные АХ 59,9±2,9 42,2±0,8 1268,0±74,8 1,1±0,1
НП 61,0±3,0 45,1±1,0 1375,3±93,7
L-NAME АХ 68,0±4,1 20,0±1,4 695,3±87,6* 5,4±0,6*
НП 98,0±2,0 67,4±1,4 3322,7±116,7*
L-NAME + смесь растворов гомеопатических разведений поликлональных антител к эндотелиальной NOS человека - C12, C30, C200 АХ 81,1±7,5** 45,2±2,3** 2075,0±147,8** 2,1±0,2**
НП 75,3±6,0** 90,2±7,1** 3751,3±401,7
Примечание: * - р<0,05 в сравнении с группой интактных животных,
** - р<0,05 в сравнении с группой L-NAME. АХ - ацетилхолин; НП - нитропруссид.
Для оценки эндотелиопротективных эффектов смеси гомеопатических разведений мы рассчитывали коэффициент эндотелиальной дисфункции (КЭД) как соотношение сосудистой реакции на ацетилхолин и нитропруссид натрия (табл. 2). В наших экспериментах КЭД крыс после моделирования блокады N0-синтазы увеличился в в 5 раз - соответственно 1,1 у интактных и 5,4 у животных, получавших 1_^АМЕ. В
экспериментах у животных, получавших смесь растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека - С12, С30, С200, КЭД оказался существенно ниже - 2,1±0,2 (табл. 2).
Полученные результаты позволяют констатировать коррекцию эндотелиальной дисфункции смесью растворов гомеопатических разведений поликлональных
кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека - С12, С30, С200 при отсутствии существенного влияния на развитие артериальной гипертензии.
При переводе животных на управляемое дыхание обнаружено, что исходные показатели сократимости левого желудочка, наиболее близкие к интактным животным значения имели животные, которые на фоне введения 1_^АМЕ получали смесь гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота ^N08) С12, С30, С200.
Проба на адренореактивность характеризовалась выраженным приростом абсолютных значений ЛЖД, +сІр/сИ:, -сІр/сИ:. В контрольной группе (животные, получавшие 1_^АМЕ) ЛЖД, +<Ср/сК и -<Ср/сК составили соответственно 247,3±4,8, 12109±263 и 6820±303.
Смесь гомеопатических разведений предотвращала повышение адренореактивности, вызванное 1_-NAME-индуцированной патологией.
Проводилась проба на нагрузку сопротивлением, фиксировали падение сократимости с 5-й на 25-ю секунду пережатия аорты. Так, ЛЖД на 25-й секунде проведения пробы у интактных животных составило 83,6% от величины на 5-й секунде (что принято за 100%). В контрольной группе (1_^АМЕ-индуциро-ванный дефицит N0) - 66,0%. Тогда как результаты у животных, на фоне введения 1_^АМЕ получавших смесь гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота ^N08) С12, С30, С200, достоверно отличались от контрольной группы и были близки к значениям у интактной группы - 82,9%.
Аналогичные кардиопротективные эффекты, но уже на уровне метаболического ацидоза и, следовательно, коррекции редокс-потенциала окислитель-но-фосфорилированных процессов метаболизма миокарда обнаружены на примере результатов ги-поксической пробы. Так, у интактных животных прирост сократимости, выражающийся в увеличении ЛЖД в ответ на 3-минутную гипоксию, по сравнению с исходным составил 104,8±7,4 мм рт. ст., максимальной скорости сокращения - +с1р/сК на 4610±247, максимальной скорости расслабления - ср/с: - на 1262±135. Напротив, у животных с моделированием блокады N0-синтазы прирост ЛЖД составил лишь 54,7±4,9 мм рт. ст. При этом наблюдались полиморфные нарушения ритма и экстрасистолы, в 3 случаях из 13 приведшие к фатальным нарушениям ритма или невыходом животных из гипоксической бра-дикардии и гипотензии. У группы животных на фоне введения 1_^АМЕ, получавших смесь гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота ^N08) С12, С30, С200, прирост сократимости составил 75,0±13,1 мм рт. ст.
Таким образом, результаты исследования функционального состояния миокарда при проведении нагрузочных проб выявили отчетливое кардиопротек-тивное действие смеси гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота ^N08) С12, С30, С200, выражающееся в предотвращении увеличения адреноре-активности, падения ЛЖД при проведении пробы на нагрузку сопротивлением и увеличении сократимости на пике реоксигенации по сравнению с животными у которых моделировали 1_^АМЕ-индуцированный дефицит N0.
Обсуждение
Известным фактом является то, что сосудистый гомеостаз регулируется посредством высвобождения клетками эндотелия ряда вазоактивных веществ, которые поддерживают базальный тонус сосудов, обладают ангиопротективными свойствами, подавляя пролиферацию гладкой мускулатуры сосудов, предотвращают ремоделирование сосудистой стенки, ингибируют агрегацию и адгезию тромбоцитов, лейкоцитарные взаимодействия и миграцию моноцитов, оказывают антиокси-дантное действие [3, 9].
Главным механизмом, лежащим в основе эндотелиальной дисфункции, является изменение метаболизма N0 [6, 7, 9, 10].
В человеческом организме существует система собственных антител практически ко всем веществам, циркулирующим в нем. Собственные антитела к эндотелиальной N0-синтазе регулируют ее уровень, подавляя ее. Введение извне сверхмалых доз таких же антител индуцирует появление в организме антител к чужеродным, в том числе и собственным, антителам. Их количество уменьшается, ингибирующее влияние на N0-синтазу подавляется, и ее количество возрастает [6, 9, 10, 12].
Смесь гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной син-тазе оксида азота ^N08) С12, С30, С200 повышает (восстанавливает) активность N0-синтазы - ключевого фермента. То есть при введении препарата повышается (восстанавливается) способность эндотелия вырабатывать N0, а значит, данная смесь способствует восстановлению эндотелиальной функции.
Проведенные исследования обнаружили, что смесь растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота ^N08) С12, С30, С200 обладает выраженными эндотелио- и кардиопротективными эффектами.
Поступила 04.12.2006
ЛИТЕРАТУРА
1. Брошусь В. В. Оксид азота как регулятор защитных и гомеостатических реакций организма // Укр. ревматол. журн. 2003. № 4. С. 3-11.
2. Галаган М. Е., Широколова А. В., Ванин А. Ф. Гипотензивное действие оксида азота, продуцируемого из экзо-и эндогенных источников // Вопр. мед. химии. 1991. Т. 37, № 1. С. 67-70.
3. Затейщикова А. А., Затейщиков Д. А. Эндотелиальная регуляция сосудистого тонуса: методы исследования и клиническое значение // Кардиология. 1998. Т. 38, № 9. С. 68-80.
4. Зодионченко В. С., Адашева Т. В., Сандомирская А. П. Дисфункция эндотелия и артериальная гипертония: терапевтические возможности // Рус. мед. журн. 2002. № 1. С. 11-15.
5. Маколкин В. И. Микроциркуляция в кардиологии. М., 2004. 136 с.
6. Манухина Е. Б., Лямина Н. П., Долотовская П. В. и др. Роль оксида азота и свободных радикалов в патогенезе артериальной гипертензии // Кардиология. 2002. Т. 42, № 11. С. 73-84.
7. Метельская В. А. Возможности лабораторной оценки N0-продуцирующей функции эндотелия // Клинич. и лаб. диагностика. 2004. № 9. С. 86.
8. Минушкина Л. О., Затейщиков Д. А., Сидоренко Б. А. Генетические аспекты регуляции эндотелиальной функции при гипертонии // Кардиология. 2000. № 3. С. 68-76.
УДК 612.17+612.8+612.2
9. Эндотелиопротективное действие L-аргинина при фармакологическом способе моделирования дефицита оксида азота // Бел. журн. «Научные ведомости». Белгород, 2005. С. 43.
10. Jean-Baptiste Michel NO (Nitric oxide) and Cardiovascular Homeostasis 1999 Menarini International Industrie Farmaceutiche Ri-unite s.r.l. Paris.
11. Kelm M. The L-arginine-nitric oxide pathway in hypertension // Curr. Hypertens. Rep. 2003. V. 5 (1). P. 80-86.
12. Liauder L., Soriano F. G., Szabo C. Biology of nitric oxide signaling // Crit. Care. Med. 2000. V. 28. P. 37-52.
13. Sainani G. S., Maru V. G. Role of endothelial cell dysfunction in essential hypertension // J. Assoc. Physicians. India. 2004. V. 52. P. 966-969.
14. Shimokawa H. Endothelial dysfunction in hypertension // J. Atheroscler. Thromb. 1998. V. 4. P. 118-227.
15. Vascular health as a therapeutic tagert in cardiovascular disease // Carl J.Pepine, David S. Celermajer, Helmut Drexler // University of Florida, 1998.
A. S. BELOUS, M. V. POKROVSKII, V. I. KOCHKAROV, T. G. POKROVSKAJA, M. P. GLADCHENKO, E. B. ARTJUSHKOVA,
E. N. PASHIN, M. V. BRUSNIK, T. N. CHULUKOVA, J. P. KLJAVS, M. M. KORNEEV, T. I. ZELENKOVA, V. A. MALYHIN, A. S. BELOUS, J. I. ZALOZNYH
ENDOTHELIO- AND CARDIOPROTECTIVE EFFECTS OF THE ADMIXTURE OF HOMEOPATHIC DELUTIONS AFINN CLEARED POLYCLONAL RABBIT ANTIBODIES TO ENDOTHELIAL NITROGEN OXIDI SINTASE (ENOS) C12, C30, C200 IN EXPERIMENTAL MODELLING L-NAME INDUCED ENDOTHELIAL DYSFUNCTION
The admixture offered by us, for correction of endothelial dysfunction, possesses expressed endothe-lio — and cardioprotective properties in modelling deficiency nitrogen oxidi.
Keywords: endothelial dysfunction, N-nitro-
L-arginine methyl aether, polyclonal antibodies, endothelial NO-sintasa.
А. В. БУРЛУЦКАЯ
К ВОПРОСУ О СИНДРОМЕ СЛАБОСТИ СИНУСОВОГО УЗЛА У ДЕТЕЙ
Детская муниципальная клиническая больница № 2 г. Краснодара
Синдром слабости синусового узла является одним из наиболее полиморфных, тяжелых и сложных для диагностики и лечения нарушений ритма сердца у детей, сопряженных с риском развития синкопальных состояний и внезапной сердечной смерти. Проблема синдрома слабости синусового узла у детей далека от разрешения [12].
Многие аспекты недостаточно изучены. В частности, частота встречаемости заболевания у детей. В литературе имеются данные среди относительно больших групп детей только 30-летней давности. Это работы О. Соломатиной, А. Суздальцева [9] Т. И. Терновой [11]. Данных о частоте встречаемости синдрома слабости синусового узла у детей в настоящее время в литературе нет.
Поэтому одной из задач нашей работы явилось выяснение этого вопроса. По нашим данным, частота встречаемости синдрома слабости синусового узла у детей следующая. Среди 2239 кардиологических больных обоего пола 7-17 лет было выявлено 120 человек (5,4%) с синдромом слабости синусового узла. Среди них оказалась 41 девочка (34,2%) и 79 (65,8%) мальчиков.
Как видно из приведенных данных, частота синдрома слабости синусового узла близка к величинам 30летней давности. Так, по данным В. И. Бураковского, В. И. Бокерия [1], в детской кардиохирургии с синдромом слабости синусового узла связывают до 9% всех нарушений сердечного ритма. Т. И. Тернова [11] диагностировала синдром в 2,9% случаев нарушения ритма в детском возрасте.
По возрастной и половой градации частота встречаемости синдрома слабости синусового узла выглядела следующим образом: у девочек в возрастной период первичного детства - 3,5%, вторичного детства - 3,3%, в подростковый период - 3,9%, в юношеский период - 3,2%; у мальчиков в возрастной период первичного детства - 5,5%, вторичного детства - 9,8%, в подростковый период - 6,4%, в юношеский период - 8,9%.
Какова основная причина заболевания? Если у взрослых это органическое поражение сердца вследствие атеросклероза, ишемии, коллагеноза, амилои-доза и прочих патологических процессов и синдром слабости синусового узла является вторичным, то в детской кардиологической практике не удается обнаружить какого-либо заболевания, способного привести к нарушению функции синусового узла. В этих случаях принято диагностировать первичный или идиопатичес-кий вариант [12].
В наших наблюдениях синдром слабости синусового узла у 4 детей имел место в связи с наличием порока сердца, у 4 - гипертрофической кардиомиопатии. 1 ребенок перенес инфекционные заболевания. У 111 детей он расценивался как идиопатический.
Со слов мам детей, многие дети перенесли внутриутробную гипоксию.
У 74 детей заболевание протекало бессимптомно и было выявлено случайно при регистрации ЭКГ.
Остальные дети жаловались на головокружения, состояния, которые были расценены как синкопаль-
